《2.2.2 動物細胞融合技術(shù)與單克隆抗體》學(xué)與練

學(xué)而優(yōu)·教有方PAGE1PAGE2.2.2動物細胞融合技術(shù)與單克隆抗體Part1目標任務(wù)：對接課標，了解目標Part1目標任務(wù)：對接課標，了解目標Part2預(yù)習導(dǎo)學(xué)：自主梳理+預(yù)習檢測，掌握基本知識點Part3探究提升：代入情景+典例精講，深入學(xué)習知識要點單克隆抗體的應(yīng)用Part4網(wǎng)絡(luò)梳理：建立知識間的聯(lián)系Part5強化訓(xùn)練：必刷經(jīng)典試題，能力提升內(nèi)容導(dǎo)航新課程標準學(xué)習目標1.闡明動物細胞融合是指通過物理、化學(xué)或生物學(xué)等手段，使兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。2．概述細胞融合技術(shù)是單克隆抗體制備的重要技術(shù)。1.說明動物細胞融合與植物體細胞雜交的異同。2.簡述動物細胞融合和單克隆抗體制備的過程、方法與原理。3.列舉動物細胞融合技術(shù)與單克隆抗體技術(shù)的優(yōu)點及實際應(yīng)用。自主梳理一、動物細胞融合技術(shù)1.概念：使動物細胞結(jié)合形成的技術(shù)。融合后形成的雜交細胞具有原來兩個或多個細胞的。2.誘導(dǎo)動物細胞融合的常用方法（1）物理法：法（2）化學(xué)法：等（3）生物法：等3.原理：。4．意義：突破了的局限，使成為可能。5．動物細胞融合技術(shù)的應(yīng)用(1)成為研究、、腫瘤和培育生物新品種等的重要手段。(2)利用動物細胞融合技術(shù)發(fā)展起來的技術(shù)，為制造開辟了新途徑。二、單克隆抗體及其應(yīng)用1.常規(guī)抗體與單克隆抗體(1)常規(guī)抗體①產(chǎn)生:抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法是向動物體內(nèi)反復(fù)注射,使動物產(chǎn)生抗體,然后從動物中分離所需抗體。②缺點:產(chǎn)量、純度,制備的抗體特異性。(2)單克隆抗體①產(chǎn)生：由單一細胞增殖產(chǎn)生的單一。②優(yōu)點:能準確地識別的細微差異，與發(fā)生特異性結(jié)合,并且可以。2.單克隆抗體的制備(1)B淋巴細胞特點：一種B淋巴細胞分泌一種抗體。(2)骨髓瘤細胞特點：能在體外大量。(3)雜交瘤細胞特點：B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合得到的雜交瘤細胞，既能；又能產(chǎn)生大量。（4）制備過程①免疫處理提供B淋巴細胞的動物必須預(yù)先注射進行免疫處理，獲得能產(chǎn)生的B淋巴細胞。②誘導(dǎo)融合③通過篩選獲得雜交瘤細胞用特定的培養(yǎng)基進行篩選：在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡，只有的細胞才能生長。④通過篩選獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞對上述經(jīng)選擇培養(yǎng)的細胞進行和檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需的細胞(抗體檢測呈性的雜交瘤細胞)。⑤獲取單克隆抗體的場所若在細胞培養(yǎng)液中進行雜交瘤細胞培養(yǎng)，則從中提?。蝗粼谛∈蠡蚱渌麆游锔骨恢信囵B(yǎng)，則從中提取。(3)單克隆抗體的應(yīng)用①被廣泛用作，在多種疾病的診斷和病原體鑒定中發(fā)揮重要作用。如：用抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體做成的“早早孕診斷試劑盒”.在妊娠第8天就可以做出診斷,且準確率高達90%以上。又如：利用或的單克隆抗體在特定組織中成像的技術(shù)，可定位診斷腫瘤、心血管畸形等疾病。②可以運載抗體——藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將與能特異性識別腫瘤抗原的結(jié)合，實現(xiàn)了對腫瘤細胞的選擇性殺傷。③自身也可用于治療疾病。預(yù)習檢測（限時10分鐘）1．植物體細胞雜交和動物細胞融合兩項技術(shù)有相似也有不同。下列敘述正確的是（）A．愈傷組織經(jīng)過脫分化、再分化后才能形成雜種植株B．細胞融合過程中發(fā)生的變異主要是基因重組C．兩種技術(shù)均可運用PEG融合法或電融合法來促進細胞融合D．植物細胞融合和動物細胞融合時均會用到纖維素酶和胰蛋白酶2．下列是應(yīng)用動物細胞工程技術(shù)獲取單克隆抗X抗體的具體操作步驟，選項中對單克隆抗體制備的相關(guān)敘述不正確的是（）①將X抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B淋巴細胞②從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取骨髓瘤細胞③利用促細胞融合因子使兩種細胞發(fā)生融合④將雜交瘤細胞注入小鼠腹腔培養(yǎng)⑤篩選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細胞⑥從腹水中提取抗體A．實驗順序應(yīng)當是①②③⑤④⑥B．④過程中產(chǎn)生的多個雜交瘤細胞也稱為克隆化培養(yǎng)C．③過程獲得的細胞均可無限增殖D．③到⑤的過程中通常要經(jīng)過兩次篩選3．治療最兇險乳腺癌“HER2+”的抗體-藥物偶聯(lián)物（T-DM1）被納入2023年醫(yī)保目錄名單。T-DM1是由曲妥珠單抗、細胞毒性藥物DM1偶聯(lián)形成。T-DM1作用機制如下圖，下列有關(guān)敘述正確的是（）

A．經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來的雜交瘤細胞不可直接生產(chǎn)單克隆抗體B．T-DM1中的抗體主要是發(fā)揮治療效應(yīng)，殺傷靶細胞C．T-DM1通過主動運輸進入癌細胞D．曲妥珠單抗制備中可選擇DM1作為抗原刺激小鼠產(chǎn)生免疫應(yīng)答4．雙抗指的是一個抗體可以和兩個不同抗原或一個抗原的兩個不同表位發(fā)生特異性結(jié)合。需要人工制備兩種單克隆抗體并在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)制備。最新研究發(fā)現(xiàn)春花堿有良好的抗腫瘤效果。下圖為人工制備雙抗的過程，圖右下角為某雙抗發(fā)揮作用圖示。下列敘述錯誤的是（

）A．第一次篩選后的細胞進行克隆化培養(yǎng)，傳代培養(yǎng)過程中會發(fā)生貼壁和接觸抑制B．第二次篩選是為了確定分泌抗體的特異性，可以通過抗原抗體雜交的方式檢驗C．該方法制備的二抗與傳統(tǒng)的抗體-藥物偶聯(lián)物相比特異性相似D．將上述過程中春花堿換成熒光蛋白，可能會有助于輔助臨床診斷5．如圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的細胞毒性T細胞B．②中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細胞的形成C．③同時具有B淋巴細胞和小鼠骨髓瘤細胞的特性D．④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細胞6．與植物體細胞雜交相比，動物細胞融合的原理及其特有的誘導(dǎo)方法分別是（）A．細胞膜具有流動性、離心法B．細胞膜具有流動性、滅活病毒誘導(dǎo)法C．細胞的增殖、電融合法D．細胞的增殖、滅活病毒誘導(dǎo)法7．下列關(guān)于動物細胞融合的說法，錯誤的是（）A．細胞融合前要用酶解法將組織分散成單個細胞B．細胞融合的原理是細胞膜的流動性C．融合后得到的雜交細胞具有兩個或多個親本細胞的遺傳信息D．融合后得到的雜交細胞具有兩個細胞核8．有關(guān)動物細胞融合的敘述，正確的是（）A．動物細胞融合的結(jié)果是獲得新個體B．只有兩個動物細胞結(jié)合成一個細胞的過程才叫動物細胞融合C．動物細胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理是相同的D．滅活的病毒是動物細胞融合和植物體細胞雜交常用的促融劑9．CD3單克隆抗體（OKT3）為第一個用于臨床的抗T細胞的單克隆抗體，該抗體針對T細胞上CD3抗原，能抑制免疫系統(tǒng)的功能，有利于器官移植。下列有關(guān)敘述錯誤的是（

）A．利用細胞膜的流動性的生物學(xué)原理即可制備OKT3B．將提純的CD3抗原注入小鼠體內(nèi)可產(chǎn)生免疫反應(yīng)，分離出B細胞C．制備OKT3過程中使用了胰蛋白酶和聚乙二醇等溶液D．經(jīng)多次篩選才能獲得既能產(chǎn)生抗體，又能無限增殖的細胞10．小膠質(zhì)細胞參與一系列神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生過程，包括阿爾茨海默病、帕金森病、亨廷頓舞蹈癥、肌萎縮側(cè)索硬化等?？蒲腥藛T制備了抗小膠質(zhì)細胞表面標志蛋白CD22的單克隆抗體，具體方法如圖所示。下列對抗CD22單克隆抗體的制備的分析，不合理的是（

）

A．步驟①和步驟⑤向小鼠注射的都是CD22B．步驟②所用的SP2/0細胞具有無限增殖的特點C．吸?、壑械纳锨逡旱舰艿呐囵B(yǎng)孔中后須加入CD22進行檢測D．步驟⑥提取的抗CD22抗體，可抑制神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生11．將小鼠細胞與人細胞融合后獲得“人—鼠融合細胞”，發(fā)現(xiàn)人的染色體會隨機丟失，最終只保留一條或幾條染色體。下列敘述正確的是（

）A．可利用PCR技術(shù)檢測人的基因表達產(chǎn)物B．小鼠細胞與人細胞融合表明細胞膜具有信息識別的功能C．“人—鼠融合細胞”的獲得突破了人和小鼠之間的生殖隔離D．可通過檢測“人—鼠融合細胞”基因表達產(chǎn)物，初步定位人基因位于幾號染色體?環(huán)節(jié)單克隆抗體的應(yīng)用【情景材料】使用高效的細胞毒素類藥物進行化療可以有效殺傷腫瘤細胞。但細胞毒素沒有特異性，在殺傷腫瘤細胞的同時還會對健康細胞造成傷害，這限制了它在臨床上的應(yīng)用?？贵w一藥物偶聯(lián)物(antibody-drugconjugate，ADC)通過將細胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實現(xiàn)了對腫瘤細胞的選擇性殺傷。ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細胞毒素)三部分組成，它的作用機制如下圖所示?！締栴}探究】1.ADC的抗體和藥物各具有什么作用?2.除了細胞毒素，還有哪些物質(zhì)理論上可以作為ADC偶聯(lián)的藥物?3.單克隆抗體診斷試劑盒和ADC在臨床應(yīng)用上各具有什么優(yōu)勢?典例精講【例1】1．猴痘是一種病毒性人畜共患病，在人類中出現(xiàn)的癥狀與過去在天花患者身上所看到的癥狀相似，B6R蛋白是猴痘病毒的抗原。為制備抗B6R蛋白的單克隆抗體，研究人員進行了相關(guān)實驗，如圖所示，其中①~④表示細胞。下列敘述正確的是（）A．細胞①含有從小鼠的脾中得到的能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細胞B．誘導(dǎo)細胞①②融合的常用方法與誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法相同C．可將抗體檢測呈陰性的雜交瘤細胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)D．圖中的培養(yǎng)瓶需要置于含有95%CO2和5%O2的混合氣體中培養(yǎng)2．CTLA-4和PD-1均是T細胞表面的受體分子，與特定分子結(jié)合后，能抑制T細胞激活，或使T細胞進入凋亡程序，從而使機體腫瘤細胞免受T淋巴細胞攻擊?？笴TLA-4或抗PD-1單克隆抗體具有較好的抗腫瘤效果。如圖所示，科研人員現(xiàn)將兩種單克隆抗體在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)成抗CTLA-4和抗PD-1的雙克隆抗體，顯示具有更好的療效。下列敘述正確的是（

）

A．圖中一分子雙抗能結(jié)合兩個CTLA-4分子和兩個PD-1分子B．雙克隆抗體與腫瘤細胞的結(jié)合具有更強的特異性，從而減少副作用C．同時用CTLA-4和PD-1免疫后提取的漿細胞，可與骨髓瘤細胞融合成同時分泌兩種抗體的雜交瘤細胞D．使用雙克隆抗體治療腫瘤原理是讓機體產(chǎn)生更強的細胞免疫反應(yīng)3．P蛋白是非洲豬瘟病毒（ASFV）的重要抗原。為了能夠快速診斷ASFV，研究者制備相應(yīng)的雜交瘤細胞R3E9。有關(guān)敘述合理的是（

）A．B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合獲得的都是雜交瘤細胞B．雜交瘤細胞在培養(yǎng)過程中需要加入95%的O2和5%的CO2C．經(jīng)過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測可篩選出能夠產(chǎn)生P蛋白的R3E9D．體外培養(yǎng)R3E9可以獲得針對P蛋白的單克隆抗體4．關(guān)于制備單克隆抗體的過程，下列敘述錯誤的是（

）A．為獲得足量相應(yīng)的B細胞，可多次給小鼠注射特定抗原B．細胞融合前，已免疫的脾細胞不需要經(jīng)過原代培養(yǎng)擴大C．用PEG誘導(dǎo)細胞融合后，可加入過量培養(yǎng)基終止融合D．雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)時，常會發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象5．使用高效的細胞毒素類藥物進行化療可以有效殺傷腫瘤細胞，為了減小藥物的毒副作用，將單克隆抗體與相應(yīng)藥物偶聯(lián)結(jié)合，制成“生物導(dǎo)彈”來定向治療癌癥。如圖為制備單克隆抗體的過程，所制得的抗體為鼠源性抗體。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．圖中的多種B淋巴細胞可在小鼠的胸腺中獲取B．②過程在選擇培養(yǎng)基中生長繁殖的細胞均能分泌所需抗體C．利用“生物導(dǎo)彈”治療癌癥可減輕藥物對正常細胞的傷害D．圖示過程獲得的鼠源性抗體可直接與藥物結(jié)合用于人體疾病的治療6．PD-L1是腫瘤細胞表面的一種蛋白質(zhì)，其能與T淋巴細胞表面的PD-1蛋白結(jié)合，抑制T淋巴細胞活化，使腫瘤細胞逃避機體免疫系統(tǒng)的監(jiān)控和清除?？筆D-L1蛋白的單克隆抗體通過與腫瘤細胞表面的PD-L1蛋白結(jié)合，使腫瘤細胞無法逃避免疫系統(tǒng)的監(jiān)控和清除，對癌癥的免疫治療具有重要意義。研究人員按如下流程制備了抗PD-L1蛋白的單克隆抗體。有關(guān)制備過程的敘述不正確的是（）A．培養(yǎng)骨髓瘤細胞和B淋巴細胞需要用到CO2培養(yǎng)箱B．誘導(dǎo)融合過程原理和植物體細胞雜交技術(shù)原理相同C．抗體檢測篩選利用了抗原-抗體結(jié)合的原理D．制備過程至少進行兩次篩選操作【例7】圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）A、①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細胞B、②中使用活性較強的病毒有利于雜交瘤細.胞的形成C、③細胞均為既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體的細胞D、④是經(jīng)多次篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細胞群【例8】抗癌"神藥”抗PD-L1單克隆抗體通過抑制T細胞.上的PD-1受體和腫瘤細胞_上的配體PD-L1結(jié)合，從而激活T細胞的功能，對抗癌癥。下列關(guān)于該藥物的制備說法錯誤的是（）A、制備該藥物前必須用PD-L1蛋白免疫小鼠B、需從小鼠的脾臟中提取B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合C、用選擇性培養(yǎng)基篩選出的雜交瘤細胞均能產(chǎn)生抗PD-L1抗體D、必須經(jīng)過多次克隆化培養(yǎng)和抗體檢測以保證抗體的純度【例9】下圖表示單克隆抗體的制備過程，有關(guān)敘述不正確的是（）A、圖中有一處明顯錯誤B、②中培養(yǎng)基應(yīng)加入具有選擇性抑制骨髓瘤細胞DNA復(fù)制的物質(zhì)C、④中的篩選是為了獲得能產(chǎn)生多種抗體的雜交瘤細胞D、⑤可以稱為一個細胞系要點歸納1．融合的原理與過程(1)原理：細胞膜的流動性。(2)過程：動物細胞融合的過程包括細胞膜融合、細胞質(zhì)融合和細胞核融合，其中細胞膜融合是細胞融合的先導(dǎo)，在細胞膜融合中體現(xiàn)出細胞膜具有一定的流動性，細胞融合的實質(zhì)是核融合。動物細胞融合完成的標志是兩個或多個細胞核融合為一個細胞核。2．融合的結(jié)果形成單核雜交細胞，具有原來兩個或多個細胞的遺傳信息，可表現(xiàn)出兩個或多個親本細胞的特點。3．動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合原理細胞膜的流動性、細胞的全能性細胞膜的流動性、細胞的增殖融合前處理先除去細胞壁先使細胞分散開使用的酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶誘導(dǎo)手段物理法：電融合法、離心法化學(xué)法：PEG融合法、高Ca2+—高pH融合法除物理法和化學(xué)法外，也可用滅活的病毒誘導(dǎo)結(jié)果雜種植株雜交細胞應(yīng)用培育植物新品種主要用于制備單克隆抗體意義克服了遠緣雜交不親和的障礙，打破了生殖隔離，擴展了雜交的親本組合【易錯警示】（1）除了受到注射的抗原的刺激外，小鼠在生活過程中還可能受到其他抗原的刺激，因此從小鼠體內(nèi)取出的多個B淋巴細胞可能產(chǎn)生多種不同的抗體，所以進行第二次篩選是非常必要的。（2）可利用抗體與抗原的特異性結(jié)合原理檢測雜交瘤細胞是否產(chǎn)生了單克隆抗體。雜交瘤細胞產(chǎn)生的單克隆抗體是一種分泌蛋白，能夠和特定的抗原結(jié)合，產(chǎn)生特定的反應(yīng)，因此可用來檢測抗體的產(chǎn)生。（3）病毒在生物技術(shù)中的應(yīng)用①滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑，不滅活的病毒不能作為誘導(dǎo)劑。②病毒在不同過程或操作中的“身份”不同。在免疫調(diào)節(jié)中病毒屬于抗原；在基因工程中可作為載體；在細胞工程中可作為誘導(dǎo)劑（4）生物導(dǎo)彈”中真正發(fā)揮治療作用的物質(zhì)是相關(guān)藥物，單克隆抗體所起的作用在于將藥物定向帶到靶細胞所在的位置，借助其導(dǎo)向作用，在原位殺死癌細胞，這樣既不損傷正常細胞，又減少了用藥劑量，因此，“生物導(dǎo)彈”可作為一種療效高、毒副作用小的新型藥物。1．在甲型流感單克隆抗體的制備過程中，雜交瘤細胞在克隆化培養(yǎng)時來自B淋巴細胞的染色體往往出現(xiàn)隨機丟失現(xiàn)象。不考慮基因間的影響和其他變異，下列敘述錯誤的是（

）A．B淋巴細胞可從多次間歇注射甲型流感疫苗的動物脾臟中篩選獲得B．利用細胞融合技術(shù)制備的甲型流感單克隆抗體可用于治療甲型流感C．利用抗體檢測篩選的雜交瘤細胞經(jīng)克隆化培養(yǎng)，具有持續(xù)產(chǎn)生甲型流感單克隆抗體的能力D．若雜交瘤細胞丟失某染色體后不能分泌單克隆抗體，則該抗體的基因可能位于該染色體上2．催乳素具有刺激排卵等功能，各種動物的催乳素結(jié)構(gòu)存在種間差異，不同哺乳動物的催乳素氨基酸同源序列達到60%~100%。現(xiàn)需制備山羊催乳素單克隆抗體，下列操作正確的是（）A．用不同動物的催乳素多次免疫小鼠B．用96孔板培養(yǎng)和篩選雜交瘤細胞時，每一個孔盡量只接種一個細胞C．用滅活的仙臺病毒處理B淋巴細胞與骨髓瘤細胞，用來篩選雜交瘤細胞D．單克隆抗體可用來治療癌癥的原因是單克隆抗體能殺傷癌細胞3．非洲豬瘟由非洲豬瘟病毒（ASFV）引起，致死率接近100%，會給家豬養(yǎng)殖業(yè)造成巨大損失。p54蛋白是ASFV侵染宿主細胞的重要結(jié)構(gòu)蛋白，某研究團隊欲制備抗p54蛋白的單克隆抗體。下列敘述錯誤的是（

）A．被ASFV侵染后，家豬僅依賴細胞免疫就能消滅部分ASFVB．制備該單克隆抗體時可用聚乙二醇或滅活病毒誘導(dǎo)細胞融合C．獲得的雜交瘤細胞在體外大規(guī)模培養(yǎng)時可能不會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象D．可利用該單克隆抗體快速準確地檢測出家豬是否感染了ASFV4．細胞融合技術(shù)在植物、動物、微生物領(lǐng)域都取得了一系列成果，如白菜一甘藍、單克隆抗體、利用光合細菌與嗜熱菌選育出了耐高溫的光合細菌等。下列有關(guān)敘述正確的是（

）A．兩種細胞完成細胞融合的標志是細胞核的融合B．在制備原生質(zhì)體時，細胞培養(yǎng)液的滲透壓應(yīng)等于或略高于細胞內(nèi)滲透壓C．將骨髓瘤細胞和B淋巴細胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)后融合的細胞即為雜交瘤細胞D．植物體細胞雜交技術(shù)屬于有性雜交，包括細胞融合和植物組織培養(yǎng)技術(shù)5．單克隆抗體被用于治療腫瘤、自身免疫性疾病、感染性疾病和移植排斥反應(yīng)等。其制備過程不涉及的操作是（

）A．誘導(dǎo)動物細胞融合 B．雜交瘤細胞的篩選C．早期胚胎培養(yǎng)和移植 D．克隆化培養(yǎng)和抗體檢測6．一個抗原往往有多個不同的抗原決定族，一個抗原決定簇只能刺激機體產(chǎn)生一種抗體，由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72注入小鼠體內(nèi)，可利用該小鼠的免疫細胞制備抗p72的單抗，也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗。下列說法正確的是（）A．注入小鼠體內(nèi)的抗原純度不影響多抗的純度B．單抗制備過程中通常將分離出的漿細胞與骨髓瘤細胞融合C．利用該小鼠只能制備出一種抗p72的單抗D．p72部分結(jié)構(gòu)改變后，可能會出現(xiàn)原單抗失效而多抗仍有效的情況7．細胞融合技術(shù)應(yīng)用廣泛，如圖為細胞融合過程，下列敘述不正確的是（

）A．借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用能將藥物特異性地帶入癌細胞所在位置B．有性雜交后代一定是可育的C．番茄—馬鈴薯”的培育是利用植物體細胞雜交技術(shù)，克服了由于生殖隔離而導(dǎo)致的遠緣雜交不親和障礙D．基因型為AaBb（兩對基因獨立遺傳）植株的花粉去壁后兩兩融合得到9種基因型細胞8．動物細胞融合和植物體細胞雜交是細胞工程的基本技術(shù)，下列關(guān)于這兩項技術(shù)的敘述，錯誤的是（

）A．動物細胞融合和植物體細胞雜交采用的方法不完全相同B．可以利用動物細胞融合技術(shù)制備單克隆抗體C．科學(xué)家利用植物體細胞雜交技術(shù)培育出番茄—馬鈴薯植株，地上結(jié)番茄，地下長馬鈴薯D．動物細胞培養(yǎng)是動物細胞融合的基礎(chǔ)，動物細胞培養(yǎng)要用到胰蛋白酶、膠原蛋白酶9．植物細胞工程與動物細胞工程中所用技術(shù)與原理不相符的是（）A．纖維素酶、果膠酶處理和胰蛋白酶處理——酶的專一性B．植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)——細胞的全能性C．原生質(zhì)體融合和動物細胞融合——生物膜的流動性D．人參細胞培養(yǎng)和雜交瘤細胞培養(yǎng)——細胞增殖10．下圖表示用仙臺病毒誘導(dǎo)動物細胞融合的部分過程，下列相關(guān)敘述正確的是（）A．細胞a和細胞b必須為同種細胞才能融合B．細胞c同時有細胞a和細胞b的遺傳物質(zhì)C．該融合過程體現(xiàn)了細胞膜具有選擇透過性D．植物細胞的融合過程與動物細胞完全相同11．（多選）抗體一藥物偶聯(lián)物（ADC）通過將藥物與特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實現(xiàn)了對腫瘤細胞的選擇性殺傷，它的作用機制如下圖所示。下列敘述錯誤的是（

）A．將免疫后的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，形成的雜交瘤細胞產(chǎn)生的抗體即為單克隆抗體B．可以利用同位素或熒光標記的單克隆抗體進行腫瘤定位C．ADC通過抗體與細胞膜上受體特異性結(jié)合后，以主動運輸方式進入腫瘤細胞D．抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞可在體外適宜條件下大規(guī)模培養(yǎng)12．（多選）為研制抗病毒A的單克隆抗體，某課題組以小鼠甲為實驗對象設(shè)計了以下實驗流程。下列敘述錯誤的是（

）A．實驗處理前需給小鼠甲注射單細胞懸液B．從功能的角度來看，篩選1使用的培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基C．篩選2依據(jù)的原理是抗原一抗體特異性結(jié)合D．只有體外配制培養(yǎng)液才能使雜交瘤細胞大量增殖13．雙特異性抗體（BsAb）是指一個抗體分子可以與兩個不同抗原或同一抗原的兩個不同抗原表位相結(jié)合，雙特異性抗體在自然狀態(tài)下并不存在，可以通過重組DNA或細胞融合技術(shù)人工制備實現(xiàn)。長春花所含的長春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是科研人員通過免疫的B淋巴細胞和雜交瘤細胞雜交技術(shù)生產(chǎn)雙特異性抗體的部分過程。圖2是某雙特異性抗體作用圖示?；卮鹣铝袉栴}。(1)圖1中①步驟注射癌胚抗原的目的是。過程③所用的HAT培養(yǎng)基從用途上看屬于選擇培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基上，細胞不能生長。(2)過程④中將雜交瘤細胞進行多倍稀釋，接種在多孔的細胞培養(yǎng)板上，使每孔細胞不超過1個，通過培養(yǎng)讓其增殖，然后利用原理檢測各孔上清液中細胞分泌的抗體，篩選出能分泌所需抗體的雜交瘤細胞。與傳統(tǒng)血清抗體相比，單克隆抗體的優(yōu)點有。(3)圖1注射長春堿后，要獲取單克隆雜交—雜交瘤細胞，方框內(nèi)至少需要經(jīng)過次篩選。體外培養(yǎng)到一定時期的單克隆雜交—雜交瘤細胞因為（答2點）等因素而分裂受阻，需進行傳代培養(yǎng)。(4)與直接使用長春堿相比，將長春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥，對人體的副作用更小，原因是。14．科研人員最新發(fā)現(xiàn)，單克隆抗體或許能成為治療艾滋?。ˋIDS）（由HIV引起的獲得性免疫缺陷綜合征）非常有效的途徑，該項研究結(jié)果能進一步促進單克隆抗體的發(fā)展。如圖為抗HIV單克隆抗體的制備過程，據(jù)圖回答下列相關(guān)問題：(1)單克隆抗體是指由一個細胞增殖形成的細胞群所產(chǎn)生的單一型抗體分子；艾滋病自愈者免疫細胞是指。(2)圖示艾滋病自愈者免疫細胞和骨髓瘤細胞在聚乙二醇、電刺激或等誘導(dǎo)因素作用下，細胞膜會發(fā)生一定的損傷，由于細胞膜具有一定的，從而細胞就可以實現(xiàn)相互粘連而融合在一起。(3)甲、乙、丙中只含雜交瘤細胞的是，②過程的目的是篩選具有（特點）的雜交瘤細胞。15．雙特異性單克隆抗體是指可同時與癌細胞和藥物結(jié)合的特異性抗體。下圖是科研人員通過雜交—雜交瘤細胞技術(shù)（免疫的B細胞和雜交瘤細胞雜交技術(shù)）生產(chǎn)能同時識別癌胚抗原和長春堿（一種抗癌藥物）的雙特異性單克隆抗體的部分過程。分析回答：(1)過程①注射癌胚抗原，抗原是指，制備雙特異性單克隆抗體的過程中用到的技術(shù)有。(2)過程②誘導(dǎo)融合的方法是，假設(shè)僅考慮某兩個細胞的融合，則經(jīng)過②過程試管內(nèi)含有種類型的細胞。(3)過程③能在HAT培養(yǎng)基上生長的細胞是，未融合的B淋巴細胞經(jīng)過多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是。(4)經(jīng)過程③篩選得到的細胞還需轉(zhuǎn)移至多孔培養(yǎng)板中進行過程④，原因是。(5)獲得的單克隆雜交—雜交瘤細胞在體外條件下培養(yǎng)或，均可提取出大量的雙特異性單克隆抗體。2.2.2動物細胞融合技術(shù)與單克隆抗體Part1目標任務(wù)：對接課標，了解目標Part1目標任務(wù)：對接課標，了解目標Part2預(yù)習導(dǎo)學(xué)：自主梳理+預(yù)習檢測，掌握基本知識點Part3探究提升：代入情景+典例精講，深入學(xué)習知識要點單克隆抗體的應(yīng)用Part4網(wǎng)絡(luò)梳理：建立知識間的聯(lián)系Part5強化訓(xùn)練：必刷經(jīng)典試題，能力提升內(nèi)容導(dǎo)航新課程標準學(xué)習目標1.闡明動物細胞融合是指通過物理、化學(xué)或生物學(xué)等手段，使兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。2．概述細胞融合技術(shù)是單克隆抗體制備的重要技術(shù)。1.說明動物細胞融合與植物體細胞雜交的異同。2.簡述動物細胞融合和單克隆抗體制備的過程、方法與原理。3.列舉動物細胞融合技術(shù)與單克隆抗體技術(shù)的優(yōu)點及實際應(yīng)用。自主梳理一、動物細胞融合技術(shù)1.概念：使兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的技術(shù)。融合后形成的雜交細胞具有原來兩個或多個細胞的遺傳信息。2.誘導(dǎo)動物細胞融合的常用方法（1）物理法：電融合法（2）化學(xué)法：PEG融合等（3）生物法：滅活病毒誘導(dǎo)等3.原理：細胞膜的流動性。4．意義：突破了有性雜交的局限，使遠緣雜交成為可能。5．動物細胞融合技術(shù)的應(yīng)用(1)成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和培育生物新品種等的重要手段。(2)利用動物細胞融合技術(shù)發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)，為制造單克隆抗體開辟了新途徑。二、單克隆抗體及其應(yīng)用1.常規(guī)抗體與單克隆抗體(1)常規(guī)抗體①產(chǎn)生:抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法是向動物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原,使動物產(chǎn)生抗體,然后從動物血清中分離所需抗體。②缺點:產(chǎn)量低、純度低,制備的抗體特異性差。(2)單克隆抗體①產(chǎn)生：由單一B淋巴細胞細胞增殖產(chǎn)生的單一抗體。②優(yōu)點:能準確地識別抗原的細微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,并且可以大量制備。2.單克隆抗體的制備(1)B淋巴細胞特點：一種B淋巴細胞分泌一種特異性抗體。(2)骨髓瘤細胞特點：能在體外大量增殖。(3)雜交瘤細胞特點：B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合得到的雜交瘤細胞，既能大量增殖；又能產(chǎn)生大量抗體。（4）制備過程①免疫處理提供B淋巴細胞的動物必須預(yù)先注射特定抗原進行免疫處理，獲得能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細胞。②誘導(dǎo)融合③通過篩選獲得雜交瘤細胞用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選：在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞才能生長。④通過篩選獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞對上述經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞(抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞)。⑤獲取單克隆抗體的場所若在細胞培養(yǎng)液中進行雜交瘤細胞培養(yǎng)，則從細胞培養(yǎng)液中提??；若在小鼠或其他動物腹腔中培養(yǎng)，則從小鼠腹水中提取。(3)單克隆抗體的應(yīng)用①被廣泛用作診斷試劑，在多種疾病的診斷和病原體鑒定中發(fā)揮重要作用。如：用抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體做成的“早早孕診斷試劑盒”.在妊娠第8天就可以做出診斷,且準確率高達90%以上。又如：利用同位素或熒光標記的單克隆抗體在特定組織中成像的技術(shù)，可定位診斷腫瘤、心血管畸形等疾病。②可以運載藥物抗體——藥物偶聯(lián)物(ADC)通過細胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實現(xiàn)了對腫瘤細胞的選擇性殺傷。③自身也可用于治療疾病。預(yù)習檢測（限時10分鐘）1．植物體細胞雜交和動物細胞融合兩項技術(shù)有相似也有不同。下列敘述正確的是（）A．愈傷組織經(jīng)過脫分化、再分化后才能形成雜種植株B．細胞融合過程中發(fā)生的變異主要是基因重組C．兩種技術(shù)均可運用PEG融合法或電融合法來促進細胞融合D．植物細胞融合和動物細胞融合時均會用到纖維素酶和胰蛋白酶【答案】C【詳解】A、雜種細胞經(jīng)脫分化形成愈傷組織，再經(jīng)過再分化形成雜種植株，A錯誤；B、基因重組一般發(fā)生在減數(shù)分裂過程，細胞融合過程中發(fā)生的變異不是基因重組，B錯誤；C、電融合法、PEG融合法均可用于動植物細胞的融合，C正確；D、去除植物細胞的細胞壁利用纖維素酶或果膠酶，而分散動物細胞可以用胰蛋白酶或膠原蛋白酶，D錯誤。故選C。2．下列是應(yīng)用動物細胞工程技術(shù)獲取單克隆抗X抗體的具體操作步驟，選項中對單克隆抗體制備的相關(guān)敘述不正確的是（）①將X抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B淋巴細胞②從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取骨髓瘤細胞③利用促細胞融合因子使兩種細胞發(fā)生融合④將雜交瘤細胞注入小鼠腹腔培養(yǎng)⑤篩選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細胞⑥從腹水中提取抗體A．實驗順序應(yīng)當是①②③⑤④⑥B．④過程中產(chǎn)生的多個雜交瘤細胞也稱為克隆化培養(yǎng)C．③過程獲得的細胞均可無限增殖D．③到⑤的過程中通常要經(jīng)過兩次篩選【答案】C【詳解】AD、單克隆抗體的制備過程為①②③⑤④⑥，其中③到⑤過程通常要經(jīng)過兩次篩選，即先篩選出雜交瘤細胞，再篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞，A、D正確；B、④過程是將雜交瘤細胞注入小鼠體內(nèi)培養(yǎng)，雜交瘤細胞無限增殖，也稱為克隆化培養(yǎng)，B正確；C、③過程獲得的細胞不都能無限增殖，如B淋巴細胞自身融合的細胞不能無限增殖，因此還需要用選擇培養(yǎng)基進行篩選，C錯誤。故選C。3．治療最兇險乳腺癌“HER2+”的抗體-藥物偶聯(lián)物（T-DM1）被納入2023年醫(yī)保目錄名單。T-DM1是由曲妥珠單抗、細胞毒性藥物DM1偶聯(lián)形成。T-DM1作用機制如下圖，下列有關(guān)敘述正確的是（）

A．經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來的雜交瘤細胞不可直接生產(chǎn)單克隆抗體B．T-DM1中的抗體主要是發(fā)揮治療效應(yīng)，殺傷靶細胞C．T-DM1通過主動運輸進入癌細胞D．曲妥珠單抗制備中可選擇DM1作為抗原刺激小鼠產(chǎn)生免疫應(yīng)答【答案】A【詳解】A、經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來的雜交瘤細胞（含有各種雜交瘤細胞）不可直接生產(chǎn)單克隆抗體，還需經(jīng)過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，A正確；B、T-DM1由曲妥珠單抗、細胞毒性藥物DM1偶聯(lián)前成，分析題圖曲妥珠單抗可以與細胞膜表面的HER2+特異性結(jié)合，將DM1準確帶至乳腺癌細胞，細胞毒性藥物才能殺傷靶細胞，B錯誤；C、T-DM1（大分子）通過胞吞運輸進入癌細胞，C錯誤；D、DM1是細胞毒性藥物，不能與HER2+特異性結(jié)合，其免疫小鼠后產(chǎn)生的抗體也不能與HER2+特異性結(jié)合，所以不選擇它作為制備單抗的抗原，D錯誤。故選A。4．雙抗指的是一個抗體可以和兩個不同抗原或一個抗原的兩個不同表位發(fā)生特異性結(jié)合。需要人工制備兩種單克隆抗體并在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)制備。最新研究發(fā)現(xiàn)春花堿有良好的抗腫瘤效果。下圖為人工制備雙抗的過程，圖右下角為某雙抗發(fā)揮作用圖示。下列敘述錯誤的是（

）A．第一次篩選后的細胞進行克隆化培養(yǎng)，傳代培養(yǎng)過程中會發(fā)生貼壁和接觸抑制B．第二次篩選是為了確定分泌抗體的特異性，可以通過抗原抗體雜交的方式檢驗C．該方法制備的二抗與傳統(tǒng)的抗體-藥物偶聯(lián)物相比特異性相似D．將上述過程中春花堿換成熒光蛋白，可能會有助于輔助臨床診斷【答案】A【詳解】A、第一次篩選后的細胞是雜交瘤細胞，具有腫瘤細胞的特征，故克隆化培養(yǎng)不會有接觸抑制的現(xiàn)象，A錯誤；B、第二次篩選為了確定雜交瘤細胞產(chǎn)生的抗體是所需要的，利用抗原抗體特異性結(jié)合進行檢驗，B正確；C、圖中的二抗識別腫瘤細胞只依賴一種抗原，傳統(tǒng)ADC識別靶細胞也只依賴一種抗原，故特異性相似，C正確；D、將春花堿換成熒光蛋白，臨床使用雙抗與熒光蛋白即可指示腫瘤細胞位置，起到輔助診斷的效果，D正確。選A。5．如圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的細胞毒性T細胞B．②中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細胞的形成C．③同時具有B淋巴細胞和小鼠骨髓瘤細胞的特性D．④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細胞【答案】D【詳解】A、①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的B淋巴細胞，A錯誤；B、胰蛋白酶可使組織細胞分散為單個細胞，B錯誤；C、③為雜交細胞，若是B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成的雜交瘤細胞，才同時具有B淋巴細胞（可產(chǎn)生抗體）和骨髓瘤細胞（可大量增殖）的特性，C錯誤；D、④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細胞，D正確；故選D。6．與植物體細胞雜交相比，動物細胞融合的原理及其特有的誘導(dǎo)方法分別是（）A．細胞膜具有流動性、離心法B．細胞膜具有流動性、滅活病毒誘導(dǎo)法C．細胞的增殖、電融合法D．細胞的增殖、滅活病毒誘導(dǎo)法【答案】B【詳解】植物體細胞雜交的原理是細胞膜具有流動性、植物細胞一般具有全能性，動物細胞融合的原理是細胞膜具有流動性；動物細胞融合的常用方法有PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等，其中滅活病毒誘導(dǎo)法是其特有的方法，而PEG融合法和電融合法也可用于誘導(dǎo)植物體細胞雜交，故動物細胞融合的原理是細胞膜具有流動性，特有的誘導(dǎo)方法是滅活病毒誘導(dǎo)法，B正確，ACD錯誤；故選B。7．下列關(guān)于動物細胞融合的說法，錯誤的是（）A．細胞融合前要用酶解法將組織分散成單個細胞B．細胞融合的原理是細胞膜的流動性C．融合后得到的雜交細胞具有兩個或多個親本細胞的遺傳信息D．融合后得到的雜交細胞具有兩個細胞核【答案】D【詳解】A、動物細胞融合前要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶將組織分散成單個細胞，A正確；B、動物細胞融合的過程涉及膜的融合，其原理是細胞膜的流動性，B正確；C、動物細胞融合是指兩個或兩個以上的細胞合并成為一個細胞的過程，融合后得到的雜交細胞具有兩個或多個親本細胞的遺傳信息，C正確；D、融合后得到的雜交細胞只有一個細胞核，D錯誤。故選D。8．有關(guān)動物細胞融合的敘述，正確的是（）A．動物細胞融合的結(jié)果是獲得新個體B．只有兩個動物細胞結(jié)合成一個細胞的過程才叫動物細胞融合C．動物細胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理是相同的D．滅活的病毒是動物細胞融合和植物體細胞雜交常用的促融劑【答案】C【詳解】A、動物細胞的全能性受到限制，動物細胞融合的結(jié)果是獲得融合細胞，A錯誤；B、動物細胞融合又叫細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程，B錯誤；C、動物細胞融合與植物細胞原生質(zhì)體融合，均運用細胞膜的流動性，C正確；D、滅活的病毒只能誘導(dǎo)動物細胞融合，不能誘導(dǎo)植物的原生質(zhì)體融合，D錯誤。故選C。9．CD3單克隆抗體（OKT3）為第一個用于臨床的抗T細胞的單克隆抗體，該抗體針對T細胞上CD3抗原，能抑制免疫系統(tǒng)的功能，有利于器官移植。下列有關(guān)敘述錯誤的是（

）A．利用細胞膜的流動性的生物學(xué)原理即可制備OKT3B．將提純的CD3抗原注入小鼠體內(nèi)可產(chǎn)生免疫反應(yīng)，分離出B細胞C．制備OKT3過程中使用了胰蛋白酶和聚乙二醇等溶液D．經(jīng)多次篩選才能獲得既能產(chǎn)生抗體，又能無限增殖的細胞【答案】A【詳解】A、單克隆抗體的制備過程中所依據(jù)的生物學(xué)原理有兩個，即細胞增殖和細胞膜的流動性，A錯誤；B、要制備OKT3,需要將CD抗原注入小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫反應(yīng)，才能從其體內(nèi)分離出相應(yīng)的B淋巴細胞，B正確；C、制備OKT3時，首先要將抗原注入小鼠體內(nèi)，以獲得相應(yīng)的B淋巴細胞，然后取小鼠的脾臟組織，用胰蛋白酶處理獲得單細胞后，用該細胞和小鼠的骨髓瘤細胞在聚乙二醇的誘導(dǎo)下促進細胞融合，C正確；D、經(jīng)過多次篩選，最終獲得既能產(chǎn)生抗體，又能無限增殖的雜交瘤細胞，D正確。故選A。10．小膠質(zhì)細胞參與一系列神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生過程，包括阿爾茨海默病、帕金森病、亨廷頓舞蹈癥、肌萎縮側(cè)索硬化等。科研人員制備了抗小膠質(zhì)細胞表面標志蛋白CD22的單克隆抗體，具體方法如圖所示。下列對抗CD22單克隆抗體的制備的分析，不合理的是（

）

A．步驟①和步驟⑤向小鼠注射的都是CD22B．步驟②所用的SP2/0細胞具有無限增殖的特點C．吸?、壑械纳锨逡旱舰艿呐囵B(yǎng)孔中后須加入CD22進行檢測D．步驟⑥提取的抗CD22抗體，可抑制神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生【答案】A【詳解】A、要獲得抗CD22單克隆抗體，步驟①應(yīng)該注射CD22蛋白（CD22抗原），步驟⑤是將分泌抗CD22抗體的雜交瘤細胞注入小鼠體內(nèi)培養(yǎng)，以獲得大量單克隆抗體，A錯誤；B、步驟②所用的SP2/0細胞是骨髓瘤細胞，特點是能在體外無限增殖，B正確；C、根據(jù)抗原—抗體雜交原理，應(yīng)該用CD22蛋白檢測其中是否含抗CD22蛋白的抗體，因此，步驟④中需加入CD22蛋白進行專一抗體檢測，C正確；D、步驟⑥提取的抗CD22抗體，能與抗小膠質(zhì)細胞表面標志蛋白CD22特異性結(jié)合，可抑制神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生，D正確。故選A。11．將小鼠細胞與人細胞融合后獲得“人—鼠融合細胞”，發(fā)現(xiàn)人的染色體會隨機丟失，最終只保留一條或幾條染色體。下列敘述正確的是（

）A．可利用PCR技術(shù)檢測人的基因表達產(chǎn)物B．小鼠細胞與人細胞融合表明細胞膜具有信息識別的功能C．“人—鼠融合細胞”的獲得突破了人和小鼠之間的生殖隔離D．可通過檢測“人—鼠融合細胞”基因表達產(chǎn)物，初步定位人基因位于幾號染色體【答案】D【詳解】A、基因表達的產(chǎn)物多是蛋白質(zhì)，不能用PCR檢測，A錯誤；B、小鼠細胞與人細胞在誘導(dǎo)下融合，表明細胞膜具有流動性，B錯誤；C、如果“人—鼠融合細胞”的獲得突破生殖隔離需要產(chǎn)生可育的后代，C錯誤；D、融合實驗中，人染色體會隨機丟失，最終只保留一條或幾條染色體，可通過檢測“人－鼠融合細胞”基因表達產(chǎn)物，初步定位人基因位于幾號染色體，D正確。故選D。?環(huán)節(jié)單克隆抗體的應(yīng)用【情景材料】使用高效的細胞毒素類藥物進行化療可以有效殺傷腫瘤細胞。但細胞毒素沒有特異性，在殺傷腫瘤細胞的同時還會對健康細胞造成傷害，這限制了它在臨床上的應(yīng)用?？贵w一藥物偶聯(lián)物(antibody-drugconjugate，ADC)通過將細胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實現(xiàn)了對腫瘤細胞的選擇性殺傷。ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細胞毒素)三部分組成，它的作用機制如下圖所示。【問題探究】1.ADC的抗體和藥物各具有什么作用?2.除了細胞毒素，還有哪些物質(zhì)理論上可以作為ADC偶聯(lián)的藥物?3.單克隆抗體診斷試劑盒和ADC在臨床應(yīng)用上各具有什么優(yōu)勢?典例精講【例1】猴痘是一種病毒性人畜共患病，在人類中出現(xiàn)的癥狀與過去在天花患者身上所看到的癥狀相似，B6R蛋白是猴痘病毒的抗原。為制備抗B6R蛋白的單克隆抗體，研究人員進行了相關(guān)實驗，如圖所示，其中①~④表示細胞。下列敘述正確的是（）A．細胞①含有從小鼠的脾中得到的能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細胞B．誘導(dǎo)細胞①②融合的常用方法與誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法相同C．可將抗體檢測呈陰性的雜交瘤細胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)D．圖中的培養(yǎng)瓶需要置于含有95%CO2和5%O2的混合氣體中培養(yǎng)【答案】A【詳解】A、單克隆抗體制備過程中需要將產(chǎn)生特定抗體的漿細胞與骨髓瘤細胞融合，給小鼠注射B6R蛋白的目的是使小鼠針對該抗原產(chǎn)生特異性免疫，從而使體內(nèi)出現(xiàn)能產(chǎn)生抗B6R蛋白抗體的漿細胞，因此從小鼠脾臟提取的細胞①含有能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細胞，A正確；B、誘導(dǎo)動物細胞融合特有的方法是滅活的病毒，因此誘導(dǎo)細胞①②融合的常用方法與誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法不完全相同，B錯誤；C、抗體檢測呈陰性的雜交瘤細胞說明其產(chǎn)生的抗體不是所需的抗體，因此不能培養(yǎng)該雜交瘤細胞，應(yīng)將抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠的腹腔內(nèi)大量培養(yǎng)，C錯誤；D、圖中的培養(yǎng)瓶需要置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體中培養(yǎng)，D錯誤。故選A?！纠?】CTLA-4和PD-1均是T細胞表面的受體分子，與特定分子結(jié)合后，能抑制T細胞激活，或使T細胞進入凋亡程序，從而使機體腫瘤細胞免受T淋巴細胞攻擊?？笴TLA-4或抗PD-1單克隆抗體具有較好的抗腫瘤效果。如圖所示，科研人員現(xiàn)將兩種單克隆抗體在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)成抗CTLA-4和抗PD-1的雙克隆抗體，顯示具有更好的療效。下列敘述正確的是（

）

A．圖中一分子雙抗能結(jié)合兩個CTLA-4分子和兩個PD-1分子B．雙克隆抗體與腫瘤細胞的結(jié)合具有更強的特異性，從而減少副作用C．同時用CTLA-4和PD-1免疫后提取的漿細胞，可與骨髓瘤細胞融合成同時分泌兩種抗體的雜交瘤細胞D．使用雙克隆抗體治療腫瘤原理是讓機體產(chǎn)生更強的細胞免疫反應(yīng)【答案】D【詳解】A、將兩種單克隆抗體在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)成抗CTLA-4和抗PD-1的雙克隆抗體，并不是一分子雙抗能結(jié)合兩個CTLA-4分子和兩個PD-1分子，A錯誤；B、雙克隆抗體與T細胞表面的CTLA-4和PD-1受體分子結(jié)合，顯示出抗腫瘤的更好的效果，B錯誤；C、同時用CTLA-4和PD-1免疫后提取B淋巴細胞，然后與骨髓瘤細胞融合融合成分別形成分泌兩種抗體的雜交瘤細胞，C錯誤；D、雙克隆抗體可結(jié)合T細胞表面的CTLA-4和PD-1受體分子，T細胞可以發(fā)揮細胞免疫作用，所以使用雙克隆抗體治療腫瘤原理是讓機體產(chǎn)生更強的細胞免疫反應(yīng)，D正確。故選D。【例3】P蛋白是非洲豬瘟病毒（ASFV）的重要抗原。為了能夠快速診斷ASFV，研究者制備相應(yīng)的雜交瘤細胞R3E9。有關(guān)敘述合理的是（

）A．B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合獲得的都是雜交瘤細胞B．雜交瘤細胞在培養(yǎng)過程中需要加入95%的O2和5%的CO2C．經(jīng)過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測可篩選出能夠產(chǎn)生P蛋白的R3E9D．體外培養(yǎng)R3E9可以獲得針對P蛋白的單克隆抗體【答案】D【詳解】A、若只考慮細胞的兩兩融合，B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合后可得到雜交瘤細胞、B淋巴細胞自身融合細胞、骨髓瘤細胞自身融合細胞3種融合細胞，A錯誤；B、雜交瘤細胞在傳代培養(yǎng)中需要加入95%的空氣和5%的CO2，B錯誤；C、克隆化培養(yǎng)和抗體檢測可篩選出能夠產(chǎn)生抗P蛋白抗體的R3E9，C錯誤；D、通過體外培養(yǎng)雜交瘤細胞可獲得特定的單克隆抗體，D正確。故選D。【例4】關(guān)于制備單克隆抗體的過程，下列敘述錯誤的是（

）A．為獲得足量相應(yīng)的B細胞，可多次給小鼠注射特定抗原B．細胞融合前，已免疫的脾細胞不需要經(jīng)過原代培養(yǎng)擴大C．用PEG誘導(dǎo)細胞融合后，可加入過量培養(yǎng)基終止融合D．雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)時，常會發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象【答案】D【詳解】A、制備單克隆抗體的過程中，需反復(fù)向小鼠體內(nèi)注射特定抗原，刺激相應(yīng)B淋巴細胞的產(chǎn)生，A正確；B、一般認為，已免疫的脾細胞(含漿細胞)中已含足夠數(shù)量的能產(chǎn)生特異性抗體的細胞，不需要通過原代培養(yǎng)擴大細胞數(shù)量，高度分化的細胞也不能通過原代培養(yǎng)擴大細胞數(shù)量，B正確；C、通過添加適宜濃度的PEG進行融合，在原生質(zhì)體融合一定時間后，加入過量的培養(yǎng)基進行稀釋，稀釋的目的是降低PEG濃度，使其失去融合作用，C正確；D、雜交瘤細胞培養(yǎng)時不會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，D錯誤。故選D?！纠?】使用高效的細胞毒素類藥物進行化療可以有效殺傷腫瘤細胞，為了減小藥物的毒副作用，將單克隆抗體與相應(yīng)藥物偶聯(lián)結(jié)合，制成“生物導(dǎo)彈”來定向治療癌癥。如圖為制備單克隆抗體的過程，所制得的抗體為鼠源性抗體。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．圖中的多種B淋巴細胞可在小鼠的胸腺中獲取B．②過程在選擇培養(yǎng)基中生長繁殖的細胞均能分泌所需抗體C．利用“生物導(dǎo)彈”治療癌癥可減輕藥物對正常細胞的傷害D．圖示過程獲得的鼠源性抗體可直接與藥物結(jié)合用于人體疾病的治療【答案】C【詳解】A、用特定的抗原對小鼠進行免疫后，從小鼠的脾中得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細胞，而胸腺中主要是T細胞發(fā)育和成熟的場所，A錯誤；B、②過程能在選擇培養(yǎng)基中生長繁殖的細胞均為雜交瘤細胞，但不一定能分泌所需抗體，B錯誤；C、細胞毒素類藥物對正常細胞也有殺傷作用，“生物導(dǎo)彈”可定向治療癌癥，減輕藥物對正常細胞的傷害，C正確；D、由題圖過程獲得的單克隆抗體屬于鼠源性抗體，直接與藥物結(jié)合作用于人體可能會被人體的免疫系統(tǒng)識別，誘發(fā)人體免疫反應(yīng)，D錯誤。故選C?！纠?】PD-L1是腫瘤細胞表面的一種蛋白質(zhì)，其能與T淋巴細胞表面的PD-1蛋白結(jié)合，抑制T淋巴細胞活化，使腫瘤細胞逃避機體免疫系統(tǒng)的監(jiān)控和清除?？筆D-L1蛋白的單克隆抗體通過與腫瘤細胞表面的PD-L1蛋白結(jié)合，使腫瘤細胞無法逃避免疫系統(tǒng)的監(jiān)控和清除，對癌癥的免疫治療具有重要意義。研究人員按如下流程制備了抗PD-L1蛋白的單克隆抗體。有關(guān)制備過程的敘述不正確的是（）A．培養(yǎng)骨髓瘤細胞和B淋巴細胞需要用到CO2培養(yǎng)箱B．誘導(dǎo)融合過程原理和植物體細胞雜交技術(shù)原理相同C．抗體檢測篩選利用了抗原-抗體結(jié)合的原理D．制備過程至少進行兩次篩選操作【答案】B【詳解】A、培養(yǎng)骨髓瘤細胞和B淋巴細胞需要用到創(chuàng)造適宜的氣體環(huán)境，95%空氣和5%的CO2，CO2有利于維持培養(yǎng)液pH，所以要用到CO2培養(yǎng)箱，A正確；B、誘導(dǎo)融合過程原理是細胞膜具有一定的流動性，植物體細胞雜交技術(shù)原理是細胞膜具有一定的流動性和植物細胞的全能性，B錯誤；C、抗原與抗體的結(jié)合具有特異性，可利用抗原-抗體結(jié)合的原理篩選特定雜交瘤細胞，C正確；D、制備過程第一次篩選出雜交瘤細胞，第二次需要篩選出產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞，為了抗體的純度，抗體檢測篩選需要進行多次操作，D正確。故選B?！纠?】圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述正確的是（）A、①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細胞B、②中使用活性較強的病毒有利于雜交瘤細.胞的形成C、③細胞均為既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體的細胞D、④是經(jīng)多次篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細胞群【答案】D【詳解】①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)B細胞，A錯誤；②動物細胞融合中使用滅活的病毒有利于雜交瘤細胞的形成，B錯誤；效應(yīng)B細胞與骨髓瘤細胞進行融合，只考慮兩兩融合會有三種結(jié)果：雜交瘤細胞、骨髓瘤細胞自身融合細胞、B細胞自身融合細胞等，只有雜交瘤細胞既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體，C錯誤；④是經(jīng)多次篩選、培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的雜交瘤細胞群，可以經(jīng)體內(nèi)培養(yǎng)或體外培養(yǎng)，產(chǎn)生單克隆抗體?！纠?】抗癌"神藥”抗PD-L1單克隆抗體通過抑制T細胞.上的PD-1受體和腫瘤細胞_上的配體PD-L1結(jié)合，從而激活T細胞的功能，對抗癌癥。下列關(guān)于該藥物的制備說法錯誤的是（）A、制備該藥物前必須用PD-L1蛋白免疫小鼠B、需從小鼠的脾臟中提取B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合C、用選擇性培養(yǎng)基篩選出的雜交瘤細胞均能產(chǎn)生抗PD-L1抗體D、必須經(jīng)過多次克隆化培養(yǎng)和抗體檢測以保證抗體的純度【答案】C【詳解】A、制備該藥物前必須用PD-L1蛋白兔疫小鼠，得到相應(yīng)的B淋巴細胞（效應(yīng)B細胞），A正確；B、制備單克隆抗體，需從小鼠的脾臟中提取B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，B正確；C、用選擇性培養(yǎng)基篩選出的雜交瘤細胞不一定能產(chǎn)生抗PD-L1抗體，還需要進行抗體檢測，C錯誤；D、為保證抗體的純度，必須經(jīng)過多次克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，D正確。故選C?！纠?】下面為制備單克隆抗體過程示意圖，下列相關(guān)敘述錯誤的是()。A．④中的篩選是為了獲得能產(chǎn)生多種抗體的雜交瘤細胞B．②中培養(yǎng)基應(yīng)加入選擇性抑制骨髓瘤細胞DNA分子復(fù)制的物質(zhì)C．上圖中有一處明顯錯誤D．⑤可以無限增殖【答案】A【詳解】A、單克隆抗體制備過程中，第二次篩選的目的是獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞，④屬于單克隆抗體制備過程的第二次篩選，A錯誤；B、由于骨髓瘤細胞能無限增殖，因此需要在培養(yǎng)基中加入抑制骨髓瘤細胞DNA復(fù)制的物質(zhì)，以選擇出骨髓瘤細胞和B細胞融合的雜交細胞，B正確；C、圖中有一處錯誤，即沒有先給小鼠進行免疫，C正確；D、⑤是能專一產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細胞，雜交瘤細胞的特點是既能無限增殖又能產(chǎn)生特定抗體，D正確。故選A。要點歸納1．融合的原理與過程(1)原理：細胞膜的流動性。(2)過程：動物細胞融合的過程包括細胞膜融合、細胞質(zhì)融合和細胞核融合，其中細胞膜融合是細胞融合的先導(dǎo)，在細胞膜融合中體現(xiàn)出細胞膜具有一定的流動性，細胞融合的實質(zhì)是核融合。動物細胞融合完成的標志是兩個或多個細胞核融合為一個細胞核。2．融合的結(jié)果形成單核雜交細胞，具有原來兩個或多個細胞的遺傳信息，可表現(xiàn)出兩個或多個親本細胞的特點。3．動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合原理細胞膜的流動性、細胞的全能性細胞膜的流動性、細胞的增殖融合前處理先除去細胞壁先使細胞分散開使用的酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶誘導(dǎo)手段物理法：電融合法、離心法化學(xué)法：PEG融合法、高Ca2+—高pH融合法除物理法和化學(xué)法外，也可用滅活的病毒誘導(dǎo)結(jié)果雜種植株雜交細胞應(yīng)用培育植物新品種主要用于制備單克隆抗體意義克服了遠緣雜交不親和的障礙，打破了生殖隔離，擴展了雜交的親本組合【易錯警示】（1）除了受到注射的抗原的刺激外，小鼠在生活過程中還可能受到其他抗原的刺激，因此從小鼠體內(nèi)取出的多個B淋巴細胞可能產(chǎn)生多種不同的抗體，所以進行第二次篩選是非常必要的。（2）可利用抗體與抗原的特異性結(jié)合原理檢測雜交瘤細胞是否產(chǎn)生了單克隆抗體。雜交瘤細胞產(chǎn)生的單克隆抗體是一種分泌蛋白，能夠和特定的抗原結(jié)合，產(chǎn)生特定的反應(yīng)，因此可用來檢測抗體的產(chǎn)生。（3）病毒在生物技術(shù)中的應(yīng)用①滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑，不滅活的病毒不能作為誘導(dǎo)劑。②病毒在不同過程或操作中的“身份”不同。在免疫調(diào)節(jié)中病毒屬于抗原；在基因工程中可作為載體；在細胞工程中可作為誘導(dǎo)劑（4）生物導(dǎo)彈”中真正發(fā)揮治療作用的物質(zhì)是相關(guān)藥物，單克隆抗體所起的作用在于將藥物定向帶到靶細胞所在的位置，借助其導(dǎo)向作用，在原位殺死癌細胞，這樣既不損傷正常細胞，又減少了用藥劑量，因此，“生物導(dǎo)彈”可作為一種療效高、毒副作用小的新型藥物。1．在甲型流感單克隆抗體的制備過程中，雜交瘤細胞在克隆化培養(yǎng)時來自B淋巴細胞的染色體往往出現(xiàn)隨機丟失現(xiàn)象。不考慮基因間的影響和其他變異，下列敘述錯誤的是（

）A．B淋巴細胞可從多次間歇注射甲型流感疫苗的動物脾臟中篩選獲得B．利用細胞融合技術(shù)制備的甲型流感單克隆抗體可用于治療甲型流感C．利用抗體檢測篩選的雜交瘤細胞經(jīng)克隆化培養(yǎng)，具有持續(xù)產(chǎn)生甲型流感單克隆抗體的能力D．若雜交瘤細胞丟失某染色體后不能分泌單克隆抗體，則該抗體的基因可能位于該染色體上【答案】C【詳解】A、抗原能激發(fā)機體的特異性免疫過程，對動物進行間歇注射抗原處理，以刺激動物機體產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細胞，A正確；B、抗體與抗原能特異性結(jié)合，細胞融合技術(shù)制備的甲型流感單克隆抗體可以治療甲型流感，B正確；C、雜交瘤細胞在克隆化培養(yǎng)過程中來自B淋巴細胞的染色體往往出現(xiàn)隨機丟失現(xiàn)象，若丟失的染色體含有產(chǎn)生甲型流感抗體的基因，則利用抗體檢測篩選的雜交瘤細胞不一定具有持續(xù)產(chǎn)生甲型流感抗體的能力，C錯誤；D、與親代雜交瘤細胞相比較，若減少某條染色體后分泌單克隆抗體的功能缺失，說明該抗體的基因位于這條染色體上，D正確。故選C。2．催乳素具有刺激排卵等功能，各種動物的催乳素結(jié)構(gòu)存在種間差異，不同哺乳動物的催乳素氨基酸同源序列達到60%~100%?，F(xiàn)需制備山羊催乳素單克隆抗體，下列操作正確的是（）A．用不同動物的催乳素多次免疫小鼠B．用96孔板培養(yǎng)和篩選雜交瘤細胞時，每一個孔盡量只接種一個細胞C．用滅活的仙臺病毒處理B淋巴細胞與骨髓瘤細胞，用來篩選雜交瘤細胞D．單克隆抗體可用來治療癌癥的原因是單克隆抗體能殺傷癌細胞【答案】B【詳解】A、各種動物的催乳素結(jié)構(gòu)存在種間差異，用不同動物的催乳素多次免疫小鼠，會產(chǎn)生多種抗體的漿細胞，現(xiàn)需制備山羊催乳素單克隆抗體，需用山羊的催乳素多次免疫小鼠，A錯誤；B、用96孔板培養(yǎng)和篩選雜交瘤細胞時，每一個孔盡量只接種一個細胞，B正確；C、用滅活的仙臺病毒處理B淋巴細胞與骨髓瘤細胞，目的是促進細胞融合，C錯誤；D、單克隆抗體能與癌細胞表面特異性受體結(jié)合將化學(xué)藥物送入癌細胞殺傷癌細胞，單純的單克隆抗體不能殺傷癌細胞，D錯誤。故選B。3．非洲豬瘟由非洲豬瘟病毒（ASFV）引起，致死率接近100%，會給家豬養(yǎng)殖業(yè)造成巨大損失。p54蛋白是ASFV侵染宿主細胞的重要結(jié)構(gòu)蛋白，某研究團隊欲制備抗p54蛋白的單克隆抗體。下列敘述錯誤的是（

）A．被ASFV侵染后，家豬僅依賴細胞免疫就能消滅部分ASFVB．制備該單克隆抗體時可用聚乙二醇或滅活病毒誘導(dǎo)細胞融合C．獲得的雜交瘤細胞在體外大規(guī)模培養(yǎng)時可能不會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象D．可利用該單克隆抗體快速準確地檢測出家豬是否感染了ASFV【答案】A【詳解】A、感染非洲豬瘟病毒后，病毒是胞內(nèi)寄生物，因此機體依賴體液免疫和細胞免疫等特異性免疫過程清除病毒，A錯誤；B、制備單克隆抗體時，誘導(dǎo)動物細胞融合常用聚乙二醇PEG、滅活病毒、電刺激等方法，B正確；C、雜交瘤細胞培養(yǎng)時不會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，C正確；D、單克隆抗體具有特異性強，靈敏度高的特點，故可利用該單克隆抗體快速準確地檢測出家豬是否感染了ASFV，D正確。故選A。4．細胞融合技術(shù)在植物、動物、微生物領(lǐng)域都取得了一系列成果，如白菜一甘藍、單克隆抗體、利用光合細菌與嗜熱菌選育出了耐高溫的光合細菌等。下列有關(guān)敘述正確的是（

）A．兩種細胞完成細胞融合的標志是細胞核的融合B．在制備原生質(zhì)體時，細胞培養(yǎng)液的滲透壓應(yīng)等于或略高于細胞內(nèi)滲透壓C．將骨髓瘤細胞和B淋巴細胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)后融合的細胞即為雜交瘤細胞D．植物體細胞雜交技術(shù)屬于有性雜交，包括細胞融合和植物組織培養(yǎng)技術(shù)【答案】B【詳解】A、植物細胞和細菌細胞融合完成的標志是新細胞壁的形成，A錯誤；B、在制備原生質(zhì)體時，處于高滲或等滲溶液中，可以保護原生質(zhì)體不因吸水過多而漲破，B正確；C、將骨髓瘤細胞和B淋巴細胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)后融合的細胞有多種類型，可經(jīng)過篩選獲得雜交瘤細胞，C錯誤；D、植物體細胞雜交技術(shù)是一項無性繁殖技術(shù)，D錯誤。故選B。5．單克隆抗體被用于治療腫瘤、自身免疫性疾病、感染性疾病和移植排斥反應(yīng)等。其制備過程不涉及的操作是（

）A．誘導(dǎo)動物細胞融合 B．雜交瘤細胞的篩選C．早期胚胎培養(yǎng)和移植 D．克隆化培養(yǎng)和抗體檢測【答案】C【詳解】克隆抗體制備過程包括：特定抗原免疫小鼠、誘導(dǎo)B細胞和骨髓瘤細胞融合、雜交瘤細胞篩選、單一抗體陽性檢測、將抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)（即動物細胞培養(yǎng)），或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖、提取單克隆抗體等，該制備過程中不涉及早期胚胎培養(yǎng)和移植，C符合題意。故選C。6．一個抗原往往有多個不同的抗原決定族，一個抗原決定簇只能刺激機體產(chǎn)生一種抗體，由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72注入小鼠體內(nèi)，可利用該小鼠的免疫細胞制備抗p72的單抗，也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗。下列說法正確的是（）A．注入小鼠體內(nèi)的抗原純度不影響多抗的純度B．單抗制備過程中通常將分離出的漿細胞與骨髓瘤細胞融合C．利用該小鼠只能制備出一種抗p72的單抗D．p72部分結(jié)構(gòu)改變后，可能會出現(xiàn)原單抗失效而多抗仍有效的情況【答案】D【詳解】A、單抗的制作需要篩選，而多抗不需要篩選，抗原純度越高，產(chǎn)生的多抗純度越高，注入小鼠體內(nèi)的抗原純度影響多抗的純度，A錯誤；B、單抗制備過程中通常將經(jīng)過免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，B錯誤；C、非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72上有多種抗原決定簇，一個抗決定簇只能刺激機體產(chǎn)生一種抗體，所以向小鼠體內(nèi)注入p72后，可以刺激小鼠產(chǎn)生多種抗p72的單抗，C錯誤；D、p72部分結(jié)構(gòu)改變只改變了部分抗原決定簇，因此由這部分抗原決定簇產(chǎn)生的抗體失效，但由于還存在由其他抗原決定簇刺激機體產(chǎn)生的抗體，所以多抗仍有效，D正確。故選D。7．細胞融合技術(shù)應(yīng)用廣泛，如圖為細胞融合過程，下列敘述不正確的是（

）A．借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用能將藥物特異性地帶入癌細胞所在位置B．有性雜交后代一定是可育的C．番茄—馬鈴薯”的培育是利用植物體細胞雜交技術(shù)，克服了由于生殖隔離而導(dǎo)致的遠緣雜交不親和障礙D．基因型為AaBb（兩對基因獨立遺傳）植株的花粉去壁后兩兩融合得到9種基因型細胞【答案】B【詳解】A、根據(jù)抗原—抗體特異性結(jié)合可知，借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用能將藥物特異性地帶入癌細胞所在位置，A正確；B、同種物種可以進行有性雜交；不同物種之間由于存在生殖隔離，通常情況下不可以進行有性雜交，雖有少數(shù)物種間也可進行有性雜交，但雜交后代不育，如馬和驢雜交所產(chǎn)生的騾是不育的，B錯誤；C、“番茄—馬鈴薯”的培育是利用植物體細胞雜交技術(shù)，克服了由于生殖隔離而導(dǎo)致的遠緣雜交不親和障礙，C正確；D、兩對基因獨立遺傳，所以基因型為AaBb的植株的花粉去壁后兩兩融合得到AABB、aaBB、AAbb、aabb、AABb、AaBB、AaBb、aaBb、Aabb9種基因型的細胞，D正確。故選B。8．動物細胞融合和植物體細胞雜交是細胞工程的基本技術(shù)，下列關(guān)于這兩項技術(shù)的敘述，錯誤的是（

）A．動物細胞融合和植物體細胞雜交采用的方法不完全相同B．可以利用動物細胞融合技術(shù)制備單克隆抗體C．科學(xué)家利用植物體細胞雜交技術(shù)培育出番茄—馬鈴薯植株，地上結(jié)番茄，地下長馬鈴薯D．動物細胞培養(yǎng)是動物細胞融合的基礎(chǔ)，動物細胞培養(yǎng)要用到胰蛋白酶、膠原蛋白酶【答案】C【詳解】A、人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有物理法和化學(xué)法，誘導(dǎo)動物細胞融合采用的方法有電融合法、PEG融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法，二者不完全相同，A正確；B、讓B細胞和骨髓瘤細胞融合制備雜交瘤細胞為制備單克隆抗體開辟了新途徑，B正確；C、科學(xué)家利用植物體細胞雜交技術(shù)培育出番茄—馬鈴薯雜種植株，但這種植株并沒有在地上結(jié)番茄、地下長馬鈴薯，C錯誤；D、動物細胞培養(yǎng)是動物細胞工程的基本技術(shù)，因而也是動物細胞融合的基礎(chǔ)，動物細胞培養(yǎng)用到胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理得到分散的細胞，D正確。故選C。9．植物細胞工程與動物細胞工程中所用技術(shù)與原理不相符的是（）A．纖維素酶、果膠酶處理和胰蛋白酶處理——酶的專一性B．植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)——細胞的全能性C．原生質(zhì)體融合和動物細胞融合——生物膜的流動性D．人參細胞培養(yǎng)和雜交瘤細胞培養(yǎng)——細胞增殖【答案】B【詳解】A、利用纖維素酶和果膠酶去除植物細胞壁和利用胰蛋白酶處理動物組織都利用了酶的專一性原理，A正確；B、植物組織培養(yǎng)的原理是植物細胞具有全能性，動物細胞培養(yǎng)的原理是細胞增殖，B錯誤；C、原生質(zhì)體融合和動物細胞融合都依賴于生物膜的流動性，C正確；D、人參細胞培養(yǎng)和雜交瘤細胞培養(yǎng)的原理都是細胞增殖，D正確。故選B。10．下圖表示用仙臺病毒誘導(dǎo)動物細胞融合的部分過程，下列相關(guān)敘述正確的是（）A．細胞a和細胞b必須為同種細胞才能融合B．細胞c同時有細胞a和細胞b的遺傳物質(zhì)C．該融合過程體現(xiàn)了細胞膜具有選擇透過性D．植物細胞的融合過程與動物細胞完全相同【答案】B【詳解】A、不同種的細胞也能融合，如人、鼠細胞融合，A錯誤；B、如題圖所示，細胞a和細胞b融合成一個細胞，細胞c同時有細胞a和細胞b的遺傳物質(zhì)，B正確；C、該融合過程體現(xiàn)了細胞膜具有一定的流動性，C錯誤；D、植物細胞的融合通常要先去除細胞壁，其細胞融合的過程與動物細胞不完全相同，D錯誤。故選B。11．（多選）抗體一藥物偶聯(lián)物（ADC）通過將藥物與特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實現(xiàn)了對腫瘤細胞的選擇性殺傷，它的作用機制如下圖所示。下列敘述錯誤的是（

）A．將免疫后的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，形成的雜交瘤細胞產(chǎn)生的抗體即為單克隆抗體B．可以利用同位素或熒光標記的單克隆抗體進行腫瘤定位C．ADC通過抗體與細胞膜上受體特異性結(jié)合后，以主動運輸方式進入腫瘤細胞D．抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞可在體外適宜條件下大規(guī)模培養(yǎng)【答案】AC【詳解】A、單克隆抗體由單個B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，形成的雜交瘤細胞所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體，A錯誤；B、利用同位素標記的單克隆抗體,在特定的組織中成像的技術(shù),可定位診斷腫瘤、心血管畸形等疾病，B正確；C、ADC為大分子，結(jié)合圖示可知，ADC進入腫瘤細胞的方式為胞吞，C錯誤；D、抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞，可以通過在體外大規(guī)模培養(yǎng)可獲得單克隆抗體，D正確。故選AC。12．（多選）為研制抗病毒A的單克隆抗體，某課題組以小鼠甲為實驗對象設(shè)計了以下實驗流程。下列敘述錯誤的是（

）A．實驗處理前需給小鼠甲注射單細胞懸液B．從功能的角度來看，篩選1使用的培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基C．篩選2依據(jù)的原理是抗原一抗體特異性結(jié)合D．只有體外配制培養(yǎng)液才能使雜交瘤細胞大量增殖【答案】ABD【詳解】A、實驗處理前需給小鼠甲注射病毒A，獲得以免疫的B淋巴細胞，再以小鼠甲的脾臟制備單細胞懸液單細胞懸液，A錯誤；B、為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體雜交瘤細胞，需要使用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選，因此篩選1使用的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，B錯誤；C、篩選2進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，依據(jù)原理是雜交瘤細胞能產(chǎn)生抗病毒A的抗體，抗原和抗體特異性結(jié)合，C正確；D、雜交瘤細胞的大量增殖可以在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，D錯誤。故選ABD。13．雙特異性抗體（BsAb）是指一個抗體分子可以與兩個不同抗原或同一抗原的兩個不同抗原表位相結(jié)合，雙特異性抗體在自然狀態(tài)下并不存在，可以通過重組DNA或細胞融合技術(shù)人工制備實現(xiàn)。長春花所含的長春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是科研人員通過免疫的B淋巴細胞和雜交瘤細胞雜交技術(shù)生產(chǎn)雙特異性抗體的部分過程。圖2是某雙特異性抗體作用圖示?；卮鹣铝袉栴}。(1)圖1中①步驟注射癌胚抗原的目的是。過程③所用的HAT培養(yǎng)基從用途上看屬于選擇培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基上，