【三種檢測(cè)方式在腫瘤標(biāo)志物中的應(yīng)用探究進(jìn)展綜述論文3600字】

三種檢測(cè)方式在腫瘤標(biāo)志物中的應(yīng)用研究進(jìn)展綜述論文摘要：腫瘤標(biāo)志物的合成與腫瘤細(xì)胞的形成和增殖有密切關(guān)聯(lián)，可通過人體血液、組織或體液等成分進(jìn)行表達(dá)，因而可采用不同方式進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)方式的差異可能會(huì)直接影響臨床醫(yī)師的判斷，故而需要針對(duì)不同臨床檢測(cè)方式的特征進(jìn)行了解，使得更為合適的檢驗(yàn)手段可在臨床中被應(yīng)用和選擇以提高檢驗(yàn)準(zhǔn)確性。本文在對(duì)各類檢測(cè)方式進(jìn)行綜述后，更有利于臨床醫(yī)師延長患者生存期，未來臨床檢驗(yàn)方法的不斷完善，可能更有利于提升腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)效率，延緩患者生存期。關(guān)鍵詞：腫瘤標(biāo)志物；酶聯(lián)免疫吸附法；免疫比濁法；化學(xué)發(fā)光法腫瘤標(biāo)志物水平的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)受到不同檢驗(yàn)方式的影響，故而不同檢測(cè)方式所檢驗(yàn)出的腫瘤標(biāo)志物水平對(duì)于患者病情變化的判斷標(biāo)準(zhǔn)有所差異，而敏感度、特異度更高的檢測(cè)方式更有利于臨床醫(yī)師對(duì)患者病情進(jìn)行判斷[1]。酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)法、免疫比濁法和化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)法均在當(dāng)前臨床中被廣泛應(yīng)用[2]。本文通過對(duì)不同檢測(cè)方式的檢測(cè)特征及優(yōu)缺點(diǎn)進(jìn)行闡述，來對(duì)腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)方式的臨床選擇提供參考依據(jù)，讓不同檢驗(yàn)方式的優(yōu)劣能被臨床醫(yī)師認(rèn)識(shí)到，并對(duì)相應(yīng)的腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行檢驗(yàn)以提升準(zhǔn)確性，從而更加了解腫瘤在患者體內(nèi)的侵襲程度。1腫瘤標(biāo)志物的早期檢測(cè)方式早期腫瘤一般無特異性癥狀表現(xiàn)，故而一般在經(jīng)歷醫(yī)學(xué)檢查時(shí)才可以檢測(cè)出來，包括CT檢查、彩超檢查等，不同類型腫瘤其檢測(cè)方式存在明顯差別，然而一般以獲取的病理組織切片的病理檢查結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，但由于病理組織通常在手術(shù)中才能獲取，不具備一定的時(shí)效性，穿刺活檢也成為當(dāng)前提前診斷腫瘤性質(zhì)的重要手段。然而病理檢測(cè)需要對(duì)組織進(jìn)行免疫組化檢驗(yàn)，步驟較為繁瑣，且時(shí)間較長，為有創(chuàng)檢查，故而臨床對(duì)于腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)寄予了厚望[3]。2三種檢測(cè)方式在腫瘤標(biāo)志物中的應(yīng)用2.1酶聯(lián)免疫吸附法酶聯(lián)免疫吸附法主要被應(yīng)用于抗原和抗體的檢測(cè)，通過其在結(jié)合時(shí)產(chǎn)生的特異性現(xiàn)象，并通過酶和基質(zhì)的催化來實(shí)現(xiàn)量化檢測(cè)[4]。測(cè)定時(shí)，將待測(cè)樣品和相應(yīng)的抗原或抗體組合在固體載體上生成免疫復(fù)合物，將非結(jié)合抗原或抗體從免疫復(fù)合物中分離，然后抗原或抗體與載體上的復(fù)合物連接，催化基體與辣根過氧化物酶反應(yīng)，改變反應(yīng)液的顏色，并根據(jù)這種顏色差異實(shí)現(xiàn)對(duì)定量的判定。這種手段被較多的使用，最重要的是其可以讓相應(yīng)指標(biāo)的檢出更具靈敏和特異性，且該方法不會(huì)產(chǎn)生反射性損害[5-6]。由于作用后的最終結(jié)果在一定程度上受到酶催化影響，進(jìn)而被放大，甚至不用機(jī)器就可對(duì)顏色變化進(jìn)行辨別，且能對(duì)皮克級(jí)物質(zhì)的顏色改變進(jìn)行放大表現(xiàn)。此種檢測(cè)方式對(duì)抗原抗體結(jié)合位點(diǎn)較為看重，否則難以發(fā)生反應(yīng)。如果反應(yīng)原理不同，其采用的檢測(cè)手段也存在一定差別；直接方法是抗原涂在固體載體上，初級(jí)抗體和基質(zhì)通過辣根過氧化物酶連接，并在微孔板讀取器上進(jìn)行測(cè)量，該方法操作方便，無交叉反應(yīng)；辣根過氧化物酶間接標(biāo)記在二抗上，酶標(biāo)抗體與一抗和酶標(biāo)板上的抗原結(jié)合。這種方法適用于不適合標(biāo)記的抗體，能保持一抗最強(qiáng)的免疫力。缺點(diǎn)是容易發(fā)生交叉反應(yīng)[7]。王海生等[8]采用酶聯(lián)免疫吸附法對(duì)惡性腫瘤患者體內(nèi)癌胚抗原血清成分進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)ELISA高中低值混合血清內(nèi)批內(nèi)或批間精密度均小于15%，其高中低回收率分別可達(dá)到93.8%、97.4%、94.6%，能滿足大批體檢標(biāo)本的檢測(cè)。試驗(yàn)物質(zhì)的濃度越高，酶標(biāo)抗原或抗體越少，用儀器測(cè)定的吸光度值越低；雙重抗體夾心法適用于含有多個(gè)連接部位的聚合物蛋白質(zhì)的測(cè)定。由于受檢抗原與包膜抗體結(jié)合，與受檢抗原結(jié)合的酶標(biāo)抗體被孵育，通過過氧化氫的作用生成顏色，其特異性也很明顯[9]。酶聯(lián)免疫吸附法能夠被用來檢測(cè)抗體和抗原，因?yàn)闄z驗(yàn)時(shí)間短，且能夠更方便的被操作，故而更多的被應(yīng)用。任風(fēng)梅[10]對(duì)6種不同類型的腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)，其血液樣本來自222名癌癥病人，并采用受試者工作曲線對(duì)其檢測(cè)價(jià)值進(jìn)行評(píng)估，發(fā)現(xiàn)其與電化學(xué)發(fā)光法有較佳的一致性，臨床應(yīng)用價(jià)值良好。2.2免疫比濁法免疫比濁法是將抗原和過量抗體按一定比例稀釋，使可溶性免疫復(fù)合物因聚乙二醇的催化作用而生成顆粒。免疫比濁法是指蛋白質(zhì)與抗體的反應(yīng)使溶液變渾濁，光線通過抗原抗體復(fù)合物后可被吸收。被檢測(cè)的樣本濃度在可控范圍內(nèi)時(shí)，其可吸收的光越多，那么可生成的免疫結(jié)合產(chǎn)物也會(huì)明顯增加。紫外分光光度計(jì)用于檢測(cè)光濃度值，定量地確定測(cè)定的試樣。夏勇等[11]根據(jù)不同試劑效應(yīng)識(shí)別參數(shù)，發(fā)現(xiàn)該方法通過建立相關(guān)的識(shí)別參數(shù)，可以使血清的檢測(cè)結(jié)果更好的用來反應(yīng)患者病情變化。徐繼等[12]對(duì)免疫球蛋白含量進(jìn)行免疫比濁檢測(cè)，其血液樣本均來自肝癌患者，從而使得單純使用動(dòng)脈栓塞化療及加用參芪扶正注射液的患者免疫球蛋白水平呈現(xiàn)明顯差異，更好的對(duì)參芪扶正液的治療效果給予了參考。在可見光范圍內(nèi)，光透過膠乳粒子被儀器檢測(cè)出，檢測(cè)出的光的強(qiáng)度越強(qiáng)，被測(cè)量樣品的含量越高。劉靈燕等[13]采用快速乳膠散射免疫比濁法對(duì)尿視黃醇結(jié)合蛋白進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)其精密度、線性范圍、準(zhǔn)確度、靈敏度和特異度進(jìn)行評(píng)價(jià)，認(rèn)為該種檢測(cè)方法具有靈敏度高、精密度高、準(zhǔn)確度高，抗干擾性強(qiáng)，故而臨床采用免疫乳膠比濁法檢測(cè)具有良好的應(yīng)用價(jià)值。2.3化學(xué)發(fā)光法化學(xué)發(fā)光法包括化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)和抗原抗體檢測(cè)兩部分，同時(shí)具備較強(qiáng)的免疫特異性和較高的發(fā)光靈敏性。通過與發(fā)光試劑標(biāo)記的抗原和抗體組合的免疫反應(yīng)產(chǎn)生免疫現(xiàn)象，加入化學(xué)基質(zhì)，在聚乙烯醇的催化反應(yīng)下發(fā)生電子轉(zhuǎn)移，氧化成刺激的中間體。這種狀態(tài)是不可持續(xù)的，很快就會(huì)恢復(fù)到以前狀態(tài)，多余的能量以可見光的形式釋放到外部[14]。此時(shí)，可以用化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器檢測(cè)一定程度的光信號(hào)強(qiáng)度，可以定性且定量地確定測(cè)量對(duì)象的試料。張學(xué)棟等[15]將化學(xué)發(fā)光法應(yīng)用于腫瘤標(biāo)志物甲胎蛋白的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)肝癌患者體內(nèi)甲胎蛋白含量明顯高于健康志愿者血清水平，認(rèn)為化學(xué)免疫分析法和時(shí)間分辨熒光免疫分析法均可取得較高的血清檢測(cè)準(zhǔn)確性，幫助臨床醫(yī)師盡早對(duì)肝癌患者病情進(jìn)行判斷，從而實(shí)現(xiàn)早期治療，但臨床一般需根據(jù)實(shí)際情況對(duì)患者血清表達(dá)相關(guān)水平進(jìn)行檢測(cè)。該種方法所包含的技術(shù)有所差異，且不同檢驗(yàn)技術(shù)對(duì)于標(biāo)志物水平的檢測(cè)也會(huì)產(chǎn)生一定差異。其中化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)技術(shù)反應(yīng)機(jī)理為氧化還原反應(yīng)，不會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生明顯損害或是造成污染；化學(xué)發(fā)光酶免疫技術(shù)結(jié)合的底物與前者有所區(qū)別，在與結(jié)合抗原抗體分離后可發(fā)生能量躍遷，從而發(fā)生相應(yīng)強(qiáng)度的光，從而進(jìn)行定量；電化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)技術(shù)兼具前兩者的高特異性和點(diǎn)化學(xué)發(fā)光高敏感性，電化學(xué)發(fā)光試劑主要用于抗體和抗原的標(biāo)記，磁珠作為將檢測(cè)對(duì)象及其相應(yīng)的抗體固定在磁微球上的固體載體。3小結(jié)作為如今社會(huì)上人們最為恐懼的疾病，腫瘤患病的人數(shù)正在不斷上升。導(dǎo)致惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展的因素多種多樣，且患者在發(fā)病初期并沒有明顯感覺，患者由于沒有明顯癥狀表現(xiàn)也不能盡早發(fā)現(xiàn)。病灶一旦產(chǎn)生侵襲性，則對(duì)人體造成較強(qiáng)的致病性，并且容易于擴(kuò)散，預(yù)后不理想，而了解腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)方式對(duì)于幫助臨床醫(yī)師認(rèn)識(shí)腫瘤的發(fā)生及發(fā)展有重要價(jià)值。其樣本收集及樣品預(yù)處理都應(yīng)保持質(zhì)控，降低外界環(huán)境對(duì)樣本收集的影響。此外本研究還對(duì)酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)法、免疫比濁法和化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)法等化學(xué)檢測(cè)法各自的特點(diǎn)進(jìn)行敘述，認(rèn)為酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)在當(dāng)前的應(yīng)用較為廣泛，但具體采用的方法需根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)備、腫瘤標(biāo)志物類別進(jìn)行選擇。參考文獻(xiàn)[1]王述蓮，呼建民，何光倫,等.血清腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合血常規(guī)指標(biāo)檢測(cè)在原發(fā)性肝癌診斷中的應(yīng)用研究[J].標(biāo)記免疫分析與臨床，2017，24(1)：4-7.[2]HiramatsuA，HanaokaH，UyamaY.Characteristicsondrugsafetymeasuresinjapanstratifiedbysystemorganclassesandtherapeuticcategoriesinrelationtotheapprovaldate[J].TherapeuticInnovationandRegulatoryScience，2020，54(7)：1534-1540.[3]白順民，范哲.某院靜脈藥物調(diào)配中心抗腫瘤藥物不合理用藥分析[J].中國藥物警戒，2020，17(4)：51-56.[4]FariaSC，SagebielT，PatnanaM，CoxV，ViswanathanC，LallC，QayyumA，BhosalePR.Tumormarkers：mythsandfactsunfolded.AbdomRadiol(NY).2019Apr;44(4)：1575-1600.[5]袁錫裕，李慶賢，羅萍，等.胃癌腫瘤標(biāo)志物在術(shù)前血清中的表達(dá)情況與根治性切除可能性的相關(guān)性研究[J].中國綜合臨床，2021，37(1)：67-73.[6]GiavarinaD，LippiG.Bloodvenoussamplecollection：Recommendationsoverviewandachecklisttoimprovequality[J].ClinBiochem.2017，50(10)：568-573.[7]B?rsch-SupanA，WeissLM，B?rsch-SupanM，etal.Driedbloodspotcollection，samplequality，andfieldworkconditions：Structuralvalidationsforconversionintostandardvalues[J].AmJHumBiol.2021，33(4)：e23517.[8]王海生.化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析法和酶聯(lián)免疫吸附分析法檢測(cè)癌胚抗原的效果[J].臨床醫(yī)學(xué)研究與實(shí)踐,2018，3(36)：151-152.[9]韓素桂，黃彩云，鄭璇,等.比較用凝集素微量離心柱法和酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)甲胎蛋白異質(zhì)體對(duì)原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值[J].中國臨床藥理學(xué)雜志，2018，34(13)：2574-2576.[10]任風(fēng)梅.6項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物應(yīng)用微陣列酶聯(lián)免疫法與電化學(xué)發(fā)光免疫分析法測(cè)定的對(duì)比研究[J].系統(tǒng)醫(yī)學(xué)，2020，5(11)：52-54.[11]夏勇，薛灝，李明洋,等.免疫透射比濁法自建檢測(cè)系統(tǒng)鉤狀效應(yīng)性能確認(rèn)方法的建立[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2018，33(12)：4.[12]徐繼，何治軍，張巖.參芪扶正對(duì)肝癌化療血漿免疫蛋白表達(dá)的影響及療效觀察[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2018，36(8)：2026-2030