CellCelector Flex 基于圖像的全自動(dòng)單細(xì)胞及克隆篩選和分離

抗體發(fā)現(xiàn)基于圖像的全自動(dòng)單細(xì)胞及克隆篩選和分離celcelectorFlexSΛTO2IUS抗體發(fā)現(xiàn)和生產(chǎn)的有利工具精準(zhǔn)識(shí)別和篩選分泌高水平所需抗體的最佳克隆是抗體發(fā)現(xiàn)過程中關(guān)鍵且耗時(shí)的步驟之一。與傳統(tǒng)技術(shù)相比,celorFlex自動(dòng)化自動(dòng)化篩選、排序、挑取和分離流程高通量作流程靈活性u(píng)B細(xì)胞、雜交瘤、中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(CHO)、單細(xì)胞以及克隆離細(xì)胞和克隆表征單克隆性存活率功能生產(chǎn)率用于源板挑取模塊單細(xì)胞挑取模塊貼壁細(xì)胞挑取模塊半固體培養(yǎng)基挑取模塊轉(zhuǎn)移目的板(終板)配有CCD相機(jī)的倒置顯微鏡u物鏡(x2至x40)明場(chǎng)(BF)u相差(phc)/products/cell-selection-and-retrieval/cell-selection-instruments2高通量鑒別高產(chǎn)的單克隆有活力且高產(chǎn)的克隆。您可以根據(jù)實(shí)際數(shù)據(jù)來可靠地預(yù)測(cè)克隆的未來,不必再以平板數(shù)量取勝。這將為您節(jié)省消耗品和培養(yǎng)基成本、培養(yǎng)箱空間,但最重要的是,通過避免錯(cuò)誤、第二輪克隆和不必要的支出,為達(dá)到您的項(xiàng)目目標(biāo)節(jié)省了寶貴的時(shí)間。celIcelector納米孔板HT-NIC方法基于celIcelector納米孔板。這些培養(yǎng)板具有孔板中,每個(gè)孔有4000個(gè)納米孔,整個(gè)納米孔板有100,000盡管進(jìn)行了局部分離,但納米孔內(nèi)的細(xì)胞被同一種培養(yǎng)基所覆蓋,因此出現(xiàn)了有效的細(xì)胞共培養(yǎng)。池中的所有細(xì)胞將有助于細(xì)胞系的生長(zhǎng),同時(shí)保持其單克隆性。產(chǎn)品實(shí)現(xiàn)了行業(yè)與傳統(tǒng)基于甲基纖維素的方法不同,基于celIcelector納米孔的方法允許克隆在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。克隆共享相同的介存活I(lǐng)生長(zhǎng)v細(xì)胞分泌分子周圍培養(yǎng)基3工作流程細(xì)胞鋪板方式與傳統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)板相似。鋪板后,按照經(jīng)典的泊松分布在每個(gè)納米孔內(nèi)隨機(jī)捕獲這些細(xì)胞。自動(dòng)掃描孔,然后自動(dòng)鑒別包含單細(xì)胞的所有納米孔,提供了一個(gè)可靠的基于圖像的單克隆性證明。接種多個(gè)孔可使您從單個(gè)納米孔中捕獲約14,000個(gè)單細(xì)胞所有這些均在一個(gè)納米孔板內(nèi)實(shí)現(xiàn)。 > > > >細(xì)胞鋪板至納米孔板中單克隆篩選克隆生長(zhǎng)評(píng)估自動(dòng)化克隆排序和選擇單克隆性得到證明后,單克隆性得到證明后,細(xì)胞將在培養(yǎng)箱中生長(zhǎng)3至6天,每個(gè)克隆克隆可生長(zhǎng)20至75個(gè)細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)為單細(xì)胞克隆后,再次掃描納米孔板并自動(dòng)選擇單克隆性且具有活力的克或384孔板中進(jìn)行進(jìn)一步分析和放明場(chǎng)或384孔板中進(jìn)行進(jìn)一步分析和放明場(chǎng)10x第。天挑取前第5天挑取后第5天轉(zhuǎn)移至96孔板后第10天克隆分泌物分析在單個(gè)細(xì)胞的納米孔中直接進(jìn)行特定的細(xì)胞分泌物檢測(cè),以確保精確篩選到分泌高水平所需抗體的最佳克隆。第。天第1天第2天第3天高分泌水平的單細(xì)胞克隆。培養(yǎng)后第1、2和3天在明場(chǎng)和熒光中采集圖像。第。天的明場(chǎng)圖像顯示有單細(xì)胞。第。天第1天第2天第3天未分泌所需抗體的單細(xì)胞克隆培養(yǎng)后第1、2和3天在明場(chǎng)和熒光中4將celIcelectorFlex與獨(dú)特的納米孔技術(shù)相結(jié)合,并將高單細(xì)胞分析允許檢測(cè)具有獨(dú)特特性的稀有抗體,這些特性在傳統(tǒng)篩選方法下很難找到。單個(gè)細(xì)胞可立即進(jìn)行多種測(cè)試celIcelectorB細(xì)胞篩選和分離工作流程分鐘)分鐘)將單細(xì)胞混懸液加入到cellcelector納米孔板中分鐘)分鐘)基于納米孔的單細(xì)胞識(shí)別2-32-3小時(shí))自動(dòng)檢測(cè)陽性分泌細(xì)胞小時(shí))小時(shí))將陽性細(xì)胞轉(zhuǎn)移至PCR板,用于下游工藝分鐘)分鐘)生成實(shí)驗(yàn)文檔手動(dòng)將單細(xì)胞懸液分配到納米孔板中。納米孔板的每個(gè)大孔底部都有上萬個(gè)納米孔。根據(jù)板類型和納米孔尺寸不同,每個(gè)大孔內(nèi)可實(shí)現(xiàn)60,000到200,000規(guī)格添加細(xì)胞懸液后,單個(gè)細(xì)胞按照泊松分布隨機(jī)分布在納米孔中并被分隔開來。在單個(gè)細(xì)胞的納米孔中進(jìn)行特定細(xì)胞分泌物分析,并快速鑒別相關(guān)分泌細(xì)胞。celIcelectorB細(xì)胞工作流程支持多種類型的細(xì)胞分析。分析示例H100亞納升納米孔板;底部設(shè)計(jì)為不同數(shù)量的100um六邊形納米孔,第使用celIcelectorFlex在明件可自動(dòng)識(shí)別單細(xì)胞納米孔位置。血漿血漿B細(xì)胞利用板內(nèi)包埋抗原進(jìn)行抗原特異性測(cè)定血漿血漿B細(xì)胞微球A基于微珠的抗原特異性測(cè)定血漿血漿B細(xì)胞報(bào)告細(xì)胞表達(dá)抗原報(bào)告細(xì)胞測(cè)定5celcelIcelector將其轉(zhuǎn)移到適celIcelector基于精準(zhǔn)且溫和的機(jī)械挑取模式,有利于非常輕柔的細(xì)胞B細(xì)胞的高存活率。第從單細(xì)胞篩選到轉(zhuǎn)移命中靶細(xì)胞的整個(gè)過程都有完整的記錄并符合GLP和GMP標(biāo)準(zhǔn)。每個(gè)挑取過程都提供高質(zhì)量顯微圖像以便查驗(yàn)。所有圖像和數(shù)值數(shù)據(jù)(例如形態(tài)和熒光值)以及每個(gè)細(xì)胞的來源和目的位置都存儲(chǔ)在數(shù)據(jù)庫(kù)中,并且可以快速輕松地導(dǎo)出到客戶的LIM系統(tǒng)中。從半固體培養(yǎng)基中篩選)細(xì)胞雜交瘤克隆產(chǎn)生的抗體在不同的克隆之間具有顯著差異。由克隆產(chǎn)生并分泌至培養(yǎng)基中的蛋白可以通過熒光標(biāo)記的二抗觀察到。由于半固態(tài)培養(yǎng)基的粘度阻止抗體進(jìn)一步擴(kuò)散到培養(yǎng)基中,信號(hào)將在產(chǎn)生抗體的細(xì)胞克隆周圍顯示為熒光光暈。為選擇特定的高產(chǎn)克隆celIcelector軟件將細(xì)胞克隆(明場(chǎng)下可見)的大小與細(xì)胞克隆周圍熒光光暈的大小進(jìn)行了比較,從而計(jì)算每個(gè)克隆的抗體產(chǎn)生率。這允許在多個(gè)源板上對(duì)細(xì)胞克隆進(jìn)行排序,以獲得最佳抗體。泌抗體(深藍(lán)色)示意圖D.E.F.抗體生產(chǎn)的強(qiáng)度與克隆團(tuán)周圍熒光暈的直徑相關(guān):無抗體產(chǎn)生擴(kuò)大區(qū)域)。A.挑選前B.挑選前C.挑選后產(chǎn)生抗體的CH○細(xì)胞團(tuán);celIcelector圖像從甲基纖維素培養(yǎng)基中精準(zhǔn)分離雜交瘤和CH○細(xì)胞celIcelectorFlex半固體培養(yǎng)基挑取模塊使用一次性塑工作流程(20-30s)吸頭攝取克隆抽吸克隆轉(zhuǎn)移吸頭處理從吸頭架上自動(dòng)安裝一只新的塑料通過受控抽吸挑取靶細(xì)胞將挑取的克隆運(yùn)送至目的孔中將使用過的吸頭丟棄至垃圾桶中挑選前(A)后(B)甲基纖維素中CH○細(xì)胞的熒光圖像轉(zhuǎn)移后細(xì)胞存活率高A.第1天B.第5天傳統(tǒng)的克隆轉(zhuǎn)移方法通常會(huì)對(duì)細(xì)胞施加壓力,從而造成大量細(xì)胞死亡,并且影響到相鄰的活細(xì)胞。因此,使用一種靈敏的機(jī)械轉(zhuǎn)移方法將細(xì)胞死亡降至最低至關(guān)重要。celIcelector提供了一種溫和、可靠的方式,用于分離和轉(zhuǎn)移甲基纖維素培養(yǎng)基中的雜交瘤。細(xì)