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DB34DB34/T1421—2011水產(chǎn)品中孔雀石綠及其代謝物殘留量的快速篩選測定-酶聯(lián)免疫吸附法QuickScreeningofresiduesofmalachitegreenanditsmetaboliteinaquaticproductsELISA安徽省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I1本方法基于競爭性酶聯(lián)免疫方法原理。樣品中MG或LMG經(jīng)提取液和乙腈等提取純化后，LMG通過氧化劑被氧化為MG，與MG-生物素競爭微孔板上包被的MG抗體，沒有結(jié)合的MG-生物素在洗板中在洗板中被去除。結(jié)合的酶使隨后加入的HRP底物(TMB)顯色，樣品中MG和LMG含量越少，則結(jié)合4.1實(shí)驗(yàn)室用試劑：所用試劑除另有4.4孔雀石綠標(biāo)準(zhǔn)溶液：0ng/mL、0.05ng/mL、0應(yīng)在有效期內(nèi)。超過1個(gè)月不使用，生物素耦合物、辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈親和素以及標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)保存在-20℃。其它試劑應(yīng)在2℃~8℃的溫度下貯存。不同批次的試劑盒不可混用。26.1.2食用樣品取可食部分，勻質(zhì)），6.1.3苗種樣品直接勻質(zhì)到粉碎均勻（糊狀），裝入干凈容器，標(biāo)明6.2.1操作之前將試劑盒中所有試劑在室溫（20℃~25℃)下放置1h～2h。6.2.2稱取2.00g(±0.0001g）勻質(zhì)好的樣品于50mL離心管內(nèi)，依次加入1.0mL樣品提取液A減壓蒸餾或者50℃~60℃水浴氮?dú)獯蹈伞＜尤?00μL的氧化劑液（4.3.536.3.1測定在室溫20℃~25℃條件下操作。），），A--相對吸光度值B--標(biāo)準(zhǔn)液和樣液的平均吸光度值B0--0ng/mL標(biāo)準(zhǔn)液的平均吸光度值以相對吸光度值為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)濃度的對數(shù)值X=C×n.............................X--樣品待測組分的量，單位為微克每千克(μg/kg）C--樣品待測組分的濃度n--稀釋倍數(shù)4％，出現(xiàn)陽性值時(shí)（超過相

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