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DB34DB34/T2850—2017番鴨細(xì)小病毒PCR檢測(cè)方法DetectionMethodofMuscovyDuckParvovirusbyPCR安徽省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I1番鴨細(xì)小病毒MuscovyDuckParvovirus屬于細(xì)小病毒科、細(xì)小病毒亞科、依賴病毒屬，基因組為線性、3.1.2臺(tái)式低溫高速離心機(jī)，溫控范圍：-4℃~25℃。3.1.7水浴鍋，溫控范圍：37℃~100℃。3.1.8微量移液器，可調(diào)量程：0.5～10ul，10～103.2.9磷酸鹽緩沖液（PBS，0.01mol/L，p2GCTCTTTGCTTCAGTTGCTC-3’，下游引物53.2.14陽性對(duì)照樣品：MDPV接c)MDPV接種的番鴨胚尿囊液），3當(dāng)陽性對(duì)照出現(xiàn)861bp擴(kuò)增條帶，陰性對(duì)照未出現(xiàn)目的條帶時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果成立。被檢樣品出現(xiàn)861bp擴(kuò)增條帶為MDPV核酸陽性，未出現(xiàn)861bp擴(kuò)增條帶的樣品判為MDPV核酸陰性。圖1為檢測(cè)結(jié)果圖示。MM1234bp1、2,陽性樣品；3,陽性對(duì)照樣品；4,陰性對(duì)照樣品。4A.1細(xì)胞裂解液的配制A.2.10.2mol/L磷酸氫二鈉溶液：稱取磷酸氫二鈉（Na2HPO4?12H2O）71.6g，先加適量滅菌雙蒸水A.2.20.2mol/L磷酸二氫鈉溶液：稱取磷酸二氫鈉（NaH2PO4?H2O）27.6g，先加適量滅菌雙蒸水溶A.2.3量取0.2moL/L磷酸氫二鈉溶液36mL，0.2mol/L磷酸二氫鈉溶液14mL，稱取Nag，用滅菌雙蒸水溶解稀釋至1000mA.350×TAE緩沖液（貯存液）配制Tris堿242g，冰醋酸57.0mL，0.5mol/LEDTA（pH8.0）100mL攪拌溶解后，用Na至8.3，加滅菌雙蒸水定容至1000mL，常溫保持備用。A.41％瓊脂糖凝膠的配制

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