血涂片制備白細胞分類計數(shù)

關于血涂片制備白細胞分類計數(shù)血涂片制備實驗原理：使用推片將血液在載玻片上制成血膜。實驗步驟：1、采血：直接用潔凈的玻片蘸一滴血（使用毛細血管采血的方法）。2、推片：左手平置載玻片，右手持推片從后方或前方接近血滴，使血液沿推片的邊緣展開適當?shù)膶挾?，立即將推片與載玻片呈30-45度角，輕壓推片邊緣將血液推制成厚薄適當?shù)难科?，血涂片應呈舌狀，頭、體、尾清晰可見。3、干燥：將推好的血涂片在空氣中晃動，使其迅速干燥。4、標記：在載玻片的一端用記號筆編號。第2頁,共15頁，星期六，2024年，5月第3頁,共15頁，星期六，2024年，5月第4頁,共15頁，星期六，2024年，5月血涂片制備注意事項：1、要制備良好的血涂片，玻片必須干凈。2、最好使用非抗凝血制備，也可以EDTA抗凝血制備。3、血膜應厚薄適當，頭尾及兩側(cè)應有一定的空隙。4、血涂片必須充分干燥后方可固定染色，否則細胞尚未牢固地吸附在玻片上，在染色過程中容易脫落。5、蘸在玻片上的血液量要適度，過多或過少均會影響涂片的結(jié)果。第5頁,共15頁，星期六，2024年，5月血涂片染色實驗原理：不同種類的細胞及細胞的不同成分對酸性或堿性染料的親和力不同，因而瑞氏染色后各種血細胞顯示出各自的染色特征。實驗步驟：1、待血涂片干燥后，用蠟筆在兩端劃線，以防染色時染液外溢。將玻片平置于染色架上，滴加染液3-5滴，使其迅速蓋滿血涂片，約0.5-1min后，滴加等量的或稍多的緩沖液，用吸耳球?qū)恃禋猓谷疽撼浞只旌稀?、沖洗：室溫染色5-10min后用流水沖去染液，待干。3、觀察結(jié)果：將干燥后的血片置顯微鏡下觀察。用低倍鏡觀察血涂片體尾交界處血細胞平鋪的部分。第6頁,共15頁，星期六，2024年，5月血涂片染色注意事項：1、未干透的血膜不能染色，否則細胞容易脫落。2、染液的量應適度，過少易揮發(fā)沉淀。3、染色時間的長短與染液濃度、染色時溫度及血細胞的多少有關。4、沖洗時不能先倒掉染液，應以流水沖洗以防染料沉著在血涂片上。5、染色過淡，可以復染，復染時應先加緩沖液，創(chuàng)造良好環(huán)境，而后加染液，或加染液與緩沖液的混合液而不能先加染液。6、血細胞中的各種有機物質(zhì)特別是蛋白質(zhì)對染色環(huán)境中氫離子濃度十分敏感。染色環(huán)境偏酸，增強伊紅著色，紅細胞和嗜酸粒細胞偏紅，細胞核呈淡藍或不著色，染色環(huán)境偏堿，增強天青著色，所有細胞呈灰藍色，顆粒深藍。第7頁,共15頁，星期六，2024年，5月白細胞分類計數(shù)實驗原理：血細胞經(jīng)涂片、固定和染色后，根據(jù)不同的形態(tài)和染色特征可將各種白細胞區(qū)分開來，計數(shù)一定數(shù)量的白細胞并進行分類、匯總，可計算出各種白細胞所占的百分比。實驗步驟：1、血涂片的制備與染色。2、鏡檢：使用低倍鏡瀏覽全片，觀察細胞的著色、分布情況。高倍鏡檢查有無異?；蛲鈦砑毎?。最后選擇血涂片體尾交界處染色良好、分布均勻的區(qū)域，滴香柏油一滴，在油鏡下按一定順序?qū)σ曇爸兴姷陌准毎M行分類。要避免重復計數(shù)或漏計，不可主觀選擇視野。共計數(shù)100-200個白細胞。計數(shù)時還要觀察血細胞的形態(tài)、分布、染色情況，并注意有無寄生蟲及其他異常改變。3、結(jié)果匯總：統(tǒng)計各類白細胞所占百分率，并計算絕對值。第8頁,共15頁，星期六，2024年，5月白細胞分類計數(shù)注意事項：1、載玻片的質(zhì)量；2、血膜的質(zhì)量；3、染色；4、各種白細胞的觀察與識別；5、如染色過深，可用甲醇或乙醇適當脫色；染色過淺時可用緩沖液將染液稀釋后復染。6、發(fā)現(xiàn)有核紅細胞時應單獨計數(shù)，不計入100個白細胞內(nèi)，以分類100個白細胞同時見多少有核紅細胞來報告。第9頁,共15頁，星期六，2024年，5月白細胞分類計數(shù)臨床意義：白細胞計數(shù)與分類計數(shù)通常用于：1、疾病的鑒別與診斷；2、病情的觀察與療效的判斷；3、安全用藥監(jiān)測。第10頁,共15頁，星期六，2024年，5月外周血鏡下WBC第11頁,共15頁，星期六，2024年，5月小淋巴細胞第12頁,共15頁，星期六，2024年，5月

嗜酸性粒細胞嗜堿性粒細胞第13頁,共15頁，