凝集反應(yīng)課件

免疫學(xué)檢驗第五章凝集反應(yīng)直接凝集反應(yīng)間接凝集反應(yīng)Coombs試驗自身紅細(xì)胞凝集試驗冷凝集實驗5凝集反應(yīng)凝集反應(yīng)

Agglutination細(xì)菌、螺旋體、紅細(xì)胞或細(xì)胞性抗原等顆粒性抗原，或可溶性抗原或抗體與載體顆粒結(jié)合為致敏顆粒后，它們與相應(yīng)抗體或抗原發(fā)生特異性反應(yīng)，在適當(dāng)電解質(zhì)存在下，形成肉眼可見的凝集現(xiàn)象。

5凝集反應(yīng)凝集反應(yīng)的特點抗原顆粒性抗原或致敏顆粒。反應(yīng)的二個階段抗原抗體的特異性結(jié)合和出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。在一定pH及適量電解質(zhì)存在下才能發(fā)生。在凝集反應(yīng)中IgM類抗體的作用強(qiáng)度比IgG類要大數(shù)百倍，lgG類抗體常出現(xiàn)不完全反應(yīng)，即不可見的抗原抗體反應(yīng)。凝集試驗為定性檢測，也可進(jìn)行半定量檢測。5凝集反應(yīng)直接凝集反應(yīng)directagglutination

顆粒性抗原在適當(dāng)電解質(zhì)參與下直接與相應(yīng)抗體反應(yīng)，當(dāng)二者比例適當(dāng)時，出現(xiàn)凝集。

反應(yīng)中的抗原稱為凝集原agglutinogen參與反應(yīng)的抗體稱為凝集素agglutinin玻片凝集試驗試管凝集試驗5凝集反應(yīng)玻片凝集試驗

玻片凝集試驗為定性試驗方法。一般用已知抗體作為診斷血清，與受檢顆粒性抗原如菌液或紅細(xì)胞懸液各加一滴在玻片上，混勻，數(shù)分鐘后可用肉眼或低倍顯微鏡觀察凝集結(jié)果。

出現(xiàn)顆粒凝集者為陽性反應(yīng)，也可用已知顆粒性抗原測定病人血清中特異性抗體。

§ABO血型鑒定5凝集反應(yīng)CircleAshowsapositivetest(agglutinationofthelatexparticles.)TheothercirclesB-Eshownegativetests(noagglutinationofthelatexparticles).玻片凝集試驗5凝集反應(yīng)玻片凝集試驗5凝集反應(yīng)ABObloodtypeKarlLandsteiner(1968-1943)anAustrianimmunologist5凝集反應(yīng)ABO血型鑒定5凝集反應(yīng)ABO血型及Rh血型抗體檢測5凝集反應(yīng)試管凝集試驗

試管凝集試驗為半定量試驗方法。

在微生物學(xué)檢驗中常用已知細(xì)菌作為一定濃度懸液抗原與一系列稀釋的受檢血清混合，經(jīng)靜置保溫后觀察每管內(nèi)顆粒性抗原凝集程度。

通常以產(chǎn)生明顯凝集現(xiàn)象的最高稀釋度為血清中抗體的效價。

§肥達(dá)試驗Widaltest§外斐試驗Weil-Felixtest5凝集反應(yīng)肥達(dá)試驗WidaltestFernand

Widal(1862–1929）Frenchphysicianandbacteriologistwhomadeimportantcontributionstothediagnosis,treatment,andpreventionofmanydiseases.5凝集反應(yīng)Atestofbloodserumthatusesanagglutinationreactiontodiagnosetyphoidfever.AntigensdetectedaretheO(somatic),H(flagellar)andVi(virulence)antigens.肥達(dá)試驗

theWidalreaction5凝集反應(yīng)外斐試驗Weil-FelixtestAnagglutinationtestusedinthelaboratorytodiagnoserickettsialdiseases.5凝集反應(yīng)RickettsialInfection5凝集反應(yīng)外斐試驗Weil-FelixtestItdependsonanon-specificcrossreactionbetweenantibodiesproducedbytherickettsialinfectionwiththeOX-2,OX-19andOXKantigensoftheGramnegativerod,Proteussp（變形桿菌）.

Thediagnosisofrickettsialinfectionisconfirmedbyafour-foldriseinantibodytitrebetweenacuteandconvalescentsamples.5凝集反應(yīng)間接凝集反應(yīng)indirectagglutination將可溶性抗原(或抗體)先吸附或偶聯(lián)與免疫無關(guān)大小適當(dāng)?shù)念w粒表面，使之成為致敏載體顆粒，然后與相應(yīng)抗體(或抗原)作用，在適宜的電解質(zhì)存在條件下，出現(xiàn)特異性的凝集現(xiàn)象。也稱被動凝集反應(yīng)Passiveagglutination)。5凝集反應(yīng)正向間接凝集反應(yīng)用抗原致敏載體以檢測標(biāo)本中的相應(yīng)抗體。將可溶性抗原與載體顆粒結(jié)合，再與樣品中的抗體反應(yīng)，通過抗體橋聯(lián)，形成肉眼可見的凝集顆?；蚰瘔K者，為陽性反應(yīng)?！靷抽T菌多糖抗原-綿羊紅細(xì)胞+抗體5凝集反應(yīng)Agglutination5凝集反應(yīng)血清稀釋法1234565凝集反應(yīng)反向間接凝集試驗選用已知特異性抗體致敏載體以檢測標(biāo)本中的相應(yīng)抗原。用特異性抗體致敏載體，與檢測樣品中待測抗原反應(yīng)，通過抗原橋聯(lián)，形成肉眼可見的凝集者為陽性?！霩BsAb-綿羊紅細(xì)胞+HbsAg,§AFP,FetalAlphaGlobulin,AlphaFetoprotein5凝集反應(yīng)間接凝集抑制試驗用已知抗原致敏的顆粒載體及相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)抗體，檢測標(biāo)本中與致敏抗原相同的抗原。檢測方法將標(biāo)本與抗體試劑相加反應(yīng)，然后加入致敏載體。出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，結(jié)果陰性。未出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，凝集反應(yīng)被抑制，結(jié)果陽性。5凝集反應(yīng)HemagglutinationInhibition5凝集反應(yīng)反向間接凝集抑制試驗用抗體致敏載體顆粒及相應(yīng)的抗原作為診斷試劑，以檢測標(biāo)本中的抗體。檢測方法將待檢標(biāo)本與已知標(biāo)準(zhǔn)抗原相加反應(yīng)，然后加入抗體致敏載體。出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，結(jié)果陰性。未出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，凝集反應(yīng)被抑制，結(jié)果陽性。5凝集反應(yīng)間接血凝試驗

indirecthemagglutinationassay,IHA

用已知抗原（或抗體）致敏紅細(xì)胞，檢測標(biāo)本中相應(yīng)的抗體（或抗原）。正向間接血凝試驗反向間接血凝試驗正向間接血凝抑制試驗反向間接血凝抑制試驗§抗核抗體，類風(fēng)濕因子5凝集反應(yīng)Coombs試驗（橋梁凝集反應(yīng)）1945年由Coombs建立的一種抗球蛋白參與的間接血凝試驗，檢測抗紅細(xì)胞不完全抗體的一種非常經(jīng)典的方法。不完全抗體多半是7S的IgG抗體，該抗體能與其相應(yīng)抗原牢固結(jié)合，一般條件下不出現(xiàn)可見反應(yīng)。由于不完全抗體只能與一方紅細(xì)胞抗原的決定簇結(jié)合，而不能同時與雙方紅細(xì)胞上的抗原決定'簇連接(又稱單價抗體)，Coombs試驗利用抗球蛋白抗體作為第二抗體達(dá)到橋梁的作用，連接與紅細(xì)胞表面抗原結(jié)合的特異性抗體，使紅細(xì)胞凝集。5凝集反應(yīng)Coombs試驗的應(yīng)用§Coombs試驗新生兒溶血特發(fā)性自身免疫性貧血自身免疫性溶血Rh-抗D抗體5凝集反應(yīng)DirectCoombsTest5凝集反應(yīng)IndirectCoombsTest5凝集反應(yīng)新生兒溶血癥

CoombsTest5凝集反應(yīng)冷凝集實驗ColdAgglutination冷球蛋白cryoglobulin，CG

是血清中一種特殊蛋白質(zhì)，在4℃時不溶解并自發(fā)沉淀，30℃易于聚合，37℃時便溶解。它能固定補(bǔ)體產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，類似免疫復(fù)合物引起的疾病。冷球蛋白有兩種類型即單株型及混合型：IgG或IgM單株型冷球蛋白混合型冷球蛋白IgG、IgM或(和)IgA多株型IgG、IgM和補(bǔ)體C3混合型。5凝集反應(yīng)冷凝集實驗ColdAgglutinationColdagglutinindiseaseisanautoimmunediseasecharacterizedbythepresenceofhighconcentrationsofcirculatingantibodiesdirectedagainstredbloodcells.Itisaformofautoimmunehemolyticanemia,specificallyoneinwhichantibodiesonlybindredbloodcellsatlowtemperatures,typically28-31°C.5凝集反應(yīng)冷凝集實驗ColdAgglutinationPathophysiologyAllindividualshavecirculatingantibodiesdirectedagainstredbloodcells,buttheirconcentrationsareoftentoolowtotriggerdisease(titersunder1:64at4°C).Inindividualswithcoldagglutinindisease,theseantibodiesareinmuchhigherconcentrations(titersover1:1000at4°C).5凝集反應(yīng)冷凝集實驗ColdAgglutination5凝集反應(yīng)自身紅細(xì)胞凝集試驗

Autologousredcellagglutinationassay反應(yīng)中的紅細(xì)胞為未經(jīng)致敏的受檢者新鮮紅細(xì)胞。主要試劑材料為抗人O型紅細(xì)胞單克隆抗體，這種抗體能與各種血型的紅細(xì)胞結(jié)合，但不發(fā)生凝集反應(yīng)?？谷薕型紅細(xì)胞單克隆抗體與另一特異性抗體連接的雙功能抗體可用于檢測標(biāo)本中的抗原；若與特異性抗原連接，則可檢測標(biāo)本中的抗體?！霩IVAb,HBsAg

5凝集反應(yīng)凝集反應(yīng)在臨床中的應(yīng)用1直接凝集反