甜瓜主要病害抗性鑒定與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程 第1部分：甜瓜枯萎病、根腐病抗性鑒定與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程-送審討論稿

1霜霉病抗病性鑒定評(píng)價(jià)的術(shù)語(yǔ)和定義、抗病性鑒定方法NY/T2118蔬菜育苗基質(zhì)24抗病性鑒定方法4.1基本設(shè)備持在20℃~30℃)、塑料盆、鋁鍋、電爐、培養(yǎng)皿、試管、剪刀、鑷子、廣口瓶、酒精燈、濾紙、三4.2接種體分離甜瓜根腐病菌（Fusariumsolani見(jiàn)附錄B。4.3接種體確定選擇分布較廣、致病力較強(qiáng)的病原菌優(yōu)勢(shì)菌株作為人工接種鑒定4.4接種體保存4.4.1短期保存將甜瓜枯萎病菌、甜瓜根腐病菌接種于PDA斜面，在25℃~28℃培養(yǎng)7d后，置4℃~8℃的冰箱中3紙片，在25℃~28℃培養(yǎng)7d后，取出濾紙片，經(jīng)真空干燥后于-20℃~-80℃的低溫冰箱中保存。4.5接種體懸浮液制備將保存的人工接種鑒定使用的甜瓜枯萎病菌、甜瓜根腐病菌接種體移植于PDA平板培養(yǎng)基上，在25℃~28℃培養(yǎng)7d。在無(wú)菌操作下，甜瓜枯萎病菌和甜瓜根腐病菌接種體接種于裝有PL液體培養(yǎng)基或綠豆液體培養(yǎng)基的三角瓶中（液體培養(yǎng)基的體積是三角瓶容量的30%～35%置于25℃~28℃恒溫振蕩培養(yǎng)箱中，160r/min～180r/min振蕩培養(yǎng)7d～10d。培養(yǎng)液經(jīng)雙層紗布過(guò)濾，濾液以4000r/min離心疽病菌接種體接種于PDA平板培養(yǎng)基上，置于25℃~28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7d～10d，用滅菌蒸餾水洗下分生孢子，并制成接種體懸浮液，供人將待鑒定甜瓜的種子經(jīng)5%次氯酸鈉溶液浸種10min，用清水沖洗3次，再用清水浸泡5h后，置于30℃~32℃恒溫箱中保濕催芽。露白發(fā)芽后播植于溫室，采用營(yíng)養(yǎng)缽盆栽法進(jìn)行育苗，基質(zhì)應(yīng)自來(lái)水澆透育苗基質(zhì)，隨后將已催芽的待鑒定甜瓜種子播于上述塑料營(yíng)養(yǎng)缽中，每缽1粒種子，然后用泥炭育苗基質(zhì)覆蓋，以蓋住種子為宜。重復(fù)3次，每重復(fù)30缽，5.5接種前管理播種后將塑料缽置于溫室中，進(jìn)行培育，出苗前，溫室溫度保持在25℃~30℃,保持盆中土壤濕度；甜瓜苗出土后，溫室溫度保持在23℃4每年4月～6月和9月～11月為甜瓜對(duì)枯萎病和根腐病抗性鑒定與抗甜瓜對(duì)枯萎病、根腐病的抗病性鑒定接種，分別在甜瓜苗三直向下?lián)p傷根系后，每株用接種液200ml～250ml澆根，用透明薄膜覆蓋的小拱棚保濕24接種后的甜瓜苗，置于溫度為23℃~28℃的溫室中，黑暗保濕（RH85%～100%）24h；以后每天光照12h～14h，溫室溫度保持在23℃~28℃,適時(shí)澆水，保持正常栽培管理，不施用殺菌劑。接種后20d～25d時(shí)進(jìn)行調(diào)查。也可根據(jù)感病的對(duì)照品種病級(jí)擴(kuò)展到最高病級(jí)的甜瓜植株莖干病斑較明顯，5%～20%變色，甜瓜植株莖干病斑明顯，20%～50%變5株發(fā)病率以“Ri”計(jì)，數(shù)值以“%”表9.1鑒定有效性判別當(dāng)感病對(duì)照品種達(dá)到其相應(yīng)感病程度（DI≥50.0），該批9.2抗病性劃分1HR2R345S69.3鑒定結(jié)果記錄6編號(hào)品種/種質(zhì)名稱來(lái)源重復(fù)病情級(jí)別病情指數(shù)平均病指抗性評(píng)價(jià)013579ⅠⅡⅢ……播種日期接種日期接種生育期接種病原物分離編號(hào)接種病原物株系類型調(diào)查時(shí)間鑒定人（簽字）：校核人（簽字）：鑒定技術(shù)負(fù)責(zé)人（簽字）：鑒定單位蓋章）7PDA培養(yǎng)基、PL液體培養(yǎng)基、綠豆200g，切成小塊放入鍋中，加水1000ml，在加熱器上加熱至沸騰，維持30min，用2層紗布趁熱在量杯上過(guò)濾，棄濾渣，取濾液補(bǔ)充水分到1000ml；把濾液放入鍋中，加入葡萄糖20g，瓊脂17g，然后至6.8～7.0。將配制的培養(yǎng)基分裝入試管或500ml三角瓶?jī)?nèi)，在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞或泡沫度的1/5，滅菌后制成斜面；三角瓶的分裝量以不超過(guò)其容積的一半為宜，滅菌后倒入滅菌培養(yǎng)皿，制渣，取濾液補(bǔ)充水分到1000ml；把濾液放入鍋中，加入乳糖20g，用玻璃棒攪拌后放在石棉網(wǎng)上，小火加熱至沸騰，再補(bǔ)充水分至1000ml。將配制的培養(yǎng)基分裝入500ml三角瓶?jī)?nèi)，在三角燒瓶再補(bǔ)充水分至1000ml。將配制的培養(yǎng)基分裝入500ml三角瓶?jī)?nèi)，在三角燒瓶口上塞上棉塞或泡沫塑料8甜瓜枯萎病在整個(gè)生長(zhǎng)周期都可發(fā)病，以開(kāi)花期、坐果期和果實(shí)膨大期3個(gè)階段為高發(fā)甜瓜枯萎病菌（Fusariumoxysporum(Sc甜瓜根腐病菌（Fusariumsolani(Mart.)3個(gè)分隔，屬典型的尖孢類型；Ⅱ型較寬短或細(xì)長(zhǎng)），分生孢子上，表面光滑，偶有粗糙，球形至