TCSBM 0050.2-2024 創(chuàng)面修復(fù)材料有效性評價 第2部分：水不溶性材料體外浸提液評價方法

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T/CSBM團 體 標(biāo) 準(zhǔn)T/CSBM0050.2—2024創(chuàng)面修復(fù)材料有效性評價2EffectivenessevaluationofwoundrepairmaterialsPart2:Invitroextractsevaluationmethodforwaterinsolublematerials2024-05-14發(fā)布 2024-10-01實施中國生物材料學(xué)會 發(fā)布T/CSBM0050.2T/CSBM0050.2—2024PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANIII目 次前言 II引言 III范圍 1規(guī)范性用文件 1術(shù)語和義 1浸提液備 1細胞增試驗 1細胞遷試驗 3參考文獻 5前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)工作導(dǎo)則 第部分：標(biāo)準(zhǔn)化件的結(jié)和起草規(guī)》的規(guī)起草。本文件是T/CSBM0050—2024《創(chuàng)面修復(fù)材料有效性評價》的第2部分。包括以下部分：——第1部分：水溶性材料體外評價方法；——第2部分：水不溶性材料體外浸提液評價方法；——第3部分：刺激因子屏蔽評價方法；——第4部分：體外微血管形成試驗評價方法；——第5部分：體外細胞粘附和增殖直接接觸評價法；——第6部分：動物食管創(chuàng)面模型促修復(fù)愈合評價方法；——第7部分：動物胃創(chuàng)面模型促修復(fù)愈合評價方法；——第8部分：動物腸道創(chuàng)面模型促修復(fù)愈合評價方法；——第9部分：動物皮膚創(chuàng)面模型促修復(fù)愈合質(zhì)量評價方法。本文件由中國生物材料學(xué)會團體標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口。本文件起草單位：杭州英健生物科技有限公司、中國食品藥品檢定研究院、四川大學(xué)。引 言T/CSBM0050.2T/CSBM0050.2—202411創(chuàng)面修復(fù)材料有效性評價第2部分：水不溶性材料體外浸提液評價方法范圍本文件規(guī)定了水不溶性創(chuàng)面修復(fù)材料體外評價的浸提液制備、細胞增殖試驗和細胞遷移試驗。GB/T16886.12—2023 醫(yī)療械生物評價 第部分：樣制備與照樣品T/CSBM0050.1 創(chuàng)修復(fù)材有效性價 第部：水溶性料體外價方法術(shù)語和定義T/CSBM0050.1界定的術(shù)語和定義適用于本文件。浸提液制備在無菌狀態(tài)下，按照以下條件制備浸提液：a) 浸提溫度：37℃±1浸提時間：24h±2h48h±2h72h±2h；浸提條件：120r/minGB/T16886.12—20231原理器具試驗器具如下：T/CSBM0050.2T/CSBM0050.2—202422酶標(biāo)儀；電子天平；液氮罐；96試劑和耗材試驗試劑和耗材如下：10％DMEM（10％FBSDMEM）；CCK-8細胞系樣品制備試驗樣品將浸提液使用無血清培養(yǎng)基稀釋成100％、75％、50％、25％、12.5％的濃度。陽性對照含10％FBSDMEM37120r/min24?？瞻讓φ?，37120r/min24h。試驗方法1×105個/mL96100L，624h124h48h和72hCCK-83hT/CSBM0050.2T/CSBM0050.2—2024PAGEPAGE3450nm的吸光度值，按照式（1）計算細胞增殖率，評估試驗樣品溶液不同濃度對細胞的增殖作用，并篩選出最佳增殖濃度。表1 細胞增殖驗試驗分組培養(yǎng)條件檢測模型觀察時間檢驗方法陽性對照組含10％FBSDMEM低糖培養(yǎng)基細胞系24h、48h、72hCCK-8法空白對照組無血清培養(yǎng)基試驗組樣品無血清培養(yǎng)基溶液1??=??450????×100％·································································(1)1??450????式中：P1——細胞增殖率，％；A450nm——陽性對照組不同濃度樣品組平均吸光度；B450nm——空白對照組平均吸光度。結(jié)果分析/（p0.0（p＞0.05）6 原理器具試驗器具如下：酶標(biāo)儀；電子天平；液氮罐；24T75ImageJ試劑和耗材試驗試劑和耗材如下：10％DMEM（10％FBSDMEM）；細胞系同5.2.3。樣品制備同5.3。試驗方法按照表21×105個/mL241個復(fù)孔，24h1mL10×012h、hImageJ（2）表2 細胞遷移驗試驗分組培養(yǎng)條件檢測模型觀察時間檢驗方法陽性對照組含10％FBSDMEM低糖培養(yǎng)基細胞系0h、12h、24h顯微鏡觀察拍攝圖片空白對照組無血清培養(yǎng)基試驗組樣品無血清培養(yǎng)基溶液2??=??0???12/??24×100％·······························································(2)2??0式中：P2——細胞遷移率，％；S0012hS2424h結(jié)果分析/（p0.0（p＞0.05）參 考 文 獻究[J].,2022,41(04):405-412.HangZ,MuyeH,MinyiY,etal.InVitroandVivoInvestigationonth