第八章免疫學應用課件

第八章免疫學應用

免疫學檢測技術(shù)抗原或抗體檢測免疫細胞及其功能檢測免疫學預防人工主動免疫人工被動免疫免疫治療免疫增強劑免疫抑制劑第一節(jié)免疫學檢測技術(shù)一、抗原或抗體檢測抗原抗體反應的特點:特異性可逆性可見性抗原抗體反應的影響因素抗體過剩比例適當抗原過?？乖贵w的比例與其形成免疫復合物大小的關(guān)系１、凝集反應:顆粒性抗原＋相應抗體→凝集塊

細菌、細胞等顆粒性Ag或表面包被抗原的顆粒狀物質(zhì)與相應Ab在電解質(zhì)存在的情況下結(jié)合，出現(xiàn)肉眼可見的凝集團現(xiàn)象。包括:直接凝集反應、間接凝集反應、反向間接凝集反應、協(xié)同凝集反應等。如血型鑒定、肥達試驗等。直接凝集反應1:2稀釋待測血清1:41:81:16玻片法試管法常用于菌種鑒定或ABO血型鑒定常用于檢測抗體的滴度或效價,見于臨床診斷傷寒或副傷寒所用的肥達氏反應和診斷布氏菌病所用的瑞特試驗。2.沉淀反應：單向瓊脂擴散試驗毒素、組織浸液及血清中的蛋白等可溶性抗原與相應抗體反應后,出現(xiàn)肉眼可見的沉淀物,稱為沉淀反應。沉淀反應可在液體中進行,也可在半固體瓊脂凝膠中進行。

3.免疫比濁法抗體（Ab）與可溶性抗原（Ag）反應，形成一定結(jié)構(gòu)的免疫復合物，成為懸浮于反應溶液中的微粒。在沉淀反應中形成的復合物微粒具有特殊的光學性質(zhì)，可用儀器檢測，提高了檢測的速度、靈敏度和易操作性。4.免疫標記技術(shù)

免疫標記技術(shù)是將已知抗體或抗原標記上易顯示的物質(zhì)，通過檢測標記物來反應抗原抗體反應的情況，從而間接地測出被檢抗原或抗體的存在與否或量的多少。常用的標記物有熒光素、酶、放射性核素及膠體金等。免疫標記技術(shù)具有快速、定性或定量甚至定位的特點，是目前應用最廣泛的免疫學檢測技術(shù)。免疫標記技術(shù):——免疫酶技術(shù)1.包被抗體

洗2.加抗原

洗3.加酶標抗體

洗4.加底物顯色1.包被抗原

洗2.加抗體

洗3.加酶標抗

球蛋白

洗4.加底物顯色ELISA雙抗體夾心法ELISA間接法免疫標記技術(shù):——免疫熒光技術(shù)免疫熒光直接法免疫熒光間接法免疫標記技術(shù):——放射免疫測定法（RIA）

放射免疫測定法（RIA）是將放射性核素分析的靈敏性和抗原抗體反應的特異性結(jié)合的測定技術(shù)。具有靈敏、精確、特異性高、易規(guī)范化及自動化等優(yōu)點的一種先進的免疫標記技術(shù)。

二、免疫細胞及其功能檢測1.T細胞及其亞群檢測：目前多采用熒光免疫法，通過檢測T細胞表面的CD抗原來了解外周血T細胞及其亞群的百分率。2.淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗：T細胞受到特異性抗原或有絲分裂原刺激后發(fā)生增殖，可通過以下方法檢測：形態(tài)計數(shù)法：活化細胞體積增大、形態(tài)不規(guī)則、胞質(zhì)增多、細胞核松散及出現(xiàn)較多核仁；3H-TdR或125I-UdR摻入法：3H-TdR能摻入到合成的DNA中，用液體閃爍儀檢測樣品的放射活性，特點是靈敏可靠，但須特殊儀器，易有放射性污染。

3.B細胞檢測采用免疫熒光技術(shù)直接法，通過檢測Smlg來了解B細胞的數(shù)量。4．細胞因子檢測（1）免疫學檢測法（2）生物活性檢測法（3）分子生物學檢測法

第二節(jié)免疫學預防

根據(jù)特異性免疫應答的原理，采用人工方法將Ag/Ab制成各種制劑，接種于人體，使其產(chǎn)生/獲得特異性免疫力，達到預防某些疾病的目的。分為:人工主動免疫人工被動免疫

一、人工主動免疫：是給機體輸入疫苗或類毒素等抗原物質(zhì)，剌激機體產(chǎn)生特異性免疫力。

1.死疫苗：用物理或化學的方法將病原微生物殺死制備而成的制劑。又稱滅活疫苗。如乙腦疫苗、百日咳疫苗。2.活疫苗：用人工變異或從自然界篩選獲得的減毒或無毒的活的病原微生物制成的制劑。又稱減毒活疫苗。如卡介苗、麻疹疫苗、風疹疫苗、脊髓灰質(zhì)炎疫苗等

死疫苗和活疫苗的比較

區(qū)別點

死疫苗

活疫苗制劑特點死、強毒株活、弱毒或無毒接種劑量及次數(shù)較多，2-3次較少，1次副作用較大較小保存及有效期易保存，1年不易保存4℃數(shù)周免疫效果較差，維持數(shù)月至2年較好，維持3-5年或更長

3、亞單位疫苗：如乙肝疫苗、流感疫苗。

4、基因工程疫苗:重組疫苗(乙肝疫苗);重組載體疫苗;DNA疫苗;轉(zhuǎn)基因植物疫苗

5、合成疫苗：

6.類毒素：如白喉類毒素、破傷風類毒素。人工主動免疫注意事項接種對象:凡免疫力差、與病原體接觸機會多、疾病危害大、流行地區(qū)易感者。接種劑量、次數(shù)和間隔時間（計劃免疫程序表）接種途徑:皮內(nèi)、皮下、吸入、口服接種后反應:24h內(nèi)局部紅腫、疼痛、淋巴結(jié)大；全身發(fā)熱、頭痛、惡心，數(shù)天恢復。禁忌癥:高熱、急性傳染病、嚴重心血管病、自身免疫病、免疫缺陷病。二、人工被動免疫注射含有特異性抗體的免疫血清或純化免疫球蛋白,或細胞因子等免疫制劑,使機體即刻獲得特異性免疫,因而作用及時。但這些免疫物質(zhì)不是病人自己產(chǎn)生的,故維持時間短。主要用于治療或緊急預防。1、抗毒素(antitoxin)：外/類毒素→馬→Ab2、丙種球蛋白：正常人血清或健康產(chǎn)婦胎盤中提取3.其他抗體制劑：人工被動免疫注意事項:注意防止超敏反應早期和足量不濫用丙種球蛋白應用范圍:易感人群、患者人工主動免疫與人工被動免疫的區(qū)別人工主動免疫人工被動免疫輸入物質(zhì)抗原抗體或細胞因子免疫生效時間慢，2-4周快，立即免疫維持時間長，數(shù)月-數(shù)年短，2-3周主要用途預防治療或緊急預防區(qū)別點第三節(jié)免疫治療概念:根據(jù)免疫學原理，應用物理、化學和生物學的方法增強或抑制機體的免疫機能，人為地糾正免疫異常狀態(tài)，達到治療的目的的措施。

一、免疫增強劑（IPA）

是增強、促進和調(diào)節(jié)機體免疫功能的生物或非生物制劑。主要用于惡性腫瘤、免疫缺陷病和傳染病的輔助治療。免疫增強劑分類

分類

舉例細胞因子制劑IL-2、TNF、IFN微生物制劑卡介苗、短小棒狀桿菌、脂磷壁酸化學藥物左旋咪唑、西咪替丁多糖類制劑茯苓多糖、人參多糖二、免疫抑制劑

是一類抑制機體免疫功能的生物或非生物制劑。常見免疫抑制劑種類

分類

舉例抗生素環(huán)孢霉素A、