JJF(魯) 165-2023 快速核酸檢測儀溫度、時間參數校準規(guī)范

2023—09—05發(fā)布2023—10—01實施TimeParametersofRapidNucleicAcidDetectorJJF（魯）165—2023JJF（魯）165—2023 （II） （2） （2） （2） （2） （2） （2） （2） （3） （3） （3） （3） （3） （4） （4） （6） JJF（魯）165—2023JJF（魯）165—2023快速核酸檢測儀溫度、時間參數校準規(guī)范本規(guī)范適用于基于實時熒光聚合酶鏈反應(PCR)技術或者等溫擴增技術的快速核酸檢測儀的溫度、時間參數的校準，其他類似設備JJF（魯）138-2022實時熒3.1實時熒光聚合酶鏈反應(PCR)技術realtimefluorescentpolymerasechainreaction個基本反應步驟構成，擴增的過程中熒光染料能3.2等溫擴增技術isothermalamplificati在恒定的溫度下，反應過程通過添加不同活性3.3溫度偏差temperat低溫度與設定溫度的上下偏差。溫度偏差包含溫度JJF（魯）165—202323.4平均升溫速率mean快速核酸檢測儀在多個循環(huán)升溫過程中，被測升溫階3.6平均溫度過沖量meantemperat快速核酸檢測儀從基礎升溫至設定溫度過程中，實3.7溫度波動度temperatur3.8溫度持續(xù)時間相對偏差Relativeerroroftemperatureduration快速核酸檢測儀通常是指基于實時熒光PCR技術或者等溫擴增技術的便攜式核酸檢快速核酸檢測儀主要由樣品載臺、熱循環(huán)部件、光表1快速核酸檢測儀溫度、時間參數的技術要求校準項目技術要求基于實時熒光PCR技術基于等溫擴增技術溫度偏差溫度波動度——±0.5℃平均升溫速率≥1.5℃/s參考廠家技術要求平均降溫速率≥1.5℃/s——平均溫度過沖量≤1℃溫度持續(xù)時間相對偏差±10%注：上述計量特性指標僅供參考，不判斷合格與否。JJF（魯）165—20233溫度：10.0℃~40.0℃;相對濕度：不大于85%。），溫度傳感器、數據采集分析模塊組成，應與表2測量標準技術指標標準原理技術要求基于實時熒光PCR技術測量標準器基于等溫擴增技術測量標準器溫度參數測量標準測溫范圍0~120）℃分辨力：不低于0.01℃最大允許誤差：0.10℃采樣間隔不大于0.1s測溫范圍0~120）℃分辨力：不低于0.01℃最大允許誤差：0.10℃采樣間隔不大于10s時間參數測量標準采用溫度記錄器的記錄時間作為快速核酸檢測儀時間測量標準分辨力：不低于0.1s最大允許誤差：1s/h以下要求:7.1.1快速核酸檢測儀的外形結構應完好，標識清晰，應標明設備的名稱、型號、制造7.1.2快速核酸檢測儀裝載附件表面不得有凹陷和毛刺等缺陷?？焖俸怂釞z測儀的可用47.2校準項目快速核酸檢測儀校準項目見表3。設備類型校準項目溫度偏差十十溫度波動度十十十十十十十十注：+表示校準項目，-表示非校準項目7.3校準方法7.3.1測量點位置和數量將快速核酸檢測儀測量標準放置于快速核酸檢測儀中，獨立控溫個對反應模塊校準或同時對多個反應模塊分別校準，參照圖1所示。非獨立控溫的快速核酸檢測儀作為一個整體進行校準，以16通道快速核酸檢測儀為例，測量點分布遵循均勻分布的原則，可參照圖2所示，每增加8通道可增加2個測量點。5根據被校準快速核酸檢測儀的說明書設定控溫程序，基于實時熒光PCR技術和基于等溫擴增技術的快速核酸檢測儀控溫程序設置可參考表4和表5。也可根據用戶要求設置控溫程序?；趯崟r熒光PCR技術快速核酸檢測儀校準裝置設置采樣間隔為100ms,基于等溫擴增技術快速核酸檢測儀校準裝置設置采樣間隔為10s,啟動快速核酸檢測儀校準裝置，放入快速核酸檢測儀中采集并記錄整個循環(huán)程序溫度數步驟設定溫度點設定溫度持續(xù)時間1121364516171設定溫區(qū)設定溫度點設定溫度持續(xù)時間上溫區(qū)中溫區(qū)下溫區(qū)JJF（魯）165—20236基于實時熒光PCR技術快速核酸檢測儀溫度達到設定溫度10s后開始讀取測量值，讀取10s，均勻讀取20組數據；基于等溫擴增技術快速核酸檢測儀溫度達到設定溫度2mintmaxtmaxtstmintmints（2）基于等溫擴增技術快速核酸檢測儀溫度達到設定溫度2min后開始讀取測量值，讀取取全部測量點中變化量的最大值作為溫度波動度的校準結tfmax[(tjmaxtjmin)/2]（3）tf——溫度波動度，℃;），（50±0.5）℃瞬時升溫至（90±0.5）℃瞬時的溫度JJF(魯)165—20237計算按照公式(4)(5)計算：n累積循環(huán)次數，按本規(guī)范程序取前5次；ti(50±0.5)℃溫度點第i次測量值，℃;t(90±0.5)℃溫度點第i次測量值，℃;m測量點數量?；诘葴財U增技術快速核酸檢測儀取從常溫狀態(tài)升溫至95℃,截從最接近50℃瞬時升溫至最接近90℃瞬時的溫度曲線計算升溫速率(如下圖4所示),平均升溫速率的計算按照公式(6)計算：8Thi時間降溫至40℃循環(huán)一共5次(如下圖5所示),截取儀器各循環(huán)從(90±0.5)℃降溫至(509t(50±0.5)℃溫度點第i次測量值，℃;t(90±0.5)℃溫度點第i次測量值，℃;7.4.5平均溫度過沖量JJF（魯）165—2023tjmax——第j個測量點6次測得的最大過沖溫度值，℃;m——測量點數量。ts——設定溫度值，95℃;tjmax——第j個測量點測得的最大過沖溫度值，℃;m——測量點數量。c——溫度持續(xù)時間相對誤差，%；c——實測溫度持續(xù)時間，s；s——設定溫度持續(xù)時間，s。校準結果應在校準證書（報告）上反映，校準證書（報）；），JJF（魯）165—2023h)如果與校準結果的有效性和應用有關時，應對被校樣品的抽樣程序進j)本次校準所用測量標準的溯源性及有效性說明；n)校準證書和校準報告簽發(fā)人的簽名、職務或等p)未經實驗室書面批準，不得部分復制證書或報告的聲換重要器件等的一般需要重新校準。由于復者、儀器本身質量等諸多因素所決定的，因JJF（魯）165—2023將快速核酸檢測儀及快速核酸檢測儀校準裝置各裝置置于儀器反應模塊中，并確保與反應模塊接tmaxtmaxts（A.1）根據上述數學模型以及測量方法，其不確定度來源（1）測量重復性引入的標準不確定度分量u1；（2）快速核酸檢測儀校準裝置分辨力引入的標準不確定度分量u1；A.4各輸入量的標準不確定度分A.4.1重復性測量引入的不確定度分量u1表A.1溫度測量結果次數測量點不同測量點溫度傳感器測量結果(℃)12345678994.9894.9095.0095.0495.1394.9995.0295.0395.0994.9895.2595.3295.2895.2195.1295.2595.1395.2495.2394.9694.8595.0195.1295.1494.9394.9594.9894.9494.99JJF（魯）165—2023 (ykjyj)2sj1k1（A.2）pm(n1)m——測量點的數量；n——每個測量點測量次數；ykj——第j個測量點第k次的測量值，℃; yj——第j個測量點測量值的平均值，℃;sp=0.07℃因此重復測量引入的不確定度分量u1為：u1=0.07℃A.4.2快速核酸檢測儀校準裝置分辨力引入的不確定度u1' 分布計算，k=3，則u1'為：'0.005u13℃0.003℃'0.005者具有一定的相關性，因此在不確定度計算時不量u1'。A.4.3快速核酸檢測儀校準裝置準確度引入的標準不確定度分量u2；u2℃0.058℃A.5合成標準不確定度uc ucu12u22=0.09℃A.6擴展不確定度U取k2，則：Ukuc=0.18℃JJF（魯）165—2023證書編號：XXXXXX-XXXX基本信息委托單位名稱：委托單位地址：制造廠商：儀器名稱：規(guī)格型號：出廠編號：校準依據：環(huán)境溫度：℃環(huán)境濕度：%RH校準員：核驗員：標準器信息計量標準（器）名稱計量標準器溯源單位及證書號有效期至測量范圍準確度等級測量點次數A1(℃)A8(℃)B4(℃).......123......最大值最小值上偏差(℃)下偏差(℃)擴展不確定度℃5次平均升溫速JJF（魯）165—20235次平均升溫速5次平均升溫速5次平均降速率5次平均降速率5次平均降速率JJF（魯）165—2023測量點A1A8B4.......過沖量(℃)平均溫度過沖量(℃)平均升溫速率(℃/s）50℃→90℃平均降溫速率(℃/s）90℃→50℃三、溫度持續(xù)時間相對誤差設定溫度持續(xù)時間(s)實測溫度持續(xù)時間(s)相對誤差(%)JJF（魯）165—2023證書編號：XXXXXX-XXXX基本信息委托單位名稱：委托單位地址：制造廠商：儀器名稱：規(guī)格型號：出廠編號：校準依據：環(huán)境溫度：℃環(huán)境濕度：%RH校準員：核驗員：標準器信息計量標準（器）名稱計量標準器溯源單位及證書號有效期至測量范圍準確度等級測量點次數.......123.......最大值最小值上偏差(