腦脊液檢驗(yàn)（臨床檢驗(yàn)技術(shù)課件）

標(biāo)本采集與處理腦脊液是一種細(xì)胞外液，是主要通過各腦室的脈絡(luò)叢細(xì)胞對(duì)血漿的選擇過濾，即超濾和分泌而產(chǎn)生的，它充滿腦室系統(tǒng)以及腦和脊髓的蛛網(wǎng)膜下腔，通過蛛網(wǎng)膜粒絨毛吸收入而返回血循環(huán)。概述概述存在于：腦室、蛛網(wǎng)膜下腔流動(dòng)與：腦和脊髓表面，通過腦穹隆面的蛛網(wǎng)

膜粒絨毛吸收入上矢狀竇而返回靜脈產(chǎn)生于：70%來自各腦室的脈絡(luò)叢 30%來自室管膜和蛛網(wǎng)膜下腔超濾分泌腦脊液檢驗(yàn)左、右側(cè)腦室第三腦室第四腦室蛛網(wǎng)膜下隙中腦水管室間孔上矢狀竇頸內(nèi)靜脈滲入第四腦室正中孔第四腦室外側(cè)孔腦脊液的生成腦脊液檢驗(yàn)?zāi)X脊液的生成左、右側(cè)腦室第三腦室第四腦室蛛網(wǎng)膜下隙中腦水管室間孔蛛網(wǎng)膜顆粒上矢狀竇頸內(nèi)靜脈滲入側(cè)腦室室間孔第三腦室中腦水管第四腦室蛛網(wǎng)膜下隙蛛網(wǎng)膜顆粒上矢狀竇竇匯竇匯→左右橫竇→乙狀竇上矢狀竇第四腦室正中孔第四腦室外側(cè)孔腦脊液檢驗(yàn)血腦屏障：毛細(xì)血管內(nèi)的血液與腦組織之間的一層選擇性通透性作用的結(jié)構(gòu)組成：毛細(xì)血管的內(nèi)皮、內(nèi)皮細(xì)胞之間的緊密連接、毛細(xì)血管的基膜和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞突起功能：可阻止多種物質(zhì)進(jìn)入腦，但營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和代謝產(chǎn)物可順利通過，以維持腦部神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的相對(duì)穩(wěn)定；腦脊液檢驗(yàn)物質(zhì)通過血腦屏障的難易程度最易：氯化物、鈉、鎂、乙醇其次：清蛋白、葡萄糖、鈣、乳酸、氨基酸、尿素、肌酐極難：纖維蛋白原、補(bǔ)體、抗體、膽紅素、膽固醇腦脊液檢驗(yàn)緩沖保護(hù)作用：保護(hù)腦和脊髓調(diào)節(jié)：調(diào)節(jié)顱內(nèi)壓力和酸堿調(diào)節(jié)：調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)堿儲(chǔ)量，調(diào)節(jié)pH運(yùn)輸：供給腦、脊髓的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),運(yùn)走代謝產(chǎn)物參與神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié)01標(biāo)本采集與處理1、標(biāo)本采集◆有腦膜刺激癥狀時(shí)◆疑有顱內(nèi)出血時(shí)◆中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤◆不明原原因的劇烈頭痛、昏迷、抽搐或癱瘓◆需行椎管內(nèi)給藥及手術(shù)前麻醉、造影等禁忌癥適應(yīng)癥◆顱內(nèi)高壓者◆休克、衰竭或?yàn)l危狀態(tài)者◆穿刺處局部皮膚有炎癥者◆顱后窩有占位性病變或伴有腦干癥狀者01標(biāo)本采集與處理1、標(biāo)本采集穿刺部位：一般是腰椎穿刺特殊情況是小腦延髓池穿刺或側(cè)腦室穿刺在第3和第4腰椎間隙穿刺時(shí)應(yīng)盡量避免混入血液01標(biāo)本采集與處理1、標(biāo)本采集穿刺部位：一般是腰椎穿刺特殊情況是小腦延髓池穿刺或側(cè)腦室穿刺注意事項(xiàng)：穿刺時(shí)應(yīng)盡量避免混入血液；

穿刺后應(yīng)做壓力測(cè)定

正常成人臥位時(shí)腦脊液壓力為80-180mmH2O；

兒童 40-100mmH2O）；若壓力超過200mmH2O，則放出的腦脊液量不應(yīng)超過2ml；若壓力低于正常低限，可作動(dòng)力試驗(yàn)。穿刺后將標(biāo)本分別收集于3只無(wú)菌容器中，每管1～2ml

01標(biāo)本采集與處理1、標(biāo)本采集穿刺部位：一般是腰椎穿刺

特殊情況是小腦延髓池穿刺或側(cè)腦室穿刺穿刺后將標(biāo)本分別收集于3只無(wú)菌試管中，每管1～2ml，采集順序如下：

第一管用于細(xì)菌學(xué)檢查，

第二管用于生物化學(xué)和免疫學(xué)檢查

第三管用于顯微鏡檢查如疑為惡性腫瘤，再采集一管做脫落細(xì)胞學(xué)檢查。標(biāo)本采集后應(yīng)在檢查申請(qǐng)單上注明標(biāo)本采集的日期和時(shí)間

01標(biāo)本采集與處理2、標(biāo)本運(yùn)送

標(biāo)本采集后，應(yīng)立即由專人或?qū)Ｓ玫奈锪飨到y(tǒng)運(yùn)送，一般不能超過1h。運(yùn)送過程要保證標(biāo)本的安全性，應(yīng)用封閉的容器運(yùn)送，避免過度震蕩。若發(fā)生標(biāo)本溢灑，應(yīng)立即采用0.2%過氧乙酸或含2000mg/L有效氯的消毒液或75%乙醇溶液消毒污染區(qū)域。

01標(biāo)本采集與處理3、標(biāo)本的保存與接收接收后的標(biāo)本應(yīng)立即檢驗(yàn)，若不能及時(shí)檢驗(yàn)的，應(yīng)2℃～8℃保存，并保證在小時(shí)內(nèi)完成檢驗(yàn)。合格的腦脊液標(biāo)本：①標(biāo)本容器標(biāo)識(shí)清晰②無(wú)明顯外溢情況；③

標(biāo)本量符合檢驗(yàn)項(xiàng)目要求。

01標(biāo)本采集與處理4、標(biāo)本的拒收標(biāo)本信息不全；標(biāo)本唯一性標(biāo)識(shí)不清；標(biāo)本外溢明顯；標(biāo)本量不足拒收的標(biāo)本應(yīng)做好記錄，并將情況反饋給送檢科室。

01標(biāo)本采集與處理5、檢驗(yàn)后標(biāo)本的處理由于腦脊液內(nèi)可能含有各種病微生物，必須視為有潛在感染性的物質(zhì)。標(biāo)本的采集、運(yùn)送、接收、檢驗(yàn)及檢驗(yàn)后的處理等過程要符合實(shí)驗(yàn)室生物安全原則，實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)注意個(gè)人生物安全防護(hù)。檢驗(yàn)后的標(biāo)本及容器、檢測(cè)過程中接觸標(biāo)本的材料皆應(yīng)按《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》及《醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法》的相關(guān)規(guī)定處理。

思考題

1.腦脊液標(biāo)本采集和處理的要求是什么？（采集的三管標(biāo)本分別做什么檢查？）2.腦脊液標(biāo)本在運(yùn)送和接收過程中有什么要求？一般性狀檢驗(yàn)02化學(xué)檢驗(yàn)1、一般性狀檢驗(yàn)02化學(xué)檢驗(yàn)1、一般性狀檢驗(yàn)【顏色】通過肉眼觀察。報(bào)告方式：直接用顏色進(jìn)行描述性報(bào)告，

如無(wú)色、紅色、黃色等◆正常：無(wú)色

腦脊液顏色正常，不能排除神經(jīng)系統(tǒng)的疾病。◆病理：不同顏色常反映一定的疾病

常見的病理性改變紅色、黃色、乳白色、綠色、褐色或黑色02化學(xué)檢驗(yàn)1、一般性狀檢驗(yàn)02化學(xué)檢驗(yàn)2、顏色紅色：（出血）（1）穿刺損傷：

第一管為血性；

以后兩管顏色逐漸變淡；

離心后紅細(xì)胞沉于管底，上清液則為無(wú)色透明（2）蛛網(wǎng)膜下腔或腦室出血：

三管均吳血性，

離心后上清液為淡紅色或黃色。02化學(xué)檢驗(yàn)2、顏色穿刺損傷出血02化學(xué)檢驗(yàn)2、顏色蛛網(wǎng)下腔或腦室出血02化學(xué)檢驗(yàn)2、顏色檢查內(nèi)容新鮮出血陳舊性出血外觀前后三管紅色逐漸變淡前后三管紅色均勻一致凝固性易凝固不易凝固離心后上清液顏色無(wú)色透明呈紅色、淡紅色或黃色紅細(xì)胞形態(tài)無(wú)變化有皺縮上清液隱血試驗(yàn)多為陰性陽(yáng)性白細(xì)胞計(jì)數(shù)不增高繼發(fā)性或反應(yīng)性增高表

-腦脊液新鮮出血和陳舊性出血的鑒別02化學(xué)檢驗(yàn)2、顏色腦室出血蛛網(wǎng)下腔出血02化學(xué)檢驗(yàn)2、顏色黃色（黃變癥）：黃變癥原因臨床意義出血性紅細(xì)胞破壞，膽紅素增加陳舊性蛛網(wǎng)膜下腔出血或腦出血黃疸性膽紅素增高黃疸性肝炎、肝硬化、鉤端螺旋體病、膽管梗阻、新生兒溶血癥梗阻性蛋白質(zhì)含量顯著增高髓外腫瘤等所致的椎管梗阻表

-腦脊液黃變癥的主要原因及臨床意義02化學(xué)檢驗(yàn)◆黃色（黃變癥）：陳舊性出血

1）陳舊性出血：（蛛網(wǎng)膜下腔出血）紅細(xì)胞溶解→氧合血紅蛋白2）高膽紅素血癥：血清中膽紅素>256

腦脊液中膽紅素>8.63）蛛網(wǎng)膜下腔梗阻：椎管阻塞多神經(jīng)炎蛋白含量>1.5g/L

腦膜

少數(shù)因進(jìn)食大師的黃色素、胡蘿卜素等而呈黃色。2、顏色02化學(xué)檢驗(yàn)◆乳白色：白細(xì)胞增多（化膿性腦膜炎）◆（微）綠色：綠膿桿菌引起的腦膜炎◆褐色或黑色：腦膜黑色素瘤2、顏色02化學(xué)檢驗(yàn)【透明度】

正常----透明腦脊液中蛋白質(zhì)增多報(bào)告等級(jí)：透明、微混、混濁等腦脊液中細(xì)菌、真菌增多腦脊液中蛋白質(zhì)增多混濁的原因腦脊液細(xì)胞成分增多02化學(xué)檢驗(yàn)◆正常----清晰透明◆白細(xì)胞>200×106/L

紅細(xì)胞>400×106/L

細(xì)菌、真菌等較多◆病毒性腦炎

中樞神經(jīng)梅毒◆結(jié)核性腦膜炎→細(xì)胞數(shù)中度↑→輕度混濁（毛玻璃樣）◆化腦性腦膜炎→細(xì)胞數(shù)大量↑→明顯混濁（乳白色）◆腰椎穿刺損傷出血→輕度混濁（紅色）混濁細(xì)胞數(shù)輕度↑→透明或微混常見腦脊液的透明度【透明度】2、顏色02化學(xué)檢驗(yàn)可按“無(wú)凝塊”“有凝塊”“無(wú)薄膜”“膠凍狀”等來描述◆正常：靜置24h→不凝固、無(wú)沉淀無(wú)薄膜形成◆急性化膿性腦膜炎：靜置1-2h→凝塊沉淀物◆結(jié)核性腦膜炎：靜置12-24h→表面有纖細(xì)薄膜◆蛛網(wǎng)膜下腔梗阻：黃色膠胨狀◆神經(jīng)梅毒、脊髓灰質(zhì)炎：清晰透明或微混，可見絮狀小凝塊【凝固性】小結(jié)◆正常----無(wú)色清晰透明無(wú)凝塊無(wú)薄膜◆病毒性腦炎中樞神經(jīng)梅毒◆結(jié)核性腦膜炎→細(xì)胞數(shù)中度↑→輕度混濁（毛玻璃樣）表面有薄膜◆化腦性腦膜炎→細(xì)胞數(shù)大量↑→明顯混濁（乳白色）有凝塊或沉淀◆腰椎穿刺損傷出血→輕度混濁（紅色）無(wú)凝塊無(wú)薄細(xì)胞數(shù)輕度↑→透明或微混有絮狀小凝塊表

-常見幾種腦脊液的一般性狀檢查特征化學(xué)檢驗(yàn)04化學(xué)檢驗(yàn)1、蛋白質(zhì)測(cè)定【定性試驗(yàn)】有Pandy試驗(yàn)、硫酸銨試驗(yàn)●Pandy試驗(yàn)：（>0.25g/L可呈弱陽(yáng)性）①原理：球蛋白+苯酚（石碳酸）→蛋白鹽（白色混濁或沉淀）②試劑：飽和苯酚溶液

③簡(jiǎn)要操作：取試劑2ml于試管中→垂直滴加標(biāo)本1～2滴

→立即觀察結(jié)果（在黑色背景下）

④結(jié)果判定：正常：陰性+:白色云霧狀++：白色云霧狀渾濁+++：白色絮狀沉淀++++：立即形成白色凝塊04化學(xué)檢驗(yàn)1、蛋白質(zhì)測(cè)定在生理狀態(tài)下，由于血腦屏障的作用，健康人腦脊液蛋白質(zhì)含量較血漿低，約為血漿的1%，主要為清蛋白。

在中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生病變時(shí)，腦脊液蛋白質(zhì)種類和含量可有不同程度的變化。

腦脊液蛋白質(zhì)檢查可分為定性檢查和定量檢查。04化學(xué)檢驗(yàn)1、蛋白質(zhì)測(cè)定腦脊液蛋白質(zhì)檢查定性潘氏試驗(yàn)硫酸銨試驗(yàn)羅-瓊氏試驗(yàn)諾-愛試驗(yàn)Lee-Vinson試驗(yàn)定量磺基水楊酸-硫酸鈉比濁法鄰苯三酚紅鉬絡(luò)合顯色法雙縮脲法04化學(xué)檢驗(yàn)（一）蛋白質(zhì)：【定性試驗(yàn)】1.潘氏試驗(yàn)（Pandy試驗(yàn)）：（>0.25g/L可呈弱陽(yáng)性）◆原理：蛋白+苯酚（石碳酸）→蛋白鹽→混濁或沉淀

腦脊液中的蛋白質(zhì)與苯酚結(jié)合，生成不溶性的蛋白鹽而產(chǎn)生白色混濁，根據(jù)濁度進(jìn)行結(jié)果判定。◆試劑：飽和苯酚溶液

◆操作：取苯酚試劑2ml于潔凈試管中，垂直滴加腦脊液1-2滴，然后立即在黑色背景下觀察結(jié)果，若出現(xiàn)白色混濁或沉淀，即判斷為陽(yáng)性。

◆結(jié)果判定：

--：清晰，無(wú)混濁±：稍呈白霧狀，對(duì)光不易看到+：灰白色云霧狀++：白色云霧狀混濁+++：白色絮狀沉淀++++：立即形成白色凝塊狀1、蛋白質(zhì)測(cè)定04化學(xué)檢驗(yàn)1、蛋白質(zhì)測(cè)定【定性試驗(yàn)】潘氏試驗(yàn)（Pandy試驗(yàn)）硫酸銨試驗(yàn)：包括羅-瓊氏試驗(yàn)和諾-愛試驗(yàn)，后者操作繁瑣〖羅-瓊氏試驗(yàn)〗◆原理：

球蛋白+半飽和硫酸銨→蛋白鹽→混濁或沉淀利用半飽和硫酸銨沉淀腦脊液中的球蛋白，根據(jù)所出現(xiàn)的白色混濁或沉淀判定結(jié)果。◆試劑：半飽和硫酸銨溶液

◆操作：取試劑0.5ml于潔凈試管中，沿管壁輕輕加入腦脊液標(biāo)本0.5ml，勿混，先做環(huán)狀試驗(yàn)◆結(jié)果判定：若3min內(nèi)在兩液現(xiàn)面間出現(xiàn)白色環(huán)，表示有蛋白質(zhì)，若混勻白色混濁消失，則表示無(wú)球蛋

白；若白色沉淀不消失，則表示球蛋白陽(yáng)性。04化學(xué)檢驗(yàn)1、蛋白質(zhì)測(cè)定【定性試驗(yàn)】潘氏試驗(yàn)（Pandy試驗(yàn)）硫酸銨試驗(yàn)：包括羅-瓊氏試驗(yàn)和諾-愛試驗(yàn)Lee-Vinson試驗(yàn)：

●原理：

磺基水楊酸和氯化高汞均能沉淀腦脊液蛋白質(zhì)，根據(jù)沉淀物的比例不同，可鑒別化膿性和結(jié)核性腦膜炎。04化學(xué)檢驗(yàn)1、蛋白質(zhì)測(cè)定方法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)Pandy試驗(yàn)操作簡(jiǎn)便、標(biāo)本量少、易于觀察、靈敏度高假陽(yáng)性率高羅-瓊氏試驗(yàn)檢測(cè)球蛋白，特異性高靈敏度低諾-愛試驗(yàn)檢測(cè)球蛋白和清蛋白，特異性高操作繁瑣Lee-Vinson試驗(yàn)檢測(cè)球蛋白和清蛋白操作繁瑣、特異性低蛋白質(zhì)定性試驗(yàn)方法學(xué)評(píng)價(jià)04化學(xué)檢驗(yàn)1、蛋白質(zhì)測(cè)定蛋白質(zhì)定性試驗(yàn)方法學(xué)評(píng)價(jià)方法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)比濁法（磺基水楊酸-硫酸鈉比濁法）操作簡(jiǎn)便、快速，無(wú)需特殊儀器標(biāo)本用量大、重復(fù)性差、影響因素多染料結(jié)合比色法（鄰苯三酚紅鉬絡(luò)合顯色法）操作快速、靈敏度高、標(biāo)本用量少、重復(fù)性好（常用）要求高、線性范圍窄雙縮脲法操作簡(jiǎn)便、受蛋白質(zhì)種類影響小靈敏度較低、特異性差04化學(xué)檢驗(yàn)1、蛋白質(zhì)測(cè)定【參考值】（1）定性試驗(yàn)

陰性或弱陽(yáng)性（2）定量試驗(yàn)正常成人：腰池穿刺參考區(qū)間為0.20～0.40g/L，

小腦延髓池穿刺參考區(qū)間為0.10～0.25g/L，

腦室穿刺為0.00～0.15g/L04化學(xué)檢驗(yàn)1、蛋白質(zhì)測(cè)定（1）標(biāo)本：若標(biāo)本混濁或含有大量細(xì)胞時(shí)，須離心沉淀，吸取上清液進(jìn)行檢測(cè)，否則可引起潘氏試驗(yàn)假陽(yáng)性，腦脊液蛋白定量測(cè)定結(jié)果偏高。（2）器材：所用的器材均應(yīng)潔凈沒有污染，以免出現(xiàn)假陽(yáng)性，或使結(jié)果偏高。（3）試劑：潘氏試驗(yàn)中所用的苯酚試劑如飽和度降低會(huì)出現(xiàn)假陰性，應(yīng)定期檢查更換試驗(yàn)，特別是室溫較低時(shí)。（4）結(jié)果觀察：潘氏試驗(yàn)觀察結(jié)果時(shí)，應(yīng)注意在黑色背景下進(jìn)行，否則易引起假陰性。（5）其他：腦脊液蛋白定量測(cè)定時(shí)，若標(biāo)本蛋白質(zhì)濃度過高，應(yīng)用生理鹽水稀釋后再重新測(cè)定?！举|(zhì)量保證】04化學(xué)檢驗(yàn)1、蛋白質(zhì)測(cè)定【臨床意義】病變臨床意義腦組織炎性病變腦組織感染時(shí)腦膜和脈絡(luò)叢毛細(xì)血管通透性增加，先有清蛋白增高,隨后球蛋白和纖維蛋白也增高。蛋白增高程度:化膿性腦膜炎>結(jié)核性腦膜炎>病毒性、真菌性腦炎神經(jīng)根病變梗阻性腦積水Guilain-Barre綜合征常有蛋白-細(xì)胞分離現(xiàn)象椎管內(nèi)梗阻腦與蛛網(wǎng)膜下腔互不相通，血漿蛋白質(zhì)由脊髓靜脈滲出，腦脊液蛋白質(zhì)含量顯著增高(有時(shí)達(dá)30~50g/L),如脊髓腫瘤、轉(zhuǎn)移癌、粘連性蛛網(wǎng)膜炎等其他早產(chǎn)兒腦脊液蛋白含量可達(dá)2g/L,新生兒為0.8~1.0g/L,出生2個(gè)月后逐漸降至正常水平04化學(xué)檢驗(yàn)1、蛋白質(zhì)測(cè)定

神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病顱內(nèi)和蛛網(wǎng)膜下腔出血蛛網(wǎng)膜下腔梗阻顱內(nèi)占位性病變損傷性腰椎穿刺增加見于脊液更新加快損傷或腰穿引起的脊液漏顱內(nèi)壓增加甲亢

減少見于04化學(xué)檢驗(yàn)2、葡萄糖測(cè)定血糖濃度血腦屏障通透性糖酵解速度葡萄糖膜轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的功能腦脊液中葡萄糖含量影響因素腦脊液葡萄糖的方法-（同血糖）葡萄糖氧化酶法己糖激酶法04化學(xué)檢驗(yàn)2、葡萄糖測(cè)定方法評(píng)價(jià)定量測(cè)定氧化酶法氧化酶法中一些還原性物質(zhì)可產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用，造成測(cè)定結(jié)果偏低，使反應(yīng)的特異性減低。己糖激酶法①基本不受溶血、高脂血、黃疸、尿酸、維生素C及藥物的干擾；②特異性和準(zhǔn)確性均高于葡萄糖氧化酶法。半定量測(cè)定五管糖法（班氏法）特異性、準(zhǔn)確性較差葡萄糖測(cè)定方法學(xué)評(píng)價(jià)04化學(xué)檢驗(yàn)2、葡萄糖測(cè)定血糖濃度血腦屏障通透性糖酵解速度葡萄糖膜轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的功能腦脊液中葡萄糖含量影響因素參考值成人2.5～4.4mmol/L兒童2.8～4.5mmol/L腦脊液/血漿比0.3～0.9健康人腦脊液葡萄糖含量?jī)H為血糖的50%～80%。04化學(xué)檢驗(yàn)2、葡萄糖測(cè)定變化臨床意義腦組織炎性病變①急性化膿性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎、真菌性腦膜炎，葡萄糖含量越低，預(yù)后越差；②急性化膿性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎、真菌性腦膜炎，葡萄糖含量越低，預(yù)后越差腦腫瘤，尤其是惡性腫瘤；③神經(jīng)梅毒④低血糖椎管內(nèi)梗阻①飽餐或靜脈注射葡萄糖后，血糖增高②腦出血③影響到腦干的急性外傷或中毒④糖尿病【臨床意義】04化學(xué)檢驗(yàn)3、氯化物測(cè)定血氯濃度血漿pH值血腦屏障通透性腦脊液中蛋白質(zhì)含量腦脊液中氯化物含量影響因素腦脊液高于血漿氯化物腦脊液氯化物測(cè)定方法與血清氯化物測(cè)定方法相同04化學(xué)檢驗(yàn)3、氯化物測(cè)定◆目前臨床常用的方法有：硝酸汞滴定法、硫氰酸汞比色法、離子選擇電極法、電量分析法、干化學(xué)分析法等。其中，離子選擇電極法變異系數(shù)小，準(zhǔn)確度和精密度良好，易于自動(dòng)化，是目前使用最廣泛的常規(guī)方法。04化學(xué)檢驗(yàn)3、氯化物測(cè)定方法評(píng)價(jià)硝酸汞滴定法①為手工檢測(cè)法，操作繁瑣，以目測(cè)判斷滴定終點(diǎn)；②精密度低，影響因素多硫氰酸汞比色法①可手工操作，又可自動(dòng)化分析；②準(zhǔn)確度、精密度良好；③為常規(guī)方法離子選擇電極法①變異系數(shù)??；②準(zhǔn)確度、精密度良好，易于自動(dòng)化；③為目前使用最廣泛的常規(guī)方法電量分析法①準(zhǔn)確度、精密度高；②為參考方法常用腦脊液氯化物測(cè)定方法的方法學(xué)評(píng)價(jià)04化學(xué)檢驗(yàn)3、氯化物測(cè)定減低①化膿性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎和真菌性腦膜炎氯化物降低，其中結(jié)核性腦膜炎氯化物顯著降低，比葡萄糖降低出現(xiàn)更早，對(duì)化膿性腦膜炎和結(jié)核性腦膜炎的鑒別診斷有一定價(jià)值；②非中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如嘔吐、腹瀉、攝入氯化物過少等造成血氯降低時(shí)，腦脊液中的氯化物可隨之降低；③其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如病毒性腦膜炎、脊髓灰質(zhì)炎、腦膿腫、神經(jīng)梅毒等氯化物多屬于正?；蜉p度減低增高慢性腎功不全、腎炎、尿毒癥、脫水、心力衰竭和漿液性腦膜炎等成人120～130mmol/L；兒童111～123mmol/L【參考值】【臨床意義】04化學(xué)檢驗(yàn)4、其他測(cè)定項(xiàng)目臨床意義化學(xué)檢查酶及乳酸測(cè)定（1）天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)＜20

/L活性增高見于腦梗死、腦萎縮、、中毒性腦病、急性顱腦外傷、血管病變、中樞神經(jīng)系統(tǒng)轉(zhuǎn)移癌（2）乳酸脫氫酶(LDH)：3～40

/L(具有鑒別意義)①細(xì)菌性腦膜、腦血管疾病、腦腫瘤、脫髓鞘病，病情進(jìn)展時(shí)②病毒性腦膜炎：多正?；蜉p度③顱腦外傷：LDH正常④病情緩解時(shí)，LDH降低（3）肌酸激酶(CK)：CK-BB0.5～2

/L①增高見于：化膿性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎、進(jìn)行性腦積水、腦血管疾病、腦腫瘤②正?；蜉p度增高見于：病毒性腦膜炎（4）溶菌酶：

無(wú)或含量極微結(jié)核性腦膜炎增高的程度明顯高于細(xì)菌性腦膜炎且與病情變化相一致04化學(xué)檢驗(yàn)4、其他測(cè)定項(xiàng)目臨床意義化學(xué)檢查蛋白電泳①前白蛋白增高→見于退行性變，如腦積水、舞蹈病，帕金森病前白蛋白減少→見于神經(jīng)系統(tǒng)炎癥，如腦膜炎，腦腫瘤，腦萎縮②清蛋白增高→見于腦血管病，如腦瘤、腦梗阻、腦出血等清蛋白減少→見于外傷急性期③a1球蛋白增高→見于腦膜炎、脊髓灰質(zhì)炎④a2球蛋白增高→見于腦腫瘤，轉(zhuǎn)移癌，膠質(zhì)瘤⑤β球蛋白增高→見于退行性變，如帕金森病、外傷后偏癱等⑥r(nóng)球蛋白增高→見于腦膠質(zhì)瘤、重癥腦外傷、癲癇等04化學(xué)檢驗(yàn)4、其他測(cè)定項(xiàng)目臨床意義免疫學(xué)檢查免疫球蛋白測(cè)定IgG增加→多發(fā)性硬化，亞急性硬化性全腦炎，結(jié)核性腦膜炎，梅毒性腦膜炎IgA增加→各種腦膜炎、腦血管疾病IgM出現(xiàn)→近期中樞神經(jīng)系統(tǒng)有感染，腦腫瘤，多發(fā)性硬化IgE增高→見于腦寄生蟲病等其他項(xiàng)目測(cè)定髓鞘堿性蛋白：多發(fā)性硬化癥的急性期顯著增加，主要作為觀察多發(fā)性硬化癥患者疾病活動(dòng)的指標(biāo)；神經(jīng)性梅毒、腦外傷、腦血管意外時(shí)也增高C反應(yīng)蛋白：在細(xì)菌和非細(xì)菌性腦膜炎鑒別診斷中有價(jià)值，前者升高程度明顯大于后者S-100：中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷特異和靈敏的化學(xué)指標(biāo)IgE增高→見于腦寄生蟲病等顯微鏡檢驗(yàn)04顯微鏡檢驗(yàn)1、顯微鏡計(jì)數(shù)法1．細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)●直接計(jì)數(shù)法：適用于比較清亮或微渾的腦脊液標(biāo)本【操作】吸取標(biāo)本（用微量吸管吸取少量混勻腦脊液）→充液（充入計(jì)數(shù)池）→靜置（2-3分鐘）→計(jì)數(shù)用低倍鏡計(jì)數(shù)10個(gè)大方格（兩個(gè)計(jì)數(shù)池內(nèi)四角和中央大）→計(jì)算

04顯微鏡檢驗(yàn)1、顯微鏡計(jì)數(shù)法1．細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)●直接計(jì)數(shù)法：【計(jì)算】腦脊液細(xì)胞數(shù)=N×106=■.■■×109/L

N：10個(gè)大方格的細(xì)胞數(shù)04顯微鏡檢驗(yàn)1、顯微鏡計(jì)數(shù)法1．細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)●直接計(jì)數(shù)法：適用于比較清亮或微渾的腦脊液標(biāo)本●稀釋計(jì)數(shù)法：適用于細(xì)胞過多、混濁或血性的腦脊液標(biāo)本【操作】

稀釋（用微量吸管吸取少量混勻的腦脊液+生理鹽水或紅細(xì)胞稀釋液）

→充液（充入計(jì)數(shù)池）→靜置（2-3分鐘）→計(jì)數(shù)用低倍鏡計(jì)數(shù)10個(gè)大方格（兩個(gè)計(jì)數(shù)池內(nèi)四角和中央大）→計(jì)算04顯微鏡檢驗(yàn)1、顯微鏡計(jì)數(shù)法1．細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)●稀釋計(jì)數(shù)法：【計(jì)算】腦脊液細(xì)胞數(shù)=N×稀釋倍數(shù)×106=■.■■×109/LN：10個(gè)大方格的細(xì)胞數(shù)04顯微鏡檢驗(yàn)1、顯微鏡計(jì)數(shù)法2．白細(xì)胞計(jì)數(shù)●直接計(jì)數(shù)法：適用于非血性的腦脊液標(biāo)本【操作】

標(biāo)本預(yù)處理

（用微量吸管吸取少量冰乙酸，全部吹出，使微量吸管內(nèi)壁黏附少量冰酸，再吸入混勻的腦脊液，數(shù)分鐘后，再次混勻腦脊液標(biāo)本）→充液（充入計(jì)數(shù)池）→靜置（2-3分鐘）→計(jì)數(shù)用低倍鏡計(jì)數(shù)10個(gè)大方格（兩個(gè)計(jì)數(shù)池內(nèi)四角和中央大）→計(jì)算

04顯微鏡檢驗(yàn)1、顯微鏡計(jì)數(shù)法2．白細(xì)胞計(jì)數(shù)●直接計(jì)數(shù)法：適用于非血性的腦脊液標(biāo)本●稀釋計(jì)數(shù)法：適用于混濁或血性的腦脊液標(biāo)本【操作】

稀釋（用微量吸管吸取少量混勻的腦脊液+白細(xì)胞計(jì)數(shù)稀釋液）

→→充液（充入計(jì)數(shù)池）→靜置（2-3分鐘）→計(jì)數(shù)用低倍鏡計(jì)數(shù)10個(gè)大方格（兩個(gè)計(jì)數(shù)池內(nèi)四角和中央大）→計(jì)算

04顯微鏡檢驗(yàn)2、細(xì)胞計(jì)數(shù)1．細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)

【方法】（1）儀器計(jì)數(shù)法：體液細(xì)胞分析儀（2）顯微鏡計(jì)數(shù)法：①直接計(jì)數(shù)法

②稀釋計(jì)數(shù)法04顯微鏡檢驗(yàn)2、細(xì)胞計(jì)數(shù)1．細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)2．白細(xì)胞計(jì)數(shù)

【方法】（1）儀器計(jì)數(shù)法：同細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)，體液細(xì)胞分析儀（2）顯微鏡計(jì)數(shù)法：直接計(jì)數(shù)法：同細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)稀釋計(jì)數(shù)法04顯微鏡檢驗(yàn)2、細(xì)胞計(jì)數(shù)【方法學(xué)評(píng)價(jià)】（1）儀器計(jì)數(shù)法：

該法精密度高、速度快、報(bào)告及時(shí)；但對(duì)于異常細(xì)胞形態(tài)識(shí)別有偏差。若儀器出現(xiàn)形態(tài)學(xué)報(bào)警，必須進(jìn)行顯微鏡計(jì)數(shù)法復(fù)查。（2）顯微鏡計(jì)數(shù)法：雖然操作繁瑣，但可作為校正儀器的參考方法。04顯微鏡檢驗(yàn)2、細(xì)胞計(jì)數(shù)【質(zhì)量保證】●及時(shí)送檢。

為避免腦脊液標(biāo)本凝固，應(yīng)盡快送檢，應(yīng)在標(biāo)本采集后1小時(shí)內(nèi)完成，以免放置過久，使細(xì)胞變形、破壞或腦脊液凝固，導(dǎo)致細(xì)胞計(jì)數(shù)不準(zhǔn)。●準(zhǔn)確預(yù)處理標(biāo)本。

直接計(jì)數(shù)時(shí)吸管內(nèi)的冰乙酸要盡量除去，否則結(jié)果偏低血性標(biāo)本的白細(xì)胞計(jì)數(shù)的校正：混有血液的腦脊液標(biāo)本混勻后，用1%的冰乙酸溶液稀釋后計(jì)數(shù)。●準(zhǔn)確校正。04顯微鏡檢驗(yàn)2、細(xì)胞計(jì)數(shù)【質(zhì)量保證】●及時(shí)送檢。●準(zhǔn)確預(yù)處理標(biāo)本?！駵?zhǔn)確校正。

穿刺損傷導(dǎo)致的血性腦脊液，計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)無(wú)意義。白細(xì)胞計(jì)數(shù)須經(jīng)校正。為了排除因出血而帶來的白細(xì)胞，可用以下公式進(jìn)行校正：04顯微鏡檢驗(yàn)2、細(xì)胞計(jì)數(shù)【質(zhì)量保證】●及時(shí)送檢●準(zhǔn)確預(yù)處理標(biāo)本●準(zhǔn)確校正●注重形態(tài)

細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，若發(fā)現(xiàn)較多的皺縮或腫脹的紅細(xì)胞，應(yīng)在報(bào)告中予以描述，以幫助臨床鑒別陳舊性或新鮮出血?！耔b別成分：計(jì)數(shù)時(shí)注意鑒別紅細(xì)胞、白細(xì)胞、新型隱球菌。04顯微鏡檢驗(yàn)2、細(xì)胞計(jì)數(shù)【質(zhì)量保證】●及時(shí)送檢●準(zhǔn)確預(yù)處理標(biāo)本●準(zhǔn)確校正●注重形態(tài)●鑒別成分：計(jì)數(shù)時(shí)注意鑒別紅細(xì)胞、白細(xì)胞、新型隱球菌。紅細(xì)胞加酸后溶解白細(xì)胞加酸后細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)更加明顯新型隱球菌具有“出芽”現(xiàn)象；滴加0.35mol/L冰乙酸后，仍保持原形；加優(yōu)質(zhì)墨汁后可見不著色的莢膜。04顯微鏡檢驗(yàn)2、細(xì)胞計(jì)數(shù)【質(zhì)量保證】●及時(shí)送檢?！駵?zhǔn)確預(yù)處理標(biāo)本●準(zhǔn)確校正●注重形態(tài)●鑒別成分●保護(hù)器材：

檢查完畢，采用75%乙醇消毒計(jì)數(shù)板60min。勿用苯酚消毒，以防損傷計(jì)數(shù)室的刻度。04顯微鏡檢驗(yàn)2、細(xì)胞計(jì)數(shù)【參考區(qū)間】●紅細(xì)胞：無(wú)●白細(xì)胞：成人（0～10）×106/L，兒童（0～15）×106/L；新生兒（0～30）×106/L04顯微鏡檢驗(yàn)3、細(xì)胞分類計(jì)數(shù)【方法】腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查常采用：玻片離心法、沉淀室法、微孔薄膜篩濾法、纖維蛋白網(wǎng)細(xì)胞捕獲法等采集細(xì)胞，并進(jìn)行染色。04顯微鏡檢驗(yàn)3、細(xì)胞分類計(jì)數(shù)【方法】（1）儀器分類法：體液細(xì)胞分析儀（2）顯微鏡分類法：即直接分類法（3）染色分類法04顯微鏡檢驗(yàn)3、細(xì)胞分類計(jì)數(shù)【方法】（1）儀器分類法：體液細(xì)胞分析儀（2）顯微鏡分類法：即直接分類法①白細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后，在高倍鏡下根據(jù)細(xì)胞形狀和細(xì)胞核的形態(tài)進(jìn)行分類。②

分別計(jì)數(shù)“多個(gè)核細(xì)胞”（即粒細(xì)胞）、“單個(gè)核細(xì)胞”（包括淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞），共計(jì)數(shù)100個(gè)有核細(xì)胞③

分別計(jì)算單個(gè)核細(xì)胞和多個(gè)核細(xì)胞所占的比例④

以百分?jǐn)?shù)表示04顯微鏡檢驗(yàn)染色分類法取離心后的腦脊液沉淀物制備涂片（均勻薄膜）干燥行瑞特或瑞-吉復(fù)合染色油鏡下分類計(jì)數(shù)（分類方法同血液白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)方法）結(jié)果以百分率表示（如有內(nèi)皮細(xì)胞，需要另作描述并報(bào)告）04顯微鏡檢驗(yàn)3、細(xì)胞分類計(jì)數(shù)04顯微鏡檢驗(yàn)3、細(xì)胞分類計(jì)數(shù)【質(zhì)量保證】（1）若腦脊液標(biāo)本陳舊、細(xì)胞變形時(shí)，白細(xì)胞直接分類法誤差較大，應(yīng)改用染色分類法。（2）染色分類法時(shí)，離心速度不宜過快、固定時(shí)間不宜過長(zhǎng)，以減少腦脊液細(xì)胞的破壞和變形。細(xì)胞涂片應(yīng)均勻集中，以利于觀察。（3）進(jìn)行染色分類時(shí)，如見到內(nèi)皮細(xì)胞、室管膜細(xì)胞，應(yīng)計(jì)入分類百分比中；（4）若見到腫瘤細(xì)胞，則另行描述報(bào)告。（5）直接分類時(shí)，若白細(xì)胞總數(shù)少于100個(gè)，則直接寫出單個(gè)核細(xì)胞和多個(gè)核細(xì)胞各自的具體數(shù)字。04顯微鏡檢驗(yàn)3、細(xì)胞分類計(jì)數(shù)【參考區(qū)間】●直接分類法：

有核細(xì)胞分類：多為淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞（7∶3）；偶見內(nèi)皮細(xì)胞?！袢旧诸惙ǎ撼扇耍毫馨图?xì)胞40%-80%，單核細(xì)胞15%-45%，中性粒細(xì)胞0-6%新生兒：淋巴細(xì)胞5%-35%，單核細(xì)胞50%-90%，中性粒細(xì)胞0-8%04顯微鏡檢驗(yàn)細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類計(jì)數(shù)【臨床意義】腦脊液細(xì)胞數(shù)增多見于中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變，其增多程度及細(xì)胞種類與病變的性質(zhì)及轉(zhuǎn)歸有關(guān)。04顯微鏡檢驗(yàn)臨床意義（1）病毒性腦炎、腦膜炎：

輕度增加，數(shù)十

106/L；淋巴細(xì)胞為主（2）結(jié)核性性腦膜炎：

輕到中度增加，<500

106/L；

初期以中性粒增多為主，好轉(zhuǎn)后以淋巴細(xì)胞為主。（3）真菌性性腦膜炎：

中度增加，數(shù)百

106/L（新型隱球菌性）

常以淋巴細(xì)胞為主。（4）化膿性腦膜炎：

明顯增多，數(shù)千

106/L

中性粒細(xì)胞為主，病情好轉(zhuǎn)中性粒急劇下降（5）腦寄生蟲?。荷?，<100

106/L，以淋巴細(xì)胞和嗜酸細(xì)胞為主（血吸蟲、

阿米巴原蟲、弓形體、旋毛蟲幼蟲）（6）腦室或蛛網(wǎng)膜下腔出血：可見大量紅細(xì)胞，白細(xì)胞中以中性粒細(xì)胞為主，2-3天可發(fā)現(xiàn)

吞噬細(xì)胞吞噬紅細(xì)胞04顯微鏡檢驗(yàn)表-中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變時(shí)腦脊液細(xì)胞分類計(jì)數(shù)的變化04顯微鏡檢驗(yàn)4、病原生物學(xué)檢查方法●細(xì)菌檢查：顯微鏡檢查法，細(xì)菌培養(yǎng)法，ELISA法●真菌檢查：顯微鏡檢查法，真菌檢查法●寄生蟲檢查：顯微鏡檢查法，免疫學(xué)檢查法

04顯微鏡檢驗(yàn)表–常用

細(xì)菌生物學(xué)檢查方法及評(píng)價(jià)04顯微鏡檢驗(yàn)表–常用真菌、寄生蟲生物學(xué)檢查方法及評(píng)價(jià)檢查內(nèi)容檢查方法真菌檢查顯微鏡檢查法離心取沉淀進(jìn)行墨汁染色，若發(fā)現(xiàn)新型隱球菌可確診新型隱球菌性腦膜炎真菌培養(yǎng)法排除污染因素，若培養(yǎng)出真菌可確診，同時(shí)可確真菌的種類及進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。缺點(diǎn)：耗時(shí)長(zhǎng)，不能及時(shí)確診寄生蟲檢查顯微鏡檢查法離心取沉淀涂片，若檢出寄生蟲蟲卵即可診斷腦寄生蟲病。優(yōu)點(diǎn)：該法簡(jiǎn)單、快速，可確診；缺點(diǎn)：陽(yáng)性率較低免疫學(xué)法ELISA法對(duì)診斷腦囊蟲病有高度的特異性；梅毒螺旋體熒光抗體吸收試驗(yàn)對(duì)神經(jīng)梅毒的診斷有較高的靈敏度和特異性臨床應(yīng)用05臨床應(yīng)用1、在中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病診療中的應(yīng)用正常腦脊液：外觀無(wú)色、清晰、透明，放置24小時(shí)無(wú)凝塊，蛋白定性試驗(yàn)(潘氏試驗(yàn))陰性或弱陽(yáng)性，羅瓊氏試驗(yàn)陰性葡萄糖正常:2.5-4.4mmol/L氯化物正常:120-130mmol/L細(xì)胞計(jì)數(shù)（0-10）*109/L，細(xì)胞分類計(jì)數(shù)以淋巴細(xì)胞為主細(xì)菌05臨床應(yīng)用1、在中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病診療中的應(yīng)用1．病毒性腦膜炎2．結(jié)核性腦膜炎3．病毒性腦膜炎4.真菌性腦膜炎05臨床應(yīng)用1、在中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病診療中的應(yīng)用疾病外觀凝固性蛋白質(zhì)葡萄糖氯化物細(xì)胞分類細(xì)胞計(jì)數(shù)細(xì)菌化膿性腦膜炎混濁有凝塊↑↑↓↓↓↓以中性粒細(xì)胞為主明顯升高化膿菌結(jié)核性腦膜炎混濁可見薄膜↑↓↓↓以中性粒細(xì)胞為主中度升高結(jié)核桿菌病毒性腦膜炎透明或微混無(wú)↑正常正常早期以中性粒細(xì)胞為主，后期以淋