《快速核酸檢測儀校準(zhǔn)規(guī)范》編制說明

PAGE4 -1- -《快速核酸檢測儀校準(zhǔn)規(guī)范》編制說明一、任務(wù)來源根據(jù)內(nèi)蒙古自治區(qū)市場監(jiān)督管理局（內(nèi)市監(jiān)計量字〔2022〕473號）自治區(qū)市場監(jiān)管局關(guān)于自治區(qū)地方技術(shù)規(guī)范批準(zhǔn)立項的通知，《快速核酸檢測儀校準(zhǔn)規(guī)范》由內(nèi)蒙古自治區(qū)計量測試研究院負(fù)責(zé)主要起草，滿洲里市檢驗檢測中心、內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院、赤峰市產(chǎn)品質(zhì)量檢驗檢測中心參與起草。二、目的及意義核酸檢測是發(fā)現(xiàn)新冠病毒感染者的關(guān)鍵技術(shù)手段，核酸檢測設(shè)備檢測結(jié)果準(zhǔn)確與否直接關(guān)系疫情防控成效。因此，對核酸檢測儀量值溯源尤為重要。目前，醫(yī)療機構(gòu)多數(shù)使用傳統(tǒng)的熒光定量PCR（聚合酶鏈反應(yīng)分析）儀，一般為48、96、128孔，進(jìn)行基因擴增分析判斷“陰性”或“陽性”樣本結(jié)果，檢測樣本通量大，常規(guī)的核酸檢測檢測時間一般為4～6小時?？焖俸怂釞z測儀是新冠疫情爆發(fā)后為了縮短檢測時間而研制出來的新型儀器，一般為1～2孔，被大量使用于急診和發(fā)熱門診，檢測樣本通量低?？焖俸怂釞z測儀在一套設(shè)備里即可完成核酸提取、PCR擴增全部過程的快速檢測儀器。目前國內(nèi)外沒有相關(guān)的校準(zhǔn)方法，國內(nèi)處于起步研究階段。因快速核酸檢測儀普遍為低通量設(shè)計，在實際檢測中沒有辦法在每次檢測中攜帶陰性、陽性對照品，使用者普遍在每天使用之前對設(shè)備的某一檢測孔進(jìn)行對照品或質(zhì)控品試驗，在具體檢測操作中沒有攜帶對照品，設(shè)備本身的計量性能準(zhǔn)確就尤為重要。此規(guī)范的制定為核酸檢測結(jié)果的可信度提供重要的技術(shù)依據(jù)，對于完善我區(qū)乃至全國相關(guān)領(lǐng)域的快速核酸檢測儀溯源體系具有重要意義。三、規(guī)范制定原則根據(jù)現(xiàn)有的國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和專家意見、建議，以現(xiàn)有的生產(chǎn)技術(shù)為前提，本著促進(jìn)生產(chǎn)技術(shù)，鼓勵進(jìn)步、淘汰落后，與國際慣例靠近、接軌的原則，為工程實驗設(shè)備的計量性能提供技術(shù)依據(jù)，規(guī)范格式依據(jù)計量校準(zhǔn)規(guī)范編寫規(guī)則進(jìn)行編寫。參考與依據(jù)的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和文件：[1]JJF1007-2007溫度計量名詞術(shù)語及定義[2]JJF1101-2019環(huán)境試驗設(shè)備溫度、濕度參數(shù)校準(zhǔn)規(guī)范[3]JJF1265-2010生物計量術(shù)語及定義[4]JJF1527-2015聚合酶鏈反應(yīng)分析儀校準(zhǔn)規(guī)范[5]YY∕T1173-2010聚合酶鏈反應(yīng)分析儀[6]JJF1071-2010《國家計量校準(zhǔn)規(guī)范編寫規(guī)則》四、主要制定部分編制說明1.范圍根據(jù)JJF1071-2010《國家計量校準(zhǔn)規(guī)范編寫規(guī)則》的要求，明確本規(guī)范的適用范圍。本規(guī)范適用于將核酸提取、擴增檢測一體化運行，基于控溫基因擴增技術(shù)的快速核酸檢測儀的校準(zhǔn)，其他類似設(shè)備也可參照本規(guī)范進(jìn)行校準(zhǔn)。2.計量術(shù)語和概述明確了核酸、閾值循環(huán)數(shù)、等溫擴增技術(shù)、拷貝數(shù)、檢出限、溫度偏差、平均降溫速率、平均過沖溫度、溫度波動度、持續(xù)時間等信息。寫明了快速核酸檢測儀的原理、用途、結(jié)構(gòu)等。3.計量特性要求包含快速核酸檢測儀的溫度偏差、平均升溫速率、平均降溫速率、平均過沖溫度、溫度波動度、持續(xù)時間偏差、檢出限、樣本檢測重復(fù)性等。4.計量器具控制4.1校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)器具校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)器具為快速核酸檢測儀專用無線溫度校準(zhǔn)裝置、新型冠狀病毒核酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、移液器?？焖俸怂釞z測儀專用無線溫度校準(zhǔn)裝置溫度測量范圍（0～120）℃，分辨力：不低于0.01℃，最大允許誤差：0.1℃，采樣時間間隔：≤0.1s；有證新型冠狀病毒核酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)；（2.5、10、100、200、1000、5000）μL檢定合格的移液器。4.2校準(zhǔn)項目校準(zhǔn)項目主要包括溫度偏差、平均升溫速率、平均降溫速率、平均過沖溫度、溫度波動度、持續(xù)時間偏差、檢出限的檢查、樣本檢測重復(fù)性。5.校準(zhǔn)方法5.1溫度校準(zhǔn)獨立控溫模塊快速核酸檢測儀可逐個模塊校準(zhǔn)或同時對多個模塊分別校準(zhǔn)。非獨立控溫的快速核酸檢測儀作為一個整體進(jìn)行溫度校準(zhǔn)，以8通道、16通道快速核酸檢測儀為例，布點遵循均勻分布的原則，每增加8通道可增加3個點。多模塊或多通道的快速核酸檢測儀以所有布點計算結(jié)果的最大值作為測量結(jié)果。設(shè)置基于實時熒光PCR技術(shù)的快速核酸檢測儀控溫程序，設(shè)置溫度采樣間隔為0.1s。設(shè)定基于等溫擴增技術(shù)的快速核酸檢測儀溫度程序。將專用無線溫度校準(zhǔn)裝置置入樣品槽中，啟動溫度測量標(biāo)準(zhǔn)，自動采集并記錄整個循環(huán)程序溫度數(shù)據(jù)。根據(jù)測量結(jié)果計算溫度偏差、平均升溫速率、平均降溫速率、平均過沖溫度、溫度波動度、持續(xù)時間偏差。5.2檢出限的檢查將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)稀釋到設(shè)備宣稱的檢出限(參照配套使用的核酸檢測試劑盒說明書，比如500copies/mL)作為樣本，對同一模塊或通道進(jìn)行2次檢測，分別記錄ORFlab基因和N基因的擴增結(jié)果，與設(shè)備宣稱的檢出限進(jìn)行比較。多模塊或多通道的快速核酸檢測儀可以根據(jù)用戶要求選擇模塊或通道進(jìn)行。5.3樣本