專題21 細(xì)胞工程與胚胎工程-五年(2020-2024)高考生物真題分類匯編(全國(guó)版)(解析版)_第1頁(yè)
專題21 細(xì)胞工程與胚胎工程-五年(2020-2024)高考生物真題分類匯編(全國(guó)版)(解析版)_第2頁(yè)
專題21 細(xì)胞工程與胚胎工程-五年(2020-2024)高考生物真題分類匯編(全國(guó)版)(解析版)_第3頁(yè)
專題21 細(xì)胞工程與胚胎工程-五年(2020-2024)高考生物真題分類匯編(全國(guó)版)(解析版)_第4頁(yè)
專題21 細(xì)胞工程與胚胎工程-五年(2020-2024)高考生物真題分類匯編(全國(guó)版)(解析版)_第5頁(yè)
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2020-2024年五年高考真題分類匯編PAGEPAGE1專題21細(xì)胞工程與胚胎工程考點(diǎn)五年考情(2020-2024)命題趨勢(shì)考點(diǎn)1動(dòng)物細(xì)胞工程(5年5考)2024·吉林、浙江、湖北、江西、全國(guó)、廣東2023·北京、海南、湖南、湖北2022·遼寧、江蘇、福建、湖北、山東、浙江、海南2021·湖北、山東、浙江、重慶、江蘇、湖南2020·海南、北京、天津、浙江、江蘇、全國(guó)從近五年全國(guó)各地的高考試題來(lái)看,細(xì)胞工程與胚胎工程專題創(chuàng)設(shè)科研情景考查動(dòng)植物細(xì)胞工程與胚胎工程的具體操作過(guò)程和整個(gè)過(guò)程涉及的原理、技術(shù)應(yīng)用等,此部分內(nèi)容在選擇題和非選擇題都有考察??键c(diǎn)2植物細(xì)胞工程(5年5考)2024·北京、貴州、甘肅、安徽、湖北、吉林、浙江、山東、湖南2023·山東、浙江、廣東、湖北、海南2022·重慶、遼寧、浙江2021·江蘇、福建、湖北、北京、浙江2020·北京、江蘇、山東、天津、浙江考點(diǎn)3胚胎工程(5年5考)2024·北京、貴州、甘肅、湖北2023·廣東、浙江、天津2022·北京、江蘇、全國(guó)2021·江蘇、遼寧、浙江2020·海南、山東、浙江、江蘇、全國(guó)考點(diǎn)1動(dòng)物細(xì)胞工程〖2024年高考真題〗1.(2024·吉林·高考真題)從小鼠胚胎中分離獲取胚胎成纖維細(xì)胞進(jìn)行貼壁培養(yǎng),在傳代后的不同時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)細(xì)胞數(shù)目,結(jié)果如圖。下列敘述正確的是(

)A.傳代培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)皿需密封防止污染B.選?、俚募?xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)比②更合理C.直接用離心法收集細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)D.細(xì)胞增長(zhǎng)進(jìn)入平臺(tái)期可能與細(xì)胞密度過(guò)大有關(guān)【答案】D〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:取動(dòng)物組織塊(動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織)→剪碎→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要的條件有:①無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境;②營(yíng)養(yǎng);③溫度和pH;④氣體環(huán)境:95%空氣+5%CO2;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)主要應(yīng)用在:制備病毒疫苗、制備單克隆抗體、檢測(cè)有毒物質(zhì)等?!驹斘觥緼、傳代培養(yǎng)時(shí)需要營(yíng)造無(wú)菌、無(wú)毒以及95%空氣+5%CO2的氣體環(huán)境,而非密封,A錯(cuò)誤;B、選?、诘募?xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)比①更合理,②時(shí)細(xì)胞增長(zhǎng)開始變得緩慢,B錯(cuò)誤;C、對(duì)于貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí),先需要用胰蛋白酶等處理,使之分散為單個(gè)細(xì)胞,然后再用離心法收集,C錯(cuò)誤;D、細(xì)胞增長(zhǎng)進(jìn)入平臺(tái)期可能與細(xì)胞密度過(guò)大、細(xì)胞間產(chǎn)生接觸抑制有關(guān),D正確。故選D。2.(2024·浙江·高考真題)某動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)至接觸抑制時(shí),需分裝培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程如圖。下列敘述錯(cuò)誤的是(

)A.①加消化液的目的是使細(xì)胞與瓶壁分離 B.②加培養(yǎng)液的目的是促進(jìn)細(xì)胞增殖C.③分裝時(shí)需調(diào)整到合適的細(xì)胞密度 D.整個(gè)過(guò)程需要在無(wú)菌、無(wú)毒條件下進(jìn)行【答案】B〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件:(1)無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:①消毒、滅菌;②添加一定量的抗生素;③定期更換培養(yǎng)液,以清除代謝廢物。(2)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等,還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。(3)溫度和PH:36.5℃±0.5℃;適宜的pH:7.2~7.4。(4)氣體環(huán)境:95%空氣(細(xì)胞代謝必需的)和5%的CO2(維持培養(yǎng)液的PH)?!驹斘觥緼、①加消化液的目的是使細(xì)胞與瓶壁分離,A正確;B、②加培養(yǎng)液,多次加培養(yǎng)液先洗去殘留的消化酶,然后終止消化液的消化作用,并對(duì)細(xì)胞加以稀釋,B錯(cuò)誤;C、③分裝時(shí)需調(diào)整到合適的細(xì)胞密度,因?yàn)槿裘芏冗^(guò)大細(xì)胞直接仍存在接觸抑制,C正確;D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無(wú)菌無(wú)毒環(huán)境,因此整個(gè)過(guò)程需要在無(wú)菌、無(wú)毒條件下進(jìn)行,D正確。故選B。3.(2024·湖北·高考真題)糖尿病是危害人類健康的主要疾病之一?;謴?fù)功能性胰島B細(xì)胞總量是治療糖尿病的重要策略。我國(guó)學(xué)者研究發(fā)現(xiàn),向患有糖尿病的小鼠注射胰高血糖素受體單克隆抗體(mAb),可以促進(jìn)胰島A細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)少數(shù)胰島A細(xì)胞向胰島B細(xì)胞轉(zhuǎn)化,促進(jìn)功能性胰島B細(xì)胞再生。根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果,下列敘述錯(cuò)誤的是(

)A.mAb的制備可能涉及細(xì)胞融合技術(shù)B.注射mAb可降低胰腺分泌胰高血糖素的量C.mAb和胰高血糖素均能與胰高血糖素受體特異性結(jié)合D.胰高血糖素主要通過(guò)促進(jìn)肝糖原分解和非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)化為糖,升高血糖水平【答案】B【詳析】A、單克隆抗體的制備涉及細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),mAb屬于單克隆抗體,其制備可能涉及細(xì)胞融合技術(shù),A正確;B、單克隆抗體(mAb),可以促進(jìn)胰島A細(xì)胞增殖;而胰島A細(xì)胞可分泌胰高血糖素,可見注射mAb可提高胰島A細(xì)胞分泌胰高血糖素的量,B錯(cuò)誤;C、題干信息,mAb是胰高血糖素受體單克隆抗體,可見Ab和胰高血糖素均能與胰高血糖素受體特異性結(jié)合,C正確;D、胰高血糖素主要作用于肝,促進(jìn)肝糖原分解成葡萄糖進(jìn)入血液,促進(jìn)非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)變成糖,使血糖濃度回升到正常水平,D正確。故選B。4.(2024·江西·高考真題)某病毒顆粒表面有一特征性的大分子結(jié)構(gòu)蛋白S(含有多個(gè)不同的抗原決定基,每一個(gè)抗原決定基能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體)。為了建立一種靈敏、高效檢測(cè)S蛋白的方法,研究人員采用雜交瘤技術(shù)制備了抗-S單克隆抗體(如圖)。下列說(shuō)法正確的是(

)A.利用膠原蛋白酶處理,可分散貼壁生長(zhǎng)的骨髓瘤細(xì)胞B.制備的單克隆抗體A和單克隆抗體B是相同的單克隆抗體C.用于生產(chǎn)單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞可傳代培養(yǎng),但不能凍存D.單克隆抗體A和單克隆抗體B都能夠特異性識(shí)別S蛋白【答案】AD【詳析】A、膠原蛋白酶可以催化分解細(xì)胞外的膠原蛋白,因此利用膠原蛋白酶處理,可分散貼壁生長(zhǎng)的骨髓瘤細(xì)胞,A正確;B、由于蛋白S含有多個(gè)不同的抗原決定基,每一個(gè)抗原決定基能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體,單克隆抗體A和單克隆抗體B來(lái)自不同的雜交瘤細(xì)胞,因此制備的單克隆抗體A和單克隆抗體B不是相同的單克隆抗體,B錯(cuò)誤;C、用于生產(chǎn)單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞可傳代培養(yǎng),也可以冷凍保存,C錯(cuò)誤;D、單克隆抗體A和單克隆抗體B都來(lái)自篩選出的雜交瘤細(xì)胞,因此都能夠特異性識(shí)別S蛋白上的抗原決定簇,D正確。故選AD。5.(2024·全國(guó)·高考真題)某種病原體的蛋白質(zhì)A可被吞噬細(xì)胞攝入和處理,誘導(dǎo)特異性免疫?;卮鹣铝袉?wèn)題。(1)病原體感染誘導(dǎo)產(chǎn)生漿細(xì)胞的特異性免疫方式屬于。(2)溶酶體中的蛋白酶可將蛋白質(zhì)A的一條肽鏈水解成多個(gè)片段,蛋白酶切斷的化學(xué)鍵是。(3)不采用熒光素標(biāo)記蛋白質(zhì)A,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證蛋白質(zhì)A的片段可出現(xiàn)在吞噬細(xì)胞的溶酶體中,簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)思路和預(yù)期結(jié)果。【答案】(1)體液免疫(2)肽鍵(3)實(shí)驗(yàn)思路:以蛋白質(zhì)A的片段為抗原,制備單克隆抗體,利用差速離心法將吞噬細(xì)胞中的溶酶體分離,并提取溶酶體中的蛋白質(zhì),利用抗原抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)預(yù)期結(jié)果:出現(xiàn)雜交帶,表明蛋白質(zhì)A的片段可出現(xiàn)在吞噬細(xì)胞的溶酶體中〖祥解〗非特異性免疫(先天性免疫):第一道防線:皮膚、黏膜等;第二道防線:體液中的殺菌物質(zhì)和吞噬細(xì)胞;特異性免疫(獲得性免疫)第三道防線:由免疫器官和免疫細(xì)胞借助血液循環(huán)和淋巴循環(huán)組成。【詳析】(1)特異性免疫包括體液免疫和細(xì)胞免疫。病原體感染誘導(dǎo)產(chǎn)生漿細(xì)胞的特異性免疫方式屬于體液免疫。(2)蛋白酶可將蛋白質(zhì)A的一條肽鏈水解成多個(gè)片段,因此蛋白酶切斷的是肽鍵。(3)為驗(yàn)證蛋白質(zhì)A的片段可出現(xiàn)在吞噬細(xì)胞的溶酶體中,可以蛋白質(zhì)A的片段為抗原,制備單克隆抗體,利用差速離心法將吞噬細(xì)胞中的溶酶體分離,并提取溶酶體中的蛋白質(zhì),利用抗原抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè),若出現(xiàn)雜交帶,則表明蛋白質(zhì)A的片段可出現(xiàn)在吞噬細(xì)胞的溶酶體中。6.(2024·廣東·高考真題)某些腫瘤細(xì)胞表面的PD-L1與細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)表面的PD-1結(jié)合能抑制CTL的免疫活性,導(dǎo)致腫瘤免疫逃逸。免疫檢查點(diǎn)療法使用單克隆抗體阻斷PD-Ll和PD-1的結(jié)合,可恢復(fù)CTL的活性,用于腫瘤治療。為進(jìn)一步提高療效,研究者以黑色素瘤模型小鼠為材料,開展該療法與化療的聯(lián)合治療研究。部分結(jié)果見圖。

回答下列問(wèn)題:(1)據(jù)圖分析,療法的治療效果最佳,推測(cè)其原因是。(2)黑色素瘤細(xì)胞能分泌吸引某類細(xì)胞靠近的細(xì)胞因子CXCL1.為使CTL響應(yīng)此信號(hào),可在CTL中導(dǎo)入基因后再將其回輸小鼠體內(nèi),從而進(jìn)一步提高治療效果。該基因的表達(dá)產(chǎn)物應(yīng)定位于CTL的(答位置)且基因?qū)牒蟛挥绊慍TL的能力。(3)某興趣小組基于現(xiàn)有抗體—藥物偶聯(lián)物的思路提出了兩種藥物設(shè)計(jì)方案。方案一:將化療藥物與PD-L1單克隆抗體結(jié)合在一起。方案二:將化療藥物與PD-1單克隆抗體結(jié)合在一起。你認(rèn)為方案(填“一”或“二”)可行,理由是?!敬鸢浮?1)聯(lián)合該療法既發(fā)揮了化療藥物的作用,也增加了活化的CTL數(shù)量(2)CXCL1受體(細(xì)胞膜)表面殺傷腫瘤細(xì)胞(3)一方案一的偶聯(lián)物既可阻斷PD-1與PD-L1結(jié)合,恢復(fù)CTL的活性,又使化療藥物靶向腫瘤細(xì)胞〖祥解〗根據(jù)題圖可知,腫瘤細(xì)胞表面的PD-L1通過(guò)與T細(xì)胞表面的PD-1蛋白特異性結(jié)合,抑制T細(xì)胞增殖分化,從而逃避免疫系統(tǒng)的攻擊?!驹斘觥浚?)由圖a可知,聯(lián)合療法腫瘤體積最小,再根據(jù)圖b可知,采用聯(lián)合療法時(shí)活化的CTL的數(shù)目明顯高于免疫檢查點(diǎn)療法和化療等,原因是該療法既發(fā)揮了化療藥物的作用,也增加了活化的CTL數(shù)量。(2)由于黑色素瘤細(xì)胞能分泌吸引某類細(xì)胞靠近的細(xì)胞因子CXCL1,故要進(jìn)一步提高治療效果,可以在CTL中導(dǎo)入細(xì)胞因子CXCL1受體基因,使CTL表達(dá)出細(xì)胞因子CXCL1受體,達(dá)到治療的效果。由于細(xì)胞因子是一類肽類化合物,故該基因的表達(dá)產(chǎn)物應(yīng)定位于CTL的細(xì)胞膜上,且基因?qū)牒蟛挥绊慍TL殺傷腫瘤細(xì)胞的能力。(3)某腫瘤細(xì)胞表面的PD-L1與細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)表面的PD-1結(jié)合能抑制CTL的免疫活性,故應(yīng)該將化療藥物與PD-L1單克隆抗體結(jié)合在一起,即方案一的偶聯(lián)物既可阻斷PD-1與PD-L1結(jié)合,恢復(fù)CTL的活性,又使化療藥物靶向腫瘤細(xì)胞。〖2023年高考真題〗1.(2023·北京·統(tǒng)考高考真題)甲狀旁腺激素(PTH)水平是人類多種疾病的重要診斷指標(biāo)。研究者制備單克隆抗體用于快速檢測(cè)PTH,有關(guān)制備過(guò)程的敘述不正確的是()A.需要使用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)B.需要制備用PTH免疫的小鼠C.利用抗原-抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細(xì)胞D.篩選能分泌多種抗體的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞【答案】D【詳析】A、單克隆抗體制備過(guò)程中需要對(duì)骨髓瘤細(xì)胞等進(jìn)行培養(yǎng),即需要使用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),A正確;B、該操作的目的是制備單克隆抗體用于快速檢測(cè)PTH,故應(yīng)用PTH刺激小鼠,使其產(chǎn)生相應(yīng)的B細(xì)胞,B正確;C、抗原與抗體的結(jié)合具有特異性,可利用抗原-抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細(xì)胞,C正確;D、由于一種B細(xì)胞經(jīng)分化形成漿細(xì)胞后通常只能產(chǎn)生一種抗體,故篩選出的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞無(wú)法分泌多種抗體,D錯(cuò)誤。故選D。2.(2023·海南·高考真題)某團(tuán)隊(duì)通過(guò)多代細(xì)胞培養(yǎng),將小鼠胚胎干細(xì)胞的Y染色體去除,獲得XO胚胎干細(xì)胞,再經(jīng)過(guò)一系列處理,使之轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(

)A.營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)充足時(shí),傳代培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞不會(huì)發(fā)生接觸抑制B.獲得XO胚胎干細(xì)胞的過(guò)程發(fā)生了染色體數(shù)目變異C.XO胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞的過(guò)程發(fā)生了細(xì)胞分化D.若某瀕危哺乳動(dòng)物僅存雄性個(gè)體,可用該法獲得有功能的卵母細(xì)胞用于繁育【答案】A【詳析】A、營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)充足時(shí),傳代培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞也會(huì)發(fā)生接觸抑制,A錯(cuò)誤;B、XO胚胎干細(xì)胞中丟失了Y染色體,因而該細(xì)胞的獲得過(guò)程發(fā)生了染色體數(shù)目變異,B正確;C、XO胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞的過(guò)程發(fā)生了細(xì)胞分化,即細(xì)胞的功能發(fā)生了特化,因而發(fā)生了細(xì)胞分化,C正確;D、若某瀕危哺乳動(dòng)物僅存雄性個(gè)體,可用該法,即獲得有功能的卵母細(xì)胞,進(jìn)而用于繁育,實(shí)現(xiàn)瀕危物種的保護(hù),D正確。故選A。3.(2023·湖南·統(tǒng)考高考真題)某些植物根際促生菌具有生物固氮、分解淀粉和抑制病原菌等作用?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)若從植物根際土壤中篩選分解淀粉的固氮細(xì)菌,培養(yǎng)基的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括水和。(2)現(xiàn)從植物根際土壤中篩選出一株解淀粉芽孢桿菌H,其產(chǎn)生的抗菌肽抑菌效果見表。據(jù)表推測(cè)該抗菌肽對(duì)的抑制效果較好,若要確定其有抑菌效果的最低濃度,需在μg·mL-1濃度區(qū)間進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。測(cè)試菌抗菌肽濃度/(μg?mL-1)55.2027.6013.806.903.451.730.86金黃色葡萄球菌++枯草芽孢桿菌++禾谷鐮孢菌-++++++假絲酵母-++++++注:“+”表示長(zhǎng)菌,“-”表示未長(zhǎng)菌。(3)研究人員利用解淀粉芽孢桿菌H的淀粉酶編碼基因M構(gòu)建高效表達(dá)質(zhì)粒載體,轉(zhuǎn)入大腸桿菌成功構(gòu)建基因工程菌A。在利用A菌株發(fā)酵生產(chǎn)淀粉酶M過(guò)程中,傳代多次后,生產(chǎn)條件未變,但某子代菌株不再產(chǎn)生淀粉酶M。分析可能的原因是(答出兩點(diǎn)即可)。(4)研究人員通過(guò)肺上皮干細(xì)胞誘導(dǎo)生成肺類器官,可自組裝或與成熟細(xì)胞組裝成肺類裝配體,如圖所示。肺類裝配體培養(yǎng)需要滿足適宜的營(yíng)養(yǎng)、溫度、滲透壓、pH以及(答出兩點(diǎn))等基本條件。肺類裝配體形成過(guò)程中是否運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)(填“是”或“否”)。

(5)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)是一種耐藥菌,嚴(yán)重危害人類健康。科研人員擬用MRSA感染肺類裝配體建立感染模型,來(lái)探究解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽是否對(duì)MRSA引起的肺炎有治療潛力。以下實(shí)驗(yàn)材料中必備的是。①金黃色葡萄球菌感染的肺類裝配體

②MRSA感染的肺類裝配體

③解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽

④生理鹽水

⑤青霉素(抗金黃色葡萄球菌的藥物)

⑥萬(wàn)古霉素(抗MRSA的藥物)【答案】(1)無(wú)機(jī)鹽、淀粉(2)金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌1.73~3.45(3)淀粉酶編碼基因M發(fā)生突變;重組質(zhì)粒在大腸桿菌分裂過(guò)程中丟失(4)無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境,含95%空氣和5%CO2的氣體環(huán)境否(5)②③④⑥【詳析】(1)由題意可知,根際促生菌具有固氮作用,可利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?,因此用于篩選根際促生菌的培養(yǎng)基的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括水、無(wú)機(jī)鹽和淀粉。(2)由題表可知,在抗菌肽濃度為3.45-55.20μg·mL-1范圍內(nèi),金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌均不能生長(zhǎng),表明該抗菌肽對(duì)它們的抑菌效果較好;因?yàn)榭咕牡臐舛葹?.73μg·mL-1時(shí),它們均能生長(zhǎng),所以要確定抗菌肽抑菌效果的最低濃度,應(yīng)在1.73~3.45μg·mL-1的濃度區(qū)間進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。(3)在利用A菌株發(fā)酵生產(chǎn)淀粉酶M過(guò)程中,傳代多次后,生產(chǎn)條件未變,但某子代菌株不再產(chǎn)生淀粉酶M,可能的原因是淀粉酶編碼基因M發(fā)生突變;或者是重組質(zhì)粒在大腸桿菌分裂過(guò)程中丟失。(4)肺類裝配體培養(yǎng)需要滿足適宜的營(yíng)養(yǎng)、溫度、滲透壓、pH以及無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境,含95%空氣和5%CO2的氣體環(huán)境等基本條件;由圖示可知,肺類裝配體形成的過(guò)程中沒(méi)有運(yùn)用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù),只涉及了細(xì)胞的分裂和分化等內(nèi)容。(5)科研人員擬用MRSA感染肺類裝配體建立感染模型,來(lái)探究解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽是否對(duì)MRSA引起的肺炎有治療潛力,必備實(shí)驗(yàn)材料為:②MRSA感染的肺類裝配體、③解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽、④生理鹽水(設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)使用)、⑥萬(wàn)古霉素(抗MRSA的藥物,比較解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽的療效),故選②③④⑥。4.(2023·湖北·統(tǒng)考高考真題)某病毒對(duì)動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)危害十分嚴(yán)重。我國(guó)學(xué)者擬以該病毒外殼蛋白A為抗原來(lái)制備單克隆抗體,以期快速檢測(cè)該病毒,其主要技術(shù)路線如圖所示?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合前,已免疫的脾細(xì)胞(含漿細(xì)胞)(填“需要”或“不需要”)通過(guò)原代培養(yǎng)擴(kuò)大細(xì)胞數(shù)量;添加脂溶性物質(zhì)PEG可促進(jìn)細(xì)胞融合,該過(guò)程中PEG對(duì)細(xì)胞膜的作用是。(2)在雜交瘤細(xì)胞篩選過(guò)程中,常使用特定的選擇培養(yǎng)基(如HAT培養(yǎng)基),該培養(yǎng)基對(duì)和生長(zhǎng)具有抑制作用。(3)單克隆抗體篩選中,將抗體與該病毒外殼蛋白進(jìn)行雜交,其目的是。(4)構(gòu)建重組質(zhì)粒需要使用DNA連接酶。下列屬于DNA連接酶底物的是?!敬鸢浮?1)不需要使細(xì)胞接觸處的磷脂分子重新排布,細(xì)胞膜打開,細(xì)胞發(fā)生融合(2)未融合的親本細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞(3)通過(guò)抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性來(lái)獲得分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞(4)④【詳析】(1)漿細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞,不能增殖,所以不需要通過(guò)原代培養(yǎng)擴(kuò)大細(xì)胞數(shù)量。脂溶性物質(zhì)PEG可使細(xì)胞接觸處的磷脂分子重新排布,細(xì)胞膜打開,細(xì)胞發(fā)生融合。(2)在雜交瘤細(xì)胞篩選過(guò)程中,用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,在該培養(yǎng)基上,未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡,只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)。(3)單克隆抗體篩選中,將抗體與該病毒外殼蛋白進(jìn)行雜交,是運(yùn)用了抗原-抗體雜交技術(shù),抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的細(xì)胞,即為所需的雜交瘤細(xì)胞。(4)DNA連接酶能連接DNA片段,脫氧核苷酸的磷酸基團(tuán)位于5'端,-OH位于3'端,①②③脫氧核苷酸鏈的兩端基團(tuán)有誤;DNA連接酶能催化合成磷酸二酯鍵,即將一條脫氧核苷酸5'端的磷酸基團(tuán)與另一條脫氧核苷酸鏈的3'端的-OH相連,④符合題意。故選④。〖2022年高考真題〗5.(2022·遼寧·統(tǒng)考高考真題)二甲基亞砜(DMSO)易與水分子結(jié)合,常用作細(xì)胞凍存的滲透性保護(hù)劑。干細(xì)胞凍存復(fù)蘇后指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果見下表。下列敘述錯(cuò)誤的是(

)凍存劑指標(biāo)

合成培養(yǎng)基+DMSO合成培養(yǎng)基+DMSO+血清G1期細(xì)胞數(shù)百分比(%)65.7879.85活細(xì)胞數(shù)百分比(%)15.2941.33注:細(xì)胞分裂間期分為G1期、S期(DNA復(fù)制期)和G2期A.凍存復(fù)蘇后的干細(xì)胞可以用于治療人類某些疾病B.G1期細(xì)胞數(shù)百分比上升,導(dǎo)致更多干細(xì)胞直接進(jìn)入分裂期C.血清中的天然成分影響G1期,增加干細(xì)胞復(fù)蘇后的活細(xì)胞數(shù)百分比D.DMSO的作用是使干細(xì)胞中自由水轉(zhuǎn)化為結(jié)合水【答案】B【詳析】A、凍存復(fù)蘇后的干細(xì)胞可以經(jīng)誘導(dǎo)分裂分化形成多種組織器官,用于治療人類某些疾病,A正確;B、G1期細(xì)胞數(shù)百分比上升,說(shuō)明細(xì)胞進(jìn)入分裂間期,但不會(huì)導(dǎo)致干細(xì)胞直接進(jìn)入分裂期,還需經(jīng)過(guò)S和G2期,B錯(cuò)誤;C、分析表格可知,血清中的天然成分影響G1期(該期細(xì)胞數(shù)百分比增大),能增加干細(xì)胞復(fù)蘇后的活細(xì)胞數(shù)百分比,C正確;D、二甲基亞砜(DMSO)易與水分子結(jié)合,可以使干細(xì)胞中自由水轉(zhuǎn)化為結(jié)合水,D正確。故選B。6.(2022·江蘇·統(tǒng)考高考真題)航天員葉光富和王亞平在天宮課堂上展示了培養(yǎng)的心肌細(xì)胞跳動(dòng)的視頻。下列相關(guān)敘述正確的是(

)A.培養(yǎng)心肌細(xì)胞的器具和試劑都要先進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B.培養(yǎng)心肌細(xì)胞的時(shí)候既需要氧氣也需要二氧化碳C.心肌細(xì)胞在培養(yǎng)容器中通過(guò)有絲分裂不斷增殖D.心肌細(xì)胞在神經(jīng)細(xì)胞發(fā)出的神經(jīng)沖動(dòng)的支配下跳動(dòng)【答案】B【詳析】A、培養(yǎng)心肌細(xì)胞的器具要先進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,但是試劑并不都需要滅菌,如動(dòng)物血清不能進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,否則會(huì)使其中的成分失活,A錯(cuò)誤;B、培養(yǎng)心肌細(xì)胞的時(shí)候既需要氧氣(有助于進(jìn)行有氧呼吸)也需要二氧化碳(有助于維持培養(yǎng)液的pH),B正確;C、在體外培養(yǎng)條件下,細(xì)胞會(huì)因接觸抑制、細(xì)胞密度過(guò)大、代謝廢物積累、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗而停止分裂,C錯(cuò)誤;D、心肌細(xì)胞節(jié)律性收縮,受植物性神經(jīng)的支配,是不隨意的,在神經(jīng)細(xì)胞釋放的神經(jīng)遞質(zhì)的支配下跳動(dòng),D錯(cuò)誤。故選B。7.(2022·福建·統(tǒng)考高考真題)我國(guó)科研人員在航天器微重力環(huán)境下對(duì)多能干細(xì)胞的分化進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)與正常重力相比,多能干細(xì)胞在微重力環(huán)境下加速分化為功能健全的心肌細(xì)胞。下列敘述錯(cuò)誤的是(

)A.微重力環(huán)境下多能干細(xì)胞和心肌細(xì)胞具有相同的細(xì)胞周期B.微重力環(huán)境下進(jìn)行人體細(xì)胞的體外培養(yǎng)需定期更換培養(yǎng)液C.多能干細(xì)胞在分化過(guò)程中蛋白質(zhì)種類和數(shù)量發(fā)生了改變D.該研究有助于了解微重力對(duì)細(xì)胞生命活動(dòng)的影響【答案】A【詳析】A、連續(xù)分裂的細(xì)胞才有細(xì)胞周期,心肌細(xì)胞已經(jīng)高度分化,不能再分裂,沒(méi)有細(xì)胞周期,A錯(cuò)誤;B、進(jìn)行細(xì)胞的體外培養(yǎng)需定期更換培養(yǎng)液,避免代謝廢物對(duì)細(xì)胞的毒害作用,B正確;C、分化過(guò)程的本質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),故多能干細(xì)胞在分化過(guò)程中蛋白質(zhì)種類和數(shù)量發(fā)生了改變,C正確;D、由題意可知,多能干細(xì)胞在微重力環(huán)境下能加速分化,所以該研究有助于了解微重力對(duì)細(xì)胞生命活動(dòng)的影響,D正確。故選A。8.(2022·湖北·統(tǒng)考高考真題)某興趣小組開展小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)的研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)的原代神經(jīng)元生長(zhǎng)緩慢,其原因不可能的是()A.實(shí)驗(yàn)材料取自小鼠胚胎的腦組織 B.為了防止污染將培養(yǎng)瓶瓶口密封C.血清經(jīng)過(guò)高溫處理后加入培養(yǎng)基 D.所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性【答案】A【詳析】A、小鼠胚胎腦組織中含有豐富的原代神經(jīng)元,細(xì)胞增殖能力強(qiáng),不會(huì)造成生長(zhǎng)緩慢,A符合題意;B、培養(yǎng)瓶瓶口密封會(huì)使培養(yǎng)液中缺氧,影響細(xì)胞有氧呼吸,造成供能不足,可能使細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,B不符合題意;C、血清經(jīng)過(guò)高溫處理后,其中活性成分變性,失去原有功能,細(xì)胞生存環(huán)境嚴(yán)重惡化,可能使細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,C不符合題意;D、小鼠內(nèi)環(huán)境為弱堿性,所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性,使細(xì)胞生存環(huán)境惡劣,可能造成細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,D不符合題意。故選A。9.(2022·湖北·統(tǒng)考高考真題)滅菌、消毒、無(wú)菌操作是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常見的操作。下列敘述正確的是()A.動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取必須在無(wú)菌條件下進(jìn)行B.微生物、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染C.為防止蛋白質(zhì)變性,不能用濕熱滅菌法對(duì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌D.可用濕熱滅菌法對(duì)實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌【答案】D【詳析】A、動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行,A錯(cuò)誤;B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染,保證無(wú)菌環(huán)境,而微生物的培養(yǎng)不能加入抗生素,B錯(cuò)誤;C、一般用濕熱滅菌法對(duì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌,以防止雜菌污染,C錯(cuò)誤;D、可用濕熱滅菌法對(duì)實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌,以防止雜菌污染,D正確。故選D。10.(2022·山東·高考真題)如圖所示,將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子,在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體,簡(jiǎn)稱雙抗。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是(

)A.雙抗可同時(shí)與2種抗原結(jié)合B.利用雙抗可以將蛋白類藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞C.篩選雙抗時(shí)需使用制備單克隆抗體時(shí)所使用的2種抗原D.同時(shí)注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞【答案】D【詳析】A、根據(jù)抗原和抗體發(fā)生特異性結(jié)合的原理推測(cè),雙抗可同時(shí)與2種抗原結(jié)合,A正確;B、根據(jù)抗原與抗體能夠發(fā)生特異性結(jié)合的特性,利用雙抗可以將蛋白類藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞,從而使藥物發(fā)揮相應(yīng)的作用,B正確;C、在兩種不同的抗原刺激下,B細(xì)胞增殖、分化產(chǎn)生不同的漿細(xì)胞分泌形成兩種抗體,因此,篩選雙抗時(shí)需使用制備單克隆抗體時(shí)所使用的2種抗原來(lái)進(jìn)行抗原-抗體檢測(cè),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)雙抗的篩選,C正確;D、同時(shí)注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化形成不同的漿細(xì)胞,而不是分化成產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞,D錯(cuò)誤。故選D。11.(2022·江蘇·統(tǒng)考高考真題)下圖表示利用細(xì)胞融合技術(shù)進(jìn)行基因定位的過(guò)程,在人-鼠雜種細(xì)胞中人的染色體會(huì)以隨機(jī)方式丟失,通過(guò)分析基因產(chǎn)物進(jìn)行基因定位?,F(xiàn)檢測(cè)細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4種酶活性,只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性,只有Ⅲ具有胸苷激酶活性,Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性。下列相關(guān)敘述正確的有(

)A.加入滅活仙臺(tái)病毒的作用是促進(jìn)細(xì)胞融合B.細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別為人-人、人-鼠、鼠-鼠融合細(xì)胞C.芳烴羥化酶基因位于2號(hào)染色體上,乳酸脫氫酶基因位于11號(hào)染色上D.胸苷激酶基因位于17號(hào)染色體上,磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上【答案】ACD【詳析】A、動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程中,可以利用滅活的仙臺(tái)病毒或聚乙二醇作誘導(dǎo)劑促進(jìn)細(xì)胞融合,A正確;B、細(xì)胞Ⅲ中保留了人的X、11、17號(hào)染色體,故不會(huì)是鼠-鼠融合細(xì)胞,B錯(cuò)誤;CD、根據(jù)分析可知,芳烴羥化酶基因位于2號(hào)染色體上,乳酸脫氫酶基因位于11號(hào)染色上,胸苷激酶基因位于17號(hào)染色體上,磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上,CD正確。故選ACD。12.(2022·浙江·統(tǒng)考高考真題)回答下列(一)、(二)小題:(一)紅曲霉合成的紅曲色素是可食用的天然色素,具有防腐、降脂等功能。研究者進(jìn)行了紅曲色素的提取及紅色素的含量測(cè)定實(shí)驗(yàn),流程如下:(1)取紅曲霉菌種斜面,加適量洗下菌苔,制成菌懸液并培養(yǎng),解除休眠獲得菌種。經(jīng)液體發(fā)酵,收集紅曲霉菌絲體,紅曲霉菌絲體與70%乙醇溶液混合,經(jīng)浸提、,獲得的上清液即為紅曲色素提取液。為進(jìn)一步提高紅曲色素得率,可將紅曲霉細(xì)胞進(jìn)行處理。(2)紅曲色素包括紅色素、黃色素和橙黃色素等,紅色素在390nm、420nm和505nm波長(zhǎng)處均有較大吸收峰。用光電比色法測(cè)定紅曲色素提取液甲的紅色素含量時(shí),通常選用505nm波長(zhǎng)測(cè)定的原因是。測(cè)定時(shí)需用作空白對(duì)照。(3)生產(chǎn)上提取紅曲色素后的殘?jiān)?,?jīng)處理后作為飼料添加劑或有機(jī)肥,這屬于廢棄物的無(wú)害化和處理。(二)我國(guó)在新冠疫情方面取得了顯著的成效,但全球疫情形勢(shì)仍然非常嚴(yán)峻、尤其是病毒出現(xiàn)了新變異株——德爾塔、奧密克戎,更是威脅著全人類的生命健康。(4)新冠病毒核酸定性檢測(cè)原理是:以新冠病毒的單鏈RNA為模板,利用酶合成DNA,經(jīng)PCR擴(kuò)增,然后在擴(kuò)增產(chǎn)物中加入特異的,如果檢測(cè)到特異的雜交分子則核酸檢測(cè)為陽(yáng)性。(5)接種疫苗是遏制新冠疫情蔓延的重要手段。腺病毒疫苗的制備技術(shù)要點(diǎn)是:將腺病毒的復(fù)制基因敲除;以新冠病毒的基因?yàn)槟0搴铣傻腄NA插入腺病毒基因組,構(gòu)建重組腺病毒。重組腺病毒在人體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)產(chǎn)生新冠病毒抗原,從而引發(fā)特異性免疫反應(yīng)。在此過(guò)程中,腺病毒的作用是作為基因工程中目的基因的。將腺病毒復(fù)制基因敲除的目的是。(6)單克隆抗體有望用于治療新冠肺炎。單克隆抗體的制備原理是:取免疫陽(yáng)性小鼠的細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞混合培養(yǎng),使其融合,最后篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。與植物組織培養(yǎng)相比,雜交瘤細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)需要特殊的成分,如胰島素和。【答案】(1)無(wú)菌水活化離心破碎(2)其它色素對(duì)該波長(zhǎng)光的吸收相對(duì)較少,干擾相對(duì)較小70%乙醇溶液(3)滅菌資源化(4)逆轉(zhuǎn)錄核酸探針(5)抗原載體使腺病毒失去復(fù)制能力(6)脾動(dòng)物血清【詳析】(1)防止污染,洗菌苔可加適量的無(wú)菌水,制成菌懸液并培養(yǎng),解除休眠獲得活化菌種。紅曲霉菌絲體與70%乙醇溶液混合,經(jīng)浸提、離心,獲得的上清液即為紅曲色素提取液。為進(jìn)一步提高紅曲色素得率,可將紅曲霉細(xì)胞進(jìn)行破碎處理,使細(xì)胞內(nèi)的紅曲色素釋放出來(lái)。(2)用光電比色法測(cè)定紅曲色素提取液甲的紅色素含量時(shí),通常選用505nm波長(zhǎng)測(cè)定的原因是其它色素對(duì)該波長(zhǎng)光的吸收相對(duì)較少,干擾相對(duì)較小。由于提取紅曲色素是用的70%乙醇溶液,故測(cè)定時(shí)需用70%乙醇溶液作空白對(duì)照。(3)生產(chǎn)上提取紅曲色素后的殘?jiān)?jīng)滅菌處理殘?jiān)?,作為飼料添加劑或有機(jī)肥,這屬于廢棄物的無(wú)害化和資源化處理。(4)RNA做模板合成DNA,利用逆轉(zhuǎn)錄酶;PCR擴(kuò)增,然后在擴(kuò)增產(chǎn)物中加入特異的核酸探針,檢測(cè)新冠病毒核酸。如果檢測(cè)到特異的雜交分子則核酸檢測(cè)為陽(yáng)性。(5)腺病毒疫苗的制備技術(shù)要點(diǎn)是:將腺病毒的復(fù)制基因敲除;以新冠病毒的抗原基因?yàn)槟0搴铣傻腄NA插入腺病毒基因組,構(gòu)建重組腺病毒。重組腺病毒在人體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)產(chǎn)生新冠病毒抗原,從而引發(fā)特異性免疫反應(yīng)。在此過(guò)程中,腺病毒的作用是作為基因工程中目的基因的載體。將腺病毒復(fù)制基因敲除的目的是使腺病毒失去復(fù)制能力。(6)單克隆抗體的制備原理是:取免疫陽(yáng)性小鼠的脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞混合培養(yǎng),使其融合,最后篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。與植物組織培養(yǎng)相比,雜交瘤細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)需要特殊的成分,如胰島素和動(dòng)物血清。13.(2022·福建·統(tǒng)考高考真題)美西螈具有很強(qiáng)的再生能力。研究表明,美西螈的巨噬細(xì)胞在斷肢再生的早期起重要作用。為研究巨噬細(xì)胞的作用機(jī)制,科研人員制備了抗巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志蛋白CD14的單克隆抗體,具體方法如下。回答下列問(wèn)題:(一)基因工程抗原的制備(1)根據(jù)美西螈CD14基因的核苷酸序列,合成引物,利用PCR擴(kuò)增CD14片段。已知DNA聚合酶催化引物的3’—OH與加入的脫氧核苷酸的5’—P形成磷酸二酯鍵,則新合成鏈的延伸方向是(填“5’→3’”或“3’→5’”)。

(2)載體和CD14片段的酶切位點(diǎn)及相應(yīng)的酶切抗性基因序列如圖1所示。用XhoI和Sal1分別酶切CD14和載體后連接,CD14接入載體時(shí)會(huì)形成正向連接和反向連接的兩種重組DNA.可進(jìn)一步用這兩種限制酶對(duì)CD14的連接方向進(jìn)行鑒定,理由是。培養(yǎng)能表達(dá)CD14蛋白的大腸桿菌,分離純化目的蛋白。(二)抗CD14單克隆抗體的制備流程如圖2所示:

(3)步驟①和步驟⑤分別向小鼠注射和。(4)步驟②所用的SP2/0細(xì)胞的生長(zhǎng)特點(diǎn)是。(5)吸?、壑械纳锨逡旱舰艿呐囵B(yǎng)孔中,根據(jù)抗原—抗體雜交原理,需加入①進(jìn)行專一抗體檢測(cè),檢測(cè)過(guò)程發(fā)現(xiàn)有些雜交瘤細(xì)胞不能分泌抗CD14抗體,原因是②。(6)步驟⑥從中提取到大量的抗CD14抗體,用于檢測(cè)巨噬細(xì)胞?!敬鸢浮?1)5'→3'(2)正向連接的重組DNA有這兩種酶切位點(diǎn)(限制酶的識(shí)別序列);而反向連接的重組DNA會(huì)形成新的序列,沒(méi)有這兩種酶的酶切位點(diǎn)(沒(méi)有限制酶的識(shí)別序列)(3)CD14蛋白/CD14抗原分泌抗CD14抗體的雜交瘤細(xì)胞(4)能在體外無(wú)限增殖(5)CD14蛋白參與形成雜交瘤細(xì)胞的B淋巴細(xì)胞種類多,有的不能分泌抗CD14抗體(6)小鼠腹水【詳析】(1)PCR擴(kuò)增時(shí),DNA聚合酶催化引物的3'-OH與加入的脫氧核苷酸的5'-P形成磷酸二酯鍵,因此新鏈合成的方向是從5'→3'。(2)可進(jìn)一步用限制酶XhoⅠ和SalⅠ對(duì)CD14的連接方向進(jìn)行鑒定,是因?yàn)檎蜻B接的重組DNA有這兩種酶切位點(diǎn)(限制酶的識(shí)別序列);而反向連接的重組DNA會(huì)形成新的序列,沒(méi)有這兩種酶的酶切位點(diǎn)(沒(méi)有限制酶的識(shí)別序列)。(3)步驟①是注射特定抗原,針對(duì)本實(shí)驗(yàn)?zāi)康目芍?,要獲得抗CD14單克隆抗體,故應(yīng)該注射CD14蛋白/CD14抗原;步驟⑤是將分泌抗CD14抗體的雜交瘤細(xì)胞注入小鼠體內(nèi)培養(yǎng),以獲得大量單克隆抗體。(4)步驟②所用的SP2/0細(xì)胞是骨髓瘤細(xì)胞,特點(diǎn)是能在體外無(wú)限增殖。(5)根據(jù)抗原—抗體雜交原理,應(yīng)該用CD14蛋白檢測(cè)其中是否含抗CD14蛋白的抗體。因?yàn)樾纬呻s交瘤細(xì)胞的B淋巴細(xì)胞種類很多,因此有些雜交瘤細(xì)胞不能分泌抗CD14抗體。(6)從制備單克隆抗體的流程可知,將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔后,最終要從小鼠的腹水中提取抗CD14抗體。14.(2022·遼寧·統(tǒng)考高考真題)某抗膜蛋白治療性抗體藥物研發(fā)過(guò)程中,需要表達(dá)N蛋白胞外段,制備相應(yīng)的單克隆抗體,增加其對(duì)N蛋白胞外段特異性結(jié)合的能力。Ⅰ.N蛋白胞外段抗原制備,流程如圖1(1)構(gòu)建重組慢病毒質(zhì)粒時(shí),選用氨芐青霉素抗性基因作為標(biāo)記基因,目的是。用脂質(zhì)體將重組慢病毒質(zhì)粒與輔助質(zhì)粒導(dǎo)入病毒包裝細(xì)胞,質(zhì)粒被包在脂質(zhì)體(填“雙分子層中”或“兩層磷脂分子之間”)。(2)質(zhì)粒在包裝細(xì)胞內(nèi)組裝出由組成的慢病毒,用慢病毒感染海拉細(xì)胞進(jìn)而表達(dá)并分離、純化N蛋白胞外段。Ⅱ.N蛋白胞外段單克隆抗體制備,流程如圖2(3)用N蛋白胞外段作為抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫后,取小鼠脾組織用酶處理,制成細(xì)胞懸液,置于含有混合氣體的中培養(yǎng),離心收集小鼠的B淋巴細(xì)胞,與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合。(4)用選擇性培養(yǎng)基對(duì)融合后的細(xì)胞進(jìn)行篩選,獲得雜交瘤細(xì)胞,將其接種到96孔板,進(jìn)行培養(yǎng)。用技術(shù)檢測(cè)每孔中的抗體,篩選既能產(chǎn)生N蛋白胞外段抗體,又能大量增殖的單克隆雜交瘤細(xì)胞株,經(jīng)體外擴(kuò)大培養(yǎng),收集,提取單克隆抗體。(5)利用N蛋白胞外段抗體與藥物結(jié)合,形成,實(shí)現(xiàn)特異性治療?!敬鸢浮?1)檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞雙分子層中(2)蛋白質(zhì)外殼和含N蛋白胞外段基因的核酸(3)胰蛋白酶或膠原蛋白CO2培養(yǎng)箱(4)克隆化抗原抗體雜交細(xì)胞培養(yǎng)液(5)抗體-藥物偶聯(lián)物/ADC【詳析】(1)構(gòu)建重組慢病毒質(zhì)粒時(shí),為檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞,常選用氨芐青霉素抗性基因作為標(biāo)記基因。重組慢病毒質(zhì)粒與輔助質(zhì)粒導(dǎo)入病毒包裝細(xì)胞需要依賴膜融合,故質(zhì)粒被包在脂質(zhì)體雙分子層中(即磷脂雙分子層)。(2)由于目的基因?yàn)镹蛋白胞外段基因,在包裝細(xì)胞內(nèi)組裝出由蛋白質(zhì)外殼和含有N蛋白胞外段基因的核酸組成的慢病毒,用慢病毒感染海拉細(xì)胞進(jìn)而表達(dá)并分離、純化N蛋白胞外段。(3)進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),需要取小鼠脾組織用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,制成細(xì)胞懸液,置于含有95%空氣和5%的CO2混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。(4)用選擇性培養(yǎng)基對(duì)融合后的細(xì)胞進(jìn)行篩選,獲得雜交瘤細(xì)胞,將其接種到96孔板,進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)。用抗原抗體雜交技術(shù)檢測(cè)每孔中的抗體,篩選既能產(chǎn)生N蛋白胞外段抗體,又能大量增殖的單克隆雜交瘤細(xì)胞株,經(jīng)體外擴(kuò)大培養(yǎng),收集細(xì)胞培養(yǎng)液,提取單克隆抗體。(5)利用N蛋白胞外段抗體與藥物結(jié)合,形成抗體-藥物偶聯(lián)物ADC,實(shí)現(xiàn)特異性治療。15.(2022·海南·統(tǒng)考高考真題)以我國(guó)科學(xué)家為主的科研團(tuán)隊(duì)將OSNL(即4個(gè)基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的縮寫)導(dǎo)入黑羽雞胚成纖維細(xì)胞(CEFs),誘導(dǎo)其重編程為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS),再誘導(dǎo)iPS分化為誘導(dǎo)原始生殖細(xì)胞(iPGCs),然后將iPGCs注射到孵化2.5天的白羽雞胚血管中,最終獲得具有黑羽雞遺傳特性的后代,實(shí)驗(yàn)流程如圖?;卮鹣铝袉?wèn)題。(1)CEFs是從孵化9天的黑羽雞胚中分離獲得的,為了獲得單細(xì)胞懸液,雞胚組織剪碎后需用處理。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)通常需要在合成培養(yǎng)基中添加等天然成分,以滿足細(xì)胞對(duì)某些細(xì)胞因子的需求。(2)體外獲取OSNL的方法有(答出1種即可)。若要在CEFs中表達(dá)外源基因的蛋白,需構(gòu)建基因表達(dá)載體,載體中除含有目的基因和標(biāo)記基因外,還須有啟動(dòng)子和等。啟動(dòng)子是識(shí)別和結(jié)合的部位,有了它才能驅(qū)動(dòng)。(3)iPS細(xì)胞和iPGCs細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能不同的根本原因是。(4)誘導(dǎo)iPS細(xì)胞的技術(shù)與體細(xì)胞核移植技術(shù)的主要區(qū)別是。(5)該實(shí)驗(yàn)流程中用到的生物技術(shù)有(答出2點(diǎn)即可)?!敬鸢浮?1)胰蛋白酶、膠原蛋白酶等動(dòng)物血清(2)PCR技術(shù)、人工合成法終止子RNA聚合酶目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終表達(dá)出所需要的蛋白質(zhì)(3)基因的選擇性表達(dá)(4)誘導(dǎo)iPS細(xì)胞的技術(shù)是將已經(jīng)分化的細(xì)胞誘導(dǎo)為類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞(iPS),再誘導(dǎo)iPS分化為誘導(dǎo)原始生殖細(xì)胞(iPGCs)的技術(shù),而細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞內(nèi),使這個(gè)重組的細(xì)胞發(fā)育為胚胎,繼而發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)(5)基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)【詳析】(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),雞胚組織剪碎后需用胰蛋白酶處理,以獲得單細(xì)胞懸液。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)一般需要在合成培養(yǎng)基中添加血清等天然成分,以滿足細(xì)胞對(duì)某些細(xì)胞因子的需求。(2)OSNL為目的基因,體外獲取目的基因可通過(guò)PCR技術(shù)大量擴(kuò)增或通過(guò)人工合成法來(lái)合成?;虮磉_(dá)載體中除目的基因外,還必須有啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)和標(biāo)記基因等。啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得所需要的蛋白質(zhì)。(3)據(jù)圖可知,由iPS細(xì)胞誘導(dǎo)形成iPGCs細(xì)胞經(jīng)過(guò)了細(xì)胞分化,該過(guò)程遺傳物質(zhì)沒(méi)有改變,導(dǎo)致其細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能不同的根本原因是基因的選擇性表達(dá)。(4)誘導(dǎo)iPS細(xì)胞的技術(shù)是將已經(jīng)分化的細(xì)胞誘導(dǎo)為類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞(iPS),再誘導(dǎo)iPS分化為誘導(dǎo)原始生殖細(xì)胞(iPGCs)的技術(shù),而細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞內(nèi),使這個(gè)重組的細(xì)胞發(fā)育為胚胎,繼而發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。(5)由圖可知,該實(shí)驗(yàn)流程中將OSNL基因?qū)腚u胚成纖維細(xì)胞利用了基因工程技術(shù),誘導(dǎo)多能干細(xì)胞過(guò)程利用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的技術(shù)?!?021年高考真題〗16.(2021·湖北·統(tǒng)考高考真題)自青霉素被發(fā)現(xiàn)以來(lái),抗生素對(duì)疾病治療起了重要作用。目前抗生素的不合理使用已經(jīng)引起人們的關(guān)注。下列關(guān)于抗生素使用的敘述,正確的是(

)A.作用機(jī)制不同的抗生素同時(shí)使用,可提高對(duì)疾病的治療效果B.青霉素能直接殺死細(xì)菌,從而達(dá)到治療疾病的目的C.畜牧業(yè)中為了防止牲畜生病可大量使用抗生素D.定期服用抗生素可預(yù)防病菌引起的腸道疾病【答案】A【詳析】A、結(jié)合分析可知,抗生素的作用機(jī)理主要有四個(gè)方面,作用機(jī)制不同的抗生素同時(shí)使用,可從不同方面對(duì)于病原體進(jìn)行防治,故可提高對(duì)疾病的治療效果,A正確;B、青霉素殺死細(xì)菌可能是通過(guò)抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成或增強(qiáng)細(xì)菌細(xì)胞膜通透性等途徑實(shí)現(xiàn)的,不是直接殺死細(xì)菌,B錯(cuò)誤;C、抗生素大量使用會(huì)導(dǎo)致耐藥菌等的出現(xiàn),不利于牲畜疾病的防控,C錯(cuò)誤;D、定期服用抗生素會(huì)導(dǎo)致耐藥菌等的出現(xiàn),不能用于預(yù)防病菌引起的腸道疾病,D錯(cuò)誤。故選A。17.(2021·山東·統(tǒng)考高考真題)一個(gè)抗原往往有多個(gè)不同的抗原決定簇,一個(gè)抗原決定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體,由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72注入小鼠體內(nèi),可利用該小鼠的免疫細(xì)胞制備抗p72的單抗,也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗。下列說(shuō)法正確的是()A.注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對(duì)單抗純度的影響比對(duì)多抗純度的影響大B.單抗制備過(guò)程中通常將分離出的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合C.利用該小鼠只能制備出一種抗p72的單抗D.p72部分結(jié)構(gòu)改變后會(huì)出現(xiàn)原單抗失效而多抗仍有效的情況【答案】D【詳析】A、單抗的制作需要篩選,而多抗不需要篩選,抗原純度越高,產(chǎn)生的多抗純度越高,因此原純度對(duì)單抗純度的影響比對(duì)多抗純度的影響小,A錯(cuò)誤;B、單抗制備過(guò)程中通常將經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,B錯(cuò)誤;C、非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72上有多種抗原決定簇,一個(gè)抗決定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體,所以向小鼠體內(nèi)注入p72后,可以刺激小鼠產(chǎn)生多種抗p72的單抗,C錯(cuò)誤;D、p72部分結(jié)構(gòu)改變只改變了部分抗原決定簇,因此由這部分抗原決定簇產(chǎn)生的抗體失效,但由于還存在由其他抗原決定簇刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體,所以多抗仍有效,D正確。故選D。18.(2021·浙江·統(tǒng)考高考真題)下圖為動(dòng)物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程示意圖。下列敘述正確的是()A.步驟①的操作不需要在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行B.步驟②中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離C.步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理D.步驟④培養(yǎng)過(guò)程中不會(huì)發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化【答案】C【詳析】A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程需要無(wú)菌操作,故步驟①的操作需要在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行,A錯(cuò)誤;B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動(dòng)物組織,分散成單個(gè)細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液,B錯(cuò)誤;C、傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞,使之分散成單個(gè)細(xì)胞,再分瓶培養(yǎng),C正確;D、步驟④為傳代培養(yǎng)過(guò)程,該過(guò)程中部分細(xì)胞可能發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化,核型改變,D錯(cuò)誤。故選C。19.(2021·重慶·高考真題)為了研究PDCD4基因?qū)π∈笞訉m內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞凋亡的影響,進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。(1)取小鼠子宮時(shí),為避免細(xì)菌污染,手術(shù)器具應(yīng)進(jìn)行處理;子宮取出剪碎后,用處理一定時(shí)間,可獲得分散的子宮內(nèi)膜組織細(xì)胞,再分離獲得基質(zhì)細(xì)胞用于培養(yǎng)。(2)培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)應(yīng)有(填寫兩種);培養(yǎng)箱中CO2濃度為5%,其主要作用是。(3)在含PDCD4基因的表達(dá)載體中,啟動(dòng)子的作用是。為了證明PDCD4基因?qū)|(zhì)細(xì)胞凋亡的作用,以含PDCD4基因的表達(dá)載體和基質(zhì)細(xì)胞的混合培養(yǎng)為實(shí)驗(yàn)組,還應(yīng)設(shè)立兩個(gè)對(duì)照組,分別為。經(jīng)檢測(cè),實(shí)驗(yàn)組中PDCD4表達(dá)水平和細(xì)胞凋亡率顯著高于對(duì)照組,說(shuō)明該基因?qū)|(zhì)細(xì)胞凋亡具有(填“抑制”或“促進(jìn)”)作用。【答案】(1)滅菌胰蛋白酶或膠原蛋白酶(2)無(wú)機(jī)鹽、葡萄糖、氨基酸、微量元素、促生長(zhǎng)因子、血清或血漿(填寫兩種即可)維持培養(yǎng)液的pH值(3)RNA聚合酶的識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn),驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄出相應(yīng)的mRNA基質(zhì)細(xì)胞懸浮液、空載體和基質(zhì)細(xì)胞的混合培養(yǎng)液促進(jìn)【詳析】(1)為避免細(xì)菌污染,手術(shù)器具應(yīng)進(jìn)行滅菌處理;動(dòng)物組織取出剪碎后,用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理一定時(shí)間,可獲得分散的動(dòng)物組織細(xì)胞。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)應(yīng)有無(wú)機(jī)鹽、葡萄糖、氨基酸、微量元素、促生長(zhǎng)因子、血清或血漿等;培養(yǎng)箱中為95%的空氣和5%的CO2,其中5%的CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH值。(3)啟動(dòng)子是RNA聚合酶的識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn),驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄出相應(yīng)的mRNA。為了證明PDCD4基因?qū)|(zhì)細(xì)胞凋亡的作用,以含PDCD4基因的表達(dá)載體和基質(zhì)細(xì)胞的混合培養(yǎng)為實(shí)驗(yàn)組,還應(yīng)設(shè)立兩個(gè)對(duì)照組,分別為基質(zhì)細(xì)胞懸浮液(空白對(duì)照)、空載體和基質(zhì)細(xì)胞的混合培養(yǎng)液(排除空載體的作用)。經(jīng)檢測(cè),實(shí)驗(yàn)組中PDCD4表達(dá)水平和細(xì)胞凋亡率顯著高于對(duì)照組,說(shuō)明該基因?qū)|(zhì)細(xì)胞凋亡具有促進(jìn)作用。20.(2021·江蘇·高考真題)根據(jù)新冠病毒致病機(jī)制及人體免疫反應(yīng)特征研制新冠疫苗,廣泛接種疫苗可以快速建立免疫屏障,阻擊病毒擴(kuò)大。圖1為新冠病毒入侵細(xì)胞后的增殖示意圖,圖2為人體免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體的一般規(guī)律示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題。(1)圖1中,新冠病毒通過(guò)S蛋白與細(xì)胞表面的ACE2受體結(jié)合,侵入細(xì)胞釋放出病毒的(+)RNA,在宿主細(xì)胞中經(jīng)合成病毒的RNA聚合酶。(2)在RNA聚合酶的作用下,病毒利用宿主細(xì)胞中的原料,按照原則合成(-)RNA。隨后大量合成新的(+)RNA。再以這些RNA為模板,分別在大量合成病毒的N蛋白和S、M、E蛋白。(3)制備病毒滅活疫苗時(shí),先大量培養(yǎng)表達(dá)的細(xì)胞,再接入新冠病毒擴(kuò)大培養(yǎng),滅活處理后制備疫苗。細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需通入CO2,其作用是。(4)制備S蛋白的mRNA疫苗時(shí),體外制備的mRNA常用脂質(zhì)分子包裹后才用于接種。原因一是人體血液和組織中廣泛存在,極易將裸露的mRNA水解,二是外源mRNA分子不易進(jìn)入人體細(xì)胞產(chǎn)生抗原。(5)第一次接種疫苗后,人體內(nèi)識(shí)別到S蛋白的B細(xì)胞,經(jīng)過(guò)增殖和分化,形成的細(xì)胞可合成并分泌特異性識(shí)別的IgM和IgG抗體(見圖2),形成的細(xì)胞等再次接觸到S蛋白時(shí),發(fā)揮免疫保護(hù)作用。(6)有些疫苗需要進(jìn)行第二次接種,據(jù)圖2分析進(jìn)行二次接種的意義是。【答案】(1)翻譯(2)堿基互補(bǔ)配對(duì)游離核糖體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體(3)ACE2受體維持培養(yǎng)液的酸堿度(4)RNA酶(5)漿新冠病毒S蛋白記憶(6)激發(fā)再次應(yīng)答在人體內(nèi)產(chǎn)生更多維持時(shí)間更長(zhǎng)的抗體,并儲(chǔ)備更多的記憶細(xì)胞【詳析】(1)結(jié)合分析可知,新冠病毒侵入細(xì)胞后釋放出病毒的(+)RNA,在宿主細(xì)胞中經(jīng)翻譯合成病毒的RNA聚合酶。(2)在RNA聚合酶的作用下,病毒利用宿主細(xì)胞中的原料,按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成(-)RNA;隨后再通過(guò)復(fù)制合成大量新的(+)RNA,再以這些RNA為模板,分別在游離核糖體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體大量合成病毒的N蛋白和S、M、E蛋白。(3)病毒表面的蛋白質(zhì)可作為抗原激發(fā)機(jī)體的特異性免疫過(guò)程,制備新冠病毒滅活疫苗時(shí),先大量培養(yǎng)能夠表達(dá)ACE2受體的細(xì)胞,再接入新冠病毒擴(kuò)大培養(yǎng),經(jīng)滅活處理后制備疫苗;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)常需通入CO2,其目的是維持培養(yǎng)液的酸堿度。(4)由于人體血液和組織中廣泛存在RNA酶極易將裸露的mRNA水解,另外外源mRNA分子不易進(jìn)入人體細(xì)胞產(chǎn)生抗原,因此,制備S蛋白的mRNA疫苗時(shí),體外制備的mRNA常用脂質(zhì)分子包裹后才用于接種。(5)第一次接種疫苗后,刺激B細(xì)胞增殖和分化,形成的漿細(xì)胞可合成并分泌特異性識(shí)別新冠病毒S蛋白的IgM和IgG抗體,并產(chǎn)生記憶細(xì)胞;當(dāng)再次接觸到S蛋白時(shí),記憶細(xì)胞增殖分化,產(chǎn)生大量漿細(xì)胞,分泌大量抗體,發(fā)揮免疫保護(hù)作用。(6)進(jìn)行二次接種的意義:激發(fā)再次應(yīng)答在人體內(nèi)產(chǎn)生更多維持時(shí)間更長(zhǎng)的抗體,并儲(chǔ)備更多的記憶細(xì)胞。21.(2021·湖南·統(tǒng)考高考真題)M基因編碼的M蛋白在動(dòng)物A的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)?,F(xiàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),將外源DNA片段F插入M基因的特定位置,再通過(guò)核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物A,流程如圖所示。回答下列問(wèn)題:(1)在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過(guò)程中,切割質(zhì)粒DNA的工具酶是,這類酶能將特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的斷開。(2)在無(wú)菌、無(wú)毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動(dòng)物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時(shí),需要定期更換培養(yǎng)液,目的是。(3)與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比,體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率更低,原因是。從早期胚胎中分離獲得的胚胎干細(xì)胞,在形態(tài)上表現(xiàn)為(答出兩點(diǎn)即可),功能上具有。(4)鑒定轉(zhuǎn)基因動(dòng)物:以免疫小鼠的淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合,篩選融合雜種細(xì)胞,制備M蛋白的單克隆抗體。簡(jiǎn)要寫出利用此抗體確定克隆動(dòng)物A中M基因是否失活的實(shí)驗(yàn)思路?!敬鸢浮肯拗菩院怂醿?nèi)切酶(限制酶)磷酸二酯鍵清除代謝產(chǎn)物,防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害,同時(shí)給細(xì)胞提供足夠的營(yíng)養(yǎng)動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)其全能性相對(duì)容易,動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高,恢復(fù)其全能性十分困難細(xì)胞體積小,細(xì)胞核大,核仁明顯(任選兩點(diǎn)作答)發(fā)育的全能性B取動(dòng)物A和克隆動(dòng)物A的肝組織細(xì)胞,分別提取蛋白質(zhì)進(jìn)行抗原—抗體雜交【詳析】(1)基因工程中切割DNA的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶),故在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過(guò)程中,切割質(zhì)粒DNA的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)。限制性內(nèi)切核酸內(nèi)切酶是作用于其所識(shí)別序列中兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵。不同的限制酶可以獲得不同的末端,主要分為黏性末端和平末端。(2)在無(wú)菌、無(wú)毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動(dòng)物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時(shí),需要定期更換培養(yǎng)液,目的是清除代謝產(chǎn)物,防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。(3)由于動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)其全能性相對(duì)容易,動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高,恢復(fù)其全能性十分困難,故與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比,體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率低。胚胎干細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為細(xì)胞體積小,細(xì)胞核大,核仁明顯;在功能上具有發(fā)育的全能性,可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外,在體外培養(yǎng)的條件下,可以增殖而不發(fā)生分化,可進(jìn)行冷凍保存,也可進(jìn)行遺傳改造。(4)先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng),之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞;誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合,利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞,制備M蛋白的單克隆抗體;若要利用此抗體確定克隆動(dòng)物A中M基因是否失活,如果M基因已經(jīng)失活,則克隆動(dòng)物A中無(wú)法產(chǎn)生M蛋白的單克隆抗體,則可利用抗原—抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。故實(shí)驗(yàn)思路為:取動(dòng)物A和克隆動(dòng)物A的肝組織細(xì)胞,分別提取蛋白質(zhì)進(jìn)行抗原—抗體雜交?!?020年高考真題〗22.(2020·海南·統(tǒng)考高考真題)將人細(xì)胞與小鼠細(xì)胞融合得到的人-鼠雜種細(xì)胞進(jìn)行長(zhǎng)期培養(yǎng),雜種細(xì)胞隨機(jī)丟失一部分人的染色體后,染色體數(shù)目會(huì)保持穩(wěn)定。選取三種雜種細(xì)胞,對(duì)編碼人的芳烴羥化酶(AHH)和磷酸甘油酸激酶(PGK)的基因進(jìn)行染色體定位研究,結(jié)果如表(“+”表示有,“-”表示無(wú))。雜種細(xì)胞人的染色體AHHPGK2號(hào)11號(hào)17號(hào)X甲-+-+-+乙++--+-丙-+++-+下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(

)A.聚乙二醇可誘導(dǎo)入細(xì)胞與小鼠細(xì)胞融合B.培養(yǎng)雜種細(xì)胞時(shí),通常需在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素C.編碼AHH的基因在11號(hào)染色體上D.編碼PGK的基因在X染色體上【答案】C【詳析】A、聚乙二醇是誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的常用化學(xué)試劑,A正確;B、培養(yǎng)雜種細(xì)胞時(shí),通常需在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防止雜菌污染,B正確;CD、由表中信息可知,編碼AHH的基因在2號(hào)染色體上,編碼PGK的基因在X染色體上,C錯(cuò)誤,D正確。故選C。23.(2020·北京·統(tǒng)考高考真題)人體感染新冠病毒后,機(jī)體會(huì)產(chǎn)生多種特異性抗體。我國(guó)科學(xué)家從康復(fù)者的漿細(xì)胞中克隆出針對(duì)病毒表面抗原的抗體基因相關(guān)序列,構(gòu)建表達(dá)載體并在相應(yīng)系統(tǒng)中表達(dá),可制備出全人源單克隆抗體。以下表述錯(cuò)誤的是(

)A.該單抗可直接用于新冠病毒的核酸檢測(cè)B.在該單抗制備過(guò)程中利用了基因工程技術(shù)C.該單抗可與新冠病毒相應(yīng)蛋白特異性結(jié)合D.可用抗原-抗體反應(yīng)檢測(cè)抗體基因表達(dá)產(chǎn)物【答案】A【詳析】A、單抗檢測(cè)病毒是否存在的原理是抗原―抗體雜交,檢測(cè)病毒蛋白;直接檢測(cè)新冠病毒核酸是分子雜交,檢測(cè)是否含有病毒的核酸,所以抗體不能直接檢測(cè)核酸,A錯(cuò)誤;B、題意顯示,我國(guó)科學(xué)家從康復(fù)者的漿細(xì)胞中克隆出針對(duì)病毒表面抗原的抗體基因相關(guān)序列,構(gòu)建表達(dá)載體并在相應(yīng)系統(tǒng)中表達(dá),制備出全人源單克隆抗體。據(jù)此可推測(cè),在該單抗制備過(guò)程中利用了基因工程技術(shù),B正確;C、針對(duì)新冠病毒表面抗原制備出的單抗,可與新冠病毒相應(yīng)蛋白特異性結(jié)合,C正確;D、抗體基因表達(dá)產(chǎn)物檢測(cè)的方法是采用抗原―抗體雜交反應(yīng),若呈陽(yáng)性,則說(shuō)明已翻譯出相應(yīng)的蛋白質(zhì),D正確。故選A。24.(2020·天津·統(tǒng)考高考真題)在克隆哺乳動(dòng)物過(guò)程中,通常作為核移植受體細(xì)胞的是去核的(

)A.卵原細(xì)胞B.初級(jí)卵母細(xì)胞C.次級(jí)卵母細(xì)胞D.卵細(xì)胞【答案】C【詳析】在克隆哺乳動(dòng)物過(guò)程中,通常選擇減數(shù)第二次分裂中期的去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞,即次級(jí)卵母細(xì)胞。故選C。25.(2020·浙江·高考真題)下列關(guān)于病毒的敘述,錯(cuò)誤的是(

)A.有的病毒經(jīng)滅活處理后,可用于細(xì)胞工程中介導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞的融合B.適當(dāng)增加機(jī)體內(nèi)參與免疫的細(xì)胞數(shù)量與活性,可提高對(duì)新型冠狀病毒的抵御能力C.在某人的分泌物中檢測(cè)到新型冠狀病毒,推測(cè)該病毒的增殖不依賴于宿主細(xì)胞D.用高溫高壓處理病毒使其失去感染能力,原因之一是病毒的蛋白質(zhì)發(fā)生了熱變性【答案】C【詳析】A、有的病毒經(jīng)滅活處理后,可用于細(xì)胞工程中介導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞的融合,如滅活的病毒,A正確;B、適當(dāng)增加機(jī)體內(nèi)參與免疫的細(xì)胞數(shù)量與活性,可以參與免疫調(diào)節(jié)中的體液和細(xì)胞免疫,盡可能殺死更多的病毒,可提高對(duì)新型冠狀病毒的抵御能力,B正確;C、在某人的分泌物中檢測(cè)到新型冠狀病毒,是因?yàn)椴《窘爰?xì)胞后大量繁殖,病毒從細(xì)胞中釋放出來(lái),不能說(shuō)明該病毒的增殖不依賴于宿主細(xì)胞,C錯(cuò)誤;D、用高溫高壓處理病毒使其失去感染能力,原因之一是病毒的蛋白質(zhì)在高溫高壓下,空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,肽鏈松散,發(fā)生了變性,D正確。故選C。26.(2020·江蘇·統(tǒng)考高考真題)新型冠狀病毒可通過(guò)表面的棘突蛋白(S蛋白)與人呼吸道黏膜上皮細(xì)胞的ACE2受體結(jié)合,侵入人體,引起肺炎。圖1為病毒侵入后,人體內(nèi)發(fā)生的部分免疫反應(yīng)示意圖。單克隆抗體可阻斷病毒的粘附或入侵,故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的研究熱點(diǎn)之一。圖2為篩選、制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1)圖1中人體內(nèi)抗原遞呈細(xì)胞吞噬病毒,并將病毒的抗原暴露在細(xì)胞表面,被細(xì)胞表面的受體識(shí)別后激活該細(xì)胞。(2)B細(xì)胞識(shí)別入侵的病毒后,在淋巴因子作用下,經(jīng)過(guò)細(xì)胞的,形成細(xì)胞。(3)為判斷疑似患者是否為新型冠狀病毒感染者,采集鼻咽拭子主要用于病原學(xué)檢查,檢測(cè)病毒的;采集血液樣本主要用于血清學(xué)檢查,檢測(cè)。(4)據(jù)圖2所示,研制抗S蛋白單克隆抗體,需先注射免疫小鼠以激活小鼠的免疫細(xì)胞,再提取激活的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,用HAT培養(yǎng)基篩選獲得細(xì)胞。因?yàn)橥环N抗原可能激活細(xì)胞,還需繼續(xù)篩選才能獲得分泌單克隆抗體的細(xì)胞株。【答案】T增殖、分化漿細(xì)胞和記憶核酸抗新型冠狀病毒抗體棘突蛋白(或S蛋白)雜交瘤多種B【詳析】(1)據(jù)題圖1可知,人體內(nèi)抗原遞呈細(xì)胞吞噬新冠病毒,并將新冠病毒的抗原暴露,呈遞給T細(xì)胞,被T細(xì)胞表面的受體識(shí)別后激活T細(xì)胞;(2)激活的T細(xì)胞釋放淋巴因子,并將抗原呈遞給B細(xì)胞,B細(xì)胞識(shí)別入侵的病毒后,迅速增殖分化成漿細(xì)胞和記憶細(xì)胞;(3)臨床上為判斷疑似患者是否為新型冠狀病毒感染者,采集鼻咽拭子主要用于病原學(xué)檢查,檢測(cè)疑似患者的呼吸道是否有新冠病毒的核酸,采集血液樣本主要用于血清學(xué)檢查,檢測(cè)血清中是否產(chǎn)生抗新型冠狀病毒的抗體;(4)據(jù)題中圖2所示,結(jié)合單克隆抗體制備方法,要研制抗棘突蛋白單克隆抗體,需先注射新冠病毒的棘突蛋白(或S蛋白),以激活小鼠的免疫細(xì)胞,再提取激活的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,獲得融合的、未融合的細(xì)胞,用HAT篩選培養(yǎng)基培養(yǎng),未融合的B細(xì)胞不能長(zhǎng)期生存而死亡,未融合的骨髓瘤細(xì)胞不能合成DNA而死亡,只有雜交瘤細(xì)胞能成活;由于同一種抗原可能激活多種B細(xì)胞,篩選出的融合的骨髓瘤細(xì)胞就可能分泌多種抗體,還需繼續(xù)篩選才能獲得分泌單克隆抗體的細(xì)胞。27.(2020·全國(guó)·統(tǒng)考高考真題)為研制抗病毒A的單克隆抗體,某同學(xué)以小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)流程。回答下列問(wèn)題:(1)上述實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠甲注射病毒A,該處理的目的是。(2)寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟:。(3)為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,需要進(jìn)行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于,使用該培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是。圖中篩選2含多次篩選,篩選所依據(jù)的基本原理是。(4)若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖,可采用的方法有(答出2點(diǎn)即可)?!敬鸢浮空T導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞取小鼠甲脾臟剪碎,用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞,加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液選擇培養(yǎng)基只有雜交瘤細(xì)胞能夠生存抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖;將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)【詳析】(1)實(shí)驗(yàn)前給小鼠甲注射病毒A,是為了誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞。(2)取小鼠的脾臟,剪碎組織,用胰蛋白酶處理獲得單個(gè)細(xì)胞,加入培養(yǎng)液可以制成單細(xì)胞懸液。(3)圖中篩選1需要用到選擇培養(yǎng)基,只有雜交瘤細(xì)胞可以存活。篩選2是為了獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞,該過(guò)程要用到抗原抗體雜交,故篩選所依據(jù)的原理是抗原-抗體反應(yīng)具有特異性。(4)獲得能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞后,可以在體外培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng),或在小鼠的腹腔中進(jìn)行培養(yǎng),使雜交瘤細(xì)胞大量增殖??键c(diǎn)2植物細(xì)胞工程〖2024年高考真題〗1.(2024·北京·高考真題)五彩繽紛的月季裝點(diǎn)著美麗的京城,其中變色月季“光譜”備受青睞。“光譜”月季變色的主要原因是光照引起花瓣細(xì)胞液泡中花青素的變化。下列利用“光譜”月季進(jìn)行的實(shí)驗(yàn),難以達(dá)成目的的是(

)A.用花瓣細(xì)胞觀察質(zhì)壁分離現(xiàn)象B.用花瓣大量提取葉綠素C.探索生長(zhǎng)素促進(jìn)其插條生根的最適濃度D.利用幼嫩莖段進(jìn)行植物組織培養(yǎng)【答案】B〖祥解〗當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時(shí),細(xì)胞液中的水分就透過(guò)原生質(zhì)層進(jìn)入到外界溶液中,由于原生質(zhì)層比細(xì)胞壁的伸縮性大,當(dāng)細(xì)胞不斷失水時(shí),液泡逐漸縮小,原生質(zhì)層就會(huì)與細(xì)胞壁逐漸分離開來(lái),即發(fā)生了質(zhì)壁分離?!驹斘觥緼、花瓣細(xì)胞含有中央大液泡,液泡中含有花青素,因此可用花瓣細(xì)胞觀察質(zhì)壁分離現(xiàn)象,A不符合題意;B、花瓣含花青素,而不含葉綠素,因此不能用花瓣提取葉綠素,B符合題意;C、生長(zhǎng)素能促進(jìn)月季的莖段生根,可利用月季的莖段為材料來(lái)探索生長(zhǎng)素促進(jìn)其插條生根的最適濃度,C不符合題意;D、月季的幼嫩莖段能分裂,能利用幼嫩莖段的外植體進(jìn)行植物組織培養(yǎng),D不符合題意。故選B。2.(2024·貴州·高考真題)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中合理選擇材料和研究方法是順利完成實(shí)驗(yàn)的前提條件。下列敘述錯(cuò)誤的是(

)A.稀釋涂布平板法既可分離菌株又可用于計(jì)數(shù)B.進(jìn)行胚胎分割時(shí)通常是在原腸胚期進(jìn)行分割C.獲取馬鈴薯脫毒苗常選取莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)D.使用不同的限制酶也能產(chǎn)生相同的黏性末端【答案】B〖祥解〗胚胎分割是指采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等,經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)?!驹斘觥緼、稀釋涂布平板法除可以用于分離微生物外,也常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)單菌落,來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌,通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌,A正確;B、在進(jìn)行胚胎分割時(shí),應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚,B錯(cuò)誤;C、馬鈴薯頂端分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少,甚至無(wú)病毒,所以可以選取馬鈴薯莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)獲得脫毒苗,C正確;D、不同的限制酶識(shí)別的DNA序列不同,但使用不同的限制酶也能產(chǎn)生相同的黏性末端,D正確。故選B。3.(2024·北京·高考真題)大豆葉片細(xì)胞的細(xì)胞壁被酶解后,可獲得原生質(zhì)體。以下對(duì)原生質(zhì)體的敘述錯(cuò)誤的是(

)A.制備時(shí)需用纖維素酶和果膠酶B.膜具有選擇透過(guò)性C.可再生出細(xì)胞壁D.失去細(xì)胞全能性【答案】D〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交就是將不同種的植物體細(xì)胞,在一定的條件下融合成雜種細(xì)胞,并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。該技術(shù)涉及的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞的全能性?!驹斘觥緼、大豆葉片細(xì)胞是植物細(xì)胞,具有細(xì)胞壁,其細(xì)胞壁的成分是纖維素和果膠,所以制備原生質(zhì)體,需用纖維素酶和果膠酶進(jìn)行處理,A正確;B、生物膜的功能特點(diǎn)是具有選擇透過(guò)性,所以膜具有選擇透過(guò)性,B正確;C、原生質(zhì)體可以再生出新的細(xì)胞壁,C正確;D、分離出的原生質(zhì)體具有全能性,可用于植物體細(xì)胞雜交,為雜種植株的獲得提供了理論基礎(chǔ),D錯(cuò)誤。故選D。4.(2024·甘肅·高考真題)蘭州百合栽培過(guò)程中易受病毒侵染,造成品質(zhì)退化。某研究小組嘗試通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗,操作流程如下圖。下列敘述正確的是(

A.①為脫分化過(guò)程,1號(hào)培養(yǎng)基中的愈傷組織是排列規(guī)則的薄壁組織團(tuán)塊B.②為再分化過(guò)程,愈傷組織細(xì)胞分化時(shí)可能會(huì)發(fā)生基因突變或基因重組C.3號(hào)培養(yǎng)基用于誘導(dǎo)生根,其細(xì)胞分裂素濃度與生長(zhǎng)素濃度的比值大于1D.百合分生區(qū)附近的病毒極少,甚至無(wú)病毒,可以作為該研究中的外植體【答案】D〖祥解〗植物組織培養(yǎng)過(guò)程是:離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織,然后再分化生成根、芽,最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。【詳析】A、在脫分化過(guò)程中,1號(hào)培養(yǎng)基中的愈傷組織是排列不規(guī)則的薄壁組織團(tuán)塊,A錯(cuò)誤;B、愈傷組織細(xì)胞分化時(shí)可能會(huì)發(fā)生基因突變,但基因重組發(fā)生在減數(shù)分裂過(guò)程中,而愈傷組織細(xì)胞的分化過(guò)程是有絲分裂,所以不會(huì)發(fā)生基因重組,B錯(cuò)誤。C、3號(hào)培養(yǎng)基用于誘導(dǎo)生根,其細(xì)胞分裂素濃度與生長(zhǎng)素濃度的比值應(yīng)該小于1,C錯(cuò)誤;D、百合分生區(qū)附近的病毒極少,甚至無(wú)病毒,因此可以作為該研究中的外植體,D正確;故選D。5.(2024·安徽·高考真題)植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)在生產(chǎn)中已得到應(yīng)用。某興趣小組嘗試?yán)迷摷夹g(shù)培養(yǎng)胡蘿卜細(xì)胞并獲取番茄紅素,設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)流程和培養(yǎng)裝置(如圖),請(qǐng)同學(xué)們進(jìn)行評(píng)議。下列評(píng)議不合理的是(

A.實(shí)驗(yàn)流程中應(yīng)該用果膠酶等處理愈傷組織,制備懸浮細(xì)胞B.裝置中的充氣管應(yīng)置于液面上方,該管可同時(shí)作為排氣管C.裝置充氣口需要增設(shè)無(wú)菌濾器,用于防止雜菌污染培養(yǎng)液D.細(xì)胞培養(yǎng)需要適宜的溫度,裝置需增設(shè)溫度監(jiān)測(cè)和控制設(shè)備【答案】B〖祥解〗植物細(xì)胞培養(yǎng)是指在離體條件下對(duì)單個(gè)植物細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)使其增殖的技術(shù)。【詳析】A、植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠,欲利用愈傷組織制備懸浮細(xì)胞,可用纖維素酶和果膠酶進(jìn)行處理愈傷組織,A正確;B、裝置中的充氣管應(yīng)置于液面下方,以利于培養(yǎng)液中的溶氧量的增加,該管不能同時(shí)作為排氣管,B錯(cuò)誤;C、為了防止雜菌污染培養(yǎng)液,裝置充氣口需要增設(shè)無(wú)菌濾器,C正確;D、細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要保證適宜的溫度,因此裝置需增設(shè)溫度監(jiān)測(cè)和控制設(shè)備,D正確。故選B。6.(2024·湖北·高考真題)植物甲抗旱、抗病性強(qiáng),植物乙分蘗能力強(qiáng)、結(jié)實(shí)性好??蒲腥藛T通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育出兼有甲、乙優(yōu)良性狀的植物丙,過(guò)程如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是(

)A.過(guò)程①中酶處理的時(shí)間差異,原因可能是兩種親本的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)有差異B.過(guò)程②中常采用滅活的仙臺(tái)病毒或PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合C.過(guò)程④和⑤的培養(yǎng)基中均需要添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素D.可通過(guò)分析植物丙的染色體,來(lái)鑒定其是否為雜種植株【答案】B〖祥解〗1、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)將來(lái)自兩個(gè)不同植物的體細(xì)胞融合成一個(gè)雜種細(xì)胞(植物體細(xì)胞雜交技術(shù)),把雜種細(xì)胞培育成植株(植物組織培養(yǎng)技術(shù))。其原理是植物細(xì)胞具有全能性和細(xì)胞膜具有流動(dòng)性。雜種細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁是體細(xì)胞融合完成的標(biāo)志,細(xì)胞壁的形成與細(xì)胞內(nèi)高爾基體有重要的關(guān)系。植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙、培育作物新品種方面所取得的重大突破。2、分析題圖:圖示為甲、乙兩種植物細(xì)胞融合并培育新植株的過(guò)程,其中①表示去壁獲取原生質(zhì)體的過(guò)程;②③表示人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合以及再生出新細(xì)胞壁的過(guò)程;④表示脫分化形成愈傷組織;⑤表示再分化以及個(gè)體發(fā)育形成植株丙的過(guò)程?!驹斘觥緼、酶解是為了去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁,過(guò)程①中酶處理的時(shí)間不同,說(shuō)明兩種親本的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)有差異,A正確;B、過(guò)程②為原生質(zhì)體的融合,常用PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,滅活的仙臺(tái)病毒可誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合,不能用于植物,B錯(cuò)誤;C、過(guò)程④脫分化和⑤再分化的培養(yǎng)基中均需要添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素,但在兩個(gè)過(guò)程中比例不同,C正確;D、植物丙是植物甲和植物乙體細(xì)胞雜交形成的個(gè)體,應(yīng)具備兩者的遺傳物質(zhì),因此可通過(guò)分析植物丙的染色體,來(lái)鑒定其是否為雜種植株,D正確。故選B。7.(2024·吉林·高考真題)迷迭香酸具有多種藥理活性。進(jìn)行工廠化生產(chǎn)時(shí),先誘導(dǎo)外植體形成愈傷組織,再進(jìn)行細(xì)胞懸浮培養(yǎng)獲得迷迭香酸,加入誘導(dǎo)劑茉莉酸甲酯可大幅提高產(chǎn)量。下列敘述錯(cuò)誤的是(

)A.迷迭香頂端幼嫩的莖段適合用作外植體B.誘導(dǎo)愈傷組織時(shí)需加入NAA和脫落酸C.懸浮培養(yǎng)時(shí)需將愈傷組織打散成單個(gè)細(xì)胞或較小的細(xì)胞團(tuán)D.茉莉酸甲酯改變了迷迭香次生代謝產(chǎn)物的合成速率【答案】B〖祥解〗1、植物組

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