標本采集醫(yī)學課件

臨床微生物檢查

標本的采集與送檢規(guī)范

桐鄉(xiāng)市第一人民醫(yī)院主要內(nèi)容

一、臨床微生物檢查標本送檢的意義二、微生物檢驗目前存在的困惑三、常見標本的采集與運送規(guī)范一、臨床微生物檢查標本送檢的意義

正確采集、轉(zhuǎn)運與保存微生物標本直接關(guān)系到致病微生物培養(yǎng)的正確性與陽性率,是從臨床微生物檢驗獲得正確結(jié)果的最關(guān)鍵一步。

近年來由各種不同細菌引起的感染性疾病越來越多,導致抗生素的過度使用,其結(jié)果是耐藥菌株的增加。

臨床微生物室應(yīng)如何幫助臨床醫(yī)生合理治療感染性疾病成為我們共同目標。檢驗誤差發(fā)生率哪個階段最高

？微生物結(jié)果的影響因素

1.針對性的檢驗申請2.病人準備3.標本的采取4.標本的運輸5.標本的保存和處理46~68.2%標本檢驗4~15%結(jié)果審核和批準危急值報告18.5-27%分析前過程

按照時間的順序,從臨床醫(yī)生開出醫(yī)囑開始,到實驗室分析檢驗程序啟動時終止。包括檢驗申請、患者準備、原始樣品的采集、標本運送到實驗室并在實驗室內(nèi)進行傳輸?shù)娜窟^程。二、微生物檢驗目前存在的困惑目前存在的困惑

醫(yī)生根據(jù)藥敏報告進行臨床治療常常無效;實驗室是否分離到真正的致病菌;標本采集不合格;標本延遲送檢血標本采集時存在的問題

1血培養(yǎng)瓶存放于冰箱,取出后立即采血進行培養(yǎng),過低的溫度抑制細菌生長。2血液標本采集后放置于冰箱,低溫抑制細菌生長。3血液標本采集后,放置時間過長,細菌生長已達衰老期。4標本采集量少,會明顯降低陽性率。5標本采集時機不合適,未抓住菌血癥時期,或在剛使用抗生素不久。采血最好在:體溫升高前半小時,使用抗生素前,或停用抗生素24小時。標本消毒時消毒酒精未完全揮發(fā)。

痰液標本采集存在的問題隨機標本采集多而非晨痰針對如此嚴重的分析前誤差

我們能做什么?

提供準確的“標本采集輸送的標準操作程序”持續(xù)的臨床教育和交流三、常見標本的采集與運送規(guī)范做好病原學檢查

要特別重視標本質(zhì)量

基本原則

早期采集無菌采集

根據(jù)目的菌的特性用不同的方法采集。

采取適量的標本

安全運送我國血培養(yǎng)現(xiàn)狀—陽性檢出率低<10%(國外約為15%)

血流中含菌量低血培養(yǎng)的臨床實踐欠規(guī)范!!血液中抗菌物質(zhì)培養(yǎng)條件限制抗生素的應(yīng)用血培養(yǎng)問題

2008年制定血培養(yǎng)指導原則要求:懷疑血流感染時,應(yīng)在不同部位采血做血培養(yǎng),至少2套。提高血培養(yǎng)陽性率關(guān)鍵點消毒程序

靜脈穿刺點皮膚消毒程序

取無菌棉簽或棉球沾取安爾碘II型皮膚消毒劑原液由內(nèi)向外劃圈,均勻涂擦消毒區(qū)域二遍,消毒面積不小于5cm×5cm.,自然干燥后再行穿刺采血。如沒有佩戴無菌手套,不允許按壓消毒后的靜脈。(<2月的嬰兒不建議采用該消毒劑)、

培養(yǎng)瓶消毒程序用75%酒精擦拭血培養(yǎng)瓶橡皮塞(不能用含碘消毒劑),自然待干。運送程序

血培養(yǎng)標本應(yīng)按要求盡快送往實驗室,不得超過2h。如無法及時送檢,血培養(yǎng)標本需室溫(20-25度)保存。切勿冷藏！

血培養(yǎng)標本

采集與運送

血培養(yǎng)的指征是什么?

血培養(yǎng)的指征是什么?

當懷疑血流感染或膿毒癥時,應(yīng)常規(guī)行血培養(yǎng)懷疑患者有血流感染的癥狀有:

–

不明原因的發(fā)燒(>38°C)或體溫過低(<36°C)

–

白細胞增多(

>10,000/ul),粒細胞減少(

<1,000ul)

–

休克,寒顫

–

嚴重的局部感染(腦膜炎,心內(nèi)膜炎,肺炎,腎盂腎炎，腹部術(shù)后感染,...)

–

心率異常加快

–

低血壓或高血壓

–

呼吸頻率加快懷疑血流感染,何時采血最佳?

采集血培養(yǎng)樣本的最佳時間?

答案

盡可能在患者寒戰(zhàn)或開始發(fā)熱時采血在患者接受抗生素治療前采血

如患者已經(jīng)應(yīng)用抗菌藥物進行治療,應(yīng)在下一次用藥之前采血培養(yǎng)應(yīng)該采幾份血液標本?基本概念

成人“一套”血培養(yǎng)應(yīng)該包括需氧瓶和厭氧瓶各一個,也叫“一份”注意:一次穿刺采血,算“一套”,采集第二套應(yīng)從另一個穿刺點獲得。

兒童一般只做需氧培養(yǎng),特殊患者才考慮厭氧培養(yǎng)

應(yīng)該采幾份血液標本?

每位患者采血最少2套,3套更好初發(fā)患者,絕不能只采1套標本應(yīng)該采集多少血液?要采集多少血液?

采血量是影響靈敏度最關(guān)鍵因素成人一份標本2個培養(yǎng)瓶(需氧+厭氧),每瓶8-10ml,共20ml;要求至少采兩份標本,即40ml。

兒童一般只需采集需氧瓶,在保證采集血量<1%總血量下,一般為1-5ml采血量不足時應(yīng)優(yōu)先保證需氧瓶,因臨床90%以上的感染為需氧菌或兼性需氧菌感染

痰培養(yǎng)標本

采集與運送

咳痰途經(jīng)口咽部

不可避免地受到污染?唾液中口咽部定植菌的濃度可達108-109/ml。?研究顯示,國內(nèi)常規(guī)痰標本中約半數(shù)存在唾液嚴重污染現(xiàn)象。痰標本的采集方法

自然咳痰:要求患者在清晨用藥前留取，因為晨痰量多，且含菌量也多。留取前刷牙，用清水漱口3次，以除去口腔內(nèi)大部分雜菌，之后用力咳痰?？忍递^困難者可用3%～5%氯化鈉溶液霧化吸入進行導痰；對咳嗽乏力或昏迷患者，可用普通吸痰管經(jīng)鼻腔或口腔吸引下呼吸道分泌物；痰液必須盛于無菌容器內(nèi)送檢。。痰標本的采集方法

咽拭子采樣：上呼吸道感染，可通過咽拭子獲取標本。標本采集前數(shù)小時內(nèi)不得用消毒藥物漱口或涂抹病灶局部。用咽拭子采集標本時應(yīng)小心、認真、準確，避免觸及舌、口腔黏膜和唾液，以防污染。如咽拭子標本發(fā)現(xiàn)致病菌，如肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等，且數(shù)量較多時，提示有該菌所致感染存在。痰標本的采集方法

纖維支氣管鏡抽吸采樣：插入纖支鏡，達到肺炎病灶引流支氣管內(nèi)，纖支鏡吸引口依次連接標本采集瓶，用負壓將下呼吸道分泌物吸入標本采集瓶內(nèi)送檢。氣管切開或氣管插管患者也可用痰液收集器吸入標本采集瓶內(nèi)。痰標本的采集方法

纖支鏡直視下可準確采集病灶部位的分泌物，但插入時纖支鏡頂端和內(nèi)孔常受咽喉部正常菌群污染，所以纖支鏡吸引物常規(guī)培養(yǎng)結(jié)果不能完全代表肺部感染的病原體。但檢查過程中如注意規(guī)范化操作，插入纖支鏡時盡量不做上呼吸道分泌物吸引，纖支鏡吸痰遭口咽部細菌污染機會較咳痰明顯減少。一般認為纖支鏡吸引物定量培養(yǎng)可更有效地區(qū)分污染菌與感染菌。痰標本的采集方法人工氣道是肺部感染的常見易感因素。經(jīng)人工氣道吸引下呼吸道分泌物是目前臨床較常用的標本采集方法。但由于這些患者的氣管纖毛黏液防御機制受到損害，常有致病菌或條件致病菌定植而不再保持無菌狀態(tài)，故建立人工氣道患者肺部感染病原學診斷有時更為困難。通常認為吸引物定量培養(yǎng)可能區(qū)分污染菌抑或感染菌。根據(jù)國內(nèi)診斷標準，經(jīng)人工氣道吸痰細菌濃度≥1×105cfu/ml可認為是感染病原菌，而濃度≤1×104cfu/ml則認為是污染菌。痰標本的采集方法支氣管肺泡灌洗術(shù)采樣：采用塑料導管，在近頂端處設(shè)置一氣囊，纖支鏡插入病灶引流支氣管后，引入導管，然后用等滲氯化鈉液20～50ml分次注入，并立即用低負壓吸引回收，棄去首次灌洗液，以減少污染，收集以后回收的支氣管肺泡灌洗液（10-100ml）送檢。

痰標本運送

盡快(<2h)送至實驗室。如不能及時送達,應(yīng)將標本暫存于4°C,但放置時間不可超過24h。痰液室溫下延擱2～5h會降低肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌和葡萄球菌的檢出率，而定植于上呼吸道的非致病菌和革蘭陰性桿菌會過度生長。

尿培養(yǎng)標本

采集與運送

采集指征:

有典型的尿道刺激癥狀肉眼膿尿或血尿尿常規(guī)檢查表現(xiàn)為白細胞陽性(幾個+號)不明原因的發(fā)熱,無其他局部癥狀留置導尿管時間超過48h的患者出現(xiàn)發(fā)熱膀胱排空功能受損泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前。采集方法:

盡量取早晨第一次尿液棄去開始流出的尿液,以沖刷尿道口的細菌,取能代表膀胱部位病原菌的中段尿詳細告知病人以下操作步驟女性病人收集標本前用清洗液沖洗干凈,從前向后仔細擦洗尿道區(qū)域分開陰唇,開始排尿排出幾毫升后,不停止尿流,采集中段尿?男性病人回縮包皮并清洗龜頭

排出幾毫升后,不停止尿流,采集中段尿?qū)蚬苣蛞?/p>

集尿袋內(nèi)的尿液不能用作培養(yǎng);導尿管末端的尿液也不能用于培養(yǎng),因為很難避免沒有尿道菌群污染。不能把導尿管與尿袋拔開后收集尿液。采樣端口用酒精消毒;必要時,可先夾住導尿管但不能超過30分鐘;將注射器針頭插入采樣端口,抽吸出尿液;注入無菌杯或試管中標本運送

收集中段尿液5-10ml,及時送檢。室溫保存下不得超過2小時,否則應(yīng)置于4°C冰箱保存,保存時間不得超過18h。

糞便培養(yǎng)標本

采集與運送

采集指征:

糞便標本的采集方法

自然排便采集標本時,取有膿血、粘液、組織碎片部份的糞便1~3g(花生米大小)。液體糞便則取絮狀物,一般取1~3ml,直接裝入糞便容器或運送培養(yǎng)基中送檢。肛拭子采集糞便標本:先將