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ICS65.020B16DB43DB43/T1370—2017葫蘆科蔬菜小西葫蘆黃花葉病毒檢測(cè)技術(shù)規(guī)程TechnicalRegulationforDetectionofZucchiniYellowMosaicVirusinCucurbitaceaeVegetables2017-12-31發(fā)布2018-03-31實(shí)施湖南省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I Ⅱ 2規(guī)范性引用文件 4儀器和耗材 6檢測(cè)結(jié)果判定 本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：孫書(shū)娥、朱春暉、劉勇、張德詠、劉駿、張松柏、譚新球、張卓葫蘆科蔬菜小西葫蘆黃花葉病毒檢測(cè)技術(shù)規(guī)程N(yùn)a2SO3Na2EDTA?2H2O不同生產(chǎn)廠家的反轉(zhuǎn)錄試劑盒操作步驟應(yīng)參照相應(yīng)產(chǎn)5b變性94℃30sc退火56℃30s步驟b-d35個(gè)循環(huán)后，72℃延伸10min,4℃終止反應(yīng)，擴(kuò)增產(chǎn)物4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?結(jié)果記錄見(jiàn)圖A1。圖A1西葫蘆上ZYMW的RT-PCR檢測(cè)(MARK:DL2000,CK1:空白對(duì)照，CK2:陰性對(duì)照，1:陽(yáng)性對(duì)照，2～7陽(yáng)性樣品)7結(jié)果判斷果有效。待測(cè)樣品在620bp左右出現(xiàn)核酸條帶，表明樣品為陽(yáng)性，無(wú)目標(biāo)條帶則為陰性。上述合成的cDNA模板0.8μL75結(jié)果記錄見(jiàn)圖B1和表B1。圖B1田間南瓜病葉的溶解曲線表B1田間南瓜病葉的定量檢測(cè)6結(jié)果判定陽(yáng)性對(duì)照的溶

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