發(fā)酵學(xué)習(xí)資料

又稱微生物工業(yè)，是利用微生物具有的生物活性〔酶〕進展物質(zhì)轉(zhuǎn)換，從事各種發(fā)酵產(chǎn)品生產(chǎn)的工業(yè)。指利用微生物細胞中的一種或多種酶，作用于一些化合物的特定部位〔基團使它轉(zhuǎn)變成構(gòu)造相類似但具有更大經(jīng)濟價值化合物。是爭論微生物生長、生殖及代謝活動、代謝產(chǎn)物合成及其掌握規(guī)律的科學(xué)。如何理解“發(fā)酵”的含義？從發(fā)酵工業(yè)的角度如何理解“發(fā)酵”的含義？外表現(xiàn)象就是發(fā)泡、沸騰。發(fā)酵是厭氧菌借助氧化-復(fù)原反響或好氧菌在限氧條件下不完全氧化釋放能量的過程。從發(fā)酵工業(yè)角度來說，發(fā)酵就是利用微生物及生物細胞培育來生產(chǎn)產(chǎn)物的無氧或需氧的任何過程。以產(chǎn)品的類型為分類依據(jù)如何劃分發(fā)酵工業(yè)的范圍？1.2.3.微生物代謝產(chǎn)物發(fā)酵4.5.微生物廢水處理和6.生物技術(shù)的生物細胞發(fā)酵發(fā)酵工業(yè)的進展歷程1.以自然發(fā)酵為特點閱歷發(fā)酵技術(shù)時期2.以純培育技術(shù)建立為特點近代發(fā)酵工業(yè)的建立時期 3.通氣攪拌深層培育技術(shù)近代發(fā)酵工業(yè)的全盛時期4.以基因工程的應(yīng)用等為特點現(xiàn)代發(fā)酵工業(yè)的建立和進展發(fā)酵工藝的培育方法和根本過程培育方法1.按對氧的需要分：厭氧發(fā)酵和有氧發(fā)酵2.按培育基物理性狀分：液體發(fā)酵和固體發(fā)酵3.按發(fā)酵過程的連續(xù)性分：分批發(fā)酵和連續(xù)發(fā)酵4.按培育方式分：外表發(fā)酵和深層發(fā)酵。等養(yǎng)分物質(zhì)放入種子罐，然后進展滅菌，接著進展主發(fā)酵，最終進展產(chǎn)物分別純化得到產(chǎn)品。其次章工業(yè)微生物的生長與產(chǎn)物的生物合成微生物的生長：細胞代謝過程中，同化作用的速度超過異化作用，原生質(zhì)總量不斷增加細胞分裂而消滅細胞個體數(shù)目的增加。生長曲線：在適宜的穎滅菌培育基中接入少量微生物，適合條件下進展培育，以后每隔肯定時是該微生物的生長曲線。微生物細胞分化：從養(yǎng)分菌體〔或菌絲〕產(chǎn)生不同形態(tài)類型細胞的過程。包括養(yǎng)分細胞分化和孢子形成。是指細胞中ATP、ADP、AMP系統(tǒng)中可供利用的高能磷酸鍵的量度。ATP、ADP、AMP三者比例來調(diào)整其代謝活動。指的是代謝產(chǎn)物分子中構(gòu)建單位的各種原子的起源；(有機化學(xué))前體激活：即代謝途徑中后面的反響可以被該途徑較前面的一種代謝中間產(chǎn)物所促進。反響抑制：是指反響途徑中某些中間產(chǎn)物或末端產(chǎn)物對該途徑中前面反響的抑制。代謝產(chǎn)物到達肯定濃度時，反響阻遏該代謝途徑中的一種酶或幾種酶的生物合成。有無底物均能合成的酶，且合成速度恒定。只有在誘導(dǎo)物()存在時才能合成的酶。代謝終產(chǎn)物到達肯定濃度時，反響阻遏該代謝途徑中的一種或幾種酶的生物合成。指被菌體快速利用的基質(zhì)或其分解產(chǎn)物對很多酶(降解酶、合成酶)合成的阻遏作用。葡萄糖效應(yīng)：當(dāng)微生物在含有葡萄糖和乳糖的培育基中生長時，通常優(yōu)先利用葡萄糖。只有當(dāng)葡萄糖消耗完，經(jīng)過一段停滯期，在乳糖的誘導(dǎo)下半乳糖苷酶開頭合成，細菌才能利用乳糖進展生長。此現(xiàn)象稱葡萄糖效應(yīng)。ATPATP1ADP能荷(%) 2ATP ADP AMP100%酶活性的調(diào)整包括哪兩種作用。酶活性的調(diào)整就是通過轉(zhuǎn)變已有酶的活性來調(diào)整代謝速率。包括激活和抑制。兩種以上末端產(chǎn)物的分支代謝途徑的反響抑制，其調(diào)整方式分為哪幾種?協(xié)同反響抑制：特點：幾種末端產(chǎn)物同時過量時才抑制共同途徑中的第一個酶活性積存反響抑制：特點：每一末端產(chǎn)物按肯定百分率單獨抑制共同途徑中第一個酶活性酶活性，但兩個末端產(chǎn)物同時過量時，其抑制作用可超過各產(chǎn)物存在的抑制力量的總和。挨次反響抑制：特點：每個末端產(chǎn)物過量后，抑制分支后的第一個酶，造成分支點上中間產(chǎn)物的積存，高濃度的中間產(chǎn)物再反響抑制第一個酶的活性。酶合成的調(diào)整(即酶量的調(diào)整)有哪兩種。通過調(diào)整酶的合成數(shù)量來調(diào)整微生物的代謝速率。包括：誘導(dǎo)作用，反響阻遏誘導(dǎo)和阻遏的實質(zhì)。誘導(dǎo)的實質(zhì)：是開啟酶合成相關(guān)基因的表達。阻遏的實質(zhì)：是阻遏物關(guān)閉了酶合成基因的表達。微生物分批培育生長生殖的規(guī)律。延滯期(適應(yīng)期)：菌體數(shù)目不變或略有降低，菌體生長速率為零，單個細胞體積和質(zhì)量增加。對數(shù)生長期：菌體開頭生長，細胞數(shù)目以幾何級數(shù)增加，細胞的代謝極其旺盛。穩(wěn)定期(平衡期)：細胞數(shù)量到達最大，細胞的生長速率與死亡速率到達動態(tài)平衡。對數(shù)死亡期：養(yǎng)分物質(zhì)消耗殆盡，代謝物大量積存，菌體產(chǎn)生毒性，造成細胞快速死亡。你對微生物的生長曲線是如何理解的？每毫升培育液的微生物數(shù)目；繪制微生物細胞濃度對數(shù)隨培育時間的變化曲線，這就是該微生物(適應(yīng)期)(平衡期)；對數(shù)死亡期。微生物合成次級代謝產(chǎn)物的根本特征。次級代謝產(chǎn)物具有種特異性2.分批發(fā)酵時，明顯分為三個時期：菌體生長期、產(chǎn)物合成期以及菌體自溶期3.強②產(chǎn)生菌對次級代謝產(chǎn)物進展多種化學(xué)修飾而同時合成多種衍生物。③一種次級代謝產(chǎn)物可由兩種或兩種以上的代謝途徑合成4.次級代謝產(chǎn)物的合成受多基因掌握初級代謝產(chǎn)物和次級代謝產(chǎn)物的聯(lián)系和區(qū)分聯(lián)系：級代謝則是初級代謝在特定條件下的連續(xù)與進展，避開初級代謝過程中某種〔或某些〕中間體或產(chǎn)物過量積存對機體產(chǎn)生的毒害作用。區(qū)分：1.2.對產(chǎn)生者自身的重要性不同：必需—非必需。3.同微生物生長過程的關(guān)系明顯不同：平行—非平行。4.對環(huán)境條件變化的敏感性〔遺傳穩(wěn)定性〕明顯不同：小〔大〕—大〔小。5.產(chǎn)物類型明顯不同：初級產(chǎn)物—次級產(chǎn)物。6.相關(guān)酶的專一性不同：強—差。在工業(yè)生產(chǎn)中，如何解除碳分解產(chǎn)物對次級代謝產(chǎn)物合成的抑制效應(yīng)？1.承受復(fù)合碳源：快速和慢速利用的碳源按肯定比例協(xié)作使用，如〔葡萄糖+淀粉〕為碳源。承受流加的方式：將葡萄糖逐步參加發(fā)酵罐內(nèi)，以利于前期的生長和后期的產(chǎn)物生成。次級代謝產(chǎn)物生物合成的主要調(diào)控機制。1.酶合成的誘導(dǎo)調(diào)整2.反響調(diào)整3.磷酸鹽的調(diào)整4.ATP的調(diào)整作用5.碳分解產(chǎn)物的調(diào)整作用6.氮分解產(chǎn)物的調(diào)整作用7.產(chǎn)生菌生長速率的調(diào)整在工業(yè)生產(chǎn)中，如何解除氮分解產(chǎn)物對次級代謝產(chǎn)物合成的抑制效應(yīng)？第三章工業(yè)微物的菌種選育不經(jīng)過人工處理，利用微生物的自然突變進展的菌種選育的過程。又叫自然分別。表型的轉(zhuǎn)變落后于基因型轉(zhuǎn)變的現(xiàn)象。需要經(jīng)過復(fù)制分別，細胞中只有突變型基因，沒有野生型基因時，其性狀才得到表達。生理性延遲：在突變基因已經(jīng)為純的狀態(tài)后，突變表型還不肯定消滅，必需等到原有基因產(chǎn)物稀釋到某一程度才表現(xiàn)出來。如抗噬菌體菌株的表達。隨機篩選：誘變處理后進展平板分別，隨機選擇菌落，從中篩選高產(chǎn)菌株。子構(gòu)造等來進展篩選。常規(guī)雜交育種：不對菌體的細胞壁進展處理，直接使細胞接合而發(fā)生遺傳物質(zhì)的重組合。原生質(zhì)體融合育種：利用酶解方法得到兩親本的原生質(zhì)體，承受肯定的理化方法誘導(dǎo)兩親本原生質(zhì)體發(fā)生融合，兩基因組由接觸到交換，從而實現(xiàn)基因重組，進而從再生菌落中篩選具有抱負性狀的重組子。利用基因工程技術(shù)、原理和設(shè)備，在分子水平上改進菌種。DNA損傷的修復(fù)方式。光復(fù)活作用；切補修復(fù)；重組修復(fù)；SOSDNA多聚酶的校正作用。誘變育種根本原理，包括哪三個環(huán)節(jié)。根本原理：利用物理、化學(xué)及生物因素人工誘發(fā)微生物的基因突變，引起微生物的遺傳變異，經(jīng)篩選獲得優(yōu)良特性的變異菌株。特點：突變頻率、變異幅度提高，獲得優(yōu)良特性的變異菌株的幾率較高。具速度快、收效大、方法簡便等優(yōu)點。誘發(fā)突變?nèi)狈Χㄏ蛐?，必需與大量的篩選工作結(jié)合。環(huán)節(jié)：突變的誘發(fā)、突變株的篩選、突變高產(chǎn)基因的表現(xiàn)。亞硝基胍的誘變作用。亞硝基胍可誘發(fā)養(yǎng)分缺陷型突變，不經(jīng)淘汰便可得到12%~80%的養(yǎng)分缺陷型菌株，故稱超誘變劑。雜交育種分為哪兩種方法。常規(guī)雜交育種，原生質(zhì)體融合育種自然突變的緣由？多因素低劑量的誘變效應(yīng)：是指在自然環(huán)境中存在著低劑量的宇宙射線、各種短波輻射、低劑量的誘變物質(zhì)和微生物自身代謝產(chǎn)生的誘變物質(zhì)如H2O2等的作用引起的突變?；プ儺悩?gòu)效應(yīng)：是指四種堿基第六位上的酮基或氨基的瞬間變構(gòu)，會引起堿基錯配。自然選育的一般程序?qū)⒕N制成菌懸液，用稀釋法在固體平板上分別單菌落，再分別測定單菌落的生產(chǎn)力量，從中選出高水平菌種。。簡潔易行；效率低、進展慢、難以使生產(chǎn)水平大幅度提高，需要與誘變育種結(jié)合交替使用，以提高育種效率。在微生物的誘變育種中，選擇動身菌株有哪些原則？a.選擇純種作為動身菌株b.不僅要選產(chǎn)量高的，還要考慮其它有利于發(fā)酵產(chǎn)物合成的性狀，動身c.對誘變劑敏感的菌株在微生物的誘變育種中，影響誘變效果的因素有哪些？菌種的生理狀態(tài)：堿基類似物、亞硝基胍等對靜止的細胞或休眠的孢子無效；紫外線、亞硝酸、烷化劑、電離輻射等對分裂中的細胞更有效。誘變前后的培育條件：核酸堿基、咖啡因、氨基酸、氯化鋰、重金屬離子等可影響細胞對DNA損傷的修復(fù)，參加培育基中，可提高誘變率。pH、可見光等對誘變也有影響。原生質(zhì)體融合技術(shù)育種的優(yōu)點。①去除了細胞壁的障礙，不同種微生物、甚至親緣關(guān)系更遠的微生物都可融合；②兩親株基因組可發(fā)生屢次交換，且親株數(shù)可以多至3、4個，可得到多種類型重組子；③重組頻率特別高。例如天藍色鏈霉菌的種內(nèi)重組頻率可到達20%；④可使不同菌株的多種優(yōu)良性狀組合到一個菌株里。⑤半理性化篩選，親株特性雖，但基因交換、重組非定向。防止或降低工程菌的不穩(wěn)定的措施。①組建適宜的載體，引入一段特別的DNA片斷或基因；②選擇適當(dāng)?shù)乃拗?，重組質(zhì)粒相對穩(wěn)定DNA片斷；④避開使用帶有可轉(zhuǎn)移因子的質(zhì)粒；⑤將質(zhì)粒上的不需要的DNA局部除去；⑥掌握外源基因過量表達，外源基因表達水平越高，重組質(zhì)粒往往越不穩(wěn)定；⑦掌握培育條件；⑧施加選擇壓力；⑨在發(fā)酵過程中將工程菌固定化。是指人們供給微生物生長生殖和生物合成各種代謝產(chǎn)物所需要的按肯定比例配制的多種養(yǎng)分物質(zhì)的混合物。但凡用于構(gòu)成微生物細胞和代謝產(chǎn)物中碳素的養(yǎng)分物質(zhì)均稱為碳源。但凡用于構(gòu)成微生物細胞和代謝產(chǎn)物中的氮素的養(yǎng)分物質(zhì)。生長因子:微生物生長不行缺少且不能用簡潔的碳源和氮源合成的微量有機物。前體：參加到發(fā)酵培育基中，能直接被微生物在生物合成過程中結(jié)合到產(chǎn)物分子中去，而其自身構(gòu)造并沒有多大變化的物質(zhì)，但產(chǎn)物的產(chǎn)量卻因此有較大提高。合成培育基：由組成成分的各種養(yǎng)分物質(zhì)組合的培育基，主要用于科學(xué)爭論。自然培育基〔復(fù)合培育基或半合成培育基〕：由一些組成成分不完全明確的自然產(chǎn)物如黃豆粉、蛋白胨等與一些無機鹽組合的培育基，常用于發(fā)酵生產(chǎn)。經(jīng)微生物生理作用(代謝)后能形成酸性物質(zhì)的無機氮源。經(jīng)微生物代謝后能產(chǎn)生堿性物質(zhì)的無機氮源。實際發(fā)酵過程中轉(zhuǎn)化率的大小。抱負狀態(tài)下依據(jù)微生物的代謝途徑進展物料衡算，所得出的轉(zhuǎn)化率的大小；多因子試驗的試驗設(shè)計方法有哪些？微生物的培育基的分類。1.按組成成分分類：合成培育基，自然培育基。2.按狀態(tài)分類：固體培育基，半固體培育基，液體培育基。3.按生產(chǎn)中的用途分類：孢子培育基，種子培育基，發(fā)酵培育基，補料培育基。金屬離子對微生物生理活性的作用與其濃度有何關(guān)系？生理活性與其濃度相關(guān)，低濃度時往往呈現(xiàn)刺激作用，高濃度則表現(xiàn)出抑制作用。工業(yè)使用鐵制的發(fā)酵罐，使用前要如何處理？處理：正式投產(chǎn)之前，用稀硫酸銨或稀硫酸溶液預(yù)處理幾次，再用未接種的培育基運轉(zhuǎn)幾批，進一步去除罐內(nèi)壁上鐵離子，然后正式投產(chǎn)。緣由：鐵是生命活動必需的微量元素之一。鐵制發(fā)酵罐在初次使用時如不進展處理，其內(nèi)壁鐵銹會溶入到發(fā)酵培育基中，而高含量的鐵離子對多種代謝產(chǎn)物的生物合成有較大的抑制作用。如青霉素、四環(huán)素、麥迪霉素等的發(fā)酵產(chǎn)量均會受到高含量的Fe2+的影響。培育基設(shè)計的根本思路？①依據(jù)他人的閱歷和培育基成分，初步確定培育基成分，作為爭論的起始培育基。②單因素試驗，和響應(yīng)面分析等統(tǒng)計學(xué)方法。④從搖瓶、小型發(fā)酵罐，到中試，最終放大到生產(chǎn)罐。⑤綜合考慮各種因素〔產(chǎn)量、純度、本錢等〕，確定一個適宜的生產(chǎn)配方。試述配制工業(yè)發(fā)酵培育基時的一般原則。①生物學(xué)原則：依據(jù)不同微生物的養(yǎng)分需求，設(shè)計培育基；養(yǎng)分物質(zhì)組成較豐富，濃度適當(dāng)，滿足菌體生長和合成產(chǎn)物的需求；各種成分之間比例恰當(dāng)，特別是有機氮和無機氮源，C/N比；肯定條件下，各種原材料之間不能產(chǎn)生化學(xué)反響；具有適宜的pH和滲透壓。②工藝原則：不影響通氣和攪拌；不影響產(chǎn)物的分別精制和廢物處理；過程簡潔掌握。③低本錢原則：原材料要因地制宜，來源便利，豐富，質(zhì)量穩(wěn)定，質(zhì)優(yōu)價廉，本錢低。④高效經(jīng)濟原則：生產(chǎn)安全，環(huán)境保護，高質(zhì)量，最高得率，最少副產(chǎn)物。試述影響培育基質(zhì)量的因素。原料及設(shè)備的預(yù)處理；發(fā)酵特性的影響；原材料的質(zhì)量；滅菌；其它影響因素試述培育基成分選擇必需考慮的問題。菌體的同化力量：不同的微生物對大分子物質(zhì)的利用力量不同。培育基成分對代謝的阻遏和誘導(dǎo)：如是否存在葡萄糖效應(yīng)、銨阻遏等。培育基要有適宜的C，N比：留意速效碳、氮源和緩效碳、氮源相互協(xié)作，且選用適當(dāng)C/N。適宜的C，N比：一般發(fā)酵中C/N為100〔0.～2.0，但氨基酸生產(chǎn)，C/N較高，如谷氨酸發(fā)酵100:〔15～21〕培育基成分對pH的影響：成分選擇時，要考慮該物質(zhì)被代謝后對pH的奉獻。一般不主見首先直接用酸堿來調(diào)整。培育基一般應(yīng)有哪些成分？碳源，氮源，無機鹽及微量元素，水，其它成分第五章滅菌用物理或化學(xué)方法殺滅或除掉物料或設(shè)備中全部有生命的有機體的技術(shù)和工藝過程。殺死微生物的最低溫度〔同最高生長溫度〕。在致死溫度下，殺死全部微生物所需要的時間。熱阻：微生物對熱的抵抗力。一般說滅菌是否徹底，是以能否殺死熱阻大的芽孢桿菌為指標(biāo)。分批滅菌：將配制好的培育基輸入發(fā)酵罐內(nèi)，用直接蒸汽加熱，到達滅菌要求的溫度和壓力后維持肯定時間，再冷卻至發(fā)酵要求的溫度，這一工藝過程稱為分批滅菌或?qū)嵐逌缇蜷g歇滅菌。保溫、降溫的滅菌過程，然后輸入到已滅菌的發(fā)酵罐中。也稱之為連消。指一年內(nèi)發(fā)酵染菌的批次與總投料批次數(shù)之比乘以100﹪得到的百分率雜菌污染對發(fā)酵會產(chǎn)生哪些不良后果？①雜菌消耗基質(zhì)，造成產(chǎn)率下降；②雜菌分泌酶，分解目標(biāo)產(chǎn)物或使之失活，產(chǎn)量下降；分泌有毒物質(zhì)，抑制生產(chǎn)菌生長；③轉(zhuǎn)變培育條件，引起發(fā)酵液pH值、溶解氧、培育基黏度等發(fā)生變化，使發(fā)酵特別；④會引起產(chǎn)物分別困難，甚至影響產(chǎn)品質(zhì)量。⑤噬菌體污染，引起溶菌，生產(chǎn)失敗。濕熱滅菌原理？蒸汽熱能破壞氫鍵等化學(xué)鍵而使細胞內(nèi)大分子變性，微生物死亡。分批滅菌和連續(xù)滅菌工藝的特點有哪些？連續(xù)滅菌的優(yōu)點：①可承受高溫短時滅菌，養(yǎng)分成分破壞少，有利于提高發(fā)酵產(chǎn)率；②發(fā)酵罐非生產(chǎn)占用時間縮短，利用率高；③承受熱交換器工藝時，可節(jié)約大量能量；④適宜承受自動掌握，勞動強度?。虎菡羝摵删?；⑥可實現(xiàn)耐熱和不耐熱物料在不同溫度下分開滅菌，削減養(yǎng)分成分的破壞。器、維持罐〔管〕和冷卻器以及發(fā)酵罐等都應(yīng)先滅菌，增加了染菌的機率③對蒸汽的要求高，蒸汽波動時滅菌不徹底④不適合粘度大或固形物含量高或有較多泡沫的培育基滅菌；深層介質(zhì)過濾的原理？當(dāng)氣流通過濾層時，微生物微粒與濾層纖維間產(chǎn)生慣性沖擊、攔截、集中、重力沉降和靜電吸附5種作用，從而把微生物微粒截留、捕集在介質(zhì)中，到達除菌的目的。簡述空氣過濾除菌的一般工藝流程1.空氣吸氣口；2.粗過濾器；3.空氣壓縮機；4.一級空氣冷卻器56．分水器；7.空氣貯罐；8.旋風(fēng)分別器；9.絲網(wǎng)除沫器；l0.空氣加熱器；11.總空氣過濾器；12.分過濾器〔4、585μm以上的顆粒及液滴91μm以上的液滴〕發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)中雜菌的檢查方法有哪些？工業(yè)生產(chǎn)中，對發(fā)酵液的無菌檢測主要有二種方式：鏡檢、無菌試驗。顯微鏡檢查：染色→鏡檢有無雜菌斜面培育法：無菌試管取樣→接種于斜面培育基→培育觀看有無雜菌生長平板劃線檢查〔雙蝶法〕：倒平板→待測樣品劃線〔另做空培育〕→培育觀看有無雜菌生長酚紅肉湯培育檢查：無菌酚紅〔6.8→8.0,黃→紅〕肉湯培育基〔另做空培育〕→接入樣品→培育觀看顏色變化或渾濁程度旋風(fēng)分別器工作原理？絲網(wǎng)除沫器工作原理？旋風(fēng)分別器工作原理：含塵氣體從入口切線進入外殼和排氣管之間，形成旋轉(zhuǎn)向下的外旋流。懸浮于外旋流的粉塵在離心力的作用下被拋向器壁，并隨外旋流轉(zhuǎn)到除塵器下部，由排塵孔排出。凈化后的氣體形成上升的內(nèi)旋流并經(jīng)過排氣管排出。10微米的非粘性、非纖維的枯燥粉塵。絲網(wǎng)除沫器工作原理：當(dāng)帶有霧沫的氣體以肯定速度上升通過絲網(wǎng)時，由于霧沫上升的慣性，大液滴沿著細絲流至兩根絲的交接點。細絲的可潤濕性、液體的外表張力及細絲的毛細管作用，使液滴越來越大，到聚攏的液滴大到其自身產(chǎn)生的重力超過氣體上升力與液體外表張力的合力時，液滴就從細絲上分別下落。利用慣性攔截原理。1μm98％。發(fā)酵用無菌空氣的質(zhì)量標(biāo)準。0.1～2.0VVM②空氣的壓強〔表壓〕0.2～0.4MPa。③進φ≤70%。④進罐前的空氣溫度可比培育溫度高10～30℃。⑤10-3為壓縮無菌空氣的干凈度。種子罐染菌的處理方法？發(fā)酵罐染菌的處理方法？1．種子罐染菌的處理：種子罐染菌后都不能往下道工序移種，要準時用高壓蒸汽直接滅菌后放下水。2．發(fā)酵罐染菌的處理：對產(chǎn)生菌的危害性大，承受蒸汽滅菌后放掉；危害性不大，重滅菌、重接種處理；雜菌少且生長緩慢，可連續(xù)運轉(zhuǎn)，時刻留意雜菌數(shù)量和代謝變化。加適量殺菌劑，抑雜菌生長；如某些抗生素；降培育溫度或控補料量來掌握雜菌的生長速度；上述兩種措施仍不見效，就要考慮提前放罐。發(fā)酵過程中污染噬菌體后有哪些現(xiàn)象，一般做哪些處理？現(xiàn)象：發(fā)酵液突然轉(zhuǎn)稀，泡沫增多；早期菌體染色不勻，然后自溶，最終僅見菌絲斷片；平皿培育消滅典型的噬菌斑； 溶氧濃度上升提前；養(yǎng)分成分很少消耗；產(chǎn)物合成停頓等。處理：①發(fā)酵液用蒸汽滅菌后放掉，嚴防發(fā)酵液任意流失；②停產(chǎn)，對環(huán)境全面清洗和消毒，斷絕寄生根底；③篩選更換抗噬菌體生產(chǎn)菌種?；瘜W(xué)物質(zhì)滅菌的原理？為什么它不適合培育基的滅菌？原理：化學(xué)物質(zhì)可與微生物細胞中的某種成分產(chǎn)生化學(xué)反響，如使蛋白質(zhì)變性、酶類失活、破壞細胞膜透性而殺滅微生物。緣由①培育基里含有蛋白質(zhì)等養(yǎng)分物質(zhì)亦易與上述化學(xué)物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反響，②藥物參加培育基之后很難除掉。在培育基的滅菌過程中是否能做到確定無菌？為什么？發(fā)酵生產(chǎn)中對培育基的滅菌的無菌程度是多少？假設(shè)要求滅菌后確定無菌，即Ns=0，則滅菌時間將等于無窮大，這對生產(chǎn)來說是不行能的，所以培育基滅菌后，必定還殘留肯定的活菌，工程上通常以Ns=103個/1000罐中只殘留一個活菌的程度，這樣就可以滿足生產(chǎn)要求了空氣深層介質(zhì)過濾除菌的幾種作用機理的相互關(guān)系是怎么樣的？哪種機理起主要作用呢？五種機理同時起作用，不過氣流速度不同，起主要作用的機理也就不同?？諝饬魉俅髸r〔約>0.1m/min) ，以慣性沖擊為主；流速中等，以攔截為主；流速小，以集中、重力沉降為主。畫出由連消塔、維持罐和冷卻器組成的培育基連續(xù)滅菌的流程圖，并注明各個設(shè)備的名稱。第六章生產(chǎn)菌種的培育與保藏種子擴大培育：是指將保存處于休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌種接入試管斜面活化后，再經(jīng)過扁瓶或搖瓶及種子罐逐級擴大培育而獲得肯定數(shù)量和質(zhì)量的純種過程。是指一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵稱為二級發(fā)酵。是指把一級種子接入到體積較大的種子罐中，經(jīng)培育后形成更多的菌體(絲)種子的培育時間。種子液體積占接種后培育液總體積的百分比。菌種衰退：生產(chǎn)菌種在使用和保藏過程中，常常會漸漸向不利于生產(chǎn)的方面發(fā)生變化(某些優(yōu)良特性變?nèi)趸蛳?，這種變化稱為菌種衰退。種子制備一般包括哪兩個過程？母瓶培育，子瓶培育種子質(zhì)量主要受哪些因素的影響？如何進展掌握？〔一〕1.養(yǎng)分較豐富和完全，以利于孢子發(fā)芽和菌絲生長。2.養(yǎng)分成分盡可能接近發(fā)酵培育基，以利于主發(fā)酵。3.pH較穩(wěn)定，以利于生長和生殖?！捕撤N子培育條件1.2.掌握好通氣攪拌。不同時期的需氧量不同；按需氧量掌握。通氣攪拌缺乏可引起菌絲結(jié)團、菌絲粘壁等特別現(xiàn)象；泡沫影響正常的通氣攪拌，應(yīng)掌握培育基消毒質(zhì)量，甚至考慮轉(zhuǎn)變培育基配方，以削減發(fā)泡。種子特別的表現(xiàn)菌種生長發(fā)育緩慢或過快、菌絲結(jié)團、菌絲粘壁一般衰退菌種的主要復(fù)壯措施。①純種分別：通過自然分別，從衰退菌種的細胞群體中將保持原優(yōu)良性狀的單細胞分別出來。②淘汰衰退的個體：如芽孢產(chǎn)生菌經(jīng)高溫(80℃)處理，可淘汰不產(chǎn)芽孢的個體。③選擇適宜的培育條件：如保藏前所用培育基，有利于菌種原有性狀的恢復(fù)；加富培育基。在絲狀菌液體發(fā)酵的過程中簡潔產(chǎn)生菌絲團的緣由？攪拌效果差，接種量小為了加大接種量，維持正常生產(chǎn)，常承受哪些方法。雙種法，倒種法，混種進罐法生產(chǎn)中，種子生長、代謝緩慢的主要緣由和孢子質(zhì)量以及種子罐的培育條件有關(guān)。生產(chǎn)中，無菌空氣的進罐溫度較低或者培育基的滅菌質(zhì)量較差是種子生長、代謝緩慢的主要緣由。為什么最適的種齡一般都選在生命力極為旺盛的對數(shù)生長期，菌體量尚未到達最頂峰時移種？接入種齡過早、過老的種子會有哪些害處？對數(shù)生長期的種子：很快適應(yīng)發(fā)酵罐環(huán)境，生長生殖快，縮短延滯期，縮短非產(chǎn)物合成時間，發(fā)酵罐利用率高；省動力，本錢低。泡沫多，導(dǎo)致特別發(fā)酵。種齡過老的種子：菌體老化，生產(chǎn)力量衰退。培育基是影響種子質(zhì)量的主要因素之一，為了保證種子質(zhì)量，對培育基有何要求？養(yǎng)分較豐富和完全，以利于孢子發(fā)芽和菌絲生長。養(yǎng)分成分盡可能接近發(fā)酵培育基，以利于主發(fā)酵。pH較穩(wěn)定，以利于生長和生殖。近年來，生產(chǎn)上多以大接種量和豐富培育基作為高產(chǎn)措施。大接種量有哪些好處？接種量過大、過小又有哪些弊端？優(yōu)點：種子進入發(fā)酵罐后簡潔適應(yīng)；種子液含水解酶，利于利用發(fā)酵培育基；縮短菌體生殖至頂峰所需的時間；產(chǎn)物合成速度加快；縮短發(fā)酵周期提高生產(chǎn)效益過大弊端：菌體生長過快過稠；養(yǎng)分基質(zhì)缺乏或溶解氧缺乏；不利于發(fā)酵過小弊端：發(fā)酵前期菌體生長緩慢，發(fā)酵周期延長；菌絲量少還可能產(chǎn)生菌絲團；發(fā)酵特別生產(chǎn)上常用的種子質(zhì)量標(biāo)準有哪些？1〕菌體形態(tài)、濃度、菌液外觀〔如顏色、粘度等〔〕變化及pH〔〕產(chǎn)物生成量：種子生產(chǎn)力量和成熟度的反響；〔〕與土霉素發(fā)酵單位有肯定關(guān)系；〔5〕無雜菌污染。菌種保藏的原理。制造不利于菌種生長的一切條件，使其代謝處于“休眠”狀態(tài)，以削減變異，到達長期保存的目的。常用的菌種保藏方法2.3.固體曲法——自然基質(zhì)保藏法4.5.真空冷凍枯燥6.液氮超低溫保藏法防止菌種衰退的方法：〔DNA5×10-410-8~10-9；選擇適宜的培育條件；③承受適宜的菌種保藏方法；④分別復(fù)壯。第七章通氣與攪拌微生物攝氧率(γ)：單位體積培育液每小時消耗的氧量，一般在25～100mmol/L·h。呼吸強度(QO2)：單位質(zhì)量干菌體每小時消耗的氧量，一般在1.5～15mmol/g·h。(Q臨)：不影響微生物呼吸的最低溶解氧濃度。(C*)：空氣與液體相接觸，當(dāng)氧氣分子在氣液兩相中的濃度到達動態(tài)平衡時，液體中的氧氣濃度即為該條件下在該溶液中的飽和濃度。以通風(fēng)比表示，即一分鐘內(nèi)通過單位體積培育液的空氣體積(V/V·min)。影響液相體積氧傳遞系數(shù)KLa的因素有哪些？用一個表達式說明(注明各