植物營養(yǎng)診斷作業(yè)指導書

植物營養(yǎng)診斷作業(yè)指導書1.1植物汁液和浸提液的制備制取植株汁液的方法有三種：一是用壓汁法將組織汁液擠壓出來，然后稀釋到一定濃度進行測定，這叫壓液稀釋法。二是用浸提劑浸提，制成速測用的浸提液，這可用熱水浸提或冷水浸提。三是直接將汁液擠壓在比色盤或試紙上進行速測。1.壓液稀釋法壓出植株汁液需用特別壓汁器，現(xiàn)介紹三種供參考。(1)特制的壓汁鉗，這種壓汁鉗適用于玉米、棉花、麥子和汁液較多的作物。不大適用于水稻。使用費力，不易壓出汁液但可將植物樣品直接放在鉗盤上壓汁。(2)金工用手虎鉗壓汁，同時要有一個軟質塑料管(長10厘米，寬25厘米)。將待測的組織洗清后，用濾紙內外擦干，放入塑料管中對折后再壓汁。這種壓液器力量較大，同時可防止混入鐵銹影響測定。(3)無壓汁鉗時可用木凳壓汁法代替。取長棒一個，長凳一條，用繩索將棒捆綁在凳上，另取待測植株放于塑料套管內，折疊后，放在木棒之下壓汁。此方法取材既方便又省力，適宜于推廣使用?；旌现仓陿悠酚脡褐鬟M行壓汁，將壓出汁液稀釋20倍，即1滴汁液加19滴水，即成供測NO3—N、P、K之用的待測液。2.水浸提法將切碎的作物組織混勻后，稱取05克放入小三角瓶或大試管中，加蒸餾水20毫升，塞緊，用力搖1分鐘(上下?lián)u動約200次)靜止片刻，即可吸取上層清液供測定NO3—N、P、K之用，如果溶液混濁，應先過濾再測定，浸提液不宜放置過久，在2～3小時內測定完。淀粉、氨基態(tài)氮的測定不用上述待測液而應另外制取。1.2試劑配制(1)氮、磷、鉀混合標準液用分析天平準確稱取烘干的分析純試劑，磷酸二氫鉀(KH2PO4)0.4393克，硝酸鉀(KNO3)0.7217克，氯化銨(NH4Cl)0.3820克，硫酸鉀(K2SO4)1.3247克，放入100毫升燒杯中，用少量蒸餾水溶解，無損地移入1000毫升容量瓶中，并用蒸餾水多次洗燒杯，洗液均并于容量瓶中，最后加水至刻度，搖勻。此溶液中硝態(tài)氮(NO3—N)、銨態(tài)氮(NH4—N)、磷(P)的濃度各為100mg/L，鉀的濃度為1000mg/L，溶液中加甲苯5滴，可保存3—4個月。二級混合標準液用刻度移液管分別吸取上述貯備液2毫升及16毫升，各在100毫升容量瓶中用蒸餾水稀釋至刻度，充分搖勻，由2毫升貯備液稀釋而成的標準液，含硝態(tài)氮、銨態(tài)氮、磷的濃度各為2mg/L，含鉀濃度為20mg/L。由16毫升貯備液稀釋而成的標準液，含硝態(tài)氮、銨態(tài)氮、磷的濃度各為16mg/L，含鉀濃度為160mg/L，均不易長期保存，1～2周后即失效。(2)硝酸試粉稱取分析純硫酸鋇(105℃烘干4小時，研細、過60目篩)100克，分為四份，分別與10克硫酸錳(MnSO4·2H2O)，2克鋅粉(研細，過80—100目篩)，4克對氨基苯磺酸和2克四苯胺在研缽中研細混勻，最后加入75克檸檬酸(顆粒大時，需先研細)在研缽中一起研磨、混勻，于棕色瓶中密閉保存，每次用后隨即蓋嚴防潮。(3)50%醋酸取化學純冰醋酸，按1：1稀釋而成。(4)2.1%鉬酸銨鹽酸溶液稱取化學純鉬酸銨10.5克，溶于約100毫升蒸餾水中，加熱低于60℃促其溶解，若有混濁，過濾之，另取濃鹽酸204毫升加入約100毫升蒸餾水中，攪勻，待兩液冷卻至室溫后，將鉬酸銨溶液慢慢注入鹽酸中，邊加邊搖勻，貯入棕色試劑瓶中，此溶液鹽酸濃度為4.9mol/L，每隔二～三個月應檢查其是否失效。(5)2%氯化亞錫甘油貯備液稱取氯化亞錫結晶(SnCl2·2H2O)2克，加濃鹽酸10毫升，充分搖動使其溶解，加化學純甘油90毫升，混勻，貯入棕色瓶中，可保存半年以上。使用前取2%氯化亞錫甘油液1滴，加蒸餾水19滴，搖勻即成0.1%氯化亞錫溶液，此溶液只供當天使用，氣溫高時，僅半日內有效。(6)3%EDTA堿性溶液稱取EDTA二鈉3克，氫氧化鈉1克，溶于100毫升蒸餾水中。(7)37%甲醛若有沉淀，濾其清液使用，如呈酸性，用稀堿液調節(jié)至中性。(8)2%四苯硼鈉溶液稱取0.5克四苯硼鈉(采用測血鉀專用試劑)溶于25毫升蒸餾水中，加0.2mol/L氫氧化鈉(2克氫氧化鈉溶于250毫升蒸餾水中)約2滴調節(jié)溶液pH值至8—9放置過夜，然后過濾。1.3植物組織中硝態(tài)氮的測定(硝酸試粉比色法)測定原理：測定硝態(tài)氮是利用硝酸試粉和溶液中的硝酸鹽起作用，產生粉紅色化合物。硝酸試粉是幾種試劑配制成的混合粉劑，它們的主要作用是在弱酸性條件下，溶液中硝酸鹽受試粉中鋅和酸產生的氫作用，先被還原成亞硝酸鹽，再與對氨基苯磺酸和甲苯胺作用形成粉紅色的偶氮化合物，其反應如下：NO3-+Zn+2H+→NO2-+Zn2++H2O試粉中硫酸錳對還原和呈色反應起催化作用，也可消除溶液中氯離子的干擾。硫酸鋇在試粉中起填充作用。在一定濃度范圍內，形成粉紅色的深淺與溶液中硝酸鹽含量的多少成正相關，將它與標準色階比較，即可求出硝態(tài)氮的含量。測定步驟制備標準色階和供試液中硝態(tài)氮含量的測定，可同時在白瓷比色盤中，按下表順序進行。表格里的雙線上部，為制備比色用標準溶液，雙線的右上部為待測試液。只有在標準溶液和待測試液都按要求依次準備好之后，才能同時按雙線以下各操作步驟順序進行操作。硝

態(tài)

氮

測

定

步

驟操

作

步

驟用量單位標準色階濃度（mg/L）供試液用量（滴）0.51248121．

制備顯色液標準系列取混合標準液濃

度2mg/L滴124000416mg/L滴000123加

蒸

餾

水滴3203212．加50％醋酸滴11111113．加硝酸試粉耳勺11111114．攪勻

由低至高濃度逐穴攪勻5．比色讀數

3～15分鐘內與標準色階比較記下讀數6．結算結果

硝態(tài)氮(mg/L)＝讀數值*稀釋倍數注意事項①加入醋酸的作用是使顯色穩(wěn)定，據試驗在硝態(tài)氮含量高的溶液，醋酸濃度達7%以上呈色才穩(wěn)定。②硝酸試粉用量各穴盡量一致，每一耳勺相當15毫克。③比色讀數時，若試液顏色強度介于標準色階的兩個等級之間，可估計其中間數值為讀數值；若試液顯色超過最高一級標準色階，應另取試液稀釋后重新測定。但在計算結果時，根據讀數值，除了乘原來制備供試液時的稀釋倍數外，必須再乘以第二次的稀釋倍數。1.4植物組織中磷的測定(磷鉬藍比色法)測定原理在一定的酸度和鉬酸銨濃度下，溶液中的磷與鉬酸銨作用生成黃色的磷鉬酸，其反應如下：(NH4)2MoO4+2HCl→H2MoO4+2NH4ClH3PO4+12H2MoO4→H3［P(Mo3O10)4］+12H2O生成的磷鉬酸，在一定量的氯化亞錫作用下，使部分鉬(六價鉬)被還原，形成藍色的復雜化合物—磷鉬藍。在一定含磷濃度范圍內，溶液藍色的深淺與磷含量成正比。根據藍色的深淺與標準色階相比較，即可求出磷的含量。測定步驟制備標準色階和供試液中磷含量的測定，可同時在比色盤中，按下表順序進行。

磷測定步驟操

作

步

驟用量單位標準色階濃度(mg/L)供試液用量（滴）0.5124812制備顯色用準系列取混合標準液濃度2mg/L滴124000416mg/L滴000123

滴3203211．加2.1%鉬酸銨鹽酸液滴11111112．攪勻由低至高濃度逐穴攪勻3．加0.1%氯化亞錫溶液滴11111114．攪勻由低至高濃度逐穴攪勻5．比色讀數5～15分鐘內與標準色階比較記下讀數6．計算結果無機磷(mg/L)=讀數*稀釋倍數注意事項0.1%氯化亞錫在臨用前由2%氯化亞錫甘油貯備液稀釋制備當天有效，每次少配。1.5植物組織中鉀的測定(四苯硼鈉比濁法)溶液中的鉀離子與四苯硼鈉Na［B(C6H5)4］作用，生成難溶的四苯硼鉀白色沉淀，使溶液呈現(xiàn)渾濁、其反應如下：K++Na[B(C6H5)4]→K[B(C6H5)4]↓+Na+在一定含鉀濃度范圍內，其混濁度與鉀含量成正比，根據混濁程度與標準鉀的濁度相比較，即可求出鉀的含量。測定步驟制備標準比濁系列與供試液中鉀的測定，可同時在小試管(19×70毫米)中，按下表順序進行。有效鉀測定步驟操

作

步

驟用量單位標準濁度系列濃度(mg/L)供試液用量（滴）510204060801．

制備比濁用標準系列取混合標準液

濃

度20mg/L滴2480004160mg/L滴000234加

蒸

餾

水滴6406542．加3％EDTA堿性溶液滴11111113．加37％甲醛滴11111114．攪勻逐管攪勻5．加2％四苯硼鈉溶液滴22222226．攪勻逐管攪勻7．比濁讀數5～15分鐘內與標準濁度系列比濁8．計算結果有效鉀(mg/L)=讀數值*稀釋倍數注意事項①試液中產生干擾作用的離子，主要有銨離子及其它一些三價、二價金屬離子(如鈣、鎂、鐵、鋁等)須加入EDTA二鈉鹽及甲醛來掩蔽，以消除干擾。EDTA二鈉鹽即乙二胺四乙酸二鈉鹽能與二價、三價金屬離子結合為無色絡合物，甲醛與銨離子作用，能形成無色的六次甲基四胺，其反應如下：4NH4++6HCHO→(CH2)6N4+6H2O+4H+銨離子含量多時，在堿性條件下，甲醛才能有更好的掩蔽效果。②比濁讀數可參考硝態(tài)氮測定中的注意事項③。

3—3植物水分的測定測定植物樣品水分的目的有二。一是為了了解植物的實際含水情況，因為：①植物水分和干物質(水分以外的物質)的含量是植物生理狀態(tài)和成熟度的重要指標；②