魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座

魚(yú)類(lèi)生理學(xué)試驗(yàn)

動(dòng)物醫(yī)學(xué)系伍莉魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第1頁(yè)試驗(yàn)一

魚(yú)類(lèi)生理學(xué)試驗(yàn)慣用儀器

試驗(yàn)基本操作技術(shù)

魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第2頁(yè)一、魚(yú)類(lèi)生理學(xué)試驗(yàn)地位本課程共20課時(shí)，屬專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)課程成績(jī)計(jì)算：匯報(bào)90%，考勤10%二、魚(yú)類(lèi)生理學(xué)試驗(yàn)方法魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第3頁(yè)三、魚(yú)類(lèi)生理學(xué)試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)1.掌握基本試驗(yàn)方法；2.掌握主要儀器操作方法；3.掌握生理試驗(yàn)基本技能；4.獨(dú)立分析試驗(yàn)結(jié)果、寫(xiě)出規(guī)范試驗(yàn)匯報(bào)。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第4頁(yè)四、魚(yú)類(lèi)生理學(xué)試驗(yàn)要求1.試驗(yàn)前：教師和學(xué)生均做好試驗(yàn)準(zhǔn)備工作。2.試驗(yàn)中：教師簡(jiǎn)明講解試驗(yàn)原理、關(guān)鍵步驟、試驗(yàn)要求等。學(xué)生領(lǐng)取器材，償還時(shí)復(fù)核，損壞登記，丟失賠償。3.試驗(yàn)后：償還試驗(yàn)用具，動(dòng)物尸體按指定位置放置，輪番清掃清潔衛(wèi)生；轉(zhuǎn)錄、整理試驗(yàn)結(jié)果，及時(shí)上交試驗(yàn)匯報(bào)。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第5頁(yè)五、慣用生理儀器使用（一）刺激系統(tǒng)1.刺激器2.刺激電極（1）普通電極（2）保護(hù)電極（3）Zn-Cu弓（二）引導(dǎo)、換能系統(tǒng)1.壓力換能器2.張力換能器魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第6頁(yè)（三）放大系統(tǒng)（信號(hào)調(diào)整）放大器：可將生物電信號(hào)放大數(shù)千倍（四）顯示、統(tǒng)計(jì)系統(tǒng)1.記紋鼓2.生理統(tǒng)計(jì)儀慣用有二道、四道及八道儀等3.計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第7頁(yè)六、魚(yú)類(lèi)生理試驗(yàn)基本操作技術(shù)（一）手術(shù)器械1.刀：手術(shù)刀（指壓式、執(zhí)筆式、反挑式）2.剪：外科剪、眼科剪3.鑷：外科鑷、眼科鑷4.鉗：止血鉗5.其它：探針、玻璃分針、蛙板、鋅銅弓、蛙心夾等（二）試驗(yàn)動(dòng)物選擇健康動(dòng)物魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第8頁(yè)七、魚(yú)類(lèi)麻醉劑麻醉劑能夠降低魚(yú)體新陳代謝，降低對(duì)魚(yú)體傷害，提升存活率。（一）麻醉劑作用原理麻醉劑首先抑制腦皮質(zhì)（觸覺(jué)喪失期），再作用于基底神經(jīng)節(jié)與小腦（興奮期），最終作用于脊髓（麻醉期）。過(guò)大劑量或過(guò)長(zhǎng)接觸可深及髓質(zhì)，使呼吸與血管舒縮中樞麻痹，最終造成死亡。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第9頁(yè)（二）魚(yú)類(lèi)麻醉過(guò)程行為特征表1麻醉程度分期及魚(yú)類(lèi)行為表現(xiàn)注：“±”-正常；“＋”-略失；“－”-喪失。行為表現(xiàn)分期視覺(jué)觸覺(jué)重壓肌張力平衡感鰓蓋頻率備注第Ⅰ期（輕度鎮(zhèn)靜期）±±＋＋＋正常第Ⅱ期（深度鎮(zhèn)靜期）－－＋＋＋略降低用于普通運(yùn)輸?shù)冖笃冢ㄆ胶馐д{(diào)期）－－＋＋－增加第Ⅳ期（麻醉期）－－＋－－增加或降低最正確操作時(shí)期第Ⅴ期（深度麻醉期）－－－－－慢馬上進(jìn)行復(fù)蘇第Ⅵ期（延髓麻醉期）－－－－－停頓無(wú)法恢復(fù)，死亡魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第10頁(yè)表2復(fù)蘇過(guò)程分期及魚(yú)類(lèi)行為表現(xiàn)復(fù)蘇過(guò)程行為表現(xiàn)第Ⅰ期身體靜止，呼吸恢復(fù)，鰓蓋開(kāi)始振動(dòng)第Ⅱ期部分平衡及運(yùn)動(dòng)恢復(fù)第Ⅲ期平衡完全恢復(fù)，對(duì)外界反應(yīng)恢復(fù)第Ⅳ行為完全恢復(fù)正常魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第11頁(yè)1.MS-222（間氨基苯甲酸乙酯甲烷磺酸鹽）MS-222易處理、效力快速、安全性高，被美國(guó)國(guó)家食品及藥品管理局（FDA）同意為漁用麻醉劑。MS-222可采取浸泡、噴霧和注射等方法使用。MS-222主要在脾臟、肝臟中積聚，過(guò)高濃度會(huì)引發(fā)死亡。MS-222適宜活魚(yú)運(yùn)輸，將魚(yú)放在清水中僅1min就能清醒，但FDA要求經(jīng)MS-222麻醉魚(yú)，食用必須經(jīng)過(guò)21d休藥期才可銷(xiāo)售；另外，因?yàn)槠鋬r(jià)格昂貴限制了它應(yīng)用。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第12頁(yè)2.丁香酚（2-甲氧-4丙烯基酚）全麻劑，是一個(gè)植物香料，丁香酚及其代謝物能夠快速?gòu)难汉徒M織中排出，不會(huì)誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生有毒和突變物質(zhì)，在醫(yī)學(xué)上作為牙科鎮(zhèn)痛劑被廣泛應(yīng)用。丁香酚無(wú)殘留期，是正當(dāng)水產(chǎn)麻醉劑，能同時(shí)滿足安全性、高效性和低成本要求，已廣泛應(yīng)用于親魚(yú)采卵、活魚(yú)運(yùn)輸以及手術(shù)中，對(duì)鯉魚(yú)、真鯛、鰻魚(yú)等有強(qiáng)烈麻醉作用。與MS-222相比，丁香酚毒性更小，無(wú)殘留，但它入麻時(shí)間與復(fù)蘇時(shí)間比MS-222更長(zhǎng)。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第13頁(yè)3.C02C02是唯一被允許用來(lái)運(yùn)輸食用魚(yú)化學(xué)麻醉劑。用C02麻醉魚(yú)，沒(méi)有藥品消退期，食用魚(yú)可直接上市銷(xiāo)售，但其麻醉時(shí)間和復(fù)蘇時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)，麻醉水溶液使用濃度范圍很窄，且只對(duì)部分魚(yú)有麻醉作用，因而應(yīng)用范圍受到限制。如用C02輔助運(yùn)輸鯉成魚(yú)，須分別用高分壓（27.33KPa）和低分壓（13.17KPa）C02氣流交替刺激鯉成魚(yú)，經(jīng)15～30min后魚(yú)即進(jìn)入昏眠狀態(tài)，運(yùn)輸時(shí)間可維持1h左右，且死亡率很低。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第14頁(yè)也可用C02和02（50：50）混合氣體輔助運(yùn)輸活魚(yú)。直接往裝有鯽魚(yú)和鯉魚(yú)水體中注入氣體，使魚(yú)在水中行為逐步遲鈍。約25min后，魚(yú)便沉到水底“睡眠”，此時(shí)可將魚(yú)從水中撈出進(jìn)行運(yùn)輸，連續(xù)時(shí)間可超出30h。當(dāng)魚(yú)運(yùn)到目標(biāo)地后，再將它們放入水中并注入02，5min后即可清醒。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第15頁(yè)試驗(yàn)二計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)

一、系統(tǒng)組成與工作原理PCLAB-UE由硬件和軟件兩部分組成，硬件主要完成對(duì)各種生物電信號(hào)與非電生物信號(hào)進(jìn)行調(diào)理、放大，并對(duì)信號(hào)進(jìn)行模/數(shù)（A/D）轉(zhuǎn)換，使之進(jìn)入計(jì)算機(jī)。軟件主要對(duì)已經(jīng)數(shù)字化了生物信號(hào)進(jìn)行顯示、統(tǒng)計(jì)、存放、處理及打印輸出，同時(shí)對(duì)系統(tǒng)各部分進(jìn)行控制，與操作者進(jìn)行人機(jī)對(duì)話。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第16頁(yè)二、主界面

從上到下依次分為：標(biāo)題欄、菜單欄、工具欄、狀態(tài)提醒欄及采樣窗、控制面板和數(shù)據(jù)窗等其它多個(gè)對(duì)應(yīng)子窗口組成。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第17頁(yè)三、使用方法1.設(shè)置：標(biāo)準(zhǔn)配置，恢復(fù)出廠時(shí)配置2.新建：試驗(yàn)項(xiàng)目→填寫(xiě)信息→試驗(yàn)窗口→開(kāi)始試驗(yàn)3.采樣：統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)4.控制面板參數(shù)調(diào)整（1）通道功效調(diào)整（2）刺激參數(shù)調(diào)整5.文件存放：F：/文件名：09水養(yǎng)3-呼吸（左2）6.編輯：打開(kāi)原文件→選擇→復(fù)制→打開(kāi)“工具”下“畫(huà)圖”→處理文件→復(fù)制圖片→存盤(pán)到F：/魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第18頁(yè)試驗(yàn)三影響血液凝固原因紅細(xì)胞脆性測(cè)定血紅蛋白測(cè)定魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第19頁(yè)影響血液凝固原因

1試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)以凝血時(shí)間為指標(biāo)，了解影響凝血原因，加深對(duì)生理止血過(guò)程了解。2試驗(yàn)原理血液凝固是一個(gè)酶解激活過(guò)程，有各種凝血因子參加。依據(jù)凝血過(guò)程起動(dòng)時(shí)凝血因子起源不一樣，可將凝血分為內(nèi)源性激活路徑和外源性激活路徑。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第20頁(yè)表1血液凝固及其影響原因試管號(hào)試驗(yàn)處理凝血時(shí)間（秒）1空白2液體石蠟2滴3棉花少許4冰水環(huán)境5肝素4滴6草酸鉀4滴7肺組織浸液4滴5號(hào)管加CaCl24滴6號(hào)管加CaCl24滴魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第21頁(yè)【注意事項(xiàng)】l.采血過(guò)程要盡可能快，以降低計(jì)時(shí)誤差，對(duì)比試驗(yàn)采血時(shí)間要緊接著進(jìn)行。2.每支試管口徑大小及采血量要相對(duì)一致，不可相差太大。3.判斷凝血標(biāo)準(zhǔn)要一致，普通以傾斜試管達(dá)45°時(shí)試管內(nèi)血液不見(jiàn)流動(dòng)為準(zhǔn)。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第22頁(yè)紅細(xì)胞脆性測(cè)定1.試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)學(xué)習(xí)測(cè)定紅細(xì)胞滲透脆性方法，了解細(xì)胞外液滲透張力對(duì)維持細(xì)胞正常形態(tài)與功效主要性。2.試驗(yàn)原理正常紅細(xì)胞懸浮于等滲血漿中，若置于高滲溶液內(nèi)，則紅細(xì)胞會(huì)因失水而皺縮；反之，置于低滲溶液內(nèi)，則水進(jìn)入紅細(xì)胞，使紅細(xì)胞膨脹。如環(huán)境滲透壓繼續(xù)下降，紅細(xì)胞會(huì)因繼續(xù)膨脹而破裂，釋放血紅蛋白，稱之為溶血。紅細(xì)胞膜對(duì)低滲溶液有一定抵抗力，這一特征稱為紅細(xì)胞滲透脆性。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第23頁(yè)3.溶液配置表2不一樣濃度NaCl溶液配制管號(hào)123456789101%NaCl（mL）6.05.04.54.03.53.02.52.01.51.0蒸餾水(mL)4.05.05.56.06.57.07.58.08.59.0NaCl濃度（%）0.600.500.450.400.350.300.250.200.150.10魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第24頁(yè)4.結(jié)果觀察①未溶血試管：液體下層有大量紅細(xì)胞下沉，上層為無(wú)色透明，表明無(wú)紅細(xì)胞破裂。②不完全溶血試管：液體下層有紅細(xì)胞下沉，上層出現(xiàn)透明淡紅色，表明部分紅細(xì)胞已經(jīng)破裂，稱為不完全溶血。②完全溶血試管：液體完全變成透明紅色，管底無(wú)紅細(xì)胞下沉。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第25頁(yè)【注意事項(xiàng)】1.試管要潔凈，加抗凝血量要一致。2.配制NaCI溶液時(shí)應(yīng)力爭(zhēng)準(zhǔn)確、無(wú)誤。3.混勻時(shí)，輕輕傾倒1～2次，損少機(jī)械震動(dòng)，防止人為溶血。4.靜置時(shí)間足夠，應(yīng)在光線明亮處判定結(jié)果。

魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第26頁(yè)血紅蛋白測(cè)定1試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)掌握比色法測(cè)定動(dòng)物血紅蛋白含量方法。2試驗(yàn)原理血紅蛋白顏色與氧結(jié)合量相關(guān)，當(dāng)用一定氧化劑將其氧化時(shí)，可使其轉(zhuǎn)變?yōu)榉€(wěn)定、棕色高鐵血紅蛋白，而且顏色與血紅蛋白濃度成正比。所以，可與標(biāo)準(zhǔn)色板進(jìn)行對(duì)比，求出血紅蛋白濃度，即每升血液中含血紅蛋白克數(shù)（g.L-1）。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第27頁(yè)3試驗(yàn)對(duì)象：動(dòng)物種類(lèi)不限4方法與步驟：使用沙里氏血紅蛋白計(jì)測(cè)定。比色法是用HCl使血紅蛋白酸化形成粽色高鐵血紅蛋白，然后和標(biāo)準(zhǔn)比色板進(jìn)行比色。（1）血紅蛋白計(jì)由標(biāo)準(zhǔn)比色箱和測(cè)定管組成。測(cè)定管兩側(cè)有刻度，一側(cè)為血紅蛋白量絕對(duì)值，以每100mL血液中所含血紅蛋白克數(shù)表示；另一側(cè)為相對(duì)值，以％（即相當(dāng)于正常平均值百分?jǐn)?shù)）來(lái)表示。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第28頁(yè)血紅蛋白測(cè)定①先檢驗(yàn)血紅蛋白吸管和測(cè)定管是否清潔，如不清潔則依次用自來(lái)水→蒸餾水→無(wú)水乙醇清洗。②將0.1N鹽酸加入測(cè)定管中至刻度“2”處。③用血紅蛋白吸管吸收血液至刻度20μL處，用脫脂棉擦凈外壁血液后，馬上將血液緩緩吹入測(cè)定管鹽酸中，并利用上層鹽酸將吸管重復(fù)洗滌屢次（防止起泡），使吸管中血液全部進(jìn)入鹽酸液層中，混勻。④酸化10min后，逐滴加入蒸餾水使液體顏色變淺，邊加邊混勻并與標(biāo)準(zhǔn)比色板比較，至二者顏色相同為止。⑤讀出測(cè)定管內(nèi)液體凹面最低處刻度，即為每100mL血液中血紅蛋白克數(shù)。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第29頁(yè)【注意事項(xiàng)】1.吹血入測(cè)定管時(shí)，不宜用力過(guò)猛，防止起泡以影響讀數(shù)。2.稀釋時(shí)應(yīng)逐滴加入，預(yù)防稀釋過(guò)量。3.血液與鹽酸作用時(shí)間不能少于10min，不然血紅蛋白不能充分轉(zhuǎn)變?yōu)楦哞F血紅蛋白，使結(jié)果偏低。4.用血紅蛋白吸管吸血時(shí)要準(zhǔn)確，比色應(yīng)在自然光下進(jìn)行。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第30頁(yè)試驗(yàn)匯報(bào)撰寫(xiě)1試驗(yàn)原理2材料與方法2.1主要器材2.2主要藥品2.3試驗(yàn)動(dòng)物2.4試驗(yàn)方法2.4.1Hb測(cè)定：按魚(yú)類(lèi)生理學(xué)試驗(yàn)方法進(jìn)行[1]。2.4.2RBC脆性測(cè)定：按魚(yú)類(lèi)生理學(xué)試驗(yàn)方法進(jìn)行[1]。2.4.3影響血凝原因：按魚(yú)類(lèi)生理學(xué)試驗(yàn)方法進(jìn)行[1]。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第31頁(yè)3試驗(yàn)結(jié)果3.1Hb含量及RBC脆性測(cè)定表1鳙魚(yú)Hb含量及RBC脆性測(cè)定分組Hb測(cè)定含量（g/L）RBC脆性測(cè)定（NaCl%）最小抵抗最大抵抗試驗(yàn)組對(duì)照組750.48～0.400.33～0.21魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第32頁(yè)3.2不一樣原因?qū)ρ耗虝r(shí)間影響表2血液凝固及其影響原因試管號(hào)試驗(yàn)處理凝血時(shí)間（秒）1空白2液體石蠟4滴3棉花少許4冰水環(huán)境5肝素4滴6草酸鉀4滴7肺組織浸液4滴5號(hào)管加CaCl24滴6號(hào)管加CaCl24滴魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第33頁(yè)4分析與探討4.1Hb測(cè)定結(jié)果比對(duì)照高（或低、或基本一致），從操作過(guò)程方面說(shuō)明原因：……。4.2RBC脆性測(cè)定結(jié)果，與對(duì)照組相比，最小抵抗高（或低、或基本一致），最大抵抗……，從操作過(guò)程方面說(shuō)明原因：……。4.3凝血時(shí)間測(cè)定結(jié)果表明，××處理能加緊（抑制或不凝）血液凝固，為何？××管加CaCl2后凝固，為何？（從凝血機(jī)制分析）5參考文件[1]楊秀平.動(dòng)物生理學(xué)試驗(yàn)[M].北京：高等教育出版社，，85-99.魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第34頁(yè)家兔Hb、RBC脆性測(cè)定及影響血凝原因觀察

1試驗(yàn)相關(guān)信息及目標(biāo)2材料2.1動(dòng)物2.2主要藥品：2.3主要儀器：3試驗(yàn)方法：簡(jiǎn)述或按生理試驗(yàn)指導(dǎo)書(shū)a～b頁(yè)介紹方法進(jìn)行[1]。

4結(jié)果4.1家兔Hb、RBC脆性測(cè)定：見(jiàn)表1。分組試驗(yàn)組對(duì)照組Hb（g/L）RBC脆性（NaCL%）最小抵抗最大抵抗80-1500.6～

0.550.4～0.35表1家兔Hb、RBC脆性測(cè)定4.2家兔血凝時(shí)間測(cè)定：見(jiàn)表2。表2不一樣原因?qū)彝醚龝r(shí)間影響5討論5.1家兔Hb測(cè)定結(jié)果與對(duì)照比較，其值偏高，原因：5.2家兔RBC脆性測(cè)定結(jié)果與對(duì)照比較，其值，原因：5.3家兔血凝時(shí)間測(cè)定結(jié)果表明，時(shí)間長(zhǎng)短，原因：參考文件[1]陳杰.家畜生理學(xué)（第四版）[M].北京：中國(guó)家業(yè)出版社，，23-34.血凝時(shí)間（S）試驗(yàn)管號(hào)處理原因草+Ca++肝素+Ca++對(duì)照棉花肝素冰水石蠟草肺組織[2]王力.論文題目[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志，（25）9：12-23.魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第35頁(yè)試驗(yàn)四蛙心收縮統(tǒng)計(jì)和心肌特征證實(shí)

【試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)】學(xué)習(xí)蟾蜍心臟活動(dòng)描記方法，觀察心肌收縮特點(diǎn)?！驹囼?yàn)原理】心肌有效不應(yīng)期尤其長(zhǎng)，幾乎占據(jù)了整個(gè)收縮期和舒張?jiān)缙凇Ｔ诖似趦?nèi)任何刺激均不能引發(fā)心肌收縮。所以心肌不會(huì)產(chǎn)生強(qiáng)直收縮，心臟總是有節(jié)律舒縮。在心臟舒張?jiān)缙谥?，給心肌一次有效刺激，會(huì)引發(fā)心臟一次期前收縮，緊接著出現(xiàn)一次較長(zhǎng)間歇——代償間歇。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第36頁(yè)【試驗(yàn)對(duì)象】蛙或蟾蜍【試驗(yàn)藥品】任氏液【試驗(yàn)方法與步驟】

1.試驗(yàn)準(zhǔn)備（1）在體蛙心制備：取蛙一只，破壞腦、脊髓，仰臥固定于蛙板上。左手持鑷子提起胸骨后端皮膚剪一小口，然后向左、右兩側(cè)鎖骨外側(cè)剪開(kāi)皮膚、肌肉，剪斷左右鎖骨，使創(chuàng)口呈一倒三角形，充分暴露心臟部位，并用眼科剪剪開(kāi)心包膜，徹底暴露心臟。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第37頁(yè)（2）觀察心臟結(jié)構(gòu)識(shí)別蛙心臟。自心臟腹面可觀察到心室、心房、動(dòng)脈球和主動(dòng)脈。用玻璃分針向前翻轉(zhuǎn)蛙心，暴露心臟后面可觀察到靜脈竇和心房。（3）連接試驗(yàn)裝置將蛙心夾上細(xì)線與張力換能器相連，讓心臟搏動(dòng)信號(hào)傳入計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)。將銅絲與心室接觸良好并固定穩(wěn)妥后，與刺激器輸出連接。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第38頁(yè)2.試驗(yàn)項(xiàng)目（1）描記正常曲線，觀察曲線收縮相和舒張相。（2）用中等強(qiáng)度單個(gè)閾上刺激在收縮期刺激心室，有何改變？為何？（3）用中等強(qiáng)度單個(gè)閾上刺激在舒張中后期刺激心室，有何改變？為何？（4）心肌“全或無(wú)”反應(yīng)：用絲線在靜脈竇與心房之間作一結(jié)扎，心臟停頓跳動(dòng)。然后給予閾下及不同強(qiáng)度閾上刺激，觀察蛙心收縮強(qiáng)度改變。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第39頁(yè)【結(jié)果及分析】1.心縮期單個(gè)閾上刺激，心臟有何改變，為何？2.心舒期單個(gè)閾上刺激，心臟有何改變，為何？3.第一結(jié)扎后，心房、心室活動(dòng)有何改變，為何？4.閾下刺激心縮曲線幅度有何改變，為何？5.不一樣強(qiáng)度閾上刺激，心縮曲線幅度有何改變，為何？魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第40頁(yè)【注意事項(xiàng)】1.破壞蛙大腦和脊髓要徹底。2.經(jīng)常給心臟滴加任氏液，以保持心臟適宜環(huán)境。3.張力傳感器與蛙心夾之間絲線應(yīng)保持適宜擔(dān)心度。4.銅絲與心室接觸良好同時(shí)，還應(yīng)盡可能不讓其妨礙心臟自發(fā)收縮。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第41頁(yè)試驗(yàn)五魚(yú)類(lèi)呼吸運(yùn)動(dòng)影響原因1目標(biāo)：觀察魚(yú)類(lèi)呼吸運(yùn)動(dòng)影響原因。2原理：魚(yú)類(lèi)在數(shù)次呼吸運(yùn)動(dòng)后，會(huì)出現(xiàn)一次洗滌運(yùn)動(dòng)，以清除進(jìn)入口腔和鰓異物，確保氣體交換順利進(jìn)行。3材料：鯉魚(yú)（或鯽魚(yú)）、1g/L硫酸酮液。4項(xiàng)目：4.1正常呼吸曲線描記；4.2向水中（5L）通入CO2氣體，統(tǒng)計(jì)呼吸運(yùn)動(dòng)改變；4.3分別向水中加入1g/L硫酸酮液5mL和50mL，使其濃度分別為1mg/L和10mg/L，統(tǒng)計(jì)呼吸運(yùn)動(dòng)改變；4.4加入溫水，使水溫遲緩升到35℃，統(tǒng)計(jì)呼吸運(yùn)動(dòng)改變。魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家講座第42頁(yè)試驗(yàn)六離體小腸平滑肌生理特