高中生物：第27講 微生物的培養(yǎng)和分離

第27講微生物的培養(yǎng)和分離

請(qǐng)回答下列有關(guān)大腸桿菌培養(yǎng)的問(wèn)題：

Q)在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮、和滲透壓等條

件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類型容易選擇、、等優(yōu)

點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。

(2)在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染,需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行(填“消

毒"或“滅菌”)；操作者的雙手需進(jìn)行清洗和；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅,

其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能

____O

⑶若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)

格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的.

(4)通常,對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步

的O

(5)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方

法是_________

____O

⑹若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn),使用過(guò)的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)處理后才能丟棄，以

防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。

【解析】Q)大腸桿菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期

短等優(yōu)點(diǎn)，培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。(2)滅菌是

用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,所以對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌;消毒是用較

為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物方桑作者的雙手

需要進(jìn)行清洗和消毒;紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。（3）稀釋涂布平板法是

將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面

進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)保證樣品稀釋的比例適合。（4）對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等

特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。（5）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)

于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察

培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。（6）因?yàn)橛械拇竽c桿菌會(huì)釋放一種強(qiáng)烈的毒素，并可能導(dǎo)致人體腸

道出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀,因此使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)

物的擴(kuò)散。

【答案】Q）溫度酸堿度易培養(yǎng)生活周期短（2）滅菌消毒損傷DNA的結(jié)構(gòu)

⑶比例合適（4）鑒定（或分類）（5）將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀

察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生（6）滅菌

工業(yè)上常用酵母菌來(lái)改善釀造醬油的風(fēng)味，在稀釋發(fā)酵階段，由于添加了較多的鹽才卬制了

大部分微生物的生長(zhǎng)，而一些耐鹽酵母菌會(huì)繼續(xù)生長(zhǎng)，發(fā)酵產(chǎn)生乙醇、有機(jī)酸等小分子物質(zhì),

增加醬油的風(fēng)味。某實(shí)驗(yàn)小組從傳統(tǒng)發(fā)酵醬油中篩選并分離耐鹽酵母菌，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

⑴將酵母菌用于醬油發(fā)酵過(guò)程中，密封的發(fā)酵罐要留有一定的空間，其目的

是O

（2）若用牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌很U培養(yǎng)基的pH需要調(diào)至。實(shí)驗(yàn)室對(duì)

培養(yǎng)基滅菌的常見(jiàn)方法是。

（3）篩選耐鹽酵母菌的培養(yǎng)基中需要加入青霉素，其目的是.為了保證

篩選出的酵母菌具有耐鹽性，培養(yǎng)基中還需要加入o酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生的乙醇

與（填試劑）反應(yīng)會(huì)呈現(xiàn)灰綠色,該反應(yīng)可用于乙醇的檢驗(yàn)。

（4）在對(duì)菌液中的耐鹽酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，一般要將多個(gè)稀釋倍數(shù)的菌液分別涂布在平板上培

養(yǎng)，其目的是.

【解析】（1）將酵母菌用于醬油發(fā)酵過(guò)程中，密封的發(fā)酵罐要留有一定的空間，可以為酵母

菌提供氧氣，促進(jìn)酵母菌的繁殖，使發(fā)酵后期有較多的酵母菌參與無(wú)氧呼吸。（2）大腸桿菌適宜

的培養(yǎng)基pH應(yīng)為中性或微堿性。實(shí)驗(yàn)室常用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行培養(yǎng)基滅菌。（3）青霉素

可以抑制細(xì)菌的繁殖。篩選耐鹽的酵母菌，培養(yǎng)基中應(yīng)加入一定濃度的食鹽溶液。酸化的重

鋁酸鉀溶液與乙醇反應(yīng)會(huì)呈現(xiàn)灰綠色,可用于乙醇的檢驗(yàn)。（4）在對(duì)菌液中的耐鹽酵母菌進(jìn)行

計(jì)數(shù)時(shí)，需要從涂布平板中篩選菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，所以要將多個(gè)稀釋倍數(shù)的

菌液分別涂布在平板上培養(yǎng)。

【答案】Q）為酵母菌提供氧氣,以促進(jìn)酵母菌的繁殖（2）中性或微堿性高壓蒸汽滅菌

法（3）抑制細(xì)菌的繁殖一定濃度的食鹽溶液酸性重鋁酸鉀（4）保證能從中篩選出菌落

數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)

多氯聯(lián)苯是一種對(duì)人體有很大危害的有機(jī)物質(zhì)，呈油狀液體，污染土壤后很難清除。研究發(fā)

現(xiàn)部分酵母菌具有分解多氯聯(lián)苯的作用，為消除這種污染,科研人員計(jì)劃從受污染的土壤中篩

選出高效分解多氯聯(lián)苯的菌株。

Q）篩選分解多氯聯(lián)苯的菌株時(shí)，應(yīng)將土壤樣品，接種到以為唯一碳源的培

養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于.

（2）對(duì)初步提取到的菌株要進(jìn)行，一般操作方法有兩種，右圖表示法。

（3）將1mL酵母菌溶液稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液經(jīng)適當(dāng)

培養(yǎng)后,3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為56、57、58,據(jù)此可得出每升溶液中酵母菌活菌數(shù)

為O

【答案】⑴稀釋（溶解）多氯聯(lián)苯選擇培養(yǎng)基⑵純化平板劃線⑶5.7x107個(gè)

大腸埃希氏菌俗稱大腸桿菌，是人和動(dòng)物腸道中的正常棲居菌。自來(lái)水一旦被它污染，就有

可能引發(fā)腸道傳染病。因此，必須對(duì)自來(lái)水進(jìn)行嚴(yán)格的檢測(cè)，以確保飲水安全。某同學(xué)欲檢測(cè)

家中自來(lái)水中大腸桿菌含量是否達(dá)標(biāo)，對(duì)飲用水中的大腸桿菌進(jìn)行了培養(yǎng)、計(jì)數(shù)和鑒定?；?/p>

答下列問(wèn)題：

Q）實(shí)驗(yàn)前應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌處理,將漏斗、培養(yǎng)皿、三角瓶和銀子等進(jìn)行滅菌,對(duì)培養(yǎng)

基進(jìn)行滅菌，對(duì)自來(lái)水龍頭進(jìn)行滅菌。

⑵為測(cè)定大腸桿菌的數(shù)目,將已知的水過(guò)濾后，將濾膜放在培養(yǎng)基上培養(yǎng)，注意

濾膜與培養(yǎng)基完全貼緊,不能有.

（3）為了鑒定大腸桿菌，在培養(yǎng)基中應(yīng)加入.在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)

色。

【解析】Q）實(shí)驗(yàn)室常用的消毒方法:煮沸消毒、化學(xué)藥物消毒、紫外線消毒。實(shí)驗(yàn)室常

用的滅菌方法:灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。微生物培養(yǎng)過(guò)程中要注意防止雜菌污

染，培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，漏斗、培養(yǎng)皿、三角并酥口鏡子等進(jìn)行干熱或高壓蒸

汽滅菌，而對(duì)自來(lái)水龍頭進(jìn)行灼燒滅菌。（2）測(cè)定水體中大腸桿菌的數(shù)目時(shí)，過(guò)濾后的濾膜應(yīng)與

培養(yǎng)基完全貼緊，不能有氣泡，如果有氣泡，則可能會(huì)被空氣中的微生物污染。（3）鑒定大腸桿菌

常用伊紅一美藍(lán)培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基上大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)紫黑色。

【答案】（1）干熱（或高壓蒸汽）高壓蒸汽灼燒（2）體積氣泡（3）伊紅一美藍(lán)紫

黑

某罐裝泡菜制造廠希望通過(guò)改良現(xiàn)有的乳酸菌菌種提高泡菜中的乳酸含量。請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)

題：

Q）微生物培養(yǎng)過(guò)程中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是.

（2）要改良現(xiàn)有的乳酸菌菌種的育種方式的原理是.菌種經(jīng)過(guò)處理后，再接

種于經(jīng)過(guò)處理的（填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基中。

（3）已知“改良MC瓊脂培養(yǎng)基”中含有碳酸鈣，碳酸鈣遇酸溶解而使培養(yǎng)基變得透明；“孟

加拉紅瓊脂培養(yǎng)基"含氯霉素，可抑制絕大多數(shù)細(xì)菌的生長(zhǎng)。對(duì)乳酸菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)選擇上

述培養(yǎng)基，用法接種，挑選出具有透明圈的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。如

果每個(gè)平板均接種了0.1mL樣品并培養(yǎng),接種的4個(gè)平板菌落數(shù)分別是210、230、470、

190,則樣品中菌種A的數(shù)量為個(gè)/mL。平板劃線法一般不用于活菌計(jì)數(shù)的原因

是O

【解析】本題考查微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用。微生物培養(yǎng)中的易混點(diǎn)有:1.無(wú)菌技術(shù)中對(duì)相

關(guān)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等用不同的滅菌方法2平板劃線法一般用于菌種的純化，可以

觀察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)行分離，稀釋涂布平板法一般用于篩選菌株，可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌

落特征;3為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。⑴微生物培養(yǎng)中獲

得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染。（2）乳酸菌是原核生物，可通過(guò)誘導(dǎo)基因突變的方法改

良現(xiàn)有的乳酸菌菌種。由于乳酸菌在固體培養(yǎng)基上菌落較小，生長(zhǎng)緩慢,所以用液體培養(yǎng)基擴(kuò)

大培養(yǎng)接種前培養(yǎng)基應(yīng)用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。（3）乳酸菌通過(guò)發(fā)酵能產(chǎn)生有機(jī)酸，所以

對(duì)乳酸菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)選擇改良MC瓊脂培養(yǎng)基，用稀釋涂布平板法接種。平板菌落數(shù)為470

的與其他平板相差較大，應(yīng)選擇平板菌落數(shù)分別是210、230、190的三個(gè)平板計(jì)算平均值。

樣品中菌種A的數(shù)量為210x10=2100個(gè)/mL;用平板劃線法接種得到的菌落多數(shù)不是單一

菌落,菌落數(shù)遠(yuǎn)小于活菌數(shù)，所以平板劃線法一般不用于活菌計(jì)數(shù)。

【答案】Q）防止外來(lái)雜菌污染（2）基因突變高壓蒸汽滅菌液體（3）改良MC瓊脂

稀釋涂布平板2100得到的菌落多數(shù)不是單一菌落,菌落數(shù)遠(yuǎn)小于活菌數(shù)

自然界中，除了植物和動(dòng)物以外的生物統(tǒng)稱為微生物。微生物無(wú)處不在，大多數(shù)對(duì)我們?nèi)祟?/p>

是有利的，少數(shù)有害。我們只有清楚地認(rèn)識(shí)它們,才能合理利用它們。

（1）傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中，人們利用酵母菌制作果酒，利用醋酸菌制作醋，利用毛霉制作腐乳，以及利

用乳酸菌制作泡菜。

①可以依據(jù)是否將酵母菌、毛霉與醋酸菌、乳酸菌區(qū)分開(kāi)。

②沒(méi)有經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的滅菌過(guò)程，卻能夠獲得傳統(tǒng)發(fā)酵產(chǎn)品，請(qǐng)說(shuō)出兩點(diǎn)理曲

a.

b.。

（2）土壤有“微生物的天然培養(yǎng)基”之稱。

①現(xiàn)從紅色淤泥中篩選出一種生產(chǎn)胡蘿卜素的紅酵母菌株，純化并計(jì)數(shù)的接種方法

為。要大量繁殖該菌株應(yīng)選用（填“液體”或“固

體”）培養(yǎng)基。

②若想在此菌株基礎(chǔ)上獲得多種其他未發(fā)現(xiàn)的新性狀菌株以供實(shí)驗(yàn)需求，應(yīng)該經(jīng)過(guò)

處理，該育種方式的不足是具有一定的盲目性，需要大量處理供試材料。

【解析】Q）①酵母菌和毛霉是真菌,屬于真核生物，醋酸菌和乳酸菌是細(xì)菌，屬于原核生物,

因此，可以依據(jù)是否有以核膜為界限（包圍的）的細(xì)胞核將酵母菌、毛霉與醋酸菌、乳酸菌區(qū)分

開(kāi)。②在發(fā)酵過(guò)程中,一方面，人為創(chuàng)造的環(huán)境有利于所培養(yǎng)的微生物生長(zhǎng)，不利于其他微生物

生長(zhǎng)，例如腐乳制作過(guò)程中加入的鹵湯中的香辛料具有防腐殺菌的作用，釀制果酒、制醋、制

作腐乳以及制作泡菜過(guò)程中均要嚴(yán)格控制相應(yīng)的溫度、通氣情況等;另一方面,培養(yǎng)的微生物

發(fā)酵產(chǎn)物會(huì)抑制其他微生物生長(zhǎng)，例如制作泡菜過(guò)程中乳酸菌發(fā)酵生成的乳酸,酵母菌發(fā)酵過(guò)

程中形成的缺氧、呈酸性的環(huán)境等都不利于其他微生物的生長(zhǎng)。（2）①菌種計(jì)數(shù)最常用的接

種方法是稀釋涂布平板計(jì)數(shù)法;要大量繁殖該菌株應(yīng)選用液體培養(yǎng)基。②若想在此菌株基礎(chǔ)

上獲得多種其他未發(fā)現(xiàn)的新性狀菌株以供實(shí)驗(yàn)需求,應(yīng)該經(jīng)過(guò)誘變處理。

【答案】（1）①有以核膜為界限（包圍的）的細(xì)胞核②人為創(chuàng)造的環(huán)境有利于所培養(yǎng)的微

生物生長(zhǎng)，不利于其他微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)的微生物所產(chǎn)生的發(fā)酵產(chǎn)物會(huì)抑制其他微生物生長(zhǎng)

（2）①稀釋涂布平板法液體②誘變

在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑（含氮有機(jī)化合物）在土壤中不易降解，長(zhǎng)期使用

可污染土壤。為修復(fù)被該除草劑污染的土壤,可按下面程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌（已知

該除草劑在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明）。

長(zhǎng)期使用

該除草劑

無(wú)透明

的土

薛取x圈菌落

種)有透明

上清液

7圈菌落

A.制備土壤B.培養(yǎng)基表面C.第2次及其后D.培養(yǎng)基培養(yǎng)

浸出液連續(xù)劃線劃線總從上次劃

線末端開(kāi)始

Q)制備土壤浸出液時(shí),為避免菌體濃度過(guò)高，需將浸出液進(jìn)行處理。

(2)要在長(zhǎng)期使用該除草劑的土壤中分離目的菌,從物理性質(zhì)、用途方面來(lái)看，上述培養(yǎng)皿中培

養(yǎng)基的特點(diǎn)是

⑶在劃線培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)基中只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)的主要原

因是一

(4)在固體培養(yǎng)基上形成的菌落中，無(wú)透明圈菌落利用的氮源主要是，有透明圈菌

落利用的氮源主要是，據(jù)此可篩選出目的菌。

(5)科研人員用放射線處理該細(xì)菌獲得兩個(gè)突變株A和B,然后對(duì)突變株A和B進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)

果如下表所示：

接種的菌種一般培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)處理及結(jié)果

A不生長(zhǎng)添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲,能生長(zhǎng)

B不生長(zhǎng)添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙,能生長(zhǎng)

A+B能生長(zhǎng)不添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲、乙就能生長(zhǎng)

突變株A不能在一般培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的原因是.突變株A和B混合

在一起接種于一般培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)的最可能原因是

【解析】Q)制備土壤浸出液時(shí)，為避免菌體濃度過(guò)高,需將浸出液進(jìn)行稀釋處理。(2)從物

理性質(zhì)方面來(lái)看，題圖培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基;從用途方面來(lái)看，該培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基

屬于選擇培養(yǎng)基。該除草劑為含氮有機(jī)化合物，降解該除草劑的細(xì)菌可以除草劑為氮源，故該

培養(yǎng)基中除加入除草劑外，不再含有其他氮源，以選擇出能降解該除草劑的細(xì)菌。（3）在以該除

草劑為唯一氮源的培養(yǎng)基上，不能降解該除草劑的細(xì)菌（除具有固氮能力的細(xì)菌外）是不能生

長(zhǎng)的。（4）含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明，形成透明圈是由該除草劑被某些細(xì)菌降解引起

的。（5）突變株A的生長(zhǎng)依賴于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲,突變株B的生長(zhǎng)依賴于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙。不添加營(yíng)養(yǎng)

物質(zhì)甲和乙，二者混合培養(yǎng)時(shí)都能生長(zhǎng)，最可能的原因是突變株A為突變株B提供了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

乙,突變株B為突變株A提供了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲。

【答案】Q）稀釋（2）為無(wú)氮固體培養(yǎng)基，且需添加該除草劑作氮源（3）培養(yǎng)基中缺少這

些細(xì)菌可利用的氮源（4）氮?dú)庠摮輨?）突變株A缺乏合成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲所需要的酶

突變株A生長(zhǎng)需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲，突變株B可以提供;突變株B生長(zhǎng)需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙，突變株A

可以提供

我國(guó)糧食產(chǎn)區(qū)產(chǎn)生大量的作物秸稈，科技工作者為使其變廢為寶，研究出利用秸稈生產(chǎn)燃料

酒精的技術(shù),為汽車用乙醇汽油提供來(lái)源，其大致流程如下（以玉米秸稈為例）：

|玉米利稈|預(yù)處理、水解木啊發(fā)醉

Q）玉米秸稈預(yù)處理后,應(yīng)該選用特定的酶進(jìn)行水解，使之轉(zhuǎn)化為發(fā)酵所需的葡萄糖。從以下哪

些微生物中可以提取到上述酶？.

A.釀制果醋的醋酸菌

B.生長(zhǎng)在腐木上的霉菌

C.制作酸奶的乳酸菌

D.生產(chǎn)味精的谷氨酸棒狀桿菌

（2）若要從土壤中分離產(chǎn)生這種酶的微生物，所需要的培養(yǎng)基為（按功能分）,

培養(yǎng)基中的碳源為。對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法

是0

⑶某同學(xué)對(duì)這種微生物培養(yǎng)液進(jìn)行數(shù)量測(cè)定,在稀釋倍數(shù)為1。5對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上

菌落數(shù)的平均值為23.4,那么每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)是（涂布平板

時(shí)所用稀釋液的體積為0.2mL）.

⑷用上述方法測(cè)定密度，實(shí)際活菌數(shù)量要比測(cè)得的菌落數(shù)量多，原因

是O

⑸上述流程圖中，發(fā)酵階段需要的菌種是，生產(chǎn)酒精要控制的必要條件

是O

【解析】本題主要考查纖維素分解菌的篩選，要求學(xué)生掌握實(shí)驗(yàn)原理和方法，掌握微生物

培養(yǎng)過(guò)程中的滅菌方法，掌握釀酒的原理和方法，用植物秸稈生產(chǎn)酒精是利用微生物進(jìn)行發(fā)酵

的過(guò)程。植物秸稈中的有機(jī)物主要是纖維素，纖維素分解菌產(chǎn)生的纖維素酶能將其水解成葡

萄糖。從土壤中分離纖維素分解菌的一般步驟是:土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培

養(yǎng)和篩選菌株。篩選纖維素分解菌必須使用以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，并且需要對(duì)

纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定。Q）根據(jù)生物對(duì)環(huán)境適應(yīng)性的原理，要

獲得能產(chǎn)生大量纖維素酶的菌種，應(yīng)該從主要以纖維素為碳源的微生物中篩選,如生長(zhǎng)在腐木

（主要成分為纖維素）上的、在反芻動(dòng)物瘤胃中生存的很多微生物等均可能產(chǎn)生大量的纖維素

酶，故選B。（2）篩選目的微生物需要使用選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中的碳源為纖維素，培養(yǎng)基需要進(jìn)

行高壓蒸汽滅菌。（3）每克（mL）樣品中的菌株數(shù)=（，k）x例其中C代表某一稀釋度下平板上

生長(zhǎng)的平均菌落數(shù),1/代表稀釋平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL）,例代表稀釋倍數(shù)。0=23.4

個(gè),/=0.2mL,例=105,把上述數(shù)據(jù)代入公式可得稀釋前1mL菌液中所含細(xì)菌數(shù)

=（（r/k）x例=（23.4/0.2）x105=1.17x107個(gè)。（4）用稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)兩

個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的是一個(gè)菌落，所以實(shí)際活菌數(shù)量要比測(cè)得的菌落數(shù)

量多。（5）上述流程圖中，發(fā)酵階段需要的菌種是酵母菌，酵母菌無(wú)氧呼吸可以產(chǎn)生酒精,因此生

產(chǎn)酒精要控制的必要條件是無(wú)氧（密封、密閉）。

【答案】⑴B（2）選擇培養(yǎng)基纖維素高壓蒸汽滅菌法（3）1.17x107（4）當(dāng)兩個(gè)或

多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落（5）酵母菌無(wú)氧（密封、密閉）

自養(yǎng)需氧型的硝化細(xì)菌能夠降低水體中的鍍鹽,對(duì)水體有一定的凈化作用。請(qǐng)回答：

⑴培養(yǎng)硝化細(xì)菌時(shí)，將含有固體培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿倒置的目的

是。培養(yǎng)基中加入被鹽為硝化細(xì)菌的生長(zhǎng)提

供，培養(yǎng)基中沒(méi)有加入有機(jī)碳，從功能上看這種培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)

基。

（2）硝化細(xì)菌純化并計(jì)數(shù)時(shí)，對(duì)照組應(yīng)該涂布等量的。若實(shí)驗(yàn)組每個(gè)平板中的菌落數(shù)

都超過(guò)了300,應(yīng)對(duì)樣本菌液進(jìn)行處理。

（3）實(shí)驗(yàn):探究弱酸、弱堿條件下硝化細(xì)菌對(duì)鍍鹽轉(zhuǎn)化能力的大小。取含核鹽的液體培養(yǎng)基均

分成等份，其pH可依次調(diào)節(jié)為，培養(yǎng)相同的時(shí)間后，可通過(guò)測(cè)定

培養(yǎng)基中的來(lái)判斷硝化細(xì)菌分解能力的大小。

【答案】Q）防止冷凝形成水滴污染培養(yǎng)基氮源（能量和氮源）選擇（2）無(wú)菌水適

當(dāng)?shù)南♂專?）35、7、9（或6、7、8）（答案合理即可）鎮(zhèn)鹽的剩余量

阿拉伯膠是一種多糖，能被土壤中某些能合成阿拉伯膠降解酶的微生物分解，回答下列問(wèn)

題。

（1）為從土壤中分離獲得能分解阿拉伯膠的單菌落,某同學(xué)設(shè)計(jì)了A、B、C、D四種培養(yǎng)基（成

分見(jiàn)下表）：

培養(yǎng)基ABCD

阿拉伯膠25g/L25g/L25g/L25g/L

——

Na