福建省寧德市2025屆高二生物第一學(xué)期期末調(diào)研模擬試題含解析

福建省寧德市2025屆高二生物第一學(xué)期期末調(diào)研模擬試題請(qǐng)考生注意：1．請(qǐng)用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應(yīng)位置上，請(qǐng)用0．5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應(yīng)的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2．答題前，認(rèn)真閱讀答題紙上的《注意事項(xiàng)》，按規(guī)定答題。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．正常情況下，下列生理過程能夠發(fā)生的是（）A.相同的DNA復(fù)制成不同的DNAB.相同的DNA轉(zhuǎn)錄出不同的RNAC.相同的密碼子翻譯成不同的氨基酸D.相同的tRNA攜帶不同的氨基酸2．下列關(guān)于遺傳學(xué)發(fā)展史上4個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（）A.孟德爾的單因子雜交實(shí)驗(yàn)證明了遺傳因子位于染色體上B.摩爾根的果蠅伴性遺傳實(shí)驗(yàn)證明了基因自由組合定律C.T2噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)證明了DNA是大腸桿菌的遺傳物質(zhì)D.肺炎雙球菌離體轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明了DNA是肺炎雙球菌的遺傳物質(zhì)3．在水庫(kù)的上游，將廢棄農(nóng)田和鹽堿地改造成大面積蘆葦濕地，通過生物降解、吸收，可以有效解決城市生活污水和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)對(duì)水源造成的污染問題，使水庫(kù)水質(zhì)得到明顯改善，相關(guān)敘述正確的是（）A.蘆葦濕地構(gòu)成了一個(gè)在物質(zhì)和能量上自給自足的生態(tài)系統(tǒng)B.濕地中生物種類多樣，利用正反饋調(diào)節(jié)維持其結(jié)構(gòu)和功能的相對(duì)穩(wěn)定C.該生態(tài)系統(tǒng)中某營(yíng)養(yǎng)級(jí)生物種類增加，該生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力一定增大D.當(dāng)外界干抗因素的強(qiáng)度超過一定限度時(shí)，該生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力會(huì)喪失4．大豐荷蘭花海是鹽城市的4A級(jí)景區(qū)，景區(qū)內(nèi)有郁金香、百合、薰衣草、薔薇等多種觀賞植物。同種的花卉種植在一起形成花帶，不同種的花帶連在一起，形成了漂亮的花帶景觀。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.花帶景觀給人美的享受體現(xiàn)了其直接價(jià)值B.不同品種的花卉形成群落C.花帶中花卉高低錯(cuò)落體現(xiàn)了群落的垂直結(jié)構(gòu)D.花帶景觀是生物與環(huán)境協(xié)同進(jìn)化的結(jié)果5．食用被諾如病毒（NV）污染的食物會(huì)導(dǎo)致嘔吐與腹瀉，人體胃酸能殺死部分NV屬于（）A.特異性免疫 B.天然免疫C.非特異性免疫 D.人工免疫6．下列與激素作用無關(guān)的實(shí)例是（）A.果實(shí)的自然發(fā)育成熟B.正常人的體溫調(diào)節(jié)C.植物的向光性D.人舌尖觸到蔗糖時(shí)感覺到甜味二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）在模擬生物體維持pH的穩(wěn)定實(shí)驗(yàn)中，表述不合理的是（）pH滴數(shù)材料加入不同數(shù)量液滴后的pH加入不同數(shù)量液滴后的pH051015202530051015202530自來水緩沖液肝勻漿A.緩沖液能使溶液pH的變化減弱B.肝勻漿的作用效果要明顯好于緩沖液組C.“等量”是對(duì)照實(shí)驗(yàn)中對(duì)無關(guān)變量的要求，在這種條件下，實(shí)驗(yàn)結(jié)果才可靠D.如果以酸或者堿的滴數(shù)為橫坐標(biāo)，以pH為縱坐標(biāo)，有可能畫出三條相應(yīng)的變化曲線8．（10分）紫莖澤蘭是我國(guó)危害嚴(yán)重的外來入侵植物，它對(duì)環(huán)境適應(yīng)能力極強(qiáng)，能迅速擠占一年生植物區(qū)域，易成為群落中的優(yōu)勢(shì)種（甚至是單一優(yōu)勢(shì)），常侵占草地造成牧草嚴(yán)重減產(chǎn)。某研究小組調(diào)查了其在不同入侵生境中的生長(zhǎng)情況，結(jié)果如下表，回答下列問題：入侵生境幼苗密度（株/m2）成熟植株密度（株/m2）成熟植株高度（cm）草地468123120人工林54895115自然林6886484（1）研究人員調(diào)查紫莖澤蘭的種群密度常用方法為__________法，該方法的關(guān)鍵是__________。（2）綜合來看，對(duì)紫莖澤蘭入侵具有較強(qiáng)的抵抗力的生境是__________，請(qǐng)分析可能的原因是__________。（3）研究人員發(fā)現(xiàn)，單位面積灌木群落合成的有機(jī)物比草本群落多，請(qǐng)從空間結(jié)構(gòu)和生態(tài)位角度分析原因是________________9．（10分）2020年兩位女科學(xué)家埃瑪紐埃爾·卡彭蒂娜和詹妮弗·杜德娜因發(fā)現(xiàn)“CRISPR/Cas9基因剪刀”而獲得2020年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。CRISPR/Cas9系統(tǒng)可對(duì)基因組進(jìn)行定點(diǎn)編輯，其工作原理如圖1所示。該系統(tǒng)主要包含單鏈向?qū)NA和Cas9蛋白兩個(gè)部分，能特異性識(shí)別并結(jié)合特定的DNA序列，從而引導(dǎo)Cas9蛋白到相應(yīng)位置并剪切DNA，最終實(shí)現(xiàn)對(duì)靶基因序列的編輯。請(qǐng)回答下列問題：（1）圖1為CRISPR/Cas9系統(tǒng)作用示意圖，該系統(tǒng)能精準(zhǔn)識(shí)別相關(guān)基因的原理是sgRNA與目標(biāo)DNA發(fā)生______，Cas9蛋白可催化_____(化學(xué)鍵名稱)水解，剪切特定DNA片段。（2）LMNA基因編碼的核纖層蛋白與維持細(xì)胞核正常形態(tài)有關(guān)?？蒲腥藛T利用CRISPR/Cas9技術(shù)對(duì)體外培養(yǎng)的HepG2(人源肺癌細(xì)胞)細(xì)胞株進(jìn)行基因編輯，獲得了LMNA基因敲除的穩(wěn)定細(xì)胞系。①HepG2細(xì)胞中沒有編碼Cas9的基因，需將Cas9基因及sgRNA基因拼接形成拼接基因并與質(zhì)粒結(jié)合導(dǎo)入HepG2細(xì)胞，sgRNA的合成需要______催化。②用下圖2中的質(zhì)粒以及含Cas9-sgRNA拼接基因的DNA片段構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)選用_______進(jìn)行酶切。將構(gòu)建好的表達(dá)載體與用______處理的細(xì)菌置于適宜反應(yīng)體系中培養(yǎng)。然后將培養(yǎng)的細(xì)菌涂布于含______的平板培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)，24h后挑取菌落，提取質(zhì)粒作為模板，選擇圖3中引物組合________和______，通過PCR和電泳技術(shù)鑒定是否重組成功。③用鑒定成功的工程菌對(duì)HepG2細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，培養(yǎng)三天后收集HepG2細(xì)胞，提取基因組，對(duì)其______序列進(jìn)行檢測(cè)，判斷Cas9-sgRNA拼接基因是否導(dǎo)入成功。若從細(xì)胞水平進(jìn)行檢測(cè)，可以檢測(cè)HepG2細(xì)胞數(shù)目增長(zhǎng)量或______。（3）華人科學(xué)家張鋒是首個(gè)將CRISPR基因編輯技術(shù)應(yīng)用于哺乳動(dòng)物和人類細(xì)胞的科學(xué)家，為此項(xiàng)技術(shù)廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域做出了不可磨滅的貢獻(xiàn)。但是更多的學(xué)者提出了CRISRP/Cas9基因編輯技術(shù)有時(shí)存在編輯對(duì)象出錯(cuò)而造成“脫靶”，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)sgRNA的序列長(zhǎng)短影響成功率，越短脫靶率越______，脫靶最可能的原因是______。10．（10分）生長(zhǎng)素是最早發(fā)現(xiàn)的一類促進(jìn)植物生長(zhǎng)的激素。以下為研究人員利用水稻進(jìn)行有關(guān)生長(zhǎng)素的實(shí)驗(yàn)。圖1表示水稻幼苗生長(zhǎng)素濃度與其作用的關(guān)系，圖2表示將水稻的胚芽鞘切除尖端后，在切面一側(cè)放置含不同濃度生長(zhǎng)素的瓊脂塊，并測(cè)定各胚芽鞘彎曲生長(zhǎng)的角度α，下列說法正確的是（）A.AC段促進(jìn)效果增加，CE段促進(jìn)效果減弱，圖中說明低濃度生長(zhǎng)素促進(jìn)生長(zhǎng)，高濃度生長(zhǎng)素抑制生長(zhǎng)B.若測(cè)得表現(xiàn)出向光性的胚芽鞘背光側(cè)生長(zhǎng)素濃度為2f，則向光測(cè)濃度<fC.圖2中，α?xí)S著圖1所示生長(zhǎng)素濃度增加而增大D.圖2中，若在左側(cè)放置單側(cè)光，胚芽鞘會(huì)彎向光源生長(zhǎng)11．（15分）埃博拉病毒是一種單鏈RNA病毒，具有極強(qiáng)的感染性。圖一表示埃博拉病毒侵入人體后，免疫細(xì)胞作出應(yīng)答的過程，其中序號(hào)Ⅰ--Ⅶ表示細(xì)胞，字母a--h表示相關(guān)物質(zhì)。圖二是機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)的相關(guān)細(xì)胞、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)。（1）圖一中能特異性識(shí)別抗原的細(xì)胞有___________________（填序號(hào)）。再次接觸同種抗原時(shí)，能迅速增殖分化的細(xì)胞有________________（填序號(hào)）。（2）研究表明，埃博拉病毒侵入機(jī)體后，通過靶向感染入侵破壞某種免疫細(xì)胞，使其不能暴露該病毒的特性，以致感染信息不能及時(shí)的呈遞給______________________，從而得以免疫逃逸在寄主細(xì)胞內(nèi)快速增殖。（3）某人感染了埃博拉病毒后，還有可能再次感染埃博拉病毒而患病，其原因可能是______________。(圍繞一個(gè)原因回答)（4）情緒是人大腦的高級(jí)功能之一，精神緊張、過度悲傷等條件下機(jī)體的抵抗力會(huì)降低；愉快的情緒能使免疫功能增強(qiáng)。由圖二可知，對(duì)免疫細(xì)胞或免疫器官的調(diào)節(jié)，既可通過突觸前膜釋放的______________進(jìn)行調(diào)節(jié)，也可通過內(nèi)分泌腺細(xì)胞分泌有關(guān)______進(jìn)行調(diào)節(jié)。免疫細(xì)胞能接受這二者的調(diào)控，是因?yàn)開______________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、B【解析】密碼子是信使RNA上決定氨基酸的3個(gè)相鄰的堿基，共有64種，終止密碼子有3種，不決定氨基酸，決定氨基酸的密碼子有61種。一種氨基酸可由一種或幾種tRNA搬運(yùn)，但一種tRNA只能搬運(yùn)一種氨基酸?！驹斀狻緼、根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則和半保留復(fù)制的特點(diǎn)，一般相同的DNA復(fù)制成相同的DNA，A錯(cuò)誤；

B、相同的DNA在不同的細(xì)胞中，由于基因的選擇性表達(dá)，轉(zhuǎn)錄合成不同的RNA，B正確；C、相同的密碼子決定一種的氨基酸，同一種氨基酸可以由多種密碼子決定，C錯(cuò)誤；D、tRNA具有專一性，相同的tRNA攜帶相同的氨基酸，D錯(cuò)誤。故選B。2、D【解析】1、肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)包括活體細(xì)菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和離體細(xì)菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，其中活體細(xì)菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明S型細(xì)菌中存在某種“轉(zhuǎn)化因子”，能將R型細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型細(xì)菌；離體細(xì)菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明DNA是遺傳物質(zhì)。2、T2噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)步驟：標(biāo)記噬菌體→標(biāo)記的噬菌體與大腸桿菌混合培養(yǎng)→在攪拌器中攪拌，然后離心，檢測(cè)上清液和沉淀物中的放射性物質(zhì)。該實(shí)驗(yàn)證明DNA是遺傳物質(zhì)。3、薩頓提出基因在染色體上的假說，摩爾根通過果蠅伴性遺傳實(shí)驗(yàn)證明了基因位于染色體上?！驹斀狻緼、孟德爾的單因子雜交實(shí)驗(yàn)沒有證明遺傳因子位于染色體上，當(dāng)時(shí)人們還沒有認(rèn)識(shí)染色體，A錯(cuò)誤；B、摩爾根的果蠅伴性遺傳實(shí)驗(yàn)只研究了一對(duì)等位基因，不能證明基因自由組合定律，B錯(cuò)誤；C、T2噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)證明了DNA是噬菌體的遺傳物質(zhì)，C錯(cuò)誤；D、肺炎雙球菌離體轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明了DNA是轉(zhuǎn)化因子，即DNA是肺炎雙球菌的遺傳物質(zhì)，D正確。故選D?！军c(diǎn)睛】本題考查人體對(duì)遺傳物質(zhì)的探究歷程，要求考生了解人類對(duì)遺傳物質(zhì)的探究歷程，識(shí)記不同科學(xué)家采用的實(shí)驗(yàn)方法及得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)論，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。3、D【解析】生態(tài)系統(tǒng)所具有的保持或恢復(fù)自身結(jié)構(gòu)和功能相對(duì)穩(wěn)定的能力，稱為生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性。生態(tài)系統(tǒng)之所以能維持相對(duì)穩(wěn)定，是由于生態(tài)系統(tǒng)具有自我調(diào)節(jié)能力。該能力的基礎(chǔ)是負(fù)反饋調(diào)節(jié)。物種數(shù)目越多，營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)越復(fù)雜，自我調(diào)節(jié)能力越大，抵抗力穩(wěn)定性越高。生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性具有相對(duì)性，當(dāng)受到大規(guī)模干擾或外界壓力超過該生態(tài)系統(tǒng)自身更新和自我調(diào)節(jié)能力時(shí)，便可導(dǎo)致生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的破壞、甚至引發(fā)系統(tǒng)崩潰?！驹斀狻緼、蘆葦濕地生態(tài)系統(tǒng)在物質(zhì)上能自給自足，但是在能量上其需要不斷吸收太陽(yáng)能，即在能量上不是自給自足，A錯(cuò)誤；B、生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定性往往依靠負(fù)反饋調(diào)節(jié)來維持，B錯(cuò)誤；C、某營(yíng)養(yǎng)級(jí)生物種類增加時(shí)，不一定能增大生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力，如過度放牧?xí)茐纳鷳B(tài)平衡，C錯(cuò)誤；D、生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力不是無限的，當(dāng)外界干擾因素的強(qiáng)度超過一定限度時(shí)，生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力會(huì)迅速喪失，D正確。故選D。4、A【解析】1、生態(tài)系統(tǒng)中的組成成分越多，營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)就越復(fù)雜，生態(tài)系統(tǒng)的自動(dòng)調(diào)節(jié)能力就越強(qiáng)，其抵抗力穩(wěn)定性就越強(qiáng)，相反的其恢復(fù)力穩(wěn)定性就越弱。2、群落的垂直結(jié)構(gòu)指群落在垂直方面的配置狀態(tài)，其最顯著的特征是分層現(xiàn)象，即在垂直方向分成許多層次的現(xiàn)象；群落的水平結(jié)構(gòu)指群落的水平配置狀況或水平格局，其主要表現(xiàn)特征是鑲嵌性。3、生物多樣性的價(jià)值：包括直接價(jià)值、間接價(jià)值、潛在價(jià)值。直接價(jià)值：是指能為人類提供形式多樣的食物、纖維、燃料和建材等。間接價(jià)值：是指對(duì)生態(tài)平衡、生物圈穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)功能。潛在價(jià)值：指目前人類尚不清楚的價(jià)值?！驹斀狻緼、直接價(jià)值指對(duì)人類的社會(huì)生活有直接影響和作用的價(jià)值，花帶景觀給人美的享受體現(xiàn)了其直接價(jià)值，A正確；B、一個(gè)群落應(yīng)包括該區(qū)域內(nèi)動(dòng)物、植物以及微生物在內(nèi)的所有生物，B錯(cuò)誤；C、花帶是由同種花種植在一起形成的，不能體現(xiàn)群落特點(diǎn)，C錯(cuò)誤；D、協(xié)同進(jìn)化是指不同物種間、生物與無機(jī)環(huán)境之間在相互影響中不斷進(jìn)化和發(fā)展，花帶是由同種花種植在一起形成的，D錯(cuò)誤。故選A。5、C【解析】人體抵御病原體攻擊的第一道防線是皮膚、黏膜及其分泌物，第二道防線是體液中的吞噬細(xì)胞和殺菌物質(zhì)；前兩道防線屬于非特異性免疫。第三道防線是特異性免疫，包括體液免疫和細(xì)胞免疫。【詳解】人體胃內(nèi)的胃酸屬于黏膜的分泌物，它能殺死部分進(jìn)入人體的病原體，該作用不針對(duì)特定的病原體，屬于非特異性免疫。人工免疫是指通過接種疫苗使人體獲得免疫力，C正確，ABD錯(cuò)誤。故選C。6、D【解析】乙烯能促進(jìn)果實(shí)成熟；炎熱環(huán)境→溫覺感受器（皮膚中）→下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞→皮膚血管舒張、汗液分泌增多（增加散熱）→體溫維持相對(duì)恒定；蔗糖刺激味覺感受器→通過傳入神經(jīng)→人體的大腦皮層的感覺中樞，感覺到甜味?！驹斀狻緼、果實(shí)的自然發(fā)育成熟是乙烯作用的結(jié)果，與激素有關(guān)，A錯(cuò)誤；B、正常人體溫調(diào)節(jié)方式是神經(jīng)和體液調(diào)節(jié)，和甲狀腺激素等有關(guān)，與激素有關(guān)，B錯(cuò)誤；C、植物生物向光性和生長(zhǎng)素分布不均勻有關(guān)，與激素有關(guān)，C錯(cuò)誤；D、人舌尖觸到蔗糖時(shí)感覺到甜味，這是神經(jīng)調(diào)節(jié)的結(jié)果，與激素?zé)o關(guān)，D正確。故選D。二、綜合題：本大題共4小題7、B【解析】血漿中有緩沖物質(zhì)，可以維持內(nèi)環(huán)境中pH的穩(wěn)定。自來水沒有緩沖作用?！驹斀狻緼、緩沖液可以中和酸和堿性物質(zhì)，能使溶液的pH的變化減弱，A正確；B、肝勻漿中有緩沖物質(zhì)，作用效果與緩沖液組差不多，B錯(cuò)誤；C、本實(shí)驗(yàn)的自變量是加入的溶液和不同的生物材料，無關(guān)變量要保持一致，故等量能保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，C正確；D、如果以酸或者堿的滴數(shù)為橫坐標(biāo)，以pH為縱坐標(biāo)，有可能畫出三條相應(yīng)的變化曲線（對(duì)應(yīng)不同的材料），D正確。故選B。8、（1）①.樣方法②.隨機(jī)取樣（2）①.自然林②.自然林中物種數(shù)量多，群落結(jié)構(gòu)復(fù)雜，抗干擾能力更強(qiáng)（3）灌木群落垂直結(jié)構(gòu)比草本群落復(fù)雜，不同植物占據(jù)不同生態(tài)位，使植物對(duì)光能資源的利用率更高，光合作用更強(qiáng)【解析】調(diào)查種群密度常采用的方法有樣方法和標(biāo)記重捕法。對(duì)于活動(dòng)能力強(qiáng)、活動(dòng)范圍大的個(gè)體調(diào)查種群密度時(shí)適宜用標(biāo)志重捕法，而一般植物和個(gè)體小、活動(dòng)能力小的動(dòng)物以及蟲卵等種群密度的調(diào)查方式常用的是樣方法?！拘?詳解】調(diào)查種群密度常采用的方法有樣方法和標(biāo)記重捕法。對(duì)于活動(dòng)能力強(qiáng)、活動(dòng)范圍大的個(gè)體調(diào)查種群密度時(shí)適宜用標(biāo)記重捕法，而一般植物和個(gè)體小、活動(dòng)能力小的動(dòng)物以及蟲卵等種群密度的調(diào)查方式常用的是樣方法。因此紫莖澤蘭的種群密度可采用樣方法調(diào)查。樣方法的關(guān)鍵是隨機(jī)取樣?！拘?詳解】綜合來看，對(duì)紫莖澤蘭入侵具有較強(qiáng)的抵抗力的生境是自然林，因?yàn)樽匀涣种形锓N數(shù)量多，群落結(jié)構(gòu)復(fù)雜，抗干擾能力更強(qiáng)。【小問3詳解】隨著演替的進(jìn)行，單位面積灌木群落合成的有機(jī)物比草本群落多，原因是灌木群落垂直結(jié)構(gòu)比草本復(fù)雜，不同植物占據(jù)不同生態(tài)位，使植物對(duì)光的利用率高，光合作用強(qiáng)?！军c(diǎn)睛】本題考查種群的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生分析題表的能力，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問題的能力。9、①.堿基互補(bǔ)配對(duì)②.磷酸二酯鍵③.RNA聚合酶④.EcoRI⑤.Ca2+（CaCl2）⑥.嘌呤霉素⑦.Ⅱ⑧.Ⅲ（兩空位置可調(diào)換）⑨.堿基(或核苷酸)⑩.細(xì)胞核形態(tài)?.高?.sgRNA（向?qū)NA）越短越容易與DNA其他部位錯(cuò)誤結(jié)合而脫靶【解析】1.基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的獲取，②基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③將目的基因?qū)耸荏w細(xì)胞，④目的基因的檢測(cè)與鑒定。

基因工程的三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體。

標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來?！驹斀狻浚?）圖1為CRISPR/Cas9系統(tǒng)作用示意圖，該系統(tǒng)能精準(zhǔn)識(shí)別相關(guān)基因的原理根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則實(shí)現(xiàn)的，即為sgRNA與目標(biāo)DNA發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)，同時(shí)Cas9蛋白可催化磷酸二酯鍵的水解，從而在特定的部位剪切特定DNA片段。（2）科研人員利用CRISPR/Cas9技術(shù)對(duì)體外培養(yǎng)的HepG2(人源肺癌細(xì)胞)細(xì)胞株進(jìn)行基因編輯，獲得了LMNA基因敲除的穩(wěn)定細(xì)胞系。①HepG2細(xì)胞中沒有編碼Cas9的基因，需將Cas9基因及sgRNA基因拼接形成拼接基因并與質(zhì)粒結(jié)合導(dǎo)入HepG2細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞中的RNA均來自轉(zhuǎn)錄過程推測(cè)sgRNA的合成需要RNA聚合酶的催化。②用下圖2中的質(zhì)粒以及含Cas9-sgRNA拼接基因的DNA片段構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)選用EcoRI進(jìn)行酶切，因?yàn)樵谫|(zhì)粒和目的基因的兩端均含有該酶的切割位點(diǎn)，而BamHⅠ的酶切位點(diǎn)正好在標(biāo)記基因內(nèi)，因此該酶不能選擇。將構(gòu)建好的表達(dá)載體與用Ca2+（CaCl2）處理的細(xì)菌（增加細(xì)菌的通透性）置于適宜反應(yīng)體系中培養(yǎng)。然后將培養(yǎng)的細(xì)菌涂布于含嘌呤霉素的平板培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選，凡是能正常生長(zhǎng)的菌落即為帶有目的基因的細(xì)菌，37℃培養(yǎng)，24h后挑取菌落，提取質(zhì)粒作為模板，根據(jù)圖中目的基因兩側(cè)的堿基序列以及引物的堿基順序，結(jié)合堿基互補(bǔ)配對(duì)原則可選擇圖3中引物組合Ⅱ和Ⅲ進(jìn)行體外DNA復(fù)制，通過PCR和電泳技術(shù)鑒定是否重組成功。③用鑒定成功的工程菌對(duì)HepG2細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，培養(yǎng)三天后收集HepG2細(xì)胞，提取基因組，對(duì)其堿基(或核苷酸)序列進(jìn)行檢測(cè)，判斷Cas9-sgRNA拼接基因是否導(dǎo)入成功。若從細(xì)胞水平進(jìn)行檢測(cè)，可以檢測(cè)HepG2細(xì)胞數(shù)目增長(zhǎng)量或細(xì)胞核形態(tài)是否變化來檢測(cè)。（3）但是更多的學(xué)者提出了CRISRP/Cas9基因編輯技術(shù)有時(shí)存在編輯對(duì)象出錯(cuò)而造成“脫靶”由于其他DNA序列也含有與向?qū)NA互補(bǔ)配對(duì)的序列，造成向?qū)NA錯(cuò)誤結(jié)合而脫靶，故RNA的序列越短脫靶率越高【點(diǎn)睛】熟知基因工程的原理及其應(yīng)用是解答本題的關(guān)鍵，能根據(jù)題目中的關(guān)鍵信息進(jìn)行合理的分析并能正確作答是解答本題的另一關(guān)鍵，基因表達(dá)載體的構(gòu)建是解答本題的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。10、B【解析】題圖分析：生長(zhǎng)素濃度在0-g范圍內(nèi)，隨著生長(zhǎng)素濃度的升高，促進(jìn)作用逐漸增大；生長(zhǎng)素濃度為g-h時(shí)，隨著生長(zhǎng)素濃度的升高，促進(jìn)作用逐漸減弱，生長(zhǎng)素濃度為g時(shí)，促進(jìn)作用最大，因此g為生長(zhǎng)素促進(jìn)莖生長(zhǎng)的最適濃度?！驹斀狻緼、AC段促進(jìn)效果增加，CE段促進(jìn)效果減弱，不能說明生長(zhǎng)素具有兩重性，高于h點(diǎn)生長(zhǎng)素作用表現(xiàn)為抑制生長(zhǎng)，此時(shí)才能體現(xiàn)生長(zhǎng)素的兩重性，A錯(cuò)誤；B、若測(cè)得表現(xiàn)出向光性的胚芽鞘背光側(cè)生長(zhǎng)素濃度為2f，則向光測(cè)濃度應(yīng)該依然具有促進(jìn)作用，只不過促進(jìn)作用小于背光側(cè)，因此向光側(cè)生長(zhǎng)素濃度應(yīng)該<f，B正確；C、圖2中，在0-g范圍內(nèi)，α?xí)S著圖1所示生長(zhǎng)素濃度增加而增大，在g-h時(shí)，α?xí)S著圖1所示生長(zhǎng)素濃度增加而減小，C錯(cuò)誤；D、圖2中，由于瓊脂