2023-2024學(xué)年湖南省株洲市炎陵縣高二下學(xué)期4月期中生物試題（解析版）

高級中學(xué)名校試卷PAGEPAGE2湖南省株洲市炎陵縣2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期4月期中試題考試時間：75分鐘；分值：100分一、單選題(每題2分，共24分）1.有關(guān)培養(yǎng)基配制原則的表述正確的是（）A.任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水以及無機(jī)鹽B.碳源和氮源必須具有一定比例，碳元素的含量最多，其次為氮元素C.有的培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求D.營養(yǎng)物質(zhì)的濃度越高越好〖答案〗C〖祥解〗人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)—培養(yǎng)基，用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。其中，不含凝固劑（如瓊脂）、呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，呈固體狀態(tài)的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入瓊脂后制成的瓊脂固體培養(yǎng)基，是實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基之一?！驹斘觥緼、培養(yǎng)基一般都含有碳源、氮源、無機(jī)鹽和水等營養(yǎng)物質(zhì)，而分離自生固氮菌的培養(yǎng)基中，不需要加入氮源，A錯誤；B、碳源和氮源必須具有一定比例，但碳元素的含量不一定最多，如自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基中不需要加入碳源，B錯誤；C、培養(yǎng)基在含有主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求，C正確；D、營養(yǎng)物質(zhì)的濃度過高可能會造成微生物因滲透失水而死亡，D錯誤。故選C。2.植物細(xì)胞工程包括植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交等技術(shù)，具有廣泛的應(yīng)用前景和實(shí)用價值。下列對這些操作或應(yīng)用的描述錯誤的是（）A.可用PEG誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合，再生出細(xì)胞壁是融合成功的標(biāo)志B.獲取植物原生質(zhì)體時，需在與細(xì)胞液濃度的相當(dāng)?shù)木彌_液中進(jìn)行C.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)去壁前，需對兩種植物細(xì)胞進(jìn)行滅菌處理，以防止雜菌污染D.植物培養(yǎng)基中常用的植物生長調(diào)節(jié)劑，一般可以分為生長素類、細(xì)胞分裂素類和赤霉素類〖答案〗C〖祥解〗植物組織培養(yǎng)技術(shù)：1、過程：離體的植物組織，器官或細(xì)胞（外植體）→愈傷組織→胚狀體→植株（新植體）。2、原理：植物細(xì)胞的全能性。3、條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長素和細(xì)胞分裂素）?！驹斘觥緼、植物細(xì)胞（或原生質(zhì)體）融合可用PEG進(jìn)行誘導(dǎo)，融合成功的標(biāo)志是再生出細(xì)胞壁，A正確；B、獲取植物原生質(zhì)體時，除使用纖維素酶和果膠酶外，還要在蔗糖濃度與細(xì)胞液濃度相當(dāng)?shù)木彌_液中進(jìn)行，以免細(xì)胞過度吸水或失水，B正確；C、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)去壁前，為了防止雜菌污染，進(jìn)行該操作前需對甲、乙植物細(xì)胞進(jìn)行消毒處理，C錯誤；C、植物生長調(diào)節(jié)劑在植物組織培養(yǎng)中具有極其重要的作用，根據(jù)其功能特點(diǎn)可分為生長素類、細(xì)胞分裂素類和赤霉素類，D正確。故選C。3.下列有關(guān)于細(xì)胞的敘述，錯誤的是（）A.干細(xì)胞是具有分裂和分化能力的細(xì)胞B.造血干細(xì)胞可定向誘導(dǎo)分化成機(jī)體所有種類的細(xì)胞C.胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)能夠維持不分化的狀態(tài)D.移植胚胎干細(xì)胞可使退化的組織得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能〖答案〗B〖祥解〗1、干細(xì)胞(StemCell)是一種未充分分化，尚不成熟的細(xì)胞，具有再生各種組織器官和人體的潛在功能，醫(yī)學(xué)界稱之為“萬用細(xì)胞”。干細(xì)胞是一類具有自我更新和分化潛能的細(xì)胞。它包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞。2、胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）。其特點(diǎn)是：具有胚胎細(xì)胞的特性，體積較小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物任何一種組織細(xì)胞；另一方面，在體外培養(yǎng)條件下，ES細(xì)胞可不斷增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可以進(jìn)行某些遺傳改造。【詳析】A、干細(xì)胞具有分裂和分化能力，A正確；B、造血干細(xì)胞可分化形成血細(xì)胞，胚胎干細(xì)胞在一定條件下可定向誘導(dǎo)分化成機(jī)體所有種類的細(xì)胞，B錯誤；C、胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上，或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，能夠維持不分化的狀態(tài)，C正確；D、當(dāng)身體某一類細(xì)胞功能退化時，可以通過誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞定向分化來及時修補(bǔ)，并恢復(fù)正常功能，D正確。故選B。4.人成體細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能專門化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)?？茖W(xué)家將人成體細(xì)胞在特定的化學(xué)小分子組合的作用下經(jīng)過“重編程”形成了多能干細(xì)胞，這種細(xì)胞稱為人CiPS細(xì)胞。下列說法錯誤的是（）A.特定的化學(xué)小分子組合可以誘發(fā)成體細(xì)胞基因突變實(shí)現(xiàn)“重編程”B.與從胚胎的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中獲取干細(xì)胞相比，該方法規(guī)避了倫理爭議C.人CiPS細(xì)胞再經(jīng)誘導(dǎo)后產(chǎn)生特定細(xì)胞，可以在新藥的測試中發(fā)揮重要作用D.利用病人自身的體細(xì)胞形成的CiPS細(xì)胞誘導(dǎo)后治療疾病，可以避免免疫排斥反應(yīng)〖答案〗A〖祥解〗多能干細(xì)胞：具有產(chǎn)生多種類型細(xì)胞的能力，但卻失去了發(fā)育成完整個體的能力，發(fā)育潛能受到一定的限制，如造血干細(xì)胞?！驹斘觥緼、人成體細(xì)胞誘發(fā)形成人CiPS細(xì)胞不是通過誘發(fā)基因突變實(shí)現(xiàn)的，A錯誤；B、該方法利用人成體細(xì)胞獲取多能干細(xì)胞，與從胚胎的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中獲取干細(xì)胞相比，規(guī)避了倫理爭議，B正確；C、人CiPS細(xì)胞是多能干細(xì)胞，可誘導(dǎo)形成特定細(xì)胞，在新藥的測試中發(fā)揮重要作用，C正確；D、自體移植不會引起免疫排斥問題，即利用病人自身的體細(xì)胞形成的CiPS細(xì)胞誘導(dǎo)后治療疾病，可以避免免疫排斥反應(yīng)，D正確。故選A。5.我國科學(xué)家利用基因編輯技術(shù)，獲得一只生物節(jié)律核心基因BMAL1敲除的獼猴。取其成纖維細(xì)胞與去核的卵母細(xì)胞融合，發(fā)育形成的早期胚胎植入代孕雌猴，獲得5只克隆猴，用于研究節(jié)律機(jī)制。以下敘述錯誤的是（）A.克隆猴基因組成差異小，作為實(shí)驗(yàn)動物便于研究B.可用滅活的病毒誘導(dǎo)去核卵母細(xì)胞和成纖維細(xì)胞融合C.受精卵經(jīng)基因編輯后形成的胚胎可發(fā)育為克隆猴D.克隆猴的獲得體現(xiàn)了動物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性〖答案〗C〖祥解〗動物體細(xì)胞核移植依據(jù)的原理是細(xì)胞的全能性。動物細(xì)胞的全能性隨著動物細(xì)胞分化程度的提高而逐漸受到抑制，全能性表達(dá)很難，但是動物的細(xì)胞核內(nèi)仍含有該種動物的全部遺傳基因，具有發(fā)育成完整個體的潛能，即動物的細(xì)胞核仍具有全能性?！驹斘觥緼、由于克隆猴基因組成差異小，用克隆猴作為實(shí)驗(yàn)動物，有利于使實(shí)驗(yàn)中的無關(guān)變量的控制，有利于增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的可信度，A正確；B、細(xì)胞融合的過程需要人工誘導(dǎo)，如聚乙二醇（PEG）融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法、電融合法等，可用滅活的病毒誘導(dǎo)去核卵母細(xì)胞和成纖維細(xì)胞融合，B正確；C、受精卵經(jīng)基因編輯后形成的胚胎發(fā)育成的個體不能叫做克隆猴，克隆猴是通過核移植技術(shù)后發(fā)育而成的，C錯誤；D、動物細(xì)胞核含有該物種的全套遺傳信息，克隆猴的獲得體現(xiàn)了動物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性，D正確。故選C。6.下列關(guān)于采用胚胎工程技術(shù)實(shí)現(xiàn)某良種肉用?？焖俜敝车臄⑹觯_的是（）A.采取激素注射等方法對良種母牛作超數(shù)排卵處理B.體外培養(yǎng)發(fā)育到原腸胚期的胚胎即可進(jìn)行移植C.使用免疫抑制劑以避免代孕牛對植入胚胎的排斥反應(yīng)D.利用胚胎分割技術(shù)，同卵多胎較同卵雙胎成功率更高〖答案〗A〖祥解〗胚胎移植的基本程序：對供體和受體的選擇和處理（同期發(fā)情處理，超數(shù)排卵處理）、配種或進(jìn)行人工授精、對胚胎的收集檢查培養(yǎng)或保存、進(jìn)行胚胎移植。所以在發(fā)情期給良種母牛注射激素，促進(jìn)母牛多排卵，這種處理屬于超數(shù)排卵處理?！驹斘觥坑么傩韵偌に貙α挤N奶牛進(jìn)行注射處理，可促使其超數(shù)排卵，A正確；進(jìn)行移植的胚胎是桑椹胚或囊胚，B錯誤；受體對移植的胚胎幾乎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，因此無需使用免疫抑制劑，C錯誤；利用胚胎分割技術(shù)，同卵雙胎較同卵多胎成功率更高，D錯誤。7.美國科學(xué)家在研究生長在墨西哥某地的野生玉米后發(fā)現(xiàn)，這種玉米含有包括蘇云金芽孢桿菌抗蟲毒蛋白基因在內(nèi)的轉(zhuǎn)基因作物的基因，下列有關(guān)敘述中正確的是（）A.轉(zhuǎn)基因作物的基因可傳播到野生植物中B.轉(zhuǎn)基因作物不可能對天然植物的遺傳多樣性構(gòu)成威脅C.為防止基因污染，應(yīng)當(dāng)禁止轉(zhuǎn)基因作物的研究D.自然雜交與轉(zhuǎn)基因過程沒有任何區(qū)別〖答案〗A〖祥解〗根據(jù)題意可知，轉(zhuǎn)基因作物的基因傳播到野生植物中，會對植物遺傳多樣性構(gòu)成威脅。自然雜交是通過受粉的方式實(shí)現(xiàn)基因重組，與轉(zhuǎn)基因技術(shù)中通過重組質(zhì)粒實(shí)現(xiàn)基因重組是有區(qū)別的。【詳析】A、轉(zhuǎn)基因作物可通過花粉散落到它的近親野生植物中，從而污染生物基因庫，A正確；B、轉(zhuǎn)基因植物可能會與野生植物雜交，造成基因污染，因而可能會對天然植物的遺傳多樣性構(gòu)成威脅，B錯誤；C、雖然轉(zhuǎn)基因生物存在危害，但我們應(yīng)理性地看待轉(zhuǎn)基因生物的研究，C錯誤；D、自然雜交是同種生物個體之間的基因交流，而轉(zhuǎn)基因是將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞的過程，即不同生物之間基因的交流，D錯誤。故選A。8.多種實(shí)驗(yàn)材料都可以用于DNA的粗提取與鑒定，用香蕉也可以取得較好的實(shí)驗(yàn)效果。下列敘述錯誤的是（）A.將粗提取的DNA加入2mol/L的NaCl溶液的目的是為了溶解DNAB.冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精可以溶解某些蛋白質(zhì)，得到粗提取的DNAC.向剪碎的香蕉果肉組織中加入蒸餾水并研磨，以釋放核DNAD.將DNA溶于NaCl溶液后加入現(xiàn)配的二苯胺試劑，沸水浴冷卻后會出現(xiàn)藍(lán)色〖答案〗C〖祥解〗根據(jù)DNA的溶解性提取DNA：（1）DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaC中的溶解度不同；（2）DNA不溶于酒精，但是某些蛋白質(zhì)則溶于酒精；（3）DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同?！驹斘觥緼、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液；將粗提取的DNA加入2mol/L的NaCl溶液中的目的是為了溶解DNA，A正確；B、DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)溶解于酒精，可用體積分?jǐn)?shù)為95%冷酒精溶解某些蛋白質(zhì)，析出DNA，獲得粗提取的DNA，B正確；C、香蕉果肉組織細(xì)胞有細(xì)胞壁保護(hù)，因此加蒸餾水不會破壞細(xì)胞，不能將DNA釋放出來，C錯誤；D、在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍(lán)色；將DNA溶于NaCl溶液后，加入現(xiàn)配的二苯胺試劑，沸水浴冷卻后出現(xiàn)藍(lán)色，D正確。故選C。9.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化其水解。將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入菊花體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.將幾丁質(zhì)酶基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上構(gòu)建表達(dá)載體B.可通過顯微注射法將農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花受體細(xì)胞C.可用PCR技術(shù)或DNA分子雜交檢測目的基因是否成功導(dǎo)入D.可用真菌接種實(shí)驗(yàn)檢測轉(zhuǎn)基因菊花對真菌的抗性程度〖答案〗B〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：1、目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。4、目的基因的檢測與鑒定：（1）分子水平上檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斘觥緼、Ti質(zhì)粒的T-DNA可以轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，根據(jù)這一特點(diǎn)，構(gòu)建表達(dá)載體時，應(yīng)該將目的基因幾丁質(zhì)酶基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，A正確；B、將目基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法，可通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花受體細(xì)胞，顯微注射法是用于將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞的方法，B錯誤；C、在基因工程技術(shù)中，在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素作標(biāo)記，以此作為探針，使探針與基因組DNA雜交，故可用PCR技術(shù)或DNA分子雜交技術(shù)檢測目的基因是否成功導(dǎo)入，C正確；D、轉(zhuǎn)基因植物接種相應(yīng)的真菌，觀察轉(zhuǎn)基因植物是否出現(xiàn)抗病性狀，據(jù)題幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入菊花體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力，故可用真菌接種實(shí)驗(yàn)檢測轉(zhuǎn)基因菊花對真菌的抗性程度，D正確。故選B。10.水稻胚乳含直鏈淀粉和支鏈淀粉，直鏈淀粉所占比例越小糯性越強(qiáng)?？蒲腥藛T將能表達(dá)出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉(zhuǎn)入水稻，實(shí)現(xiàn)了對直鏈淀粉合成酶基因(Wx基因)啟動子序列的定點(diǎn)編輯，從而獲得了三個突變品系。各品系WxmRNA量的檢測結(jié)果如下圖所示。下列分析錯誤的是（）A.該基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉(zhuǎn)入水稻，引起的變異是由于基因突變造成的B.Wx基因啟動子序列的改變可能影響RNA聚合酶與啟動子的識別和結(jié)合C.根據(jù)各品系WxmRNA量的檢測結(jié)果，可推測品系3的糯性最強(qiáng)D.與野生型相比，3個突變品系中直鏈淀粉合成酶的氨基酸序列發(fā)生改變〖答案〗D〖祥解〗根據(jù)題干信息“將能表達(dá)出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉(zhuǎn)入水稻，實(shí)現(xiàn)了對直鏈淀粉合成酶基因（Wx基因）啟動子序列的定點(diǎn)編輯，從而獲得了三個突變品系”，說明突變品系的獲得是由于啟動子發(fā)生改變，啟動子位于非編碼區(qū)，是RNA聚合酶結(jié)合的位點(diǎn)。根據(jù)圖中信息，品系3的WxRNA含量最低，說明其直鏈淀粉合成酶基因表達(dá)量最少?！驹斘觥緼、該基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉(zhuǎn)入水稻，實(shí)現(xiàn)了對直鏈淀粉合成酶基因(Wx基因)啟動子序列的定點(diǎn)編輯，使直鏈淀粉合成酶基因的堿基序列發(fā)生了改變，該變異屬于基因突變，A正確；B、啟動子是RNA聚合酶識別并結(jié)合的位點(diǎn)，如果啟動子序列改變將會影響RNA聚合酶與之結(jié)合和識別，進(jìn)而影響基因的轉(zhuǎn)錄水平，B正確；C、圖中品系3的Wx基因的mRNA的含量最少，那么合成的直鏈淀粉酶最少，因此該水稻胚乳中含的直鏈淀粉比例最小，糯性最強(qiáng)，C正確；D、在真核生物中，編碼蛋白質(zhì)的序列位于基因的編碼區(qū)，啟動子序列位于非編碼區(qū)，因此3個突變品系位于非編碼區(qū)的啟動子雖然改變，但不影響位于編碼區(qū)的編碼蛋白質(zhì)的序列，轉(zhuǎn)錄翻譯后得到的直鏈淀粉合成酶的氨基酸序列也不變，D錯誤。故選D。11.DNA瓊脂糖凝膠電泳的分子篩效應(yīng)是指作為支持介質(zhì)的瓊脂糖，具有網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，使大分子物質(zhì)在通過時受到較大阻力，借此分離不同大小的DNA片段。下列說法錯誤的是（）A.瓊脂糖凝膠電泳可用于分離、鑒定DNA分子的混合物B.雙鏈DNA分子片段長度越大，在瓊脂糖中的移動速率越大C.凝膠制備中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，用于分離后DNA的檢測D.凝膠中的DNA分子通過染色，可在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來〖答案〗B〖祥解〗1、凝膠色譜法（分配色譜法）：根據(jù)被分離物質(zhì)（如蛋白質(zhì)）相對分子質(zhì)量的大小，利用具有多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠的分子篩作用，來進(jìn)行分離。2、PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定。在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)，凝膠中的DNA分子通過染色，可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來?！驹斘觥緼、瓊脂糖凝膠電泳利用具有多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠的分子篩作用，來進(jìn)行分離，可用于分離、鑒定DNA分子的混合物，A正確；B、凝膠中DNA分子的遷移速率與DNA分子的大小有關(guān)，雙鏈DNA分子片段長度越大，在瓊脂糖中的移動速率越小，B錯誤；C、凝膠制備中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來，用于分離后DNA的檢測，C正確；D、DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)，凝膠中的DNA分子通過染色，可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來，D正確。故選B。12.下圖為單克隆抗體的制備流程示意圖。下列敘述正確的是（）A.甲是從已免疫的小鼠脾臟細(xì)胞中獲得的致敏T淋巴細(xì)胞B.①表示將骨髓瘤細(xì)胞去核后進(jìn)行細(xì)胞融合C.乙為融合細(xì)胞，同時具有細(xì)胞甲和骨髓瘤細(xì)胞的特性D.②表示篩選能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞〖答案〗D〖祥解〗1、單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。2、題中①表示細(xì)胞融合，②表示篩選過程?！驹斘觥緼、甲是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)B細(xì)胞，A錯誤；B、①是完整骨髓瘤細(xì)胞與免疫的B淋巴細(xì)胞融合的過程，B錯誤；C、融合細(xì)胞不一定同時具有細(xì)胞甲和骨髓瘤細(xì)胞的特性，也可能是瘤瘤細(xì)胞或B細(xì)胞，C錯誤；D、②是經(jīng)篩選獲得的能分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，D正確。故選D。二、不定向選擇題（全選對得4分，漏選得2分，錯選得0分）13.黃曲霉毒素在保存不當(dāng)?shù)拿棺兗Z油食品中含量較高，具有很強(qiáng)的致癌性。研究表明黃曲霉毒素能引起細(xì)胞中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體不斷脫落。科研人員用黃曲霉毒素偶聯(lián)抗原制備出單克隆抗體以檢測食品中黃曲霉毒素的含量。下列敘述正確的是（）A.當(dāng)人誤食黃曲霉毒素后，腸腺細(xì)胞可能發(fā)生消化酶的合成分泌減少B.可用電融合法、PEG法或滅活的病毒誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合C.細(xì)胞融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動性，雜交瘤細(xì)胞體外增殖體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性D.單克隆抗體用于檢測食品中黃曲霉毒素的原理是抗原－抗體雜交〖答案〗ABD〖祥解〗1、單克隆抗體是指由單個B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。2、單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可能大量制備。3、單克隆抗體的作用：①作為診斷試劑：（最廣泛的用途）具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的優(yōu)點(diǎn)。②用于治療疾病和運(yùn)載藥物：主要用于治療癌癥，可制成“生物導(dǎo)彈”?！驹斘觥緼、消化酶屬于分泌蛋白，在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的核糖體上合成，根據(jù)題干信息“研究表明黃曲霉毒素能引起細(xì)胞中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體不斷脫落”，會影響消化酶（分泌蛋白）的合成和分泌，A正確；B、誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的常用方法有PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等，可用以上方法誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合，獲得雜交瘤細(xì)胞，B正確；C、動、植物細(xì)胞融合都能體現(xiàn)細(xì)胞膜的流動性，雜交瘤細(xì)胞體外增殖并沒有形成新個體，不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，C錯誤；D、抗體與抗原結(jié)合具有特異性，單克隆抗體是化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體，能與黃曲霉毒素特異性結(jié)合，其原理是抗原-抗體雜交，D正確。故選ABD。14.Vero細(xì)胞系來源于非洲綠猴腎上皮細(xì)胞，具有無限分裂和貼壁生長的特性。將新冠病毒接種到Vero細(xì)胞后，經(jīng)Vero細(xì)胞培養(yǎng)、新冠病毒滅活及提純，可制成新冠病毒滅活疫苗。下列敘述錯誤的是（）A.Vero細(xì)胞可作為新冠病毒大量繁殖的“培養(yǎng)基”B.向Vero細(xì)胞培養(yǎng)液中加入適量干擾素可防止雜菌污染C.分瓶前需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的Vero細(xì)胞D.每傳代1次，培養(yǎng)瓶中的Vero細(xì)胞分裂1次〖答案〗BD〖祥解〗1、病毒必須寄生在活細(xì)胞內(nèi)，才能進(jìn)行正常的生命活動。2、抗生素可抗菌，干擾素可抗病毒。3、胰蛋白酶可使組織細(xì)胞分散成單個細(xì)胞?！驹斘觥緼、病毒必須寄生在活細(xì)胞內(nèi)，因此Vero細(xì)胞可作為新冠病毒大量繁殖的“培養(yǎng)基”，A正確；B、向Vero細(xì)胞培養(yǎng)液中加入適量抗生素可防止雜菌污染，而干擾素抗病毒，B錯誤；C、胰蛋白酶或膠原蛋白酶可使組織細(xì)胞分散成單個細(xì)胞，因此分瓶前需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的Vero細(xì)胞，以進(jìn)行傳代培養(yǎng)，C正確；D、當(dāng)細(xì)胞發(fā)生接觸抑制時需要進(jìn)行傳代培養(yǎng)，每傳代1次，培養(yǎng)瓶中Vero細(xì)胞分裂不止1次，D錯誤。故選BD。15.金黃色葡萄球菌是一種常見的病原菌，在血平板（完全培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長時，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色。某研究小組通過稀釋涂布平板法測定了某處土壤中金黃色葡萄球菌數(shù)量，相關(guān)說法正確的是（）A.從功能上分類，血平板屬于選擇培養(yǎng)基B.在制作血平板時需要在平板冷卻后加入血液，防止高溫破壞血細(xì)胞C.待涂布的菌液被培養(yǎng)基吸收后應(yīng)倒置培養(yǎng)，防止水分過度蒸發(fā)D.實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目高〖答案〗BC〖祥解〗1、培養(yǎng)基按功能分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基：①選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的不需要的微生物的生長，促進(jìn)所需要的微生物生長，培養(yǎng)、分離出特定的微生物。②鑒別培養(yǎng)基：根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，鑒別不同種類的微生物。3、接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體--菌落．【詳析】A、根據(jù)題干信息“金黃色葡萄球菌在血平板上生長時，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色”，因此血平板屬于鑒別培養(yǎng)基，A錯誤；B、為防止高溫破壞血細(xì)胞，在制作血平板時需要在平板冷卻后加入血液，B正確；C、涂布后的平板待菌液被培養(yǎng)基吸收后應(yīng)倒置培養(yǎng)，防止水分過度蒸發(fā)，C正確；D、由于兩個或多個菌落連在一起形成一個菌落，所以統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)比活菌數(shù)目低，D錯誤。故選BC。16.高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者從熱泉中篩選高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖1所示。將得到的菌懸液轉(zhuǎn)接于同時含有葡萄糖和淀粉作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，看到如下圖2所示情況。下列選項(xiàng)正確的是（）A.過程①②合稱為稀釋涂布平板法 B.甲乙試管中的液體均為選擇培養(yǎng)基C.Ⅱ號培養(yǎng)基上的接種方法為平板劃線法 D.圖2中周圍不顯藍(lán)色的菌落含有所需菌種〖答案〗ACD〖祥解〗接種微生物的方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法；稀釋涂布線法：逐步稀釋菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)；平板劃線法由接種環(huán)沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。【詳析】A、根據(jù)I號培養(yǎng)基上菌落分布均勻，可知①②過程為稀釋涂布平板法，A正確；B、甲乙試管中的液體是用于樣品稀釋，應(yīng)為無菌水，B錯誤；C、由Ⅱ號培養(yǎng)基上上的劃線區(qū)域可知從I號培養(yǎng)基上挑選的菌落進(jìn)行接種的方法是平板劃線法，C正確；D、淀粉與碘液反應(yīng)呈藍(lán)色，但如果淀粉分解菌中的淀粉酶將淀粉水解后就不能呈藍(lán)色，因此周圍不顯藍(lán)色的菌落含有所需菌種，D正確。故選ACD。三、非選擇題17.研究深海獨(dú)特的生態(tài)環(huán)境對于開發(fā)海洋資源具有重要意義。近期在“科學(xué)號”考察船對中國南?？瓶贾?，中國科學(xué)家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉積物樣品，分離、鑒定得到新的微生物菌株并進(jìn)一步研究了其生物學(xué)特性?；卮鹣铝袉栴}：（1）研究者先制備富集培養(yǎng)基，然后采用________________法滅菌，冷卻后再接入沉積物樣品，28℃厭氧培養(yǎng)一段時間后，獲得了含擬桿菌的混合培養(yǎng)物，為了獲得純種培養(yǎng)物，除了稀釋涂布平板法，還可采用________________法。據(jù)圖分析，擬桿菌新菌株在以________________為碳源時生長狀況最好。（2）研究發(fā)現(xiàn)，將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍有很多微生物不能被分離篩選出來，推測其原因可能是________________。（答一點(diǎn)即可）（3）藻類細(xì)胞解體后的難降解多糖物質(zhì)，通常會聚集形成碎屑沉降到深海底部。從生態(tài)系統(tǒng)組成成分的角度考慮，擬桿菌對深海生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)的作用可能是________________。（4）深海冷泉環(huán)境特殊，推測此環(huán)境下生存的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其特性可能還有________________?！即鸢浮剑?）①.高壓蒸汽滅菌②.平板劃線③.纖維素（2）某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物質(zhì)才能生存（或需要在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活）（3）擬桿菌作為分解者，將沉降到深海底部的難降解多糖物質(zhì)分解為無機(jī)物，歸還到無機(jī)環(huán)境中，有利于碳循環(huán)的順利進(jìn)行（4）耐低溫〖祥解〗進(jìn)行微生物純種培養(yǎng)物時，人們需要按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求配制培養(yǎng)基；還需要防止雜菌污染，無菌技術(shù)主要包括消毒和滅菌。獲得微生物純培養(yǎng)物的常用方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。（1）培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。可以采用稀釋涂布平板法或平板劃線法，將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)得到單菌落，從而獲得純凈培養(yǎng)物。分析圖12可知，在以纖維素為碳源的培養(yǎng)基中，細(xì)胞數(shù)量最多，可推知擬桿菌新菌株在以纖維素為碳源時生長狀況最好。（2）深海冷泉中可能存在某些微生物，只有利用冷泉中的特有物質(zhì)才能生存（或需要在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活），故將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍可能有很多微生物不能被分離篩選出來。（3）擬桿菌為異養(yǎng)生物，作為該生態(tài)系統(tǒng)的分解者，能將沉降到深海底部的難降解多糖物質(zhì)分解為無機(jī)物，歸還到無機(jī)環(huán)境中，有利于碳循環(huán)的順利進(jìn)行。（4）深海冷泉溫度較低，故生活在其中的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，應(yīng)具有耐低溫的特性，才能高效降解多糖，保證擬桿菌的正常生命活動所需。18.某研究人員設(shè)計(jì)了下列技術(shù)路線，以期獲得甘藍(lán)和蘿卜體細(xì)胞雜交植株。請回答下列問題：（1）制備原生質(zhì)體時，常用兩種酶處理，分別是____________________。誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是____________________。原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是_________________。圖中X是____________________，除了被直接誘導(dǎo)出芽生根外，還可以通過形成人工種子獲得再生植株。（2）為誘導(dǎo)融合體產(chǎn)生不定芽，通常應(yīng)在培養(yǎng)基中加入兩類植物激素，其中起主要作用的是____________________。（3）若想獲得抗鹽植株，可選用融合原生質(zhì)體作為人工誘變的材料，原因是____________________，且需在含較高濃度的NaCl培養(yǎng)基中篩選?！即鸢浮剑?）纖維素酶和果膠酶PEG（聚乙二醇）雜種細(xì)胞再生成細(xì)胞壁愈傷組織（2）細(xì)胞分裂素（3）具有分裂分化能力，突變頻率高，融合原生質(zhì)體包含了兩個物種的全部遺傳信息，且具有全能性〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)。（1）誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括離心、振動、電刺激等．化學(xué)法一般是用聚乙二醇（PEG）作為誘導(dǎo)劑。（2）細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是新的細(xì)胞壁的生成。（3）植物體細(xì)胞雜交的終點(diǎn)是培育成雜種植株，而不是形成雜種細(xì)胞就結(jié)束。（4）雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)?！驹斘觥浚?）植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，所以制備原生質(zhì)體，需要用纖維素酶和果膠酶將細(xì)胞壁去除，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是PEG（聚乙二醇）。原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是雜種細(xì)胞再次生成細(xì)胞壁；圖中X經(jīng)過離體培養(yǎng)，可以形成試管苗，所以X是愈傷組織。（2）植物組織培養(yǎng)中常加入植物激素，主要是細(xì)胞分裂素和生長素，當(dāng)生長素和細(xì)胞分裂素的比值低時，有利于芽的形成，所以起主要作用的是細(xì)胞分裂素。（3）由于融合的原生質(zhì)體具有分裂分化能力，突變頻率高，而且融合的原生質(zhì)體包含了兩個物種的全部遺傳信息，且具有全能性，所以可選用融合原生質(zhì)體作為人工誘變的材料。19.胚胎干細(xì)胞必須從胚胎中獲取，但這涉及倫理問題，因而限制了它在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。科學(xué)家通過體外誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞，獲得了類似于胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞，稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（簡稱iPS細(xì)胞）。因?yàn)檎T導(dǎo)過程無須破壞胚胎，而且iPS細(xì)胞可來源于病人自身的體細(xì)胞，因此iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞。如圖為iPS細(xì)胞的獲得及用其培育不同種細(xì)胞的示意圖（c-Myc、Klf4、Sox2和Oct3/4等基因與細(xì)胞的脫分化有關(guān)）?；卮鹣铝袉栴}：（1）在對成纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時，常用胰蛋白酶處理使之分散成單個細(xì)胞，這說明細(xì)胞間的物質(zhì)為_____，_____（填“能”或“不能”）用胃蛋白酶處理成纖維細(xì)胞，原因是_____。（2）在培養(yǎng)iPS細(xì)胞的過程中，培養(yǎng)基中應(yīng)含有細(xì)胞所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)，并定期更換培養(yǎng)液。定期更換培養(yǎng)液的目的是_____。（3）過程③④為iPS細(xì)胞提供的條件不同，分化得到的細(xì)胞不同，可知細(xì)胞分化是_____的結(jié)果。若iPS細(xì)胞來源于病人自身體細(xì)胞的誘導(dǎo)，再將其分化出的細(xì)胞移入患者體內(nèi)的優(yōu)勢是_____。（4）如果誘導(dǎo)iPS細(xì)胞定向分化為原始生殖細(xì)胞，該技術(shù)可能的應(yīng)用是_____?！即鸢浮剑?）①.蛋白質(zhì)②.不能③.多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7．2～7．4，胃蛋白酶在此環(huán)境中失活變性（2）清除代謝物﹐防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害（3）①.基因選擇性表達(dá)②.避免了免疫排斥問題（4）解決不育問題〖祥解〗1、細(xì)胞分化：在個體發(fā)育中，相同細(xì)胞的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程。細(xì)胞分化過程遺傳物質(zhì)不變，只是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果。2、多能干細(xì)胞是一類具有自我更新、自我復(fù)制能力的多潛能細(xì)胞。在一定條件下，它可以分化成多種APSC多能細(xì)胞，多能干細(xì)胞具有分化出多種細(xì)胞組織的潛能，但失去了發(fā)育成完整個體的能力，發(fā)育潛能受到一定的限制。3、動物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。（1）用胰蛋白酶分散細(xì)胞，說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。胃蛋白酶作用的適宜pH約為2，當(dāng)pH大于6時，胃蛋白酶就會失去活性。胰蛋白酶作用的適宜環(huán)境pH也為7.2～8.4，多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH也為7.2～7.4，胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性，而胰蛋白酶在此環(huán)境中活性較高，因此胰蛋白酶適宜用于細(xì)胞培養(yǎng)。（2）定期更換培養(yǎng)液的目的是清除代謝廢物﹐防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害。（3）細(xì)胞分化是基因的選擇性表達(dá)的結(jié)果，若iPS細(xì)胞來源于病人自身體細(xì)胞的誘導(dǎo)，再將其分化出的細(xì)胞移入患者體內(nèi)，由于自體細(xì)胞組織相容性抗原相同，故可以避免發(fā)生免疫排斥。（4）如果誘導(dǎo)iPS細(xì)胞定向分化為原始生殖細(xì)胞，可以用該技術(shù)解決不育問題。20.2020年8月16日，由我國軍事醫(yī)學(xué)研究院陳薇院士團(tuán)隊(duì)及康希諾生物聯(lián)合申報(bào)的腺病毒載體新冠疫苗被授予專利權(quán)，是我國首個新冠疫苗專利。全面接種新冠疫苗，建立免疫屏障，可有效防止新冠病毒大規(guī)模傳染。（1）新冠病毒是一種RNA病毒，通過其表面的S蛋白與宿主細(xì)胞膜表面ACE2受體結(jié)合而完成感染。研制疫苗時，通過RT－PCR（反轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）獲取S蛋白基因所需要的酶是______________________________________。據(jù)圖1分析，選擇的引物是________，其作用是______________________。（2）PCR的產(chǎn)物一般通過電泳來鑒定，結(jié)果如圖2所示。1號泳道為標(biāo)準(zhǔn)（Marker），2號泳道為陽性對照（提純的S蛋白基因片段），3號泳道為實(shí)驗(yàn)組。3號泳道的雜帶出現(xiàn)的原因一般有______________________（至少答出兩點(diǎn)）。（3）腺病毒是一種DNA病毒，基因組中的E1區(qū)蛋白與腺病毒的復(fù)制有關(guān)，對宿主細(xì)胞的毒性很強(qiáng)?？蒲兄袑⑷コ鼸1基因構(gòu)建的復(fù)制缺陷型腺病毒作為運(yùn)載S蛋白基因的載體，經(jīng)過改造后的腺病毒應(yīng)該具備的特點(diǎn)有_______________（至少答出兩點(diǎn)）。試說明科研中選用復(fù)制缺陷型腺病毒作為載體制備新冠疫苗的原因是_________________?！即鸢浮剑?）①.逆轉(zhuǎn)錄酶、TaqDNA聚合酶②.Ⅱ、Ⅲ③.使TaqDNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸（2）模板受到污染；引物的特異性不強(qiáng)；復(fù)性溫度偏低（3）①.能夠侵染宿主細(xì)胞；具有多個限制酶酶切位點(diǎn)；不能復(fù)制②.避免人體因重組腺病毒增殖而感染，進(jìn)而提高疫苗的安全性〖祥解〗疫苗研制已經(jīng)發(fā)展了三代：第一代疫苗指的是滅活疫苗和減毒活疫苗，通過體外培養(yǎng)病毒，然后用滅活的病毒刺激人體產(chǎn)生抗體，它是使用最為廣泛的傳統(tǒng)疫苗；第二代疫苗又稱為亞單位疫苗，是通過基因工程原理獲得的具有免疫活性的病原特異性結(jié)構(gòu)蛋白，刺激人體產(chǎn)生抗體；第三代疫苗就是核酸疫苗，又稱基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是將編碼某一抗原蛋白的基因作為疫苗，注射到人體中，通過正常的人體生理活動產(chǎn)生抗原蛋白，誘導(dǎo)機(jī)體持續(xù)作出免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體。（1）通過RT-PCR（反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）獲取S蛋白基因，需要將RNA逆轉(zhuǎn)錄形成DNA，因此需要逆轉(zhuǎn)錄酶、PCR擴(kuò)增DNA時需要TaqDNA聚合酶。由于DNA子鏈從5’端向3’端延伸，引物需要互補(bǔ)在模板鏈的3’端，而-OH端屬于3’端，則據(jù)圖1分析，選擇的引物是Ⅱ、Ⅲ，引物可以使Taq酶能夠從引物的3＇端開始連接脫氧核苷酸。（2）標(biāo)準(zhǔn)（Marker）的實(shí)質(zhì)為不同已知長度的DNA片段混合物，若實(shí)驗(yàn)的模板受到污染、引物的特異性不強(qiáng)、復(fù)性溫度偏低，則3號泳道會出現(xiàn)雜帶。（3）經(jīng)過改造后的腺病毒應(yīng)該具備能夠侵染宿主細(xì)胞、具有多個限制酶切位點(diǎn)、不能復(fù)制等特點(diǎn)。疫苗制備中選取復(fù)制缺陷型腺病毒作為載體可以防止病毒在人體內(nèi)進(jìn)行增殖，進(jìn)而提高疫苗的安全性。21.脂肪酶在食品工業(yè)中有著廣泛應(yīng)用，食品生產(chǎn)常需要在高溫條件下進(jìn)行，天然脂肪酶難以滿足生產(chǎn)需求?？茖W(xué)家對已知氨基酸序列的脂肪酶進(jìn)行改造，獲得了耐高溫的脂肪酶，提高了食品工業(yè)的生產(chǎn)效率?；卮鹣铝袉栴}。（1）根據(jù)耐高溫脂肪酶的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，推測其氨基酸序列，然后重新設(shè)計(jì)新脂肪酶的基因序列，獲得耐高溫的脂肪酶的技術(shù)稱為___。一般來說，新的脂肪酶基因脫氧核苷酸序列會有多種可能，其原因是__。（2）在設(shè)計(jì)出耐高溫的脂肪酶基因后，對其進(jìn)行PCR擴(kuò)增的過程包括_____、復(fù)性和延伸。延伸過程中由于DNA聚合酶的特性，子鏈延伸的方向?yàn)開_______。（3）利用質(zhì)粒將改造后的耐高溫脂肪酶基因?qū)氪竽c桿菌，構(gòu)建基因工程菌甲，若要檢測工程菌甲中的耐高溫脂肪酶基因是否成功表達(dá)，則需利用到___雜交技術(shù)，若出現(xiàn)雜交帶，則說明基因能在工程菌內(nèi)正常表達(dá)。（4）利用工程菌甲生產(chǎn)耐高溫脂肪酶的過程中，傳代多次后，生產(chǎn)條件未變，但某子代菌株不再產(chǎn)生耐高溫脂肪酶。分析可能的原因是___(答出兩點(diǎn)即可)?！即鸢浮剑?）①.蛋白質(zhì)工程②.密碼子的簡并性（2）①.變性②.5'端→3'端（3）抗原-抗體（4）耐高溫脂肪酶基因突變、缺失或丟失；工程菌甲在分裂過程中質(zhì)粒丟失，未遺傳給下一代〖祥解〗題干信息：科學(xué)家對已知氨基酸序列的脂肪酶進(jìn)行改造，獲得耐高溫的脂肪酶，由此可知該過程屬于蛋白質(zhì)工程。蛋白質(zhì)工程流程：首先要建立蛋白質(zhì)功能與結(jié)構(gòu)的聯(lián)系，然后依據(jù)所需蛋白質(zhì)的功能，設(shè)計(jì)改造天然蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，推測出其氨基酸的序列，并根據(jù)“中心法則”逆推出基因的核苷酸序列，進(jìn)而利用基因工程技術(shù)改變DNA上特定位點(diǎn)的核苷酸序列，最終將改造了的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后進(jìn)行表達(dá)?？梢?，蛋白質(zhì)工程是通過設(shè)計(jì)和改造編碼蛋白質(zhì)的基因獲得特定功能的蛋白質(zhì)。（1）蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過改造或合成基因，來改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)或者制造一種新的蛋白質(zhì)的過程，因此題干獲得耐高溫的脂肪酶的技術(shù)稱蛋白質(zhì)工程。由于密碼子具有簡并性，所以新的脂肪酶基因脫氧核苷酸序列會有多種可能。（2）目的基因通過PCR擴(kuò)增，其過程包括變性，復(fù)性和延伸三個步驟；由于DNA聚合酶只能將脫氧核苷酸連在子鏈的3'端，故子鏈的延伸方向?yàn)?'→3'。（3）基因表達(dá)的產(chǎn)物為蛋白質(zhì)，檢測蛋白質(zhì)的方法為抗原-抗體雜交。（4）利用工程菌甲生產(chǎn)耐高溫脂肪酶的過程中，傳代多次后，生產(chǎn)條件未變，但某子代菌株不再產(chǎn)生耐高溫脂肪酶，說明該菌種可能沒有該基因，因此子代菌株不再產(chǎn)生耐高溫脂肪酶的原因可能是耐高溫脂肪酶基因突變、缺失或丟失或工程菌甲在分裂過程中質(zhì)粒丟失，未遺傳給下一代。湖南省株洲市炎陵縣2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期4月期中試題考試時間：75分鐘；分值：100分一、單選題(每題2分，共24分）1.有關(guān)培養(yǎng)基配制原則的表述正確的是（）A.任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水以及無機(jī)鹽B.碳源和氮源必須具有一定比例，碳元素的含量最多，其次為氮元素C.有的培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求D.營養(yǎng)物質(zhì)的濃度越高越好〖答案〗C〖祥解〗人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)—培養(yǎng)基，用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。其中，不含凝固劑（如瓊脂）、呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，呈固體狀態(tài)的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入瓊脂后制成的瓊脂固體培養(yǎng)基，是實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基之一?！驹斘觥緼、培養(yǎng)基一般都含有碳源、氮源、無機(jī)鹽和水等營養(yǎng)物質(zhì)，而分離自生固氮菌的培養(yǎng)基中，不需要加入氮源，A錯誤；B、碳源和氮源必須具有一定比例，但碳元素的含量不一定最多，如自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基中不需要加入碳源，B錯誤；C、培養(yǎng)基在含有主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求，C正確；D、營養(yǎng)物質(zhì)的濃度過高可能會造成微生物因滲透失水而死亡，D錯誤。故選C。2.植物細(xì)胞工程包括植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交等技術(shù)，具有廣泛的應(yīng)用前景和實(shí)用價值。下列對這些操作或應(yīng)用的描述錯誤的是（）A.可用PEG誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合，再生出細(xì)胞壁是融合成功的標(biāo)志B.獲取植物原生質(zhì)體時，需在與細(xì)胞液濃度的相當(dāng)?shù)木彌_液中進(jìn)行C.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)去壁前，需對兩種植物細(xì)胞進(jìn)行滅菌處理，以防止雜菌污染D.植物培養(yǎng)基中常用的植物生長調(diào)節(jié)劑，一般可以分為生長素類、細(xì)胞分裂素類和赤霉素類〖答案〗C〖祥解〗植物組織培養(yǎng)技術(shù)：1、過程：離體的植物組織，器官或細(xì)胞（外植體）→愈傷組織→胚狀體→植株（新植體）。2、原理：植物細(xì)胞的全能性。3、條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長素和細(xì)胞分裂素）?！驹斘觥緼、植物細(xì)胞（或原生質(zhì)體）融合可用PEG進(jìn)行誘導(dǎo)，融合成功的標(biāo)志是再生出細(xì)胞壁，A正確；B、獲取植物原生質(zhì)體時，除使用纖維素酶和果膠酶外，還要在蔗糖濃度與細(xì)胞液濃度相當(dāng)?shù)木彌_液中進(jìn)行，以免細(xì)胞過度吸水或失水，B正確；C、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)去壁前，為了防止雜菌污染，進(jìn)行該操作前需對甲、乙植物細(xì)胞進(jìn)行消毒處理，C錯誤；C、植物生長調(diào)節(jié)劑在植物組織培養(yǎng)中具有極其重要的作用，根據(jù)其功能特點(diǎn)可分為生長素類、細(xì)胞分裂素類和赤霉素類，D正確。故選C。3.下列有關(guān)于細(xì)胞的敘述，錯誤的是（）A.干細(xì)胞是具有分裂和分化能力的細(xì)胞B.造血干細(xì)胞可定向誘導(dǎo)分化成機(jī)體所有種類的細(xì)胞C.胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)能夠維持不分化的狀態(tài)D.移植胚胎干細(xì)胞可使退化的組織得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能〖答案〗B〖祥解〗1、干細(xì)胞(StemCell)是一種未充分分化，尚不成熟的細(xì)胞，具有再生各種組織器官和人體的潛在功能，醫(yī)學(xué)界稱之為“萬用細(xì)胞”。干細(xì)胞是一類具有自我更新和分化潛能的細(xì)胞。它包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞。2、胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）。其特點(diǎn)是：具有胚胎細(xì)胞的特性，體積較小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物任何一種組織細(xì)胞；另一方面，在體外培養(yǎng)條件下，ES細(xì)胞可不斷增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可以進(jìn)行某些遺傳改造?！驹斘觥緼、干細(xì)胞具有分裂和分化能力，A正確；B、造血干細(xì)胞可分化形成血細(xì)胞，胚胎干細(xì)胞在一定條件下可定向誘導(dǎo)分化成機(jī)體所有種類的細(xì)胞，B錯誤；C、胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上，或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，能夠維持不分化的狀態(tài)，C正確；D、當(dāng)身體某一類細(xì)胞功能退化時，可以通過誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞定向分化來及時修補(bǔ)，并恢復(fù)正常功能，D正確。故選B。4.人成體細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能專門化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)?？茖W(xué)家將人成體細(xì)胞在特定的化學(xué)小分子組合的作用下經(jīng)過“重編程”形成了多能干細(xì)胞，這種細(xì)胞稱為人CiPS細(xì)胞。下列說法錯誤的是（）A.特定的化學(xué)小分子組合可以誘發(fā)成體細(xì)胞基因突變實(shí)現(xiàn)“重編程”B.與從胚胎的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中獲取干細(xì)胞相比，該方法規(guī)避了倫理爭議C.人CiPS細(xì)胞再經(jīng)誘導(dǎo)后產(chǎn)生特定細(xì)胞，可以在新藥的測試中發(fā)揮重要作用D.利用病人自身的體細(xì)胞形成的CiPS細(xì)胞誘導(dǎo)后治療疾病，可以避免免疫排斥反應(yīng)〖答案〗A〖祥解〗多能干細(xì)胞：具有產(chǎn)生多種類型細(xì)胞的能力，但卻失去了發(fā)育成完整個體的能力，發(fā)育潛能受到一定的限制，如造血干細(xì)胞。【詳析】A、人成體細(xì)胞誘發(fā)形成人CiPS細(xì)胞不是通過誘發(fā)基因突變實(shí)現(xiàn)的，A錯誤；B、該方法利用人成體細(xì)胞獲取多能干細(xì)胞，與從胚胎的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中獲取干細(xì)胞相比，規(guī)避了倫理爭議，B正確；C、人CiPS細(xì)胞是多能干細(xì)胞，可誘導(dǎo)形成特定細(xì)胞，在新藥的測試中發(fā)揮重要作用，C正確；D、自體移植不會引起免疫排斥問題，即利用病人自身的體細(xì)胞形成的CiPS細(xì)胞誘導(dǎo)后治療疾病，可以避免免疫排斥反應(yīng)，D正確。故選A。5.我國科學(xué)家利用基因編輯技術(shù)，獲得一只生物節(jié)律核心基因BMAL1敲除的獼猴。取其成纖維細(xì)胞與去核的卵母細(xì)胞融合，發(fā)育形成的早期胚胎植入代孕雌猴，獲得5只克隆猴，用于研究節(jié)律機(jī)制。以下敘述錯誤的是（）A.克隆猴基因組成差異小，作為實(shí)驗(yàn)動物便于研究B.可用滅活的病毒誘導(dǎo)去核卵母細(xì)胞和成纖維細(xì)胞融合C.受精卵經(jīng)基因編輯后形成的胚胎可發(fā)育為克隆猴D.克隆猴的獲得體現(xiàn)了動物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性〖答案〗C〖祥解〗動物體細(xì)胞核移植依據(jù)的原理是細(xì)胞的全能性。動物細(xì)胞的全能性隨著動物細(xì)胞分化程度的提高而逐漸受到抑制，全能性表達(dá)很難，但是動物的細(xì)胞核內(nèi)仍含有該種動物的全部遺傳基因，具有發(fā)育成完整個體的潛能，即動物的細(xì)胞核仍具有全能性?！驹斘觥緼、由于克隆猴基因組成差異小，用克隆猴作為實(shí)驗(yàn)動物，有利于使實(shí)驗(yàn)中的無關(guān)變量的控制，有利于增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的可信度，A正確；B、細(xì)胞融合的過程需要人工誘導(dǎo)，如聚乙二醇（PEG）融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法、電融合法等，可用滅活的病毒誘導(dǎo)去核卵母細(xì)胞和成纖維細(xì)胞融合，B正確；C、受精卵經(jīng)基因編輯后形成的胚胎發(fā)育成的個體不能叫做克隆猴，克隆猴是通過核移植技術(shù)后發(fā)育而成的，C錯誤；D、動物細(xì)胞核含有該物種的全套遺傳信息，克隆猴的獲得體現(xiàn)了動物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性，D正確。故選C。6.下列關(guān)于采用胚胎工程技術(shù)實(shí)現(xiàn)某良種肉用?？焖俜敝车臄⑹?，正確的是（）A.采取激素注射等方法對良種母牛作超數(shù)排卵處理B.體外培養(yǎng)發(fā)育到原腸胚期的胚胎即可進(jìn)行移植C.使用免疫抑制劑以避免代孕牛對植入胚胎的排斥反應(yīng)D.利用胚胎分割技術(shù)，同卵多胎較同卵雙胎成功率更高〖答案〗A〖祥解〗胚胎移植的基本程序：對供體和受體的選擇和處理（同期發(fā)情處理，超數(shù)排卵處理）、配種或進(jìn)行人工授精、對胚胎的收集檢查培養(yǎng)或保存、進(jìn)行胚胎移植。所以在發(fā)情期給良種母牛注射激素，促進(jìn)母牛多排卵，這種處理屬于超數(shù)排卵處理?！驹斘觥坑么傩韵偌に貙α挤N奶牛進(jìn)行注射處理，可促使其超數(shù)排卵，A正確；進(jìn)行移植的胚胎是桑椹胚或囊胚，B錯誤；受體對移植的胚胎幾乎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，因此無需使用免疫抑制劑，C錯誤；利用胚胎分割技術(shù)，同卵雙胎較同卵多胎成功率更高，D錯誤。7.美國科學(xué)家在研究生長在墨西哥某地的野生玉米后發(fā)現(xiàn)，這種玉米含有包括蘇云金芽孢桿菌抗蟲毒蛋白基因在內(nèi)的轉(zhuǎn)基因作物的基因，下列有關(guān)敘述中正確的是（）A.轉(zhuǎn)基因作物的基因可傳播到野生植物中B.轉(zhuǎn)基因作物不可能對天然植物的遺傳多樣性構(gòu)成威脅C.為防止基因污染，應(yīng)當(dāng)禁止轉(zhuǎn)基因作物的研究D.自然雜交與轉(zhuǎn)基因過程沒有任何區(qū)別〖答案〗A〖祥解〗根據(jù)題意可知，轉(zhuǎn)基因作物的基因傳播到野生植物中，會對植物遺傳多樣性構(gòu)成威脅。自然雜交是通過受粉的方式實(shí)現(xiàn)基因重組，與轉(zhuǎn)基因技術(shù)中通過重組質(zhì)粒實(shí)現(xiàn)基因重組是有區(qū)別的。【詳析】A、轉(zhuǎn)基因作物可通過花粉散落到它的近親野生植物中，從而污染生物基因庫，A正確；B、轉(zhuǎn)基因植物可能會與野生植物雜交，造成基因污染，因而可能會對天然植物的遺傳多樣性構(gòu)成威脅，B錯誤；C、雖然轉(zhuǎn)基因生物存在危害，但我們應(yīng)理性地看待轉(zhuǎn)基因生物的研究，C錯誤；D、自然雜交是同種生物個體之間的基因交流，而轉(zhuǎn)基因是將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞的過程，即不同生物之間基因的交流，D錯誤。故選A。8.多種實(shí)驗(yàn)材料都可以用于DNA的粗提取與鑒定，用香蕉也可以取得較好的實(shí)驗(yàn)效果。下列敘述錯誤的是（）A.將粗提取的DNA加入2mol/L的NaCl溶液的目的是為了溶解DNAB.冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精可以溶解某些蛋白質(zhì)，得到粗提取的DNAC.向剪碎的香蕉果肉組織中加入蒸餾水并研磨，以釋放核DNAD.將DNA溶于NaCl溶液后加入現(xiàn)配的二苯胺試劑，沸水浴冷卻后會出現(xiàn)藍(lán)色〖答案〗C〖祥解〗根據(jù)DNA的溶解性提取DNA：（1）DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaC中的溶解度不同；（2）DNA不溶于酒精，但是某些蛋白質(zhì)則溶于酒精；（3）DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同?！驹斘觥緼、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液；將粗提取的DNA加入2mol/L的NaCl溶液中的目的是為了溶解DNA，A正確；B、DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)溶解于酒精，可用體積分?jǐn)?shù)為95%冷酒精溶解某些蛋白質(zhì)，析出DNA，獲得粗提取的DNA，B正確；C、香蕉果肉組織細(xì)胞有細(xì)胞壁保護(hù)，因此加蒸餾水不會破壞細(xì)胞，不能將DNA釋放出來，C錯誤；D、在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍(lán)色；將DNA溶于NaCl溶液后，加入現(xiàn)配的二苯胺試劑，沸水浴冷卻后出現(xiàn)藍(lán)色，D正確。故選C。9.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化其水解。將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入菊花體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.將幾丁質(zhì)酶基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上構(gòu)建表達(dá)載體B.可通過顯微注射法將農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花受體細(xì)胞C.可用PCR技術(shù)或DNA分子雜交檢測目的基因是否成功導(dǎo)入D.可用真菌接種實(shí)驗(yàn)檢測轉(zhuǎn)基因菊花對真菌的抗性程度〖答案〗B〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：1、目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。4、目的基因的檢測與鑒定：（1）分子水平上檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳析】A、Ti質(zhì)粒的T-DNA可以轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，根據(jù)這一特點(diǎn)，構(gòu)建表達(dá)載體時，應(yīng)該將目的基因幾丁質(zhì)酶基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，A正確；B、將目基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法，可通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花受體細(xì)胞，顯微注射法是用于將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞的方法，B錯誤；C、在基因工程技術(shù)中，在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素作標(biāo)記，以此作為探針，使探針與基因組DNA雜交，故可用PCR技術(shù)或DNA分子雜交技術(shù)檢測目的基因是否成功導(dǎo)入，C正確；D、轉(zhuǎn)基因植物接種相應(yīng)的真菌，觀察轉(zhuǎn)基因植物是否出現(xiàn)抗病性狀，據(jù)題幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入菊花體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力，故可用真菌接種實(shí)驗(yàn)檢測轉(zhuǎn)基因菊花對真菌的抗性程度，D正確。故選B。10.水稻胚乳含直鏈淀粉和支鏈淀粉，直鏈淀粉所占比例越小糯性越強(qiáng)?？蒲腥藛T將能表達(dá)出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉(zhuǎn)入水稻，實(shí)現(xiàn)了對直鏈淀粉合成酶基因(Wx基因)啟動子序列的定點(diǎn)編輯，從而獲得了三個突變品系。各品系WxmRNA量的檢測結(jié)果如下圖所示。下列分析錯誤的是（）A.該基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉(zhuǎn)入水稻，引起的變異是由于基因突變造成的B.Wx基因啟動子序列的改變可能影響RNA聚合酶與啟動子的識別和結(jié)合C.根據(jù)各品系WxmRNA量的檢測結(jié)果，可推測品系3的糯性最強(qiáng)D.與野生型相比，3個突變品系中直鏈淀粉合成酶的氨基酸序列發(fā)生改變〖答案〗D〖祥解〗根據(jù)題干信息“將能表達(dá)出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉(zhuǎn)入水稻，實(shí)現(xiàn)了對直鏈淀粉合成酶基因（Wx基因）啟動子序列的定點(diǎn)編輯，從而獲得了三個突變品系”，說明突變品系的獲得是由于啟動子發(fā)生改變，啟動子位于非編碼區(qū)，是RNA聚合酶結(jié)合的位點(diǎn)。根據(jù)圖中信息，品系3的WxRNA含量最低，說明其直鏈淀粉合成酶基因表達(dá)量最少。【詳析】A、該基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉(zhuǎn)入水稻，實(shí)現(xiàn)了對直鏈淀粉合成酶基因(Wx基因)啟動子序列的定點(diǎn)編輯，使直鏈淀粉合成酶基因的堿基序列發(fā)生了改變，該變異屬于基因突變，A正確；B、啟動子是RNA聚合酶識別并結(jié)合的位點(diǎn)，如果啟動子序列改變將會影響RNA聚合酶與之結(jié)合和識別，進(jìn)而影響基因的轉(zhuǎn)錄水平，B正確；C、圖中品系3的Wx基因的mRNA的含量最少，那么合成的直鏈淀粉酶最少，因此該水稻胚乳中含的直鏈淀粉比例最小，糯性最強(qiáng)，C正確；D、在真核生物中，編碼蛋白質(zhì)的序列位于基因的編碼區(qū)，啟動子序列位于非編碼區(qū)，因此3個突變品系位于非編碼區(qū)的啟動子雖然改變，但不影響位于編碼區(qū)的編碼蛋白質(zhì)的序列，轉(zhuǎn)錄翻譯后得到的直鏈淀粉合成酶的氨基酸序列也不變，D錯誤。故選D。11.DNA瓊脂糖凝膠電泳的分子篩效應(yīng)是指作為支持介質(zhì)的瓊脂糖，具有網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，使大分子物質(zhì)在通過時受到較大阻力，借此分離不同大小的DNA片段。下列說法錯誤的是（）A.瓊脂糖凝膠電泳可用于分離、鑒定DNA分子的混合物B.雙鏈DNA分子片段長度越大，在瓊脂糖中的移動速率越大C.凝膠制備中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，用于分離后DNA的檢測D.凝膠中的DNA分子通過染色，可在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來〖答案〗B〖祥解〗1、凝膠色譜法（分配色譜法）：根據(jù)被分離物質(zhì)（如蛋白質(zhì)）相對分子質(zhì)量的大小，利用具有多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠的分子篩作用，來進(jìn)行分離。2、PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定。在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)，凝膠中的DNA分子通過染色，可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來。【詳析】A、瓊脂糖凝膠電泳利用具有多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠的分子篩作用，來進(jìn)行分離，可用于分離、鑒定DNA分子的混合物，A正確；B、凝膠中DNA分子的遷移速率與DNA分子的大小有關(guān)，雙鏈DNA分子片段長度越大，在瓊脂糖中的移動速率越小，B錯誤；C、凝膠制備中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來，用于分離后DNA的檢測，C正確；D、DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)，凝膠中的DNA分子通過染色，可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來，D正確。故選B。12.下圖為單克隆抗體的制備流程示意圖。下列敘述正確的是（）A.甲是從已免疫的小鼠脾臟細(xì)胞中獲得的致敏T淋巴細(xì)胞B.①表示將骨髓瘤細(xì)胞去核后進(jìn)行細(xì)胞融合C.乙為融合細(xì)胞，同時具有細(xì)胞甲和骨髓瘤細(xì)胞的特性D.②表示篩選能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞〖答案〗D〖祥解〗1、單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。2、題中①表示細(xì)胞融合，②表示篩選過程?！驹斘觥緼、甲是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)B細(xì)胞，A錯誤；B、①是完整骨髓瘤細(xì)胞與免疫的B淋巴細(xì)胞融合的過程，B錯誤；C、融合細(xì)胞不一定同時具有細(xì)胞甲和骨髓瘤細(xì)胞的特性，也可能是瘤瘤細(xì)胞或B細(xì)胞，C錯誤；D、②是經(jīng)篩選獲得的能分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，D正確。故選D。二、不定向選擇題（全選對得4分，漏選得2分，錯選得0分）13.黃曲霉毒素在保存不當(dāng)?shù)拿棺兗Z油食品中含量較高，具有很強(qiáng)的致癌性。研究表明黃曲霉毒素能引起細(xì)胞中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體不斷脫落?？蒲腥藛T用黃曲霉毒素偶聯(lián)抗原制備出單克隆抗體以檢測食品中黃曲霉毒素的含量。下列敘述正確的是（）A.當(dāng)人誤食黃曲霉毒素后，腸腺細(xì)胞可能發(fā)生消化酶的合成分泌減少B.可用電融合法、PEG法或滅活的病毒誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合C.細(xì)胞融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動性，雜交瘤細(xì)胞體外增殖體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性D.單克隆抗體用于檢測食品中黃曲霉毒素的原理是抗原－抗體雜交〖答案〗ABD〖祥解〗1、單克隆抗體是指由單個B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。2、單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可能大量制備。3、單克隆抗體的作用：①作為診斷試劑：（最廣泛的用途）具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的優(yōu)點(diǎn)。②用于治療疾病和運(yùn)載藥物：主要用于治療癌癥，可制成“生物導(dǎo)彈”?！驹斘觥緼、消化酶屬于分泌蛋白，在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的核糖體上合成，根據(jù)題干信息“研究表明黃曲霉毒素能引起細(xì)胞中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體不斷脫落”，會影響消化酶（分泌蛋白）的合成和分泌，A正確；B、誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的常用方法有PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等，可用以上方法誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合，獲得雜交瘤細(xì)胞，B正確；C、動、植物細(xì)胞融合都能體現(xiàn)細(xì)胞膜的流動性，雜交瘤細(xì)胞體外增殖并沒有形成新個體，不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，C錯誤；D、抗體與抗原結(jié)合具有特異性，單克隆抗體是化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體，能與黃曲霉毒素特異性結(jié)合，其原理是抗原-抗體雜交，D正確。故選ABD。14.Vero細(xì)胞系來源于非洲綠猴腎上皮細(xì)胞，具有無限分裂和貼壁生長的特性。將新冠病毒接種到Vero細(xì)胞后，經(jīng)Vero細(xì)胞培養(yǎng)、新冠病毒滅活及提純，可制成新冠病毒滅活疫苗。下列敘述錯誤的是（）A.Vero細(xì)胞可作為新冠病毒大量繁殖的“培養(yǎng)基”B.向Vero細(xì)胞培養(yǎng)液中加入適量干擾素可防止雜菌污染C.分瓶前需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的Vero細(xì)胞D.每傳代1次，培養(yǎng)瓶中的Vero細(xì)胞分裂1次〖答案〗BD〖祥解〗1、病毒必須寄生在活細(xì)胞內(nèi)，才能進(jìn)行正常的生命活動。2、抗生素可抗菌，干擾素可抗病毒。3、胰蛋白酶可使組織細(xì)胞分散成單個細(xì)胞?！驹斘觥緼、病毒必須寄生在活細(xì)胞內(nèi)，因此Vero細(xì)胞可作為新冠病毒大量繁殖的“培養(yǎng)基”，A正確；B、向Vero細(xì)胞培養(yǎng)液中加入適量抗生素可防止雜菌污染，而干擾素抗病毒，B錯誤；C、胰蛋白酶或膠原蛋白酶可使組織細(xì)胞分散成單個細(xì)胞，因此分瓶前需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的Vero細(xì)胞，以進(jìn)行傳代培養(yǎng)，C正確；D、當(dāng)細(xì)胞發(fā)生接觸抑制時需要進(jìn)行傳代培養(yǎng)，每傳代1次，培養(yǎng)瓶中Vero細(xì)胞分裂不止1次，D錯誤。故選BD。15.金黃色葡萄球菌是一種常見的病原菌，在血平板（完全培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長時，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色。某研究小組通過稀釋涂布平板法測定了某處土壤中金黃色葡萄球菌數(shù)量，相關(guān)說法正確的是（）A.從功能上分類，血平板屬于選擇培養(yǎng)基B.在制作血平板時需要在平板冷卻后加入血液，防止高溫破壞血細(xì)胞C.待涂布的菌液被培養(yǎng)基吸收后應(yīng)倒置培養(yǎng)，防止水分過度蒸發(fā)D.實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目高〖答案〗BC〖祥解〗1、培養(yǎng)基按功能分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基：①選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的不需要的微生物的生長，促進(jìn)所需要的微生物生長，培養(yǎng)、分離出特定的微生物。②鑒別培養(yǎng)基：根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，鑒別不同種類的微生物。3、接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體--菌落．【詳析】A、根據(jù)題干信息“金黃色葡萄球菌在血平板上生長時，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色”，因此血平板屬于鑒別培養(yǎng)基，A錯誤；B、為防止高溫破壞血細(xì)胞，在制作血平板時需要在平板冷卻后加入血液，B正確；C、涂布后的平板待菌液被培養(yǎng)基吸收后應(yīng)倒置培養(yǎng)，防止水分過度蒸發(fā)，C正確；D、由于兩個或多個菌落連在一起形成一個菌落，所以統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)比活菌數(shù)目低，D錯誤。故選BC。16.高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者從熱泉中篩選高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖1所示。將得到的菌懸液轉(zhuǎn)接于同時含有葡萄糖和淀粉作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，看到如下圖2所示情況。下列選項(xiàng)正確的是（）A.過程①②合稱為稀釋涂布平板法 B.甲乙試管中的液體均為選擇培養(yǎng)基C.Ⅱ號培養(yǎng)基上的接種方法為平板劃線法 D.圖2中周圍不顯藍(lán)色的菌落含有所需菌種〖答案〗ACD〖祥解〗接種微生物的方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法；稀釋涂布線法：逐步稀釋菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)；平板劃線法由接種環(huán)沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落?！驹斘觥緼、根據(jù)I號培養(yǎng)基上菌落分布均勻，可知①②過程為稀釋涂布平板法，A正確；B、甲乙試管中的液體是用于樣品稀釋，應(yīng)為無菌水，B錯誤；C、由Ⅱ號培養(yǎng)基上上的劃線區(qū)域可知從I號培養(yǎng)基上挑選的菌落進(jìn)行接種的方法是平板劃線法，C正確；D、淀粉與碘液反應(yīng)呈藍(lán)色，但如果淀粉分解菌中的淀粉酶將淀粉水解后就不能呈藍(lán)色，因此周圍不顯藍(lán)色的菌落含有所需菌種，D正確。故選ACD。三、非選擇題17.研究深海獨(dú)特的生態(tài)環(huán)境對于開發(fā)海洋資源具有重要意義。近期在“科學(xué)號”考察船對中國南?？瓶贾?，中國科學(xué)家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉積物樣品，分離、鑒定得到新的微生物菌株并進(jìn)一步研究了其生物學(xué)特性。回答下列問題：（1）研究者先制備富集培養(yǎng)基，然后采用________________法滅菌，冷卻后再接入沉積物樣品，28℃厭氧培養(yǎng)一段時間后，獲得了含擬桿菌的混合培養(yǎng)物，為了獲得純種培養(yǎng)物，除了稀釋涂布平板法，還可采用________________法。據(jù)圖分析，擬桿菌新菌株在以________________為碳源時生長狀況最好。（2）研究發(fā)現(xiàn)，將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍有很多微生物不能被分離篩選出來，推測其原因可能是________________。（答一點(diǎn)即可）（3）藻類細(xì)胞解體后的難降解多糖物質(zhì)，通常會聚集形成碎屑沉降到深海底部。從生態(tài)系統(tǒng)組成成分的角度考慮，擬桿菌對深海生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)的作用可能是________________。（4）深海冷泉環(huán)境特殊，推測此環(huán)境下生存的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其特性可能還有________________?！即鸢浮剑?）①.高壓蒸汽滅菌②.平板劃線③.纖維素（2）某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物質(zhì)才能生存（或需要在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活）（3）擬桿菌作為分解者，將沉降到深海底部的難降解多糖物質(zhì)分解為無機(jī)物，歸還到無機(jī)環(huán)境中，有利于碳循環(huán)的順利進(jìn)行（4）耐低溫〖祥解〗進(jìn)行微生物純種培養(yǎng)物時，人們需要按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求配制培養(yǎng)基；還需要防止雜菌污染，無菌技術(shù)主要包括消毒和滅菌。獲得微生物純培養(yǎng)物的常用方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。（1）培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。可以采用稀釋涂布平板法或平板劃線法，將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)得到單菌落，從而獲得純凈培養(yǎng)物。分析圖12可知，在以纖維素為碳源的培養(yǎng)基中，細(xì)胞數(shù)量最多，可推知擬桿菌新菌株在以纖維素為碳源時生長狀況最好。（2）深海冷泉中可能存在某些微生物，只有利用冷泉中的特有物質(zhì)才能生存（或需要在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活），故將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍可能有很多微生物不能被分離篩選出來。（3）擬桿菌為異養(yǎng)生物，作為該生態(tài)系統(tǒng)的分解者，能將沉降到深海底部的難降解多糖物質(zhì)分解為無機(jī)物，歸還到無機(jī)環(huán)境中，有利于碳循環(huán)的順利進(jìn)行。（4）深海冷泉溫度較低，故生活在其中的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，應(yīng)具有耐低溫的特性，才能高效降解多糖，保證擬桿菌的正常生命活動所需。18.某研究人員設(shè)計(jì)了下列技術(shù)路線，以期獲得甘藍(lán)和蘿卜體細(xì)胞雜交植株。請回答下列問題：（1）制備原生質(zhì)體時，常用兩種酶處理，分別是____________________。誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是____________________。原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是_________________。圖中X是____________________，除了被直接誘導(dǎo)出芽生根外，還可以通過形成人工種子獲得再生植株。（2）為誘導(dǎo)融合體產(chǎn)生不定芽，通常應(yīng)在培養(yǎng)基中加入兩類植物激素，其中起主要作用的是____________________。（3）若想獲得抗鹽植株，可選用融合原生質(zhì)體作為人工誘變的材料，原因是____________________，且需在含較高濃度的NaCl培養(yǎng)基中篩選?！即鸢浮剑?）纖維素酶和果膠酶PEG（聚乙二醇）雜種細(xì)胞再生成細(xì)胞壁愈傷組織（2）細(xì)胞分裂素（3）具有分裂分化能力，突變頻率高，融合原生質(zhì)體包含了兩個物種的全部遺傳信息，且具有全能性〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)。（1）誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括離心、振動、電刺激等．化學(xué)法一般是用聚乙二醇（PEG）作為誘導(dǎo)劑。（2）細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是新的細(xì)胞壁的生成。（3）植物體細(xì)胞雜交的終點(diǎn)是培育成雜種植株，而不是形成雜種細(xì)胞就結(jié)束。（4）雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)?！驹斘觥浚?）植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，所以制備原生質(zhì)體，需要用纖維素酶和果膠酶將細(xì)胞壁去除，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是PEG（聚乙二醇）。原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是雜種細(xì)胞再次生成細(xì)胞壁；圖中X經(jīng)過離體培養(yǎng)，可以形成試管苗，所以X是愈傷組織。（2）植物組織培養(yǎng)中常加入植物激素，主要是細(xì)胞分裂素和生長素，當(dāng)生長素和細(xì)胞分裂素的比值低時，有利于芽的形成，所以起主要作用的是細(xì)胞分裂素。（3）由于融合的原生質(zhì)體具有分裂分化能力，突變頻率高，而且融合的原生質(zhì)體包含了兩個物種的全部遺傳信息，且具有全能性，所以可選用融合原生質(zhì)體作為人工誘變的材料。19.胚胎干細(xì)胞必須從胚胎中獲取，但這涉及倫理問題，因而限制了它在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用?？茖W(xué)家通過體外誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞，獲得了類似于胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞，稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（簡稱iPS細(xì)胞）。因?yàn)檎T導(dǎo)過程無須破壞胚胎，而且iPS細(xì)胞可來源于病人自身的體細(xì)胞，因此iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞。如圖為iPS細(xì)胞的獲得及用其培育不同種細(xì)胞的示意圖（c-Myc、Klf4、Sox2和Oct3/4等基因與細(xì)胞的脫分化有關(guān)）。回答下列問題：（1）在對成纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時，常用胰蛋白酶處理使之分散成單個細(xì)胞，這說明細(xì)胞間的物質(zhì)為_____，_____（填“能”或“不能”）用胃蛋白酶處理成纖維細(xì)胞，原因是_____。（2）在培養(yǎng)iPS細(xì)胞的過程中，培養(yǎng)基中應(yīng)含有細(xì)胞所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)，并定期更換培養(yǎng)液。定期更換培養(yǎng)液的目的是_____。（3）過程③④為iPS細(xì)胞提供的條件不同，分化得到的細(xì)胞不同，可知細(xì)胞分化是_____的結(jié)果。若iPS細(xì)胞來源于病人自身體細(xì)胞的誘導(dǎo)，再將其分化出的細(xì)胞移入患者體內(nèi)的優(yōu)勢是_____。（4）如果誘導(dǎo)iPS細(xì)胞定向分化為原始生殖細(xì)胞，該技術(shù)可能的應(yīng)用是_____。〖答案〗（1）①.蛋白質(zhì)②.不能③.多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)