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DB22DB22/T3473—2023牛呼吸道合胞體病病原學(xué)診斷技術(shù)Pathogenicdiagnostictechniquesofbovinerespiratorysyncytialdisease2023-04-25發(fā)布2023-05-23實(shí)施吉林省市場(chǎng)監(jiān)督管理廳發(fā)布I1GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)NY/T541-2016獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運(yùn)輸BRSV：牛呼吸道合胞體病毒（BovineRespirat該病發(fā)生。牛、羊易感，犢牛最易感。主要傳染源是病畜和帶毒畜。直接接觸和飛沫經(jīng)呼吸道傳播是235'-TGCTATGTGTTGCTG在樣品制備區(qū)將經(jīng)6.4.1或6.4.2處理過的待檢樣品、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照按所選取的病毒RNA提取試劑盒說明書進(jìn)行提取。提取的RN制反應(yīng)體系。在樣品制備區(qū)，依次將待檢樣品的模板RNA、BRSV陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照加入配置好的反12345864在產(chǎn)物分析區(qū)將5μL的6×上樣緩沖液加入到RT-PCR產(chǎn)物中，混勻后取8μL加2000marker作為電泳參照物。調(diào)節(jié)電壓5V/cm，電泳時(shí)間約25min。電泳結(jié)束后，用凝膠成像儀5’-ATTAGCAGCAGGTGATAGATC-3’5’-CCTACTACCTCCTCTAGTTGA-3’5’-FAM-GCCTCACTGCAGTCATTAGGAGAGCCA-BHQ1-3’在試劑準(zhǔn)備區(qū)，冰浴條件下按照表4將除模版RNA以外的各組分加入至0.2mLPCR管，配制Real-timeRT-PCR反應(yīng)體系。在樣品制備區(qū)，依次將待檢樣品的模板RNA、BRSV陽(yáng)性對(duì)照和陰1213154556576氯化鈉（NaCl）氯化鉀（KCl）磷酸二氫鉀(KH2PO4)0.24g取青霉素1000000IU、鏈霉素1滅菌雙蒸水g(資料性)試驗(yàn)成立條件圖牛呼吸道合胞體病毒RT-PCR檢測(cè)陽(yáng)性參見圖B.1。M:DL2000Marker;1:陽(yáng)性樣品；2:陰性樣品圖B.1牛呼吸道合胞體病毒RT-PCR檢測(cè)結(jié)果參照?qǐng)D牛呼吸道合胞體病毒實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)結(jié)果參見圖

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