運動醫(yī)學(xué)-已翻譯42248中文

軟骨運動醫(yī)學(xué)研討會

–

運動醫(yī)學(xué)治療的新熱點佩德羅·吉蘭教授;博士整形外科研究小組,西班牙，馬德里，CEMTRO診所問題軟骨缺失:

組織修復(fù)軟骨軟骨缺失:組織修復(fù)軟骨損傷治療注意事項?

自我修復(fù)能力差?關(guān)節(jié)軟骨損傷治療適應(yīng)癥:?軟骨退化?

微骨折?骨軟骨鑲嵌?

骨軟骨移植?

同種軟骨移植組織工程定向到:替代物修復(fù)利用這些基礎(chǔ)領(lǐng)域的進步:

器官或損傷的組織化學(xué)、生物、物理計算機免疫

組織工程

我們怎樣去明確它?

........這并不簡單學(xué)科交叉

再生T.E.:-

盡量代償那些修復(fù)能力有限的器官-

用新生的組織來代替損傷的組織

組織工程

細胞治療19年用自體軟骨細胞移植到軟骨、損傷的軟骨（膝關(guān)節(jié)、踝關(guān)節(jié)、髖關(guān)節(jié)）465例臨床試驗和鞏固療法?

區(qū)別:–

臨床試驗

(新藥的臨床研究)–

鞏固療法：通過多年來的研究和患者使用的細胞療法，證明其是有效和安全的?

鞏固療法:–從皮膚角化細胞生產(chǎn)–角膜潰瘍治療使用角膜細胞–

同種軟骨移植到損傷的軟骨上細胞治療缺損軟骨：第一代自體軟骨細胞移植:細胞治療ACI自體軟骨移植

(ACI)?ACI第一次描述是在1994年

(Brittberg

et

al.,

NEngl

J

Med).?

ACI手術(shù)方法包括2個步驟:1st

階段:?

在人體低負重的健康區(qū)域穿刺軟骨?

軟骨細胞的分離?

單層軟骨細胞培養(yǎng)2nd

階段:

移植關(guān)節(jié)切開術(shù)缺損軟骨的準備獲取骨膜將骨膜固定在缺損區(qū)域纖維蛋白膠密封保護Wound

closureAUTOLOGOUS

CHONDROCYTE

IMPLANTATION（自體軟骨移植）軟骨移植

復(fù)查病理

研究

1999

Y

2004Normal

cartilageACI

(12

months)ACI

RK7/99

-

10/200010/98

–

Olympic

Games,

Sydney

2000

ACI152例

ACI

LK我們是否可以進一步改善ACI?

MACIICCAp4AIpcs?

細胞密度?

間充質(zhì)細胞?

避免第一步手術(shù)…….第二代生物材料的研發(fā)：使用載體來輸送所述細胞

（I型膜/Ⅲ型膠原）：組織工程MACI

(膜

ACI)細胞治療缺損軟骨：尸檢過程2.滑車溝:

微骨折1.滑車溝:

對照

SF 3.股骨內(nèi)側(cè)髁：

移植（MACI）組織學(xué)研究1

23

既往的結(jié)果:病理檢查間充質(zhì)細胞：微骨折

:長出來的新組織是纖維軟骨，并伴有些

年輕的成纖維細胞

軟骨移植

對照組(5

millions

/

1

million)

普通透明軟骨大部分新生細胞是透明軟骨新生的組織大部分都是纖維軟骨，

但有一些成熟成纖維細胞既往的結(jié)果:

基因表達?所有樣品表達蛋白多糖和I型和II型膠原?

聚集蛋白聚糖在所有樣本表達是相似的?

Ⅰ型膠原的表達能力排序:微骨折.

>

間充質(zhì)細胞.

>

1

百萬.軟骨細胞.

>

5

百萬.軟骨細胞.

>對照組?II型膠原表達能力排序

(透明軟骨標記):

對照組>5百萬.軟骨細胞.>1百萬.軟骨細胞.>間充質(zhì)細胞組.>微骨折.NormalGUILLEN

GARCíA,

P.:

“Reparación

del

cartílago

articular:

Injertos

osteocondrales,

cultivo

de

cartílagoarticular”.Revista

de

la

AsociaciónArgentina

de

Ortopedia

y

Traumatología.A?o

65.

ISSN

1515-1786

n.

3.

Pag.

228-2352000May,

2010MAY

2010Stem

cell

Research,(2011),

6,

238-240

Febrero

2011.細胞治療缺陷軟骨：通向未來的一步MACI的變型的發(fā)展旨在提高對每平方厘米膠原膜能接種的細胞的數(shù)量ICCGUILLEN

GARCIA,

P.:

"Injerto

de

menisco

y

CondrocitosAutólogos"Anales

de

la

Real

Academia

Nacional

de

Medicina.

XVIII

Sesión

Científica.Pag.

724-743.

2000GUILLEN

GARCíA,

P.:

“Reparación

del

cartílago

articular:

Injertos

osteocondrales,

cultivo

de

cartílago

articular”.Revista

de

la

AsociaciónArgentin

de

Ortopedia

y

Traumatología.

A?o

65.

ISSN

1515-1786

núme.

3.

Pag.

228-235

2000GUILLéN

GARCIA,

P.:

“Injerto

de

meniscos

y

condrocitos

autólogos”Editorial

MAPFRE,

S.A.

2001.

VI-43:

525-544.

軟骨移植技術(shù)?液體培養(yǎng)基?

再生透明組織類型?

骨膜是必需的?

70％的良好/優(yōu)秀ACI?膠原Ⅰ/Ⅲ膜

?

保留細胞

?

運輸細胞細胞的密度

?

1

百萬/

cm2?

關(guān)節(jié)鏡?

70％的良好/優(yōu)秀

MACI?膠原Ⅰ/Ⅲ膜?

細胞密度

?

5-8

百萬/

cm2?

關(guān)節(jié)鏡?

90%

的良好/優(yōu)秀

ICCMACI

ICCProf.

F.

Val

Bernal:

病理解剖學(xué)教授.桑坦德組織學(xué)橫截面示出的膠原網(wǎng)絡(luò)和軟骨細胞群填充的空間（HEX25）

低細胞密度

Prof.

P.

Cuevas:HospitalRamónyCajal.Madrid

組織學(xué)截面表現(xiàn)膠原網(wǎng)絡(luò)和軟骨填充

高細胞密度

Inner

surfacechondrocytes

collagen

fibersICC

Prof.

P.

Cuevas:

Ramón

y

Cajal

Hospital

.

Madrid

組織學(xué)截面顯示膠原網(wǎng)絡(luò)和軟骨細胞群填補了其空間MACI

(18

months)再次關(guān)節(jié)鏡–復(fù)查

普通軟骨

ICC

(20

months)同種軟骨移植第一例:

Instant

CemtroCell.

(ICC)髕骨缺陷臨床案例:

Instant

CemtroCell.

(ICC)出版：改善膜之間ECM功能:通過調(diào)控二腺苷四磷酸(Ap4A)

進一步激活MACIThe

application

of

the

dinucleotide

triggers

extracellular

matrixproduction.

This

effect

is

observed

after

the

third

day

of

itsadministration

the

maximal

effect

being

one

week

after

starting

thetreatment.Prof.

Pedro

Guillen

and

Prof.

Jesús

PintorUnidad

de

Investigación

Biomédica

Clínica

CEMTRO

y

Departamento

deBioquímica,

Universidad

Complutense

de

MadridMadrid,

2008我們發(fā)現(xiàn)當軟骨細胞用二腺苷Ap4A處理時，軟骨細胞就開始修飾它的生化過程和物理機能。2)

這是因為軟骨細胞膜上面的受體被該分子所激活.3)

Ap4A

在軟骨細胞上的應(yīng)用，使得在胞外基質(zhì)的產(chǎn)量

得到了提高。前言Extracellular

matrix(%

control)1300246810121416DaysAp4A

100

μM120110100

X50=

4.60

±

1.57

days

細胞外基質(zhì)定量

處理的

非處理ays用Ap4A處理15730Days對照組MACI細胞外基質(zhì)定量Extracellular

Matrix(%

control)2001801601401201000246810121416Days用Ap4A處理過

對照MACI細胞外基質(zhì)定量Ca?細胞外基質(zhì)

2+軟骨細胞如何這種物質(zhì)作用于MACI的軟骨細胞的假說

Ap4A

P2YER

CONCLUSIONS1.-

在一個MACI上平均就有21,000,000個細胞

(盡管并不是所有的都是移植的).2.-用Ap4A處理過的MACI就可以讓細胞外基質(zhì)

含量增加到150%。

3.-

這種個治療適合于術(shù)后需要快速康復(fù)的患者未來的細胞治療……….

重塑和

橫向分化?

從已經(jīng)成熟分化的細胞核再生出胚胎細胞?

Shinya

Yamanaka

(2012

Nobel

Prize)?

iPCs

(包括多能細胞)?

Reprogramming:

input

of

4

transcriptionfactors:

Oct4,

Sox2,

Kfl4

y

c-Myc?在動物（嚙齒動物）模型上取得了相關(guān)的成功?

umbilical

cord

cell

reprogramming

intostem

cells:

HQ

for

Regenerative

Medicine,Barcelona來自患者特定的iPS細胞：獲益和應(yīng)用

識別負責(zé)軟骨變性的分子

識別化合藥物預(yù)防軟骨變性

識別出可以防止軟骨變性又可以促進軟骨再生的microRNAs來自患者iPS細胞中化合物的篩選和疾病的建模的報告細胞系重塑iPSCs細胞分化軟骨細胞，

皮膚，

血液和

脂肪

組織等來自患者特定的iPS細胞：獲益和應(yīng)用Animals

as

reservoirs

for

human

organsNature

2015

May

21;521(7552):316-21.在早期胚胎發(fā)育進程中的相似性Ernst

Haeckel4周豬胚胎6周人體胚胎

?嵌合能力初期的

EpiSCs?

嚙齒動物

EpiSCs?靈長類動物

PSCs嵌合

Xeno-pluripotent

Human

PSCs?Na?ve

干細胞?

嚙齒動物另類的多能狀態(tài)?Wu

et

al.

Nature,

2014Na?ve

iPSCPrimed

iPSCF-class??Different

flavors

of

pluripotency

Region

Selective

iPSCs

Culture

conditions

that

conferinterspecies

chimeric

competency

to

human

iPSCs

內(nèi)胚層

中胚層外胚層Human

rsPSC-GFP

Guillen,

Izpisua

et

al.

Nature

2015??軟骨細胞培養(yǎng)對關(guān)節(jié)損傷的治療是一個新方向.

出現(xiàn)了一項新的技術(shù)對于治療這些疾病。盡管是損傷，關(guān)節(jié)組織還會繼續(xù)存在;但隨著年齡的增長，各種組織總會消失、凋亡、退化。?再生組織醫(yī)療變成現(xiàn)實，得益于偉大生物技術(shù)的進步。?分子和組織工程讓組織和器官變得不穩(wěn)定，這已經(jīng)是往事了“What’s

exciting

about

the

future...”

“...is

seeing

how

the

present

developes”A

pathological

cell

is,

today,

a

therapeuticopportunity

and

we

are

not

only

re-esteering

ittowards

normality

but

also

towards

being

a

DRUGProf.

Pedro

Guillén;

MD,

PhDI.

Guillén

VicenteJ.M.

López

Alcorocho

M.

Guillén

Vicente

E.

Ro