《藥物分析與檢驗(yàn)技術(shù)》課件-生物樣品的處理方法

生物樣品的處理方法樣品制備是體內(nèi)藥物分析極其重要的一個(gè)環(huán)節(jié)，往往也是分析中最難、最煩瑣的步驟。藥物在生物樣品中常以多種形式存在。生物樣品的介質(zhì)組成比較復(fù)雜，有大量的內(nèi)源性物質(zhì)。一、樣品制備方法選擇的一般原則1生物樣品的類型2藥物的理化性質(zhì)和濃度范圍3藥物測定的目的4樣品制備與分析技術(shù)的關(guān)系二、樣品的制備方法1去蛋白法（1）加入沉淀劑和變性試劑：加入中性鹽、加入酸、加入金屬離子。（2）加入可與水混溶的有機(jī)溶劑：如甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、四氫呋喃等。（3）酶消化法：最常用的酶是蛋白水解酶中的枯草菌溶素。二、樣品的制備方法2綴合物水解法（1）酸水解：通常加入適量的鹽酸溶液；（2）酶水解：常用葡萄糖醛酸苷酶或硫酸酯酶或葡萄糖醛酸苷硫酸酯酶的混合酶。

藥物經(jīng)人體代謝后，多與內(nèi)源性物質(zhì)結(jié)合形成綴合物經(jīng)尿液排出。所以在提取之前需要將綴合物中的藥物釋放，常用酸水解、酶水解及溶劑水解的方法。二、樣品的制備方法3萃取分離法(1)液-液萃取法：液-液萃取法在體內(nèi)藥物分析中應(yīng)用相當(dāng)廣泛，萃取一次即可除去大部分雜質(zhì)，從大量的樣品中提取藥物經(jīng)濃集后作為分析用樣品，萃取時(shí)應(yīng)注意溶劑的pH調(diào)節(jié)和提取溶劑的選擇。二、樣品的制備方法3萃取分離法(1)液-液萃取法1）溶劑的pH調(diào)節(jié)：對于堿性藥物的最佳pH要高于pKa值1～2個(gè)pH單位；對于酸性藥物則要低于pKa值1～2個(gè)單位。2）提取溶劑的選擇：一般選擇原則是在滿足提取需要的前提下，盡可能選用極性小的溶劑。二、樣品的制備方法3萃取分離法(2)液-固萃取法：將具有吸附分配或離子交換性質(zhì)的、表面積大的載體作為填充劑，裝于小分離管中，使生物樣品的干擾物或藥物保留在載體上而進(jìn)行分離的方法。1）親水性載體：硅藻土；2）疏水性或離子交換樹脂載體：活性炭、聚苯乙烯、十八烷基鍵合硅膠等。二、樣品的制備方法4化學(xué)衍生化法在色譜過程中，用特殊的化學(xué)試劑借助化學(xué)反應(yīng)給樣品化合物接上某個(gè)特殊基團(tuán)，使其轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)衍生物之后進(jìn)行檢測的方法。分離前將藥物進(jìn)行化學(xué)衍生化的主要作用是使藥物變成具有能被分