GB∕T 39927-2021 化妝品中禁用物質(zhì)藜蘆堿的測(cè)定 高效液相色譜法

國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)IⅡ禁用物質(zhì)是指不能作為化妝品生產(chǎn)原料即組分添加到化妝品中的物質(zhì)。《化妝品安全技術(shù)規(guī)范1化妝品中禁用物質(zhì)藜蘆堿的測(cè)定本標(biāo)準(zhǔn)方法檢出限為15mg/kg,定量限為50mg/kg。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法4.5乙酸銨。參見附錄A中表A.1。用提取液(4.6)溶解并定容制得質(zhì)量濃度為1000mg/L的藜蘆定標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(冰箱一20℃保存1個(gè)月)。用提取液(4.6)將藜蘆定標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液逐級(jí)稀釋配成質(zhì)量濃度為2.0mg/L、5.0mg/L、10mg/L、25儀器和設(shè)備5.1高效液相色譜儀，配有二極管陣列(DAD)檢測(cè)器或者紫外檢測(cè)器。5.2液相色譜質(zhì)譜/質(zhì)譜(LC-MS/MS)儀：配有電噴霧離子源(ESI)。5.3分析天平，感量為0.0001g。5.8渦旋振蕩器。6試驗(yàn)步驟6.1樣品處理對(duì)于面貼膜(取面膜灌)、膏霜、乳、水類色管中，用提取液(4.6)稀釋至刻度，渦旋30s,聲提取10min,離心機(jī)8000r/min離心10min,取上清液經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾，能液作為待測(cè)樣液在色譜條件下進(jìn)行測(cè)定。6.2測(cè)定條件高效液相色譜測(cè)定參考條件如下：e)檢測(cè)波長(zhǎng)261hh;6.3標(biāo)準(zhǔn)工作曲線繪制按6.2色譜條件檢測(cè)。分別吸取10L藜蘆定標(biāo)準(zhǔn)工作溶液(4.8)注入高效液相色譜儀，以色譜峰的峰面積為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。藜蘆定標(biāo)準(zhǔn)品的高效液相(HPLC)色譜圖參見附錄B中圖B.1。6.4試樣測(cè)定按6.2的色譜條件，取6.1步驟中濾液進(jìn)樣，得到試樣溶液的峰面積，根據(jù)保留時(shí)間和二極管陣列的光譜圖定性，藜蘆定標(biāo)準(zhǔn)品的DAD光譜圖參見圖B.2。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得試樣溶液中藜蘆定的含量。試樣溶液中藜蘆定的響應(yīng)值應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍內(nèi)，超過(guò)線性范圍則應(yīng)稀釋后測(cè)定。必要時(shí)，陽(yáng)性樣品需用液相色譜-質(zhì)譜進(jìn)行確證試驗(yàn)(參見附錄C)。6.5空白試驗(yàn)除不稱取試樣外，均按6.1～6.4步驟進(jìn)行。36.6平行試驗(yàn)按6.1～6.4步驟，對(duì)同一樣品進(jìn)行平行試驗(yàn)測(cè)定。試樣中藜蘆定的含量按式(1)計(jì)算：式中：X——樣品中藜蘆定的含量，單位為毫克每千克(mg/kg);p——從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得藜蘆定的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升(mg/L);V——樣品稀釋后的總體積，單位為毫升(mL);m——樣品質(zhì)量，單位為克(g)。計(jì)算結(jié)果應(yīng)扣除空由值，保留三位有效數(shù)字。8回收率和精密度在添加濃度為50.0mg/kg~500.0mg/kg范圍內(nèi)，回收率在83.5%~112.2%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在重復(fù)性條件下獲得兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不應(yīng)超過(guò)算術(shù)平均值的10%4中文名稱5藜蘆定標(biāo)準(zhǔn)品的HPLC色譜圖和DAD光譜圖分別見圖B.1和圖B.2。響應(yīng)值/AU響應(yīng)值/AU響應(yīng)值/AU響應(yīng)值/AU6b