2025屆山西省陵川第一中學(xué)高三生物第一學(xué)期期末經(jīng)典試題含解析

2025屆山西省陵川第一中學(xué)高三生物第一學(xué)期期末經(jīng)典試題注意事項(xiàng)：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫在答題卡上。2．回答選擇題時，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目的答案標(biāo)號涂黑，如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標(biāo)號?；卮鸱沁x擇題時，將答案寫在答題卡上，寫在本試卷上無效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項(xiàng)符合題目要求）1．科學(xué)家在1958年對蠑螈卵細(xì)胞的染色體分析時發(fā)現(xiàn)，用DNA酶能破壞染色體的長度，即破壞染色體的完整性，使它斷成碎片。若改用蛋白酶，則不能破壞染色體的長度。以上事實(shí)可以說明A．染色體的基本結(jié)構(gòu)由蛋白質(zhì)組成B．染色體的基本結(jié)構(gòu)由DNA組成C．染色體由DNA和蛋白質(zhì)組成D．染色體中的DNA和蛋白質(zhì)鑲嵌排列2．利用胚胎干細(xì)胞核移植技術(shù)可培養(yǎng)出與核供體極為相似的復(fù)制品，下列說法正確的是（）A．胚胎干細(xì)胞是未分化的細(xì)胞，具有細(xì)胞全能性和二倍體核型B．從供體的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離胚胎干細(xì)胞，培養(yǎng)時需接種在滋養(yǎng)層上C．采集體內(nèi)成熟的卵細(xì)胞經(jīng)過去核處理，作為核移植的受體細(xì)胞D．核移植技術(shù)需要借助精密的顯微操作儀和高效率的細(xì)胞融合法3．下列關(guān)于真核細(xì)胞生物膜的敘述，正確的是（）A．生物膜的特定功能主要由膜蛋白決定B．構(gòu)成膜的脂質(zhì)主要是磷脂、脂肪和膽固醇C．有氧呼吸及光合作用產(chǎn)生ATP均在膜上進(jìn)行D．核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體的膜都參與蛋白質(zhì)的合成與運(yùn)輸4．《柳葉刀》近期發(fā)表的一項(xiàng)研究指出，新冠肺炎患者病情嚴(yán)重與細(xì)胞因子風(fēng)暴（簡稱CS）相關(guān)。病毒入侵機(jī)體后，受感染的上皮細(xì)胞和免疫細(xì)胞產(chǎn)生約15種細(xì)胞因子幫助抵御病毒，細(xì)胞因子會引起更多免疫細(xì)胞透過毛細(xì)血管并激活這些免疫細(xì)胞，被激活的免疫細(xì)胞則會產(chǎn)生更多的細(xì)胞因子，即細(xì)胞因子風(fēng)暴（CS）。由于肺部毛細(xì)血管極為豐富，故血管通透性增加后將產(chǎn)生極其嚴(yán)重的后果，除此以外CS還會引起多種器官的衰竭。以下有關(guān)新冠肺炎的敘述錯誤的是（）A．新冠肺炎患者產(chǎn)生細(xì)胞因子風(fēng)暴（CS）是一個負(fù)反饋調(diào)節(jié)過程B．新冠肺炎患者肺部毛細(xì)血管通透性增加會導(dǎo)致肺部組織水腫C．肺炎患者富含毛細(xì)血管的器官（如腎臟）也可能受CS損傷D．服用使免疫細(xì)胞增殖受阻的藥物（如類固醇）可緩解患者的癥狀5．下面是探究基因位于X、Y染色體的同源區(qū)段，還是只位于X染色體上的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路，請判斷下列說法中正確的是方法1：純合顯性雌性個體×純合隱性雄性個體→F1方法2：純合隱性雌性個體×純合顯性雄性個體→F1結(jié)論：①若子代雌雄全表現(xiàn)顯性性狀，則基因位于X、Y染色體的同源區(qū)段。②若子代雌性個體表現(xiàn)顯性性狀，雄性個體表現(xiàn)隱性性狀，則基因只位于X染色體上。③若子代雄性個體表現(xiàn)顯性性狀，則基因只位于X染色體上。④若子代雌性個體表現(xiàn)顯性性狀，則基因位于X、Y染色體的同源區(qū)段。A．“方法1＋結(jié)論①②”能夠完成上述探究任務(wù)B．“方法1＋結(jié)論③④”能夠完成上述探究任務(wù)C．“方法2＋結(jié)論①②”能夠完成上述探究任務(wù)D．“方法2＋結(jié)論③④”能夠完成上述探究任務(wù)6．科學(xué)家研究CO2濃度、光照強(qiáng)度和溫度對同一植物光合作用強(qiáng)度的影響，得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖。請據(jù)圖判斷下列敘述不正確的是

A．光照強(qiáng)度為a時，造成曲線Ⅱ和Ⅲ光合作用強(qiáng)度差異的原因是CO2濃度不同B．光照強(qiáng)度為b時，造成曲線Ⅰ和Ⅱ光合作用強(qiáng)度差異的原因是溫度的不同C．光照強(qiáng)度為a～c，曲線Ⅰ、Ⅲ光合作用強(qiáng)度隨光照強(qiáng)度升高而升高D．光照強(qiáng)度為a～b，曲線Ⅰ、Ⅱ光合作用強(qiáng)度隨光照強(qiáng)度升高而升高二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，單獨(dú)培養(yǎng)的大鼠神經(jīng)元能形成自突觸，（見圖甲），用電極刺激這些自突觸的神經(jīng)元的胞體可引起興奮，其電位變化結(jié)果如圖乙所示，請回答下列問題：（1）____________是神經(jīng)元產(chǎn)生和維持-68mV膜電位的主要原因，此時膜內(nèi)的Na+濃度比膜外的____________(填高或低)（2）胞體受到刺激后，電位變化出現(xiàn)第一個峰值的原因是：____________使興奮部位膜內(nèi)側(cè)陽離子濃度高于膜外側(cè)，此時產(chǎn)生的興奮以____________的形式沿著神經(jīng)纖維傳導(dǎo)至軸突側(cè)支的突觸小體，然后引起突觸小體內(nèi)的突觸小泡將神經(jīng)遞質(zhì)釋放至突觸間隙，神經(jīng)遞質(zhì)與突觸后膜上的受體特異性結(jié)合，引發(fā)____________，產(chǎn)生第二個峰值．（3）谷氨酸也是一種神經(jīng)遞質(zhì)，與突觸后膜受體結(jié)合后，能使帶正電的離子進(jìn)入神經(jīng)元，導(dǎo)致其興奮．利用谷氨酸受體抑制劑(結(jié)合上述實(shí)驗(yàn))，證明大鼠自突觸神經(jīng)元的神經(jīng)遞質(zhì)是谷氨酸．寫出實(shí)驗(yàn)思路并預(yù)測實(shí)驗(yàn)結(jié)果．實(shí)驗(yàn)思路：_____________________________________________________________________預(yù)測結(jié)果：_____________________________________________________________________8．（10分）基因打靶技術(shù)是建立在基因同源重組技術(shù)以及胚胎干細(xì)胞技術(shù)的基礎(chǔ)上而發(fā)展起來的一種分子生物學(xué)技術(shù)。請結(jié)合圖示回答下列有關(guān)問題：注：neor是新霉素抗性基因；tk基因的表達(dá)可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。（1）將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到__________上，構(gòu)建打靶載體（基因表達(dá)載體）。（2）打靶載體測序驗(yàn)證正確后，利用__________酶，將之線性化，以提高重組率。通過__________技術(shù)將打靶載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，這樣打靶載體和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有機(jī)會發(fā)生同源重組。（3）為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞，可在培養(yǎng)液中加入__________。最后還需要通過__________技術(shù)鑒定同源重組的細(xì)胞（去除靶基因），將這樣的細(xì)胞通過動物細(xì)胞培養(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細(xì)胞。其中，暫時不用的細(xì)胞進(jìn)行__________保存。（4）將打靶成功的細(xì)胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、__________的母鼠體內(nèi)，一段時間后對受體母鼠進(jìn)行妊娠檢查，確保其生下嵌合體小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內(nèi)同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的__________（填“體細(xì)胞”或“生殖細(xì)胞”）恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。9．（10分）下圖為基因工程操作步驟示意圖。請回答下列問題：（1）從基因文庫中提取的目的基因通過_____________技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。與細(xì)胞內(nèi)同類酶相比，該技術(shù)所利用的DNA聚合酶所具有的特點(diǎn)是____________。（2）在過程①中，需______________酶將已切開的載體DNA與目的基因結(jié)合成基因表達(dá)載體。載體DNA上必須要有標(biāo)記基因，標(biāo)記基因的作用是_______________________。過程②中若選用的受體細(xì)胞為大腸桿菌，一般需用Ca2+進(jìn)行處理，其目的是_______________________。（3）若將病毒外殼蛋白基因?qū)虢湍妇虿溉閯游锛?xì)胞中，使之表達(dá)出病毒外殼蛋白（抗原），經(jīng)純化后而制得的疫苗可用于生產(chǎn)基因工程疫苗，接種基因工程疫苗比接種滅活減毒的病毒疫苗更安全，從疫苗的結(jié)構(gòu)組成來看，其原因是_______________________________________________。10．（10分）類產(chǎn)堿假單胞菌殺蟲蛋白不易被蝗蟲體內(nèi)蛋白酶降解，是一種安全的細(xì)菌殺蟲蛋白。某研究小組將類產(chǎn)堿假單胞菌殺蟲蛋白基因（ppip）導(dǎo)入牧草中獲得了抗蝗蟲牧草品種。（1）ppip基因，還有一些抗病基因，抗除草劑基因等都是用來提高植物的_______能力。該研究小組檢查基因工程是否做成功的一步是_______________，其中目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是________。（2）下圖是該研究小組設(shè)計(jì)的T-DNA元件示意圖。①攜帶ppip的T-DNA導(dǎo)入植物細(xì)胞的方法是_____________；T-DNA發(fā)揮的功能是_____________________。②將被檢材料用含有底物（X-Gluc）的緩沖液浸泡，若組織細(xì)胞表達(dá)出GUS，該酶就可將X-Gluc水解生成藍(lán)色產(chǎn)物，從而使被檢材料顯藍(lán)色。如下圖所示。研究發(fā)現(xiàn)天然植物體內(nèi)無GUS，根據(jù)T-DNA元件示意圖，請思考gus基因（β-葡萄糖苷酸酶基因）在植物基因表達(dá)載體中作為___________；選取該基因的原理是____________________。11．（15分）大多數(shù)植物氣孔的開閉都遵循晝開夜閉的近似晝夜節(jié)律。但在干旱條件下，氣孔會以數(shù)十分鐘為周期進(jìn)行周期性的閉合，稱為“氣孔振蕩”。分析回答：（1）氣孔的晝開夜閉與葉片胞間CO2濃度的變化密切相關(guān)。白天，__________，導(dǎo)致胞間CO2濃度下降，氣孔張開。夜間氣孔關(guān)閉的原因是__________。（2）“氣孔振蕩”是植物對干旱條件的一種適應(yīng)性反應(yīng)，有利于植物生理活動的正常進(jìn)行。其原因是__________。（3）玉米的葉片直立，其上、下表面氣孔數(shù)目較為接近；向日葵葉片平展，其下表面的氣孔數(shù)量較多；有些水生植物，只在葉片上表面分布有氣孔。試運(yùn)用現(xiàn)代生物進(jìn)化理論解釋上述現(xiàn)象產(chǎn)生的原因：__________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項(xiàng)符合題目要求）1、B【解析】

考點(diǎn)是染色體的組成，考查從題干提取有效信息進(jìn)行加工分析得出正確結(jié)論的能力?！驹斀狻坑肈NA酶能破壞染色體的完整性，蛋白酶則不能破壞染色體的長度,說明DNA在染色體的結(jié)構(gòu)中的重要作用，DNA是染色體的基本結(jié)構(gòu)，但實(shí)驗(yàn)不能說明蛋白質(zhì)和DNA的空間位置關(guān)系，選B。2、D【解析】

1.胚胎干細(xì)胞簡稱ES細(xì)胞或者EK細(xì)胞。是由早期胚胎(原腸胚期之前)或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞。2.胚胎干細(xì)胞的特點(diǎn)：在形態(tài)上，表現(xiàn)為體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，即可以分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞；另外，體外培養(yǎng)條件下，ES細(xì)胞可以增殖而不發(fā)生分化?！驹斀狻緼、胚胎干細(xì)胞是一種未分化的細(xì)胞，具有發(fā)育的全能性和二倍體核型，A錯誤；B、從供體的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離胚胎干細(xì)胞，培養(yǎng)時需接種在飼養(yǎng)層細(xì)胞上，B錯誤；C、在動物體內(nèi)采集的卵細(xì)胞需要經(jīng)過培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂的中期，然后經(jīng)過顯微操作法處理去核，作為核移植的受體細(xì)胞，C錯誤；D、核移植技術(shù)需要借助精密的顯微操作儀和高效率的細(xì)胞融合法，D正確。故選D。3、A【解析】

生物膜的特定功能主要由膜蛋白決定，因此A正確；構(gòu)成細(xì)胞膜的脂質(zhì)有磷脂和少量的固醇，不含有脂肪，因此B錯誤；有氧呼吸的第一、二、三階段都會產(chǎn)生ATP，第一階段發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中，第二階段發(fā)生在線粒體基質(zhì)中，第三階段發(fā)生在線粒體內(nèi)膜；光合作用的光反作用階段發(fā)生在葉綠體類囊體薄膜上進(jìn)行，因此C錯誤；

核糖體不具膜結(jié)構(gòu)，因此D錯誤。答案選A.【點(diǎn)睛】本題考查細(xì)胞膜的物質(zhì)組成、結(jié)構(gòu)和功能，意在考查學(xué)生分析問題的能力?？疾閷W(xué)生對生物活動過程中有關(guān)內(nèi)在知識聯(lián)系進(jìn)行分析運(yùn)用的能力。4、A【解析】

反饋調(diào)節(jié)是指系統(tǒng)本身工作的效果，反過來又作為信息調(diào)節(jié)該系統(tǒng)的工作，這種方式叫反饋調(diào)節(jié)，受病毒侵染的免疫細(xì)胞會產(chǎn)生細(xì)胞因子，細(xì)胞因子繼續(xù)激活更多的免疫細(xì)胞產(chǎn)生更多的細(xì)胞因子，這種調(diào)節(jié)方式叫正反饋調(diào)節(jié)?！驹斀狻緼、根據(jù)題干信息“細(xì)胞因子會引起更多免疫細(xì)胞透過毛細(xì)血管并激活這些免疫細(xì)胞，被激活的免疫細(xì)胞則會產(chǎn)生更多的細(xì)胞因子”可知，新冠肺炎患者產(chǎn)生細(xì)胞因子風(fēng)暴（CS）是一個正反饋調(diào)節(jié)過程，A錯誤；B、毛細(xì)血管通透性增加，導(dǎo)致血漿滲透壓降低，引起肺部組織水腫，B正確；C、CS還會引起多種器官的衰竭可知肺炎患者富含毛細(xì)血管的器官（如腎臟）也可能受CS損傷，C正確；D、服用使免疫細(xì)胞增殖受阻的藥物，使免疫細(xì)胞產(chǎn)生較少的細(xì)胞因子，有利于患者癥狀的緩解，D正確。故選A。5、C【解析】

分析題意：方法1為正交，則方法2為反交，親本均為純合子，如果正反交結(jié)果一致，說明基因位于X、Y同源區(qū)段；若正反交結(jié)果不一致，則基因不在X、Y同源區(qū)段，在X染色體上?！驹斀狻糠椒?：純合顯性雌性與隱性純合雄性：

①若子代雌雄全表現(xiàn)為顯性性狀，則基因位于X、Y染色體的同源區(qū)段或僅位于X染色體；

②雄性個體表現(xiàn)不可能為隱性性狀，②結(jié)論錯誤；

③若子代雄性個體表現(xiàn)為顯性性狀，則基因可能位于X染色體上，也可能位于X、Y染色體的同源區(qū)段，③結(jié)論錯誤；

④若子代雌性個體表現(xiàn)為顯性性狀，則基因位于X、Y染色體的同源區(qū)段或僅位于X染色體，④結(jié)論錯誤。

因此，方法1和題中的4個結(jié)論均無法完成此探究實(shí)驗(yàn)；

方法2：純合隱性雌性與純合顯性雄性：

①若子代雌雄全表現(xiàn)為顯性性狀，則基因位于X、Y染色體的同源區(qū)段；

②若子代雌性個體表現(xiàn)為顯性性狀，雄性個體表現(xiàn)為隱性性狀，則基因只位于X染色體上，Y上沒有相關(guān)基因；

③若子代雄性個體表現(xiàn)為顯性性狀，則基因位于X、Y染色體的同源區(qū)段，③結(jié)論錯誤；

④若子代雌性個體表現(xiàn)為顯性性狀，則基因位于X、Y染色體的同源區(qū)段或僅位于X染色體，④結(jié)論錯誤。因此，方法2+結(jié)論①②能夠完成上述探究任務(wù)。

故選C。6、C【解析】

本題以反映實(shí)驗(yàn)結(jié)果的曲線圖為載體，考查學(xué)生對光照強(qiáng)度、溫度、CO2濃度對光合作用的影響的相關(guān)知識的識記和理解能力，以及獲取信息、分析問題的能力。【詳解】曲線Ⅱ和Ⅲ的自變量為CO2濃度不同，因此光照強(qiáng)度為a時，造成曲線Ⅱ和Ⅲ光合作用強(qiáng)度差異的原因是CO2濃度不同，A正確；曲線Ⅰ和Ⅱ的自變量為溫度不同，所以光照強(qiáng)度為b時，造成曲線Ⅰ和Ⅱ光合作用強(qiáng)度差異的原因是溫度的不同，B正確；光照強(qiáng)度為a～c，曲線Ⅲ的光合作用強(qiáng)度不再隨光照強(qiáng)度升高而升高，C錯誤；光照強(qiáng)度為a～b，曲線Ⅰ、Ⅱ光合作用強(qiáng)度隨光照強(qiáng)度升高而升高，D正確?！军c(diǎn)睛】圖中涉及自變量較多，可依題意分別明辨曲線Ⅰ和Ⅱ的自變量為溫度、曲線Ⅱ和Ⅲ的自變量為CO2濃度等。在此基礎(chǔ)上，對比分析曲線的變化趨勢并圍繞“光照強(qiáng)度、溫度、CO2濃度對光合作用的影響”的知識分析判斷各選項(xiàng)。二、綜合題：本大題共4小題7、K+外流低Na+內(nèi)流電信號（神經(jīng)沖動或局部電流）新的神經(jīng)沖動（突觸后膜電位變化）將單獨(dú)培養(yǎng)的大鼠自突觸神經(jīng)元隨機(jī)的分為A組和B組，用谷氨酸受體抑制劑處理A組神經(jīng)元，B組神經(jīng)元不作處理，用電極刺激兩組自突觸神經(jīng)元胞體，測量其電位變化A組神經(jīng)元第二次電位變化明顯小于B組神經(jīng)元的（A組神經(jīng)元不出現(xiàn)第二次電位變化）【解析】

神經(jīng)纖維未受到刺激時，K+外流，細(xì)胞膜內(nèi)外的電荷分布情況是外正內(nèi)負(fù)，當(dāng)某一部位受刺激時，神經(jīng)纖維膜對鈉離子通透性增加，Na+內(nèi)流，使得刺激點(diǎn)處膜兩側(cè)的電位表現(xiàn)為內(nèi)正外負(fù)，該部位與相鄰部位產(chǎn)生電位差而發(fā)生電荷移動，形成局部電流。突觸是由突觸前膜，突觸間隙和突觸后膜構(gòu)成的?！驹斀狻浚?）圖中-68mV電位是神經(jīng)細(xì)胞的靜息電位，K+外流是神經(jīng)元靜息電位的產(chǎn)生和維持的主要原因，此時膜內(nèi)Na+的濃度比膜外低。（2）胞體受刺激后，Na+內(nèi)流，使細(xì)胞膜內(nèi)陽離子的濃度高于膜外側(cè)，形成動作電位，電位變化出現(xiàn)第一個峰值。與相鄰部位形成電位差，從而形成局部電流，局部電流又刺激相近未興奮部位發(fā)生同樣的電位變化，依次將興奮以電信號形式沿著神經(jīng)纖維傳導(dǎo)下去。興奮傳至軸突側(cè)支的突觸小體，突觸小體內(nèi)的突觸小泡將神經(jīng)遞質(zhì)釋放到突觸間隙，與胞體膜（突觸后膜）上的特異性受體結(jié)合，引發(fā)新的神經(jīng)沖動，產(chǎn)生第二個峰值。（3）谷氨酸作為一種興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，正常情況下能使突觸后膜產(chǎn)生興奮。加入谷氨酸受體抑制劑后，谷氨酸沒法與突觸后膜受體結(jié)合，導(dǎo)致突觸后膜不產(chǎn)生興奮。所以用谷氨酸受體抑制劑處理大鼠自突觸神經(jīng)元，電極刺激胞體后，第二次電位變化明顯變小，甚至不出現(xiàn)第二次電位變化。實(shí)驗(yàn)思路和結(jié)果為：將單獨(dú)培養(yǎng)的大鼠自突觸神經(jīng)元隨機(jī)分為A組和B組，用谷氨酸受體抑制劑處理A組神經(jīng)元，B組神經(jīng)元不做處理，用電極刺激兩組自突觸神經(jīng)元胞體，測量其電位變化；預(yù)期A組神經(jīng)元的第二次電位變化明顯小于B組的。【點(diǎn)睛】本題考查神經(jīng)細(xì)胞膜電位變化的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生的識圖能力和判斷能力，運(yùn)用所學(xué)知識綜合分析問題的能力。8、載體（或質(zhì)粒）限制顯微注射新霉素和丙氧鳥苷DNA分子雜交液氮（或冷凍）生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情處理）生殖細(xì)胞【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）分析題圖可知，將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到載體（或質(zhì)粒）上，構(gòu)建打靶載體（基因表達(dá)載體）。（2）打靶載體測序驗(yàn)證正確后，利用限制酶，將之線性化，以提高重組率。通過顯微注射技術(shù)導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，這樣打靶載體與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有幾率發(fā)生同源重組。（3）neor是新霉素抗性基因，tk基因的表達(dá)可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡，因此為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞，可在培養(yǎng)液中加入新霉素和丙氧鳥苷。最后還需要通過DNA分子雜交技術(shù)鑒定同源重組的細(xì)胞（去除靶基因），將這樣的細(xì)胞通過動物細(xì)胞（或克?。┡囵B(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細(xì)胞。其中，暫時不用的細(xì)胞進(jìn)行液氮（或冷凍）保存。（4）將打靶成功的細(xì)胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情）的母鼠體內(nèi)，一段時間后對受體母鼠進(jìn)行妊娠檢查，確保其生下嵌合小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內(nèi)同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的生殖細(xì)胞恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。【點(diǎn)睛】本題考查基因工程的原理及技術(shù)以及胚胎工程的有關(guān)知識，重點(diǎn)考查基因工程的操作步驟，要求考生識記基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，識記胚胎工程的操作過程，屬于考綱識記層次的考查。9、PCR耐高溫DNA連接鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來（或篩選出含目的基因的受體細(xì)胞）使大腸桿菌處于容易吸收周圍環(huán)境DNA分子的感受態(tài)基因工程疫苗僅具有病毒外殼蛋白，不具有遺傳物質(zhì)，不會出現(xiàn)病毒增殖和感染【解析】

基因工程的基本步驟：1、目的基因的獲?。?、基因表達(dá)載體的構(gòu)建；3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；4、目的基因的檢測與鑒定。【詳解】（1）通常使用PCR技術(shù)對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。在PCR技術(shù)中應(yīng)用的關(guān)鍵酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶，其特點(diǎn)是耐高溫。（2）DNA連接酶能將已切開的載體DNA與目的基因連接起來形成磷酸二酯鍵；標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來；由于未處理的大腸桿菌吸收周圍環(huán)境DNA分子的能力較弱，所以常用Ca2+處理大腸桿菌，使大腸桿菌處于容易吸收周圍環(huán)境DNA分子的感受態(tài)。（3）基因工程疫苗不含有遺傳物質(zhì)，可以引發(fā)機(jī)體發(fā)生特異性免疫反應(yīng)形成抗體和記憶細(xì)胞，但由于其不增殖和感染人體，比常規(guī)疫苗安全性更高?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程的操作步驟和應(yīng)用的相關(guān)知識，旨在考查考生的理解能力。10、抗逆目的基因的檢測與鑒定檢測轉(zhuǎn)基因生物DNA上是否插入了目的基因農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將攜帶的ppip轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上標(biāo)記基因天然植物體內(nèi)無GUS，不能催化X-Gluc產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物；若目的基因成功導(dǎo)入受體細(xì)胞，與其相連的標(biāo)記基因表達(dá)的GUS可催化X-Gluc產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物。因此可以通過有無藍(lán)色產(chǎn)物來鑒定目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。【解析】

基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲?。涸嘶虿扇≈苯臃蛛x獲得，真核基因是人工合成，人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。第二步：基因表達(dá)載體的構(gòu)建第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞：最常用的方法是顯微注射技術(shù)。第四步：目的基因的檢測和表達(dá)?！驹斀狻浚?）ppip是一種殺蟲蛋白，使植株具有抗蟲的特性，和抗病基因，抗除草劑基因等都是用來提高植物的抗逆能力；基因工程是否成功的第一步是目