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文檔簡介
抗原抗體反應2第一節(jié)抗原抗體反應的原理
第二節(jié)抗原抗體反應的特點
第三節(jié)影響抗原抗體反應的因素
第四節(jié)抗原抗體反應的類型
內容提要3抗原抗體反應(antigen-antibodyreaction):是指抗原與相應抗體之間所發(fā)生的特異性結合反應。體內:溶菌、殺菌、中和毒素、促進吞噬等作用,有時亦可引起免疫病理損傷。體外:凝集反應、沉淀反應、溶血反應等。
抗原表位與抗體超變區(qū)的結構互補性和親和性,由抗原、抗體分子空間構型所決定的抗原表位與抗體超變區(qū)必須緊密接觸第一節(jié)抗原抗體反應的原理1.靜電引力:相反電荷之間(electrostaticforces)2.范德華引力:原子、分子之間發(fā)生,極化作用最?。╲anderWaalsinteractions)3.氫鍵:H和電負性大的N、O,最具特異性(hydrogenbond)4.疏水作用力:疏水基團接觸,對水分子排斥,作用最大(hydrophobicinteractions)
抗原抗體結合力示意圖一、抗原抗體結合力氫鍵離子鍵疏水作用力范德華引力離子鍵二、抗原抗體的親和性和親合力AbAgHighAffinityAbAgLowAffinity親和性(affinity):抗體分子上一個抗原結合點與相應的抗原表位之間的結合強度,取決于兩者空間構型互補的程度K=K1結合常數(shù)/K2解離常數(shù)親和力與親和性、與抗體結合價、抗原的有效抗原表位數(shù)目相關YKeq=104AffinityY106AvidityYYYYY1010Avidity親合力(avidity):一個完整抗體分子的抗原結合部位與若干相應抗原表位之間的結合強度8親水膠體疏水膠體轉化NaCl可見反應三、親水膠體轉化為疏水膠體抗原抗體為蛋白質,帶負電荷,表面有水化層抗原抗體結合使表面電荷減少,水化層變薄,失去親水性特異性可逆性比例性階段性第二節(jié)抗原抗體反應的特點10特異性:抗原與抗體結合反應的專一性抗原抗體反應特異性示意圖分子基礎:抗原表位與抗體分子超變區(qū)之間空間構型的互補性一、特異性兩種不同的抗原分子具有部分相同或類似結構的抗原表位,可與彼此相應的抗血清發(fā)生反應交叉反應(crossreactions)抗原抗體交叉反應示意圖外-斐試驗:斑疹傷寒的診斷(變形桿菌與立克次體有相同的抗原表位)二、可逆性可逆性:抗原與相應抗體結合成復合物后,在一定條件下又可解離為游離抗原與抗體的特性
影響因素:抗體對相應抗原的親合力-親合力環(huán)境因素對復合物的影響-pH、離子強度動態(tài)平衡,K=K1/K2Ag+AbAg-Ab臨床應用:親和層析純化抗原或抗體比例性:抗原與抗體發(fā)生可見反應需遵循一定的量比關系三、比例性AbexcessAgexcessEquivalence–Latticeformation14前帶(prezone):抗體過量后帶(postzone):抗原過量等價帶(equivalencezone):抗原抗體比例合適
沉淀量與抗原抗體的比例關系注意臨床應用?。?!第一階段:特異性結合階段,反應快,數(shù)秒至數(shù)分鐘內完成,肉眼不可見第二階段:反應可見階段,反應慢,出現(xiàn)凝集、沉淀和細胞溶解等現(xiàn)象,數(shù)分鐘、數(shù)小時到數(shù)日不等,且受電解質、溫度和酸堿度等影響四、階段性抗原、抗體反應物的自身因素反應的環(huán)境因素第三節(jié)影響抗原抗體反應的因素一、反應物自身因素抗原:理化性狀(顆粒性、可溶性、單價抗原)表位種類和數(shù)目抗體:來源(R型或H型)濃度親和性18電解質:0.85%NaCl溶液或各種緩沖液酸堿度:pH6~pH9溫度:15℃~40℃,37℃最適,4℃冷凝集適當?shù)恼駬u或攪拌加速反應二、環(huán)境因素凝集反應沉淀反應補體參與的反應中和反應標記免疫反應抗原和抗體性質的不同和反應條件的差異、反應現(xiàn)象不同第四節(jié)抗原抗體反應的類型20反應類型實驗技術結果判斷凝集反應直接凝集試驗觀察凝集現(xiàn)象間接凝集試驗同上抗球蛋白試驗同上沉淀反應液相沉淀試驗觀察沉淀,檢測濁度凝膠內沉淀試驗觀察掃描沉淀線或沉淀環(huán)免疫電泳技術觀察掃描沉淀峰、沉淀弧補體參與的反應補體溶血試驗觀察測定溶血現(xiàn)象補體結合試驗同上反應類型實驗技術結果判斷中和反應病毒中和試驗檢測病毒感染性毒素中和試驗檢測外毒素毒性標記免疫反應熒光免疫技術檢測熒光現(xiàn)象放射免疫技術檢測放射性強度酶免疫技術檢測酶底物顯色發(fā)光免疫技術檢測發(fā)光強度金免疫技術檢測金顆粒沉淀22總結抗原抗體反應概念抗原抗體之間的結合力涉及靜電引力、范德華引力、_______和________。抗原抗體反應的特點是____
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