藥物微粒分散系第節(jié)脂質(zhì)體

關(guān)于藥物微粒分散系第節(jié)脂質(zhì)體一、脂質(zhì)體的概念脂質(zhì)體（Liposomes）系指將藥物包封于類脂質(zhì)雙分子層內(nèi)而形成的微型泡囊。第2頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月二、脂質(zhì)體的發(fā)展簡(jiǎn)況1965年英國(guó)Bangham發(fā)現(xiàn)磷脂在水中形成多層囊泡—脂質(zhì)體1988益康唑脂質(zhì)體凝膠（PeveryLipogel）瑞士等國(guó)上市1990兩性霉素B脂質(zhì)體（AmBisome）愛(ài)爾蘭上市1995阿霉素長(zhǎng)效脂質(zhì)體美國(guó)上市，第一個(gè)抗癌藥脂質(zhì)體1996柔紅霉素脂質(zhì)體（DaunoXome）美國(guó)上市阿糖胞苷脂質(zhì)體（DepoCyt）、制霉菌素脂質(zhì)體（Nyotran）、胰島素脂質(zhì)體（DepoInsul）、紫杉醇脂質(zhì)體等。第3頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月三、脂質(zhì)體常用的膜材（一）中性磷脂磷脂酰膽堿(PC),合成二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)、二硬脂酰磷脂酰膽堿(DSPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿(DMPC)、磷脂酰乙醇胺(PE)等。（二）負(fù)電荷磷脂（酸性磷脂）磷脂酸(PA)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰絲氨酸(PS)等（三）正電荷脂質(zhì)正電荷脂質(zhì)均為人工合成產(chǎn)品，在基因的傳遞系統(tǒng)中應(yīng)用非常普遍，有硬脂酰胺(SA)、膽固醇衍生物、油?；景费苌锏取＃ㄋ模┠懝檀?cholesterol)第4頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月磷脂的結(jié)構(gòu)膽固醇的結(jié)構(gòu)第5頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月

卵磷脂與膽固醇在脂質(zhì)體中的排列形式

磷脂的親水端呈彎曲的弧形，形似“手杖”，與膽固醇分子的親水基團(tuán)相結(jié)合，形成“U”形結(jié)構(gòu)，兩個(gè)“U”形結(jié)構(gòu)相對(duì)排列，構(gòu)成雙分子層結(jié)構(gòu)。第6頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)圖示第7頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月單室脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)圖

磷脂分子的極性基團(tuán)朝向外側(cè)的水相，而非極性的烴基彼此面對(duì)面形成板狀雙分子層或球狀雙分子層。

第8頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月

多室脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)圖

第9頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月1.相變溫度當(dāng)升高溫度時(shí)，脂質(zhì)雙分子層中的疏水鏈會(huì)從有序排列變?yōu)闊o(wú)序排列，使脂質(zhì)膜的變?yōu)椤耙壕А睉B(tài)，膜的流動(dòng)性增加，雙分子層變薄，這種發(fā)生相轉(zhuǎn)變時(shí)的溫度稱為相變溫度(phasetransitiontemperature，Tc)。由于在相變溫度時(shí)膜的流動(dòng)性增加，被包裹在脂質(zhì)體內(nèi)的藥物將具有最大釋放速率，因而膜的流動(dòng)性直接影響脂質(zhì)體的釋放及其（滲漏）穩(wěn)定性。

四、脂質(zhì)體的理化性質(zhì)第10頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月2.膜的通透性脂質(zhì)體是半通透性膜。對(duì)于在水和有機(jī)溶劑中溶解度都非常好的分子，易于穿透磷脂膜。鈉離子和大部分物質(zhì)在相變溫度時(shí)通透性大。第11頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月3.膜的流動(dòng)性膽固醇具有調(diào)節(jié)膜流動(dòng)性的作用，被稱為脂質(zhì)體的“流動(dòng)性緩沖劑”。當(dāng)在脂質(zhì)體膜中加入50%（mol/mol）膽固醇時(shí)，可使脂質(zhì)體膜相變消失。當(dāng)?shù)陀诹字南嘧儨囟葧r(shí)，加入膽固醇可使膜有序排列減少，流動(dòng)性增加；當(dāng)高于相變溫度時(shí)，加膽固醇可增加膜的有序排列，減少膜的流動(dòng)性。第12頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月4.脂質(zhì)體的荷電性脂質(zhì)體的表面電性對(duì)其包封率、穩(wěn)定性、靶器官分布及對(duì)靶細(xì)胞作用影響較大。含酸性脂質(zhì)，如磷脂酸（PA）和磷脂酰絲氨酸（PS）的脂質(zhì)體荷負(fù)電；含堿基（胺基）脂質(zhì)，例如十八胺等的脂質(zhì)體荷正電；不含離子的脂質(zhì)體顯電中性。第13頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月五、脂質(zhì)體的分類(一)按結(jié)構(gòu)類型分1.單層脂質(zhì)體(unilamellarvesicles,ULV)球徑0.02~0.08μm為小單室脂質(zhì)體(singleunilamellarvesicles,SUV)，球徑0.1~1μm為大單室脂質(zhì)體(largeunilamellarvesicles,LUV)，2.多層脂質(zhì)體(multilamellarvesicles,MLV)球徑1~5μm，較大第14頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月(二)根據(jù)脂質(zhì)體性能分類：1.普通脂質(zhì)體普通脂質(zhì)體用一般磷脂制備而成，主要被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬,從而使所包載的藥物在肝、脾、肺和骨髓等富含吞噬細(xì)胞的組織器官內(nèi)蓄積。2.長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體又稱隱形脂質(zhì)體(stealthliposomes),由聚乙二醇修飾的磷脂組成。第15頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月3.特殊功能的脂質(zhì)體（1）熱敏脂質(zhì)體：利用在相變溫度時(shí)，脂質(zhì)體的類脂質(zhì)雙分子層膜從膠態(tài)過(guò)渡到液晶態(tài)，脂質(zhì)膜的通透性增加，藥物釋放速度增大的原理制成熱敏脂質(zhì)體。例如將二棕櫚酸磷脂（DPPC）和二硬脂酸磷脂(DSPC)按一定比例混合，制成的3H甲氨喋呤熱敏脂質(zhì)體，再注入荷Lewis肺癌小鼠的尾靜脈后，再用微波加熱腫瘤部位至42℃，病灶部位的放射性強(qiáng)度明顯的高于非熱敏脂質(zhì)體對(duì)照組。（2）pH敏感性脂質(zhì)體：由于腫瘤間質(zhì)的pH比周圍正常組織細(xì)胞低，選用對(duì)pH敏感性的類脂材料，如二棕櫚酸磷脂或十七烷酸磷脂為膜材制備成載藥脂質(zhì)體。當(dāng)脂質(zhì)體進(jìn)入腫瘤部位時(shí)，由于pH的降低導(dǎo)致脂肪酸羧基脂質(zhì)化成六方晶相的非相層結(jié)構(gòu)，從而使膜融合，加速釋藥。第16頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月（3）配體修飾脂質(zhì)體：摻入或化學(xué)鍵連接靶向功能配體于脂質(zhì)體上，具主動(dòng)靶向性。（4）免疫脂質(zhì)體：脂質(zhì)體表面聯(lián)接抗體，對(duì)靶細(xì)胞進(jìn)行識(shí)別，提高脂質(zhì)體的靶向性。如在絲裂霉素（MMC）脂質(zhì)體上結(jié)合抗胃癌細(xì)胞表面抗原的單克隆抗體3G制成免疫脂質(zhì)體，在體內(nèi)該免疫脂質(zhì)體對(duì)胃癌靶細(xì)胞的M85殺傷作用比游離MMC提高4倍。（三）按脂質(zhì)體荷電性分類正電、負(fù)電、中性脂質(zhì)體第17頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月六、脂質(zhì)體的功能1.淋巴系統(tǒng)定向性2.被動(dòng)靶向性——脂質(zhì)體被巨噬細(xì)胞作為異物吞噬，具肝、脾、骨髓靶向性。3.主動(dòng)靶向性——抗體、激素、糖殘基、受體配體。4.物理和化學(xué)靶向性——pH敏感、熱敏、光敏、磁性脂質(zhì)體第18頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月脂質(zhì)體的應(yīng)用1.抗腫瘤藥物載體：降低用量、提高療效、降低毒副作用2.抗寄生蟲(chóng)藥物載體：利什曼病、瘧疾、肝寄生蟲(chóng)病3.抗菌與抗病毒藥物載體：兩性霉素B4.解毒藥物載體：金屬螯合物5.生物活性物質(zhì)載體：多肽和蛋白質(zhì)類藥物，酶的載體6.抗結(jié)核藥物的載體7.在遺傳工程中的應(yīng)用：DNA、RNA載體第19頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月七、脂質(zhì)體的作用機(jī)制脂質(zhì)體在體內(nèi)細(xì)胞水平上的作用機(jī)制有吸附、脂交換、內(nèi)吞(endocytosis)、融合(fusion)等。吸附是脂質(zhì)體與細(xì)胞作用的開(kāi)始，受粒子大小和表面電荷等因素影響；脂質(zhì)交換是脂質(zhì)體的脂類與細(xì)胞膜上脂類發(fā)生交換；內(nèi)吞作用是脂質(zhì)體被作為外來(lái)異物吞噬，通過(guò)內(nèi)吞，脂質(zhì)體能特異地將藥物濃集于起作用的細(xì)胞內(nèi)；融合指脂質(zhì)體的膜與細(xì)胞膜融合進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，然后經(jīng)溶酶體消化釋放藥物。滲漏磷酸酯酶消化：腫瘤中更易釋放第20頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月八、脂質(zhì)體的制備方法

（一）薄膜分散法將磷脂、膽固醇等類脂質(zhì)及脂溶性藥物溶于氯仿(或其他有機(jī)溶劑中)然后將氯仿溶液在茄形瓶中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，在瓶?jī)?nèi)壁上形成一層薄膜；將水溶性藥物溶于磷酸鹽緩沖液中，加入燒瓶中不斷攪拌，即得脂質(zhì)體。第21頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月（二）過(guò)膜擠壓法通過(guò)擠壓使脂質(zhì)體通過(guò)固定孔徑的濾膜，脂質(zhì)體粒徑變小。聚碳酸酯膜（polycarbonatemembrane）（三）French擠壓法French壓力室，高壓，30-80納米第22頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月（四）逆相蒸發(fā)法將磷脂等膜材溶于氯仿、乙醚等有機(jī)溶劑，加入待包封藥物的水溶液（水溶液:有機(jī)溶劑=1:3～1:6）進(jìn)行短時(shí)超聲,直至形成穩(wěn)定的W/O乳劑。然后，減壓蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，制得水性混懸液，最后通過(guò)凝膠色譜法或超速離心法，除去未包入的藥物，即得到大單層脂質(zhì)體。第23頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月（五）化學(xué)梯度法pH梯度法硫酸銨梯度法（六）Ca2+融合發(fā)第24頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月九、脂質(zhì)體的分離與滅菌(一)脂質(zhì)體與末包封藥物的分離透析法柱色譜分離法離心法和魚(yú)精蛋白凝聚法微型柱離心法(二)脂質(zhì)體的滅菌濾過(guò)除菌無(wú)菌操作熱壓滅菌60Co射線滅菌第25頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月十、脂質(zhì)體的質(zhì)量評(píng)價(jià)

1.包封率和載藥量包封率＝（脂質(zhì)體中包封的藥物/脂質(zhì)體中藥物總量）×100％

一般采用葡聚糖凝膠、超速離心法、透析法等分離方法將溶液中游離藥物和脂質(zhì)體分離，分別測(cè)定，計(jì)算包封率。通常要求脂質(zhì)體的藥物包封率達(dá)80%以上。

載藥量＝[脂質(zhì)體中藥物量/（脂質(zhì)體中藥物＋載體總量）]×100第26頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月（二）形態(tài)、粒徑及其分布1.光學(xué)顯微鏡法2.電子顯微鏡法：負(fù)染法、冰凍蝕刻法3.激光散射法（三）表面電性：顯微電泳法、熒光法（四）泄漏率的測(cè)泄漏率=（貯存后泄漏到介質(zhì)中的藥量/貯存前包封的藥量）×100％（五）磷脂的氧化程度氧化指數(shù)=A233/A215氧化產(chǎn)物：丙二醛和溶血磷脂第27頁(yè),共30頁(yè)，星期六，2024年，5月十一、類脂囊泡

類脂囊泡（niosomes）是由非離子表面活性劑與（或不與）膽固醇及其他物質(zhì)構(gòu)成的單室或多室囊泡，故而亦稱為非離子表面活性劑囊泡（一）分類1.按結(jié)構(gòu)可