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廣州市重點中學(xué)2025屆生物高三上期末質(zhì)量檢測模擬試題注意事項:1.答卷前,考生務(wù)必將自己的姓名、準考證號、考場號和座位號填寫在試題卷和答題卡上。用2B鉛筆將試卷類型(B)填涂在答題卡相應(yīng)位置上。將條形碼粘貼在答題卡右上角"條形碼粘貼處"。2.作答選擇題時,選出每小題答案后,用2B鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目選項的答案信息點涂黑;如需改動,用橡皮擦干凈后,再選涂其他答案。答案不能答在試題卷上。3.非選擇題必須用黑色字跡的鋼筆或簽字筆作答,答案必須寫在答題卡各題目指定區(qū)域內(nèi)相應(yīng)位置上;如需改動,先劃掉原來的答案,然后再寫上新答案;不準使用鉛筆和涂改液。不按以上要求作答無效。4.考生必須保證答題卡的整潔??荚嚱Y(jié)束后,請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.為了探究生長素的作用,將去尖端的玉米胚芽鞘切段隨機分成兩組,實驗組胚芽鞘上端一側(cè)放置含有適宜濃度IAA的瓊脂塊,對照組胚芽鞘上端同側(cè)放置不含IAA的瓊脂塊,兩組胚芽鞘下端的瓊脂塊均不含IAA。兩組胚芽鞘在同樣條件下,在黑暗中放置一段時間后,對照組胚芽鞘無彎曲生長,實驗組胚芽鞘發(fā)生彎曲生長,如圖所示。根據(jù)實驗結(jié)果判斷,下列敘述正確的是A.胚芽鞘b側(cè)的IAA含量與b'側(cè)的相等B.胚芽鞘b側(cè)與胚芽鞘c側(cè)的IAA含量不同C.胚芽鞘b'則細胞能運輸IAA而c'側(cè)細胞不能D.瓊脂塊d'從a'中獲得的IAA量小于a'的輸出量2.皇城根遺址公園以“綠色、人文”為主題,塑造了“梅蘭春雨、御泉夏爽、銀楓秋色、松竹冬翠”四季景觀。公園憑借其注重生態(tài)效益的綠化設(shè)計,在北京市精品公園評比中入選。以下相關(guān)敘述錯誤的是()A.應(yīng)盡量選用當?shù)貥浞N,為本地動物提供更適宜的棲息環(huán)境B.遺址公園的生物群落由混栽的70多個樹種組成C.公園綠化率高達90%以上,利于緩解城市污染狀況D.各類植物混栽,合理布局,實現(xiàn)了人文與自然的和諧統(tǒng)一3.科研人員為研究枇杷植株在不同天氣條件下的光合特征,對其凈光合速率和氣孔導(dǎo)度進行了測定,結(jié)果如圖。下列有關(guān)敘述不正確的是()A.陰天時凈光合速率下降的時間與氣孔導(dǎo)度的下降時間不一致B.晴天時出現(xiàn)“午休”現(xiàn)象與氣孔關(guān)閉引起的CO2濃度下降有關(guān)C.實驗結(jié)果顯示枇杷植株適合種植在光線弱的蔭蔽環(huán)境中D.兩種條件下枇杷凈光合速率峰值出現(xiàn)的早晚均與光照強度無關(guān)4.漿細胞的代謝過程中不會發(fā)生的是A.酶和底物的特異性結(jié)合 B.有機物的合成和分解C.染色體DNA的復(fù)制 D.ATP和ADP的轉(zhuǎn)化5.下列關(guān)于生物學(xué)實驗的敘述,正確的有幾項()①在“脂肪的鑒定”實驗中,體積分數(shù)為50%的酒精溶液的作用是溶解組織中的脂肪②在“觀察紫色洋蔥鱗片葉細胞質(zhì)壁分離與復(fù)原”實驗中,原生質(zhì)層的形態(tài)和位置變化為因變量,該實驗不存在對照③探究溫度對酶活性影響的實驗,可選用新鮮的肝臟研磨液和H2O2溶液④小鼠吸入18O2,則在其尿液中可檢測到H218O,呼出的CO2可能含有18O⑤鑒定DNA時,將溶解的粗提產(chǎn)物與二苯胺混合后進行沸水浴可看到紫色反應(yīng)A.無正確項 B.只有一項正確C.有兩項正確 D.有三項正確6.同種細胞組成的細胞群中,不同細胞可能處于細胞周期的不同時相。因為研究需要,科研人員用秋水仙素處理該細胞群使其中的所有細胞處于細胞周期的同一時相。下列敘述正確的是()A.秋水仙素處理后細胞群將處于細胞分裂間期B.秋水仙素處理能夠抑制細胞中紡錘體的形成C.秋水仙素處理能夠抑制細胞骨架微絲的聚合D.秋水仙素處理能夠抑制姐妹染色單體的形成7.美國科學(xué)家發(fā)現(xiàn)了一種名為RHOGD12的基因,誘導(dǎo)該基因在癌細胞內(nèi)表達后,癌細胞會失去轉(zhuǎn)移能力,從而有助于避免癌細胞在體內(nèi)的擴散。該基因的作用最可能是A.控制合成一種酶,促使癌細胞衰老、凋亡B.控制合成一種激素,誘導(dǎo)癌細胞分化為正常組織C.控制合成一種糖蛋白,增強癌細胞間的黏著性D.控制合成一種RNA,使癌細胞的DNA復(fù)制受阻8.(10分)下圖是一種“生物導(dǎo)彈”的作用原理示意圖。阿霉素是微生物的代謝產(chǎn)物,進入人體后可抑制DNA和RNA的合成,是一種抗腫瘤藥物,對正常細胞也有一定毒性。下列說法不正確的是()A.單克隆抗體由雜交瘤細胞合成和分泌B.活化阿霉素抑制細胞中的DNA復(fù)制,不抑制轉(zhuǎn)錄C.僅注射生物導(dǎo)彈不能對腫瘤細胞起抑制作用D.單克隆抗體特異性強,能減輕對正常細胞的傷害二、非選擇題9.(10分)β-葡萄糖苷酶是一種存在于微生物中的可水解纖維素的酶,可用于生產(chǎn)燃料乙醇,也可作為洗滌劑的有效成分。某科研小組進行了β-葡萄糖苷酶高產(chǎn)菌株的分離、鑒定、提純產(chǎn)物等研究。已知七葉靈能在β-葡萄糖苷酶的作用下水解,其水解產(chǎn)物七葉苷原能和Fe3+作用呈現(xiàn)棕黑色。請回答:(1)為篩選出β-葡萄糖苷酶高產(chǎn)菌株,應(yīng)到_____________環(huán)境中取樣,取樣后要在液體培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng),其目的是_________________。(2)選擇培養(yǎng)后要初步分離鑒定出目的菌株,請寫出實驗思路:___________________。(3)用接種針挑取棕黑色的菌落用_____________法進一步純化,進而篩選出高產(chǎn)菌株。(4)將高產(chǎn)菌株擴大培養(yǎng),獲得發(fā)酵液,用___________法去除發(fā)酵液中分子量小的雜質(zhì),再用_________法進一步純化,最終獲得純度較高的β-葡萄糖苷酶。(5)生產(chǎn)中為降低成本,β-葡萄糖苷酶最好采用________法固定,以便重復(fù)使用。10.(14分)雙子葉植物甲含有抗旱基因而具有極強的抗早性,乙抗旱性低。若將該抗旱基因轉(zhuǎn)移至植物乙中,有可能提高后者的抗旱性。利用基因工程技術(shù)將甲的抗旱基因轉(zhuǎn)移至乙的體內(nèi),可提高植物乙的抗旱性。回答下列問題:(1)為獲取抗早基因.可以先從植物甲中提取該基因mRNA然后經(jīng)___________________過程獲得cDNA。基因工程的核心步驟是_____________________________。(2)使用PCR技術(shù)擴增抗旱基因時,可選擇圖中A、B、C、D四種單鏈DNA片段中的___________________作為引物,此過程還需要____________酶,但不需要解旋酶,而是利用____________使DNA解旋。(3)獲得了抗旱基因的植物乙,種植時一般要與傳統(tǒng)作物間隔足夠遠的距離,以免___________________。(4)人們擔心這種行為會打開“潘多拉魔盒”,驅(qū)使一些科研者開展人類基因編輯研究,出現(xiàn)“基因完美的定制人”。在這些研究中,外源基因能與受體細胞DNA成功重組的原因是______________,這種重組DNA技術(shù)若用于對人類基因進行編輯,由于是隨機的,因此有非常大的風(fēng)險,甚至導(dǎo)致生命活動必需的基因遭到破壞。11.(14分)癌細胞表面蛋白“PDL-1”與T細胞表面蛋白“PD-1”特異性結(jié)合后,可抑制T細胞活性并啟動其凋亡,導(dǎo)致腫瘤細胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對“PD-1”基因進行克隆、表達及生物學(xué)活性鑒定,為制備抗體打基礎(chǔ)。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1、幾種常用限制酶名稱及識別序列與酶切位點見圖2:α鏈:5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈:5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1(1)首先提取細胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄生成____________________作為模板;設(shè)計含有不同的限制酶切點的α和β序列為引物,通過____________________技術(shù)擴增目的基因。(2)選用圖1中的兩種名稱分別為____________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?!陛d體進行雙切,再用DNA連接酶將其與目的基因拼接,構(gòu)建表達載體。該表達載體的組成,除了目的基因、標記基因抗卡那霉素基因外,還必須具有____________________等。(3)而后一定溫度下,與經(jīng)過處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中,可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌,繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴增重組DNA。(4)將擴增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉(zhuǎn)入可高度表達外源基因的原代293T細胞。一段時間后,為確定PD-1基因是否表達,檢測細胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能,則可裂解293T細胞,提取該物質(zhì)看能否與____________________發(fā)生結(jié)合,從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。研究中還會有一步驟,只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細胞,其目的是_________________________。12.酸馬奶酒是一種以鮮馬奶為原料,經(jīng)乳酸菌和酵母菌共同自然發(fā)酵而成的一種古老的乳酸,酒精發(fā)酵乳飲料,深受我國內(nèi)蒙和新疆地區(qū)多個少數(shù)民族同胞的喜愛。為了優(yōu)選菌種,提高品質(zhì),某科研機構(gòu)開展了以下研究:(1)分離菌種:選取多種馬奶酒樣本,使用____________法進行菌株分離,培養(yǎng)后在合格平板上會形成________菌落;使用__________挑取上述平板中不同菌種進行純培養(yǎng),在本步驟中區(qū)分不同菌種的依據(jù)是_____________。(2)篩選菌種:將上述過程中獲得的多個菌種分別進行發(fā)酵實驗。利用_________與酒精產(chǎn)生顯色反應(yīng)的原理,選擇發(fā)酵能力較強的酵母菌菌種J;檢測發(fā)酵液的pH值,選擇發(fā)酵能力較強的乳酸菌菌種W。(3)要獲得更好的發(fā)酵效果,還要檢測菌種之間的關(guān)系,現(xiàn)將W的濾菌發(fā)酵液加入J的培養(yǎng)平板上的一側(cè)(另一側(cè)不添加),30℃下,48小時后得到結(jié)果如圖一所示:將不同濃度的J的發(fā)酵液添加到含W的乳酸菌培養(yǎng)基上,在38℃下,每隔2小時檢測pH值,得到曲線如圖二所示。從實驗結(jié)果分析,W的濾菌發(fā)酵液對J的生長有__________作用;J的發(fā)酵液對W的生長有促進作用,且濃度越高其作用越________。實驗說明,在酵母菌和乳酸菌的________作用下,鮮馬奶轉(zhuǎn)變成風(fēng)味獨特的酸馬奶酒。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】試題分析:分析圖示可知,瓊脂塊a中不含生長素,胚芽鞘不生長也不彎曲,故瓊脂塊d中不含生長素;瓊脂塊a′中含生長素,胚芽鞘向放置瓊脂塊a′的對側(cè)彎曲生長,a′中的生長素部分用于胚芽鞘的生長,部分運輸?shù)江傊瑝Kd′;瓊脂塊a中不含生長素,瓊脂塊a′中含生長素,故胚芽鞘b側(cè)的IAA含量比b′側(cè)的少,生長較慢,A錯誤;瓊脂塊a中不含生長素,胚芽鞘b側(cè)與胚芽鞘c側(cè)的IAA含量相同,B錯誤;胚芽鞘b′側(cè)細胞和c′側(cè)細胞都能運輸IAA,C錯誤;瓊脂塊a′中的生長素部分用于胚芽鞘的生長,部分運輸?shù)江傊瑝Kd′.因此瓊脂塊d′從a′中獲得IAA量小于a′的輸出量,D正確。點睛:解答本題的關(guān)鍵在于對圖形的分析,特別是對生長素運輸?shù)睦斫馐菍x項分析的首要條件。2、B【解析】
生物入侵會嚴重破壞生物的多樣性,破壞生態(tài)平衡,加速物種的滅絕,所以在引種過程中應(yīng)慎重。群落是指在一定生活環(huán)境中的所有生物種群的總和,包括生產(chǎn)者、消費者和分解者?!驹斀狻緼、在樹種選擇過程中,需要考慮外來物種入侵因素,因此應(yīng)盡量選用當?shù)貥浞N,為本地動物提供更適宜的棲息環(huán)境,A正確;B、該公園的生物群落應(yīng)包括該地所有的植物、動物和微生物,B錯誤;C、綠色植物能夠通過光合作用吸收二氧化碳,釋放氧氣,有些植物還能吸收空氣中的有害物質(zhì),所以綠化率升高可有利于緩解城市污染狀況,C正確;D、各類植物混栽,布局美觀,還能維持該生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定,實現(xiàn)了人文與自然的和諧統(tǒng)一,D正確。故選B。3、D【解析】
據(jù)圖分析:晴天中午溫度較高、光照較強枇杷植株葉片的氣孔部分關(guān)閉,同時氣孔導(dǎo)度下降,二氧化碳供應(yīng)不足,導(dǎo)致凈光合作用下降;陰天時中午光照強度最大,凈光合作用速率最大,但陰天時凈光合速率下降的時間與氣孔導(dǎo)度的下降時間不一致。【詳解】A、據(jù)圖分析,陰天時凈光合速率下降的時間與氣孔導(dǎo)度的下降時間不一致,A正確;B、晴天中午溫度較高、光照較強枇杷植株葉片的氣孔部分關(guān)閉,同時氣孔導(dǎo)度下降,二氧化碳供應(yīng)不足,導(dǎo)致凈光合作用下降,B正確;C、圖示說明,陰天時光照強度較弱,凈光合作用速率高于晴天,說明枇杷植株適合種植在光線弱的蔭蔽環(huán)境中,C正確;D、兩種條件下枇杷凈光合速率峰值出現(xiàn)的早晚均與光照強度、溫度均有關(guān),D錯誤。故選D?!军c睛】本題主要考查影響光合作用的因素,本題難點主要是比較圖中各條曲線,并讀懂各條曲線的含義。4、C【解析】
漿細胞為高度分化的細胞,不再分裂,能合成并分泌抗體。能進行細胞呼吸,合成ATP?!驹斀狻繚{細胞中能進行多種酶促反應(yīng),能發(fā)生酶和底物的特異性結(jié)合,如轉(zhuǎn)錄過程中RNA聚合酶可與DNA特異性結(jié)合,A不符合題意;漿細胞中存在有機物的合成和分解,如抗體的合成、細胞呼吸可分解有機物等,B不符合題意;染色體復(fù)制發(fā)生在細胞分裂的間期,而漿細胞為高度分化的細胞,不能進行分裂,故沒有染色體DNA的復(fù)制過程,C符合題意;漿細胞中的ATP和ADP可以相互轉(zhuǎn)化,保證細胞代謝所需能量的供應(yīng),D不符合題意。故選C?!军c睛】本題綜合考查細胞代謝、細胞增殖、ATP等知識,要求考生識記細胞中酶的作用;識記ATP和ADP相互轉(zhuǎn)化的過程;識記細胞呼吸的具體過程及細胞分裂等知識,能結(jié)合所需的知識準確判斷各選項。5、B【解析】
滲透作用發(fā)生的條件:具有半透膜;半透膜兩側(cè)具有濃度差;探究pH對酶活性時,自變量應(yīng)該是不同的pH;探究溫度對酶活性的影響時,自變量應(yīng)該是不同的溫度;二苯胺可與DNA在水浴條件下反應(yīng)呈藍色?!驹斀狻竣僭凇爸镜蔫b定”實驗中,體積分數(shù)為50%的酒精溶液的作用是洗去浮色,①錯誤;
②在“觀察紫色洋蔥鱗片葉細胞質(zhì)壁分離與復(fù)原”實驗中,原生質(zhì)層的形態(tài)和位置變化為因變量,該實驗可與未發(fā)生質(zhì)壁分離前的原生質(zhì)層的形態(tài)和位置形成對照,②錯誤;③由于H2O2溶液不穩(wěn)定,在高溫條件下易分解,因此不能用作探究溫度對酶活性的影響實驗的材料,③錯誤;④小鼠吸入18O2,氧氣參與有氧呼吸的第三階段可以進入水中,水再參與有氧呼吸的第二階段可以進入二氧化碳中,故可以在其尿液中可檢測到,呼出的CO2可能含有18O,④正確;⑤用二苯胺試劑鑒定DNA時,在沸水浴條件下溶液呈藍色,⑤錯誤。只有一項正確,B正確,ACD錯誤。故選B。【點睛】本題考查探究影響教材基礎(chǔ)實驗,對于此類試題,需要考生注意的細節(jié)較多,如實驗的取材是否合適、實驗選用的鑒定試劑是否合理、實驗條件控制是否得當及實驗設(shè)計是否合理等,這需要考生在平時的學(xué)習(xí)過程中注意積累。6、B【解析】
進行連續(xù)分裂的細胞有細胞周期,一個細胞周期包括分裂間期和分裂期,分裂間期包括G1期、S期和G2期,分裂期包括前期、中期、后期和末期。【詳解】A、秋水仙素處理能夠抑制前期紡錘體的形成,因此秋水仙素處理后細胞群將處于細胞分裂前期,A錯誤;B、秋水仙素處理能夠抑制細胞中紡錘體的形成,B正確;C、秋水仙素處理能夠抑制細胞中紡錘體的形成,但是不能抑制細胞骨架微絲的聚合,C錯誤;D、秋水仙素處理能夠抑制細胞中紡錘體的形成,但是不能抑制姐妹染色單體的形成,D錯誤。故選B。7、C【解析】
控制合成一種酶,促使癌細胞衰老、凋亡,與癌細胞的粘著性無關(guān);A錯誤.
激素調(diào)節(jié)生命活動,并不能改變細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì);B錯誤.
根據(jù)題意,誘導(dǎo)RHOGDl2的基因在癌細胞內(nèi)表達后,“癌細胞會失去轉(zhuǎn)移能力,從而有助于避免癌細胞在體內(nèi)的擴散”,說明該基因控制合成一種糖蛋白,增強癌細胞間的黏著性;C正確.
控制合成一種RNA,使癌細胞的DNA復(fù)制受阻,則癌細胞不能無限繁殖;D錯誤
【名師點睛】癌細胞的主要特征是能夠無限增殖,形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化,細胞表面發(fā)生了變化,細胞癌變后,細胞膜上糖蛋白等物質(zhì)減少,使得癌細胞之間的粘著性顯著降低,容易在體內(nèi)分散和轉(zhuǎn)移..8、B【解析】
單克隆抗體是由雜交瘤細胞分泌的特異性強,靈敏度高的抗體。生物導(dǎo)彈:單克隆抗體+放射性同位素、化學(xué)藥物或細胞毒素,可借助單克隆抗體的定位導(dǎo)向作用將藥物定向帶到癌細胞,在原位殺死癌細胞。療效高,副作用小,位置準確?!驹斀狻緼、單克隆抗體是由雜交瘤細胞合成和分泌的,A正確;B、根據(jù)題意可知,“阿霉素可抑制DNA和RNA的合成”,因此活化阿霉素能抑制細胞中的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程,B錯誤;C、在治療中,應(yīng)將非活化磷酸阿霉素和生物導(dǎo)彈同時注射,C正確;D、單克隆抗體特異性強,能直接靶向癌細胞,能減輕阿霉素對正常細胞的傷害,D正確。故選B?!军c睛】本題考查了單克隆抗體的有關(guān)知識,要求考生能夠根據(jù)題干獲得有效解題信息,同時掌握單克隆抗體的制備過程,再結(jié)合所學(xué)知識準確判斷各項。二、非選擇題9、富含纖維素增加產(chǎn)β-葡萄糖苷酶菌株的濃度配制含基本成分的培養(yǎng)基,加入七葉靈、Fe3+,用稀釋涂布平板法接種并在適宜條件下培養(yǎng),粽黑色圈大的菌落即為目標菌落平板劃線透析法凝膠色譜法化學(xué)結(jié)合或物理吸附【解析】
1.尋找目的菌株的原理是需要根據(jù)它對生存環(huán)境的要求,到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。2.固定化酶和固定化細胞技術(shù)是指利用物理或化學(xué)方法,將酶或細胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù),包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。3.凝膠色譜法也稱為分配色譜法,是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。當相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時,相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道,路程較長,移動的速度較慢,而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì),無法進入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠外部移動,路程較短,移動的速度較快,相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子得以分離。【詳解】(1)實驗?zāi)康氖且Y選出β-葡萄糖苷酶高產(chǎn)菌株,而β-葡萄糖苷酶是一種存在于微生物中的可水解纖維素的酶,據(jù)此可知要找到目的菌需要到富含纖維素的環(huán)境中取樣,取樣后,為了增加產(chǎn)β-葡萄糖苷酶菌株的濃度,要將樣品菌在液體培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng)。(2)題意顯示七葉靈能在β-葡萄糖苷酶的作用下水解,其水解產(chǎn)物七葉苷原能和Fe3+作用呈現(xiàn)棕黑色,若要初步分離鑒定出目的菌株,需要在鑒定培養(yǎng)基中加入七葉靈(能在β-葡萄糖苷酶作用下分解)、Fe3+(與七葉靈的水解產(chǎn)物發(fā)生顏色反應(yīng)),為得到單菌落需用稀釋涂布平板法接種,然后置于適宜條件下培養(yǎng),在該培養(yǎng)基中呈現(xiàn)棕黑色的菌落即為目的菌。(3)用接種針挑取棕黑色的菌落,然后用平板劃線法接種,置于適宜條件下進一步純化培養(yǎng),進而篩選出高產(chǎn)菌株。(4)將高產(chǎn)菌株擴大培養(yǎng),獲得發(fā)酵液,因為透析袋允許小分子自由出入,而不能讓大分子透過,故用透析法處理之后,發(fā)酵液中分子量小的雜質(zhì)就能夠被除去,再用凝膠色譜法進一步純化,最終獲得純度較高的β-葡萄糖苷酶。(5)生產(chǎn)中為降低成本,β-葡萄糖苷酶最好采用化學(xué)結(jié)合或物理吸附法固定,以便重復(fù)使用,同時也能與產(chǎn)物有效的分離?!军c睛】熟知相關(guān)的基礎(chǔ)知識是解答本題的關(guān)鍵!能夠從題目中找到關(guān)鍵信息解答本題中篩選目的菌的原理是解答本題的另一關(guān)鍵!10、逆轉(zhuǎn)錄構(gòu)建基因表達載體B、C耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)高溫目的基因隨花粉傳播,與傳統(tǒng)植物發(fā)生雜交,造成基因污染兩者都有共同的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成【解析】
1、基因工程的操作程序:目的基因的獲取;基因表達載體的構(gòu)建;將目的基因?qū)胧荏w細胞;目的基因的檢測與鑒定。其中基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟。2、PCR技術(shù)又叫多聚酶鏈式反應(yīng)是體外合成DNA的技術(shù),通常有三個基本步驟一一變性、復(fù)性和延伸。PCR過程需要的引物不是RNA,而是人工合成的DNA單鏈,其長度通常為20-30個脫氧核苷酸,通常需要兩種引物,分別與DNA分子的兩條鏈互補。PCR過程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是將模板DNA加熱至90℃以上。一定時間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使成為單鏈,50℃時引物與DNA模板鏈之間形成氫鍵,72℃時使單鏈從引物的3’開始延伸。在這個過程中需要耐高溫的DNA聚合酶?!驹斀狻浚?)cDNA文庫是通過mRNA經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄過程獲得的,故為獲取抗旱基因,可以先從植物甲中提取該基因mRNA,然后經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄過程獲得cDNA?;虮磉_載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟。(2)使用PCR技術(shù)擴增抗旱基因時,根據(jù)DNA合成的方向是從5’端到3’端,且引物和模板鏈的方向是相反的,故可選擇圖中的B、C作為引物,此過程還需要耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶),但不需要解旋酶,而是利用高溫使DNA解旋。(3)基因污染是指轉(zhuǎn)基因植物的花粉與近緣物種進行雜交,從而使得近緣物種有了轉(zhuǎn)基因物種的性狀,造成不必要的麻煩。故在大田里栽培轉(zhuǎn)基因植物時,要求轉(zhuǎn)基因植物與傳統(tǒng)作物之間應(yīng)該間隔足夠遠的距離,以免目的基因隨花粉傳播,與傳統(tǒng)植物發(fā)生雜交,造成基因污染。(4)外源基因能與受體細胞DNA成功重組的原因是兩者都有共同的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成?!军c睛】熟練掌握基因工程的操作步驟以及相關(guān)的原理是解答本題的關(guān)鍵。11、cDNAPCRXhoIEoRI啟動子、終止子、復(fù)制原點卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對照【解析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。(2)基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA采用分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用抗原—抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】(1)基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫(cDNA)。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因,而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因,可以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄形成cDNA;由于PCR技術(shù)利用的是DNA分子復(fù)制的原理,所以用該cDNA進行PCR技術(shù)擴增短時間內(nèi)可以獲得大量的目的基因。(2)分析圖1中堿基序列,α鏈上有“—CTCGAC—”識別序列,β鏈上有“—GAATTC—”堿基識別序列,與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?!陛d體進行雙切,再用DNA連接酶將其與目的基因拼接,構(gòu)建基因表達載體?;虮磉_載體的組成包括目的基因、標記基因、啟動子、終止子、復(fù)制原點等。(3)根據(jù)第(2)題可知,基因表達載體上的標記基
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