2025屆江蘇省無錫市錫山區(qū)天一中學高三第六次模擬考試生物試卷含解析

2025屆江蘇省無錫市錫山區(qū)天一中學高三第六次模擬考試生物試卷請考生注意：1．請用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應位置上，請用0．5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2．答題前，認真閱讀答題紙上的《注意事項》，按規(guī)定答題。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．2019年世界艾滋病日的宣傳主題是“社區(qū)動員同防艾，健康中國我行動”。意在強調(diào)個人健康責任意識，為遏制艾滋病流行和健康中國建設做出貢獻。艾滋病是由人類免疫缺陷病毒（HIV）引起的免疫性疾病。下列與艾滋病有關(guān)的敘述，錯誤的是（）A．人類免疫缺陷病毒（HIV）有高度變異性B．HIV感染人群比健康人群更易患甲型H1N1流感C．HIV破壞免疫系統(tǒng)，使機體無體液免疫，不能通過檢測抗體來診斷HIV感染D．共用注射器吸毒和性濫交是傳播艾滋病的主要危險行為，因此要拒絕毒品、潔身自愛2．研究表明，黃芪注射液能夠通過下調(diào)裸鼠移植瘤CyclinD1基因的表達進而阻滯腫瘤細胞由G0或G1期進入S期；同時，抗調(diào)亡因子Bcl2表達顯著下降，凋亡關(guān)鍵酶活化的Caspase-3基因表達增加。下列說法不合理的是（）A．CyclinD1基因的表達有利于細胞的增殖B．Bcl2表達量升高能促進細胞凋亡C．黃芪注射液能促進Caspase-3基因的表達D．黃芪注射液能夠誘導腫瘤細胞的凋亡，進而抑制腫瘤細胞的增殖3．下列細胞中的結(jié)構(gòu)所對應的成分，不正確的是（）A．核糖體：蛋白質(zhì)和核酸 B．中心體：蛋白質(zhì)和脂質(zhì)C．線粒體內(nèi)膜：蛋白質(zhì)和脂質(zhì) D．染色體：蛋白質(zhì)和核酸4．某研究性學習小組進行果酒、果醋發(fā)酵實驗。下列相關(guān)敘述正確的是A．先供氧進行果醋發(fā)酵，然后隔絕空氣進行果酒發(fā)酵B．果酒發(fā)酵所需的最適溫度高于果醋發(fā)酵C．適當加大接種量可以提高發(fā)酵速率，抑制雜菌繁殖D．與人工接種的發(fā)酵相比，自然發(fā)酵獲得的產(chǎn)品品質(zhì)更好5．下列有關(guān)血糖平衡調(diào)節(jié)的敘述，不正確的是（）A．胰島素能促進組織細胞攝取、利用葡萄糖，從而使血糖濃度下降B．胰高血糖素能促進肝糖原分解，從而使血糖濃度升高C．血糖平衡調(diào)節(jié)只與胰島素和胰高血糖素有關(guān)D．當身體不能產(chǎn)生足夠的胰島素時，機體會出現(xiàn)高血糖癥狀6．2019年7月以來，澳大利亞多地林火肆虐，過火面積超過1000萬公頃。持續(xù)數(shù)月的大火，已造成包括澳大利亞國寶考拉在內(nèi)的超過10億只野生動物喪生。下列說法正確的是（）A．對受災的考拉應采取就地保護的措施B．單位面積生態(tài)系統(tǒng)多樣性的價值最高的是森林C．火災會改變當?shù)厝郝溲萏娴乃俣群头较駾．火災過后地區(qū)進行的是次生演替，很快能恢復到原來的生態(tài)系統(tǒng)二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）2019年8月，被稱為“地球之肺”的亞馬遜熱帶雨林遭遇持續(xù)大火，大批森林遭災難性毀滅。研究者曾調(diào)查某雨林生態(tài)系統(tǒng)，共有5個營養(yǎng)級（以A、B、C、D、E表示）。經(jīng)測定，一年中流經(jīng)這5個營養(yǎng)級的能量如下表所示?；卮鹣铝袉栴}：營養(yǎng)液ABCDE能量（J?m-2）160.02×1071001.37×10719.89×1070.37×1072.5×107（1）該雨林生態(tài)系統(tǒng)中次級消費者是______________（填A~E字母）。據(jù)表看出，能量在各營養(yǎng)級之間傳遞有______________特點，某一營養(yǎng)級的能量不能全部傳給下一營養(yǎng)級的原因______________（寫出兩點）。（2）雨林在物質(zhì)循環(huán)中發(fā)揮重要作用。碳主要通過______________途徑從無機環(huán)境進入生物群落，碳在生物群落中以______________形式傳遞。請推測大批森林被火燒毀滅后可能帶來的影響______________（寫出兩點）。（3）雨林中的樹木不僅可以凈化空氣、調(diào)節(jié)氣候，還在藝術(shù)、文學等創(chuàng)作領(lǐng)域有重要地位，這體現(xiàn)出生態(tài)系統(tǒng)的______________價值。8．（10分）重癥聯(lián)合免疫缺陷?。⊿CID）是一種及其罕見的遺傳病。由于控制合成腺苷脫氨酶的相關(guān)基因（ada基因）缺失，患者的T淋巴細胞無法成熟，因此喪失了大部分的免疫功能。如圖是利用基因工程技術(shù)對SCID的治療過程，請回答下列問題。(1)逆轉(zhuǎn)錄病毒重組DNA質(zhì)粒中的LTR序列可以控制目的基因的轉(zhuǎn)移和整合，這一功能與Ti質(zhì)粒中的__________________________序列功能相似，同時__________________________（5’/3’）端LTR序列中還含有啟動子。ada基因能插入兩端的LTR序列中間，是因為載體上有__________________________的識別序列和切點。（2）重組載體轉(zhuǎn)染包裝細胞，從包裝細胞中釋放出治療性RNA病毒，與野生型逆轉(zhuǎn)錄病毒相比它__________________________（有/沒有）致病性。（3）治療性RNA病毒感染從患者體內(nèi)取出的T淋巴細胞，①是__________________________過程。檢測能否成功表達出腺苷脫氨酶，可用的技術(shù)是__________________________。（4）將攜帶正常ada基因的T淋巴細胞注射回患者的骨髓組織中，這種治療SCID的方法稱為_________________________基因治療，可用于對__________________________（顯性/隱形）基因引起的疾病的治療。9．（10分）研究人員為探究亮紅眼果蠅突變型的形成機制，設計并進行了以下一系列實驗。（1）亮紅眼突變型果蠅與野生型果蠅進行雜交實驗，F(xiàn)1均為野生型，F(xiàn)2野生型與亮紅眼的比為3：1，亮紅眼果蠅雌雄個體數(shù)相當，說明亮紅眼是一種位于____染色體上的____突變，屬于____（可遺傳/不可遺傳）的變異。（2）紅眼突變型果蠅還有朱紅眼、朱砂眼和猩紅眼等類型，朱紅眼（a）、朱砂眼（b）和猩紅眼（d）三個基因分別位于Ⅱ號、X和Ⅲ號染色體上，為探究亮紅眼突變基因（用字母E或e表示）與上述三種基因的關(guān)系，以4種突變型果蠅為親本進行雜交實驗，結(jié)果如下表所示。雜交后代亮紅眼♂×朱紅眼♀亮紅眼♂×朱砂眼♀亮紅眼♂×猩紅眼♀野生型突變型野生型突變型野生型突變型F157♂∶66♀07763♂0114♂∶110♀F2116♂∶118♀90♂∶92♀75♂∶79♀110♂∶109♀0227♂∶272♀請回答問題：①根據(jù)亮紅眼與朱紅眼果蠅雜交，F(xiàn)2中野生型和突變型的比接近于9：7，可知控制果蠅亮紅眼與朱紅眼的基因位于____對同源染色體上，遵循____定律。②亮紅眼與朱砂眼果蠅雜交，F(xiàn)1中雌果蠅的基因型為____。③亮紅眼與猩紅眼果蠅雜交，F(xiàn)1、F2中沒有出現(xiàn)野生型，則可以推測亮紅眼基因與猩紅眼基因是____（等位基因／非等位基因）。（3）果蠅的眼色與其色素合成細胞產(chǎn)生的眼黃素有關(guān)，眼黃素由色氨酸經(jīng)過酶促反應合成。研究發(fā)現(xiàn)亮紅眼果蠅的眼黃素顯著偏低，但色氨酸酶促反應正常運行。由此推測，亮紅眼基因可能與___有關(guān)。10．（10分）基因工程目前已成為生物科學的核心技術(shù)，在農(nóng)牧業(yè)、工業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生等方面有良好的應用前景。回答下列問題：（1）基因表達載體中的復制原點，本質(zhì)上是一段富含A—T堿基對的DNA序列，它易與引物結(jié)合而成為復制起點的原理是____________。啟動子與復制原點的化學本質(zhì)____________（填“相同”或“不同”），啟動子功能的含義主要是________________________。（2）利用PCR技術(shù)擴增目的基因，可在PCR擴增儀中進行的三步反應是____________。若在PCR擴增儀中加入模板DNA分子100個，則經(jīng)過30次循環(huán)后，DNA分子數(shù)量將達到____________個。（3）植物基因工程技術(shù)主要用于提高農(nóng)作物的抗逆能力，如抗蟲性、抗病性等。我國的抗蟲棉就是通過____________法導人抗蟲基因____________基因培育成功的；抗病毒的轉(zhuǎn)基因小麥是導入抗病毒基因培育的，使用最多的抗病毒基因有________________________。11．（15分）研究小組利用葉面積相等的甲、乙兩種植物的葉片分別進行了以下兩組實驗，兩組實驗在相同且適宜的溫度下進行。實驗一：將甲、乙兩種植物的葉片分別放置在相同的密閉小室中，給予充足的光照，利用紅外測量儀每隔5min測定一次小室中的CO2濃度，結(jié)果如下圖中I所示。實驗二：給予不同強度的光照，測量甲、乙兩種植物葉片的CO2吸收量和CO2釋放量，結(jié)果如圖II所示。請據(jù)圖分析回答問題：（1）圖I，0-10min期間，通過光合作用制造的有機物總量：乙植物_____________甲植物（填大于、等于、小于或不能判斷），原因是_________________________。（2）圖I，25—40min期間，兩個密閉小室內(nèi)CO2含量相對穩(wěn)定的原因是__________________。（3）圖II，若光照強度為Xlx(A<X<B)，每日光照12h，一晝夜后乙植物的干重將_______________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解析】

關(guān)于“艾滋病”，考生可以從以下幾方面把握：（1）艾滋病的中文名稱是獲得性免疫缺陷綜合征（AlDS），其病原體是人類免疫缺陷病毒（HIV）。（2）艾滋病的致病原理：HIV病毒進入人體后，與人體的T淋巴細胞結(jié)合，破壞T淋巴細胞，使免疫調(diào)節(jié)受到抑制，使人的免疫系統(tǒng)癱瘓，最后使人無法抵抗其他細菌、病毒的入侵，讓人死亡。（3）艾滋病的傳播途徑包括：血液傳播、性傳播、母嬰傳播?！驹斀狻緼、艾滋病病毒是RNA病毒，遺傳物質(zhì)是RNA，有高度變異性，A正確；B、HIV破壞免疫系統(tǒng)，防衛(wèi)功能減弱，HIV感染人群比健康人群更易患甲型H1N1流感，B正確；C、艾滋病病毒主要攻擊T淋巴細胞，可以保留部分體液免疫，C錯誤；D、艾滋病主要通過性接觸、血液和母嬰三種途徑傳播，D正確。故選C。2、B【解析】

根據(jù)題干信息“黃芪注射液能夠通過下調(diào)裸鼠移植瘤CyclinD1基因的表達進而阻滯腫瘤細胞由G0或G1期進入S期”說明CyclinD1基因的表達有利于細胞由G0或G1期進入S期，“抗調(diào)亡因子Bcl2表達顯著下降，凋亡關(guān)鍵酶活化的Caspase-3基因表達增加”說明黃芪注射液通過阻止細胞分裂，進而促進細胞凋亡抑制癌細胞的增殖?！驹斀狻緼、根據(jù)分析CyclinD1基因的表達有利于細胞由G0或G1期進入S期，有利于細胞的增殖，A正確；B、Bcl2表達量下降促進細胞凋亡，B錯誤；C、根據(jù)題干“Caspase-3基因表達增加”，說明黃芪注射液能促進Caspase-3基因的表達，C正確；D、根據(jù)分析，黃芪注射液通過阻止細胞分裂，促進細胞凋亡抑制癌細胞的增殖，D正確。故選B。【點睛】本題關(guān)鍵是從題干中的信息得出黃芪注射液發(fā)揮作用的機理。3、B【解析】

1、細胞中的核糖體有的附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上，有的游離在細胞質(zhì)中，是“生產(chǎn)蛋白質(zhì)的機器”。2、中心體常見于動物和某些低等植物細胞，由一對互相垂直的中心粒及周圍物質(zhì)組成，與細胞的有絲分裂有關(guān)。3、線粒體是細胞內(nèi)進行有氧呼吸的主要場所，是細胞的“動力車間”?！驹斀狻緼、核糖體由蛋白質(zhì)和核酸（RNA）組成，A正確；B、中心體沒有膜結(jié)構(gòu)，不含脂質(zhì)，只有蛋白質(zhì)，B錯誤；C、線粒體內(nèi)膜主要由蛋白質(zhì)和脂質(zhì)組成，C正確；D、染色體主要由蛋白質(zhì)和核酸（DNA）組成，D正確。故選B。4、C【解析】

本題考查發(fā)酵技術(shù)的應用，考查對果酒、果醋制作原理的理解和識記。明確果酒發(fā)酵和果醋發(fā)酵原理、過程的不同是解答本題的關(guān)鍵。【詳解】醋酸菌在有氧的條件下可把酒精轉(zhuǎn)化為醋酸，應先隔絕空氣進行果酒發(fā)酵，然后供氧進行果醋發(fā)酵，A項錯誤；果酒發(fā)酵所需的最適溫度為18～25℃，果醋發(fā)酵所需的最適溫度為30～35℃，B項錯誤；適當加大接種量可以使目的菌種快速繁殖，提高發(fā)酵速率，抑制雜菌繁殖，C項正確；與人工接種的發(fā)酵相比，自然發(fā)酵獲得的產(chǎn)品雜質(zhì)較多，品質(zhì)較差，D項錯誤?！军c睛】果酒制作和果醋制作的比較：果酒制作果醋制作菌種酵母菌醋酸菌菌種來源附著在葡萄皮上的野生型酵母菌變酸酒表面的菌膜發(fā)酵過程有氧條件下，酵母菌通過有氧呼吸大量繁殖：C6H12O6＋6O2→6CO2＋6H2O；無氧條件下，酵母菌通過無氧呼吸產(chǎn)生酒精：C6H12O6→2C2H5OH＋2CO2氧氣、糖源充足時：C6H12O6＋2O2→2CH3COOH＋2CO2＋2H2O；缺少糖源、氧氣充足時：C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O溫度一般酒精發(fā)酵18～25℃，繁殖最適為20℃左右最適為30～35℃氣體前期：需氧，后期：無氧需要充足的氧氣時間10～12天7～8天5、C【解析】

血糖是指血液中葡萄糖的含量，正常人在清晨空腹血糖濃度為80－120mg/100mL。維持血糖濃度的正常水平，需要神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)的協(xié)同作用。在內(nèi)分泌系統(tǒng)中，胰島素是現(xiàn)在已知的，唯一能降低血糖濃度的激素，能提高血糖濃度的激素則有胰高血糖素、腎上腺髓質(zhì)激素等幾種激素。在一般情況下，主要由于胰島素和胰高血糖素等兩類激素的作用，維持正常的血糖濃度水平。胰島素降低血糖的作用，可歸結(jié)為胰島素促進肝細胞、肌肉細胞、脂肪細胞攝取、貯存和利用葡萄糖，胰島素還抑制氨基酸轉(zhuǎn)化成葡萄糖；胰高血糖素，它可促進肝糖原的分解，使血糖升高，還可使促進脂肪分解。【詳解】A、胰島素能促進組織細胞攝取、利用葡萄糖，從而使血糖濃度下降，A正確；B、胰高血糖素能促進肝糖原分解成葡萄糖，從而使血糖濃度升高，B正確；C、血糖平衡調(diào)節(jié)主要與胰島素和胰高血糖素有關(guān)，還與腎上腺素有關(guān)，C錯誤；D、胰島素是唯一能降血糖的激素，當身體不能產(chǎn)生足夠的胰島素時時，機體會出現(xiàn)高血糖癥狀，D正確。故選C。6、C【解析】

演替的概念：隨著時間的推移，一個群落被另一個群落代替的過程類型項目初生演替次生演替起點在一個從來沒有被植物覆蓋的地面，或者是原來存在過植被、但被徹底消滅了的地方在原有植被雖已不存在，但原有土壤條件基本保留，甚至還保留了植物的種子或其他繁殖體的地方時間經(jīng)歷的時間漫長經(jīng)歷的時間短影響因素自然因素人類活動較為關(guān)鍵實例裸巖、冰川泥、火山巖上的演替火災后的草原、棄耕農(nóng)田上的演替【詳解】A、由于棲息地遭受火災，因此對受災的考拉應采取遷地保護的措施，A錯誤；B、物種多樣性直接對生態(tài)系統(tǒng)多樣性價值起主要作用，而森林與其他生態(tài)系統(tǒng)相比，物種多樣性未必是最高的，故單位面積生態(tài)系統(tǒng)多樣性的價值最高的未必是森林，B錯誤；C、火災作為自然因素，改變了當?shù)厝郝溲萏娴乃俣群头较颍珻正確；D、火災過后地區(qū)進行的是次生演替，與初生演替相比演替的速度快，演替過程中群落的物種組成會發(fā)生變化，故未必是原來的生態(tài)系統(tǒng)，D錯誤。故選C。二、綜合題：本大題共4小題7、C逐級遞減某營養(yǎng)級的能量一部分在呼吸作用中以熱能形式散失，一部分給分解者利用，還有未利用部分光合作用含碳有機物溫室效應加劇，氣溫上升，冰川融化，棲息地減少，生物多樣性下降等間接（價值）和直接【解析】

1、生態(tài)系統(tǒng)的能量流動的特點是單向流動，逐級遞減。流經(jīng)生態(tài)系統(tǒng)的總能量是生產(chǎn)者固定的太陽能總量。

2、碳循環(huán)的特點：全球性，反復流動，循環(huán)利用。3、生態(tài)系統(tǒng)的多樣性具有直接價值、間接價值和潛在價值?！驹斀狻浚?）據(jù)題表分析：B表示生產(chǎn)者，A表示初級消費者，C表示次級消費者，E表示三級消費者，D表示四級消費者。所以雨林生態(tài)系統(tǒng)中次級消費者是C。據(jù)表看出，能量在各營養(yǎng)級之間傳遞有單向流動，逐級遞減的特點，某一營養(yǎng)級的能量不能全部傳給下一營養(yǎng)級的原因是一部分在呼吸作用中以熱能形式散失，一部分給分解者利用，還有未利用部分。（2）雨林在物質(zhì)循環(huán)中發(fā)揮重要作用。碳主要通過光合作用途徑從無機環(huán)境進入生物群落，碳在生物群落中以含碳有機物形式傳遞。大批森林被火燒毀滅后可能帶來的影響是溫室效應加劇，氣溫上升，冰川融化，棲息地減少，生物多樣性下降等。（3）雨林中的樹木可以凈化空氣、調(diào)節(jié)氣候，體現(xiàn)出生態(tài)系統(tǒng)的間接價值；雨林中的樹木在藝術(shù)、文學等創(chuàng)作領(lǐng)域有重要地位，體現(xiàn)出生態(tài)系統(tǒng)的直接價值?！军c睛】本題考查物質(zhì)循環(huán)和能量流動的基本規(guī)律及其應用，生物多樣性保護的意義和措施。8、T-DNA5'限制酶沒有逆轉(zhuǎn)錄抗原-抗體雜交體外隱性【解析】

基因治療：把正?；?qū)氩∪梭w內(nèi)有缺陷的細胞中，使該基因的表達產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達到治療疾病的目的。例：將腺苷酸脫氨酶（ada）基因?qū)牖颊叩牧馨图毎?，治療復合型免疫缺陷癥。（1）體外基因治療：先從病人體內(nèi)獲得某種細胞進行培養(yǎng)，然后再體外完成轉(zhuǎn)移，再篩選成功轉(zhuǎn)移的細胞增殖培養(yǎng)，最后重新輸入患者體內(nèi)，如腺苷酸脫氨酶基因的轉(zhuǎn)移。（2）體內(nèi)基因治療：用基因工程的方法直接向人體組織細胞中轉(zhuǎn)移基因的方法?！驹斀狻浚?）Ti質(zhì)粒中的T-DNA也能對目的基因進行轉(zhuǎn)移和整合。啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，轉(zhuǎn)錄的啟動子位于5’端。因為載體上有限制酶的識別序列和切點，因此ada基因能插入兩端的LTR序列中間。（2）治療性RNA病毒相對于野生型逆轉(zhuǎn)錄病毒沒有致病性。（3）圖中的①是RNA逆轉(zhuǎn)錄出DNA的過程。腺苷脫氫酶屬于蛋白質(zhì)，鑒定目的基因是否成功表達蛋白質(zhì)，可采用的方法是抗原-抗體雜交法。（4）基因治療分為體外治療和體內(nèi)治療兩種，將攜帶正常ada基因的T淋巴細胞注射回患者的骨髓組織中，這種治療SCID的方法屬于體外基因治療法，可用于對隱性基因引起的疾病的治療?！军c睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的操作步驟及相關(guān)應用；識記基因治療技術(shù)及其應用，能結(jié)合所學的知識準確答題。9、常隱性可遺傳兩基因的自由組合EeXBXb等位基因色氨酸進入色素合成細胞【解析】

本題考查遺傳的基本規(guī)律，考查對自由組合定律、伴性遺傳規(guī)律的理解和應用。解答此題，可根據(jù)雜交后代F1和F2的表現(xiàn)型及其比例判斷基因的顯隱性以及遵循的遺傳規(guī)律?！驹斀狻浚?）根據(jù)F1均為野生型，F(xiàn)2野生型與亮紅眼表現(xiàn)型比為3：1，亮紅眼果蠅雌雄個體數(shù)相當，可判斷亮紅眼是一種位于常染色體上的隱性突變，遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，屬于可遺傳變異。（2）①亮紅眼與朱紅眼果蠅雜交，F(xiàn)2性狀分離比接近于9：7，由此可判斷控制亮紅眼與朱紅眼的基因位于兩對同源染色體上，且遵循自由組合定律。②亮紅眼♂eeXBY與朱砂眼♀EEXbXb果蠅雜交，F(xiàn)1雌果蠅的基因型為EeXBXb。③亮紅眼與猩紅眼果蠅雜交，F(xiàn)1、F2果蠅中沒有出現(xiàn)野生型，說明亮紅眼與猩紅眼果蠅均不含有野生型基因，e基因是d的等位基因（e基因是d基因的新的突變）。（3）亮紅眼果蠅眼睛中眼黃素顯著偏低，而色氨酸酶促反應途徑?jīng)]有受到影響，由此推測，亮紅眼基因與色氨酸進入色素合成細胞量減少有關(guān)?！军c睛】本題主要考查伴性遺傳的相關(guān)知識，意在考查考生對所學知識的理解，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力。10、A-T堿基對多，相對氫鍵少，DNA易解旋相同啟動子驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄成mRNA高溫變性，低溫退火、中溫延伸100×230花粉管通道Bt毒蛋白病毒外殼蛋白基因和病毒的復制酶基因【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)可分為變性、復性、延伸三步。在循環(huán)之前，常需要進行一次預變性，以便增加大分子模板DNA徹底變性的概率。PCR過程為:變性，當溫度上升到90℃以上時，氫鍵斷裂，雙鏈DNA解旋為單鏈。復性，當溫度降低到50℃左右時，兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合。延伸，溫度上升到72℃左右，溶液中的四種脫氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補配對原則合成新的DNA鏈?！驹斀狻浚?）基因表達載體包括啟動子、終止子、目的基因、標記基因和復制原點等，所以復制原點和啟動子化學本質(zhì)相同，都是一段特定的DNA序列。已知復制原點中含A-T堿基對多，因此含氫鍵少，結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，易解旋，可做為復制的起點，而啟動子是驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄成mRNA的。（2）PCR技術(shù)擴增目的基因包括三步反應：高溫變性（氫鍵斷裂）、低溫退火（復性）形成氫鍵和中溫延伸形成子鏈。PCR擴增儀可以自動調(diào)控溫度，實現(xiàn)三步反應循環(huán)完成。PCR技術(shù)擴增目的基因的原理是DNA雙鏈復制，結(jié)果使DNA呈指數(shù)增長，即2n（n為擴增循環(huán)的次數(shù)），所以100個DNA分子，30次循環(huán)，使DNA數(shù)量可達到100×230個。（3）植物基