臨床檢驗基礎(chǔ)學(xué)知識點

臨床檢驗學(xué)

臨床檢驗醫(yī)學(xué)

clinicallaboratorymedicine

血液三大

尿液常

糞便規(guī)

體液

脫落細(xì)胞學(xué)

血型與血庫

臨床檢驗醫(yī)學(xué)的定義及研究范圍

臨床檢驗醫(yī)學(xué)的發(fā)展史及現(xiàn)狀

臨床檢驗基礎(chǔ)教學(xué)的目的

學(xué)好臨床檢驗基礎(chǔ)的要求

臨床檢驗基礎(chǔ)的發(fā)展史

①古代最早是檢測尿液開始的。

②17世紀(jì)的顯微鏡的發(fā)明推動了臨床檢驗的發(fā)展。AntonyvanLeeuwenhoek

③上世紀(jì)50年代，庫爾特（Coulter）電阻抗原理的提出，使臨床檢驗從手工步入自動化、

電腦化，使得檢驗變得簡便、快速、精密度高更。

⑤目前，試劑更加批量化、配套化、專業(yè)化和多樣化

⑥檢驗液更加重視檢驗方法的標(biāo)準(zhǔn)化和質(zhì)量控制，實施全面的質(zhì)量控制和質(zhì)量管理。

⑦試劑和儀器的更新使得檢驗更便捷：如床邊檢測（pointofcaretest,POCT）,使檢測標(biāo)本更

新鮮、交叉污染率低、更接近病人的生理和病理情況。

臨床檢驗基礎(chǔ)的現(xiàn)狀（二）：

實施與保證全面質(zhì)量管理

1.分析前：生理變化、飲食因素、藥物因素、標(biāo)本采集與保存等。

2.分析中：檢測方法、儀器設(shè)備性能與質(zhì)量、試劑質(zhì)量等。

3.分析后：發(fā)報告的把關(guān)。復(fù)核其信息內(nèi)容如姓名、性別、年齡、住院號、與疾病符合度等。

臨床檢驗的特點：

1.操作的自動化2.方法的標(biāo)準(zhǔn)化3.技術(shù)的現(xiàn)代化4.試劑的商品化5.計量單位的國際化6.質(zhì)量

管理的全程化7.生物安全的嚴(yán)格化8.檢驗人員的合格化

緒論

臨床檢驗醫(yī)學(xué)的定義及研究范圍

臨床檢驗醫(yī)學(xué)的發(fā)展史及現(xiàn)狀

臨床檢驗基礎(chǔ)教學(xué)的目的

學(xué)好臨床檢驗基礎(chǔ)的要求

臨檢的基礎(chǔ)教學(xué)目的：

1.疾病診斷和鑒別診斷2.疾病療效監(jiān)測和預(yù)后觀察3.疾病預(yù)防4.科學(xué)研究

教學(xué)目標(biāo)：

掌握：皮膚采血方法，Hb成分、種類及測

定臨床意義。

熟悉：血液的組成、理化性質(zhì)和功能，Hb

的結(jié)構(gòu)，參考范圍。

第一章chapter1血液標(biāo)本采集和血涂片制備bloodcollectionandbloodsmearpreparation

血液組成

I

離心后(寫)

血液主要理化性質(zhì)

①顏色：動脈血一一鮮紅色靜脈血一一暗紅色

血漿一一淺黃色高脂膳食一一乳白色

溶血一一血漿呈不同程度紅色

②量：成人約占體重的7%?9%,平均血量5L左右。

③pH：7.35-7.45

④比密：1.05-1.06

⑤滲透壓：290?310mosm/Kg?H2O

第一節(jié)血液標(biāo)本采集bloodcollection

血液標(biāo)本的采集是分析前質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)

一、標(biāo)本采集的一般要求

1.檢驗申請單：患者、臨床信息完整

2.標(biāo)本采集和處理具體要求：標(biāo)本種類標(biāo)識、采集時間、急診和危重患者信息、

3.標(biāo)本信息完整性：標(biāo)本的防腐、保溫等。

4.標(biāo)本拒收：根據(jù)標(biāo)本接收的文件不符合者。

二、血液標(biāo)本類型

1.全血(wholeblood)：靜脈、動脈、毛細(xì)血管

2.血漿(Plasma)：全血加入抗凝劑離心后的上清液。

3.血清(serum)：血液凝固后離心所得上清液。

4.分離或濃縮的血細(xì)胞成分：如血小板、白細(xì)胞、單個核細(xì)胞等。

三、血液標(biāo)本采集方法(一)皮膚采血(二)靜脈采血(三)動脈采血

(-)皮膚采血法

適用于血量的檢驗項目如RBC

計數(shù)、WBC計數(shù)、Pit計數(shù)、Hb、ESR微量法等的測定等。

器材：采血針專用的“采血針”或三棱針，用前應(yīng)高壓滅菌，一人一針。

專用采血針三棱針

采血部位

(1)手指采血：

WHO推薦采取外周血以左手無名指或中指指采血部位尖內(nèi)側(cè)

優(yōu)點：方便、獲較多血量結(jié)果比較恒定

缺點：與靜脈血仍存在某些差異。

(2)耳垂采血：

優(yōu)點：痛感輕、方便、適用于反復(fù)采集

缺點：血循環(huán)差受氣溫影響大、檢查結(jié)果不恒定、RBC、WBC、Hb、Het結(jié)果均比靜脈血

高，特別是冬季。

(3)其他

拇指、拇趾或足跟采血一一半歲以下嬰幼兒

皮膚完整處一一嚴(yán)重?zé)齻?/p>

采血操作

1、準(zhǔn)備：2、采血部位按摩：3、消毒皮膚：4、針刺：5、擦去第一滴血后吸血：6、壓住傷

口片刻：

注意事項

(1)采血部位皮膚完整。(2)無菌技術(shù)操作：防采血部位感染，一人一針。

2

(3)采血針刺入皮膚應(yīng)深淺適中。

(4)多項檢查時，采血次序為：Pit計數(shù)一RBC計數(shù)、HbfWBC計數(shù)與分類。

(5)取血用于自動化血細(xì)胞分析儀，要防止棉球纖維混入堵塞儀器。

第二章chapter2血液一般檢驗bloodgeneralexamination

第一節(jié)紅細(xì)胞檢查

Redbloodcell(erythrocyte)examination

紅細(xì)胞檢查內(nèi)容：

RBC是血液中最多的一種血細(xì)胞，其檢查包括紅細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白測定、紅細(xì)胞形態(tài)觀

察、紅細(xì)胞平均指數(shù)計算、網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)、紅細(xì)胞沉降率等。

形態(tài)：無核，雙凹圓盤形不染色：呈草黃色

RBC的生成及破壞：(見PPT)

早幼紅細(xì)胞中幼紅細(xì)胞干細(xì)胞原始紅細(xì)胞晚幼紅細(xì)胞網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟紅細(xì)胞

一、紅細(xì)胞計數(shù)(redbloodcellcount)

【原理(principle)]

血液用等滲稀釋液稀釋一定倍數(shù)一滴入血細(xì)胞計數(shù)盤一顯微鏡下計數(shù)一定范圍內(nèi)的RBC

數(shù)一換算得每升血液中的RBC數(shù)。

【參考范圍(range)]

成年女性：(3.5~5.0)X1012/L

成年男性：(4.0?5.5)X1012/L

新生兒:(6.0?7.0)X1012/L

嬰兒：(4.0?4.3)X1012/L

兒童:(4.0~4.5)X1012/L

【臨床意義(clinicalmeaning)]

一、生理性變化

(一)生理性增多

1.機體缺氧而使RBC代償性t：新生兒、高原生活、強烈的體力勞動

2.成年男性比女性高：男性在6?7歲時最低，25?30歲時達高峰。女性21?35歲維持最低

水平。

3.其他：抽煙、腎上腺素及糖皮質(zhì)激素的應(yīng)用等

(二)生理性減少

1.生長發(fā)育造血原料相對不足：從6個月至2歲嬰幼兒

2.造血功能減退：部分老年人生理性貧血

3.血容量增加：妊娠中晚期

二、病理性變化

(一)病理性增多

1.相對增多：血液濃縮

2.絕對性增多：①繼發(fā)性增多：如心肺疾?、谠l(fā)性增多：如真性RBC增多癥

高于6.8X1012/L應(yīng)采取治療措施

(二)病理性減少

1.RBC生成減少：※骨髓功能衰竭：AA※造血物質(zhì)缺乏或利用障礙：IDA、MA

2.RBC破壞過多：※內(nèi)在缺陷※外在異常

3.RBC丟失過多：低于1.5X1012/L應(yīng)考慮輸血

二、血紅蛋白測定Hemoglobinmeasurement

(一)Hb分子結(jié)構(gòu)及成分：

3

血紅蛋白（hemoglobin,Hb或HGB）是人體有核紅細(xì)胞及網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)合成的含色素輔基的

結(jié)合蛋白質(zhì)，由珠蛋白和亞鐵血紅素組成。

0.347g鐵相當(dāng)于lOOgHb海克Hb可攜帶1.34ml氧。

4.其它：

①還原Hb：Fe2+

②氧合Hb：與02結(jié)合的Hb

③Hb衍生物：HbCO、SHb

④IWI鐵Hb：Fe3+

2014年6月17日59P24

（二）Hb的測定：

ICSH（Internationalcouncilforstandardizationhaematology）推薦鼠化高鐵血紅蛋白測定法

（HiCN）

1.原理:Hb是色素蛋白，在血液中以多種形式存在，利用高鐵氧化鉀將Hb氧化成高鐵血紅

蛋白（Hi）,Hi可與CN-結(jié)合成寓化高鐵血紅蛋白，在540nm處有一吸收峰，用分光光度

計測定其吸光度，換算成每升血液中血紅蛋白的含量。

方法學(xué)評價

（1）氟化高鐵血紅蛋白測定法

優(yōu)點：①操作簡單、顯色穩(wěn)定，便于推廣。

②轉(zhuǎn)化液較穩(wěn)定，易保存。

③除SHb外各Hb均可測讀A后直接計數(shù)。

④HiCN參考品可長期保存，便于質(zhì)控。

缺點：①KCN劇毒，易污染環(huán)境。

②不能測SHb,HbCO轉(zhuǎn)化慢。

③濁度高引起Hb濃度假性增高：高球蛋白血癥，脂血，試劑混濁，WBC和Pit高。

（2）十二烷基硫酸鈉血紅蛋白（SDS-Hb）測定法

SDS能破壞WBC,摩爾消光系數(shù)未定。

（3）堿羥血紅蛋白測定法：

HbF不能轉(zhuǎn)化，最大吸收峰在575nm。

（4）疊氮高鐵Hb測定法：

具有與HiCN法相似的優(yōu)點，但仍存在試劑污染。

（5）澳代十六烷基三甲鉉血紅蛋白測定法：

不破壞WBC,精密度、準(zhǔn)確性略低。

2014年6月17日65P25

4.參考值

新生兒：170?200g/L女：110?I50g/L

男：120?160g/L

70歲以上老年人：男：94?122g/L女：87~112g/L

質(zhì)量控制（1）血清濁度：（2）器材及試劑質(zhì)量：（3）技術(shù)與操作：（4）廢棄物的處理：

臨床意義與RBC計數(shù)相似

（1）鑒別貧血類型：

IDA：RBCIHbIIMA：RBCIIHbI

（2）影響檢驗結(jié)果的因素：血液總?cè)萘扛淖內(nèi)硌獫{容量改變

教學(xué)目標(biāo)：

掌握：血紅蛋白測定的原理、Hb成分、種類及測定臨床意義；網(wǎng)織紅細(xì)胞的形態(tài)、計數(shù)

4

方法及測定的臨床意義。

熟悉：血涂片制備與染色、紅細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變。

了解：Hb測定的方法學(xué)評價。

血紅蛋白測定Hemoglobinmeasurement

(一)Hb分子結(jié)構(gòu)及成分：

血紅蛋白(hemoglobin,Hb或HGB)是人體有核紅細(xì)胞及網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)合成的含色素輔基的

結(jié)合蛋白質(zhì)，由珠蛋白和亞鐵血紅素組成。

第三節(jié)血涂片制備與染色preparationandstainingo(bloodsmears

血涂片的制備

(-)載玻片和推片：

載玻片推片

載玻片：清潔、干燥、中性、無油膩。

推片：邊緣光滑。

(―)血涂片制作：

良好血涂片：

①血膜至少長25mmo

②邊緣整齊，兩側(cè)、兩端留有空隙。

③頭體尾分明：細(xì)胞從厚區(qū)到薄區(qū)逐步均勻分布。

④血膜末端無粒狀、畫線或裂隙。

(三)制備血涂片的影響因素

推制適當(dāng)?shù)难そ嵌却?，速度快一太厚，太?/p>

推片邊緣不光整f刷尖用力不均一厚薄不勻

血量過多、血液粘度高f無尾載玻片有油膩

血涂片染色

染色就是染料透入被染物并存留其內(nèi)部的過程。

1.?瑞氏染色法是血液染色最經(jīng)典和最常用的染色法。

2.吉姆薩染色法

3.瑞氏吉姆薩復(fù)合染色法

4.細(xì)胞活體染色法

5.巴氏染色法

6.蘇木素-伊紅染色法

(1)瑞氏染色法(WrightStain)

1.瑞氏染料成分：

(1)美藍(又稱亞甲藍?methyleneblue.M+)

通常為氯鹽，氯化美藍(MCI),陽離子，一種堿性染料.

⑵伊紅(eosinE-)：

通常為鈉鹽(NaE),陰離子，一種酸性染料。

⑶Wright染料

MCI+NaEME+NaCl

⑷甲醇(溶劑、固定劑)：

①MEM++E-

②具有強大的脫水力。

可將細(xì)胞固定為一定形態(tài)；使蛋白沉淀為顆粒狀、網(wǎng)狀等結(jié)構(gòu)；增強染色效果；

染色原理：物理的吸附作用和化學(xué)的親和作用

5

正常情況染色結(jié)果：

外觀：淡紫紅色

鏡下：①RBC呈粉紅色，略有碟狀感。

②WBC漿中顆粒清楚，并顯示各種細(xì)胞特有的色彩。

③細(xì)胞核染紫紅色，核染色質(zhì)結(jié)構(gòu)清楚。

RBC嗜堿性顆粒中性顆粒嗜酸性顆粒

3.PH對細(xì)胞染色的影響：

PHI->正電荷增多一易與伊紅結(jié)合一染色偏紅

PHt-負(fù)電荷增多一易與美藍結(jié)合一偏藍

染色的質(zhì)量保證

染液質(zhì)量

染色時間與染液濃度

染色過程

染液的沖洗

脫色與復(fù)染

4.方法學(xué)評價：

瑞氏染色法：

優(yōu)點：對于細(xì)胞質(zhì)成分及中性顆粒等的染色可獲得很好的染色效果，

缺點：對細(xì)胞核的染色不如吉姆薩染色

吉姆薩染色：

原理：同瑞氏染色。

優(yōu)點：本法對細(xì)胞核染色較好，結(jié)構(gòu)更清晰。

缺點：胞質(zhì)和中性顆粒染色較差。

瑞-吉復(fù)合染色：取長補短。

第二章chapter2血液一般檢查bloodgeneralexamination

第——節(jié)紅細(xì)胞檢查Redblloodcellll(erythrocyte)examiinatiion

勿逢田胞形態(tài)檢查Redblloodcellllmorphollogyexamiinatiion

正常紅細(xì)胞形態(tài)

正常色素性

normochromatic

異常紅細(xì)胞形態(tài)

紅細(xì)胞大小異常

紅細(xì)胞形態(tài)異常

紅細(xì)胞血紅蛋白含量異常

紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)及排列異常

1.RBC大小異常

小RBC大RBC巨紅細(xì)胞RBC大小不均d<6umd>10umd>15um直徑相差一倍以上

2.RBC形態(tài)異常：

球形RBC橢圓形RBC靶形RBC口形RBC鑲形RBC

棘形RBC裂片RBC緡錢狀RBC淚滴形RBC

3.紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白含量改變

正常色素性normochromatic

低色素性高色素性嗜多色性hypochromaticHyperchromaticpolychromatic

RBC中出現(xiàn)異常結(jié)構(gòu)：

6

嗜堿點彩RBC染色質(zhì)小體

basophilicstipplingcellHowell-Jolly*sbody

有核RBC瘧原蟲

卡波環(huán)

cabotringnucleatederythrocyteplasmodium

六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)Retiicullocytecount

1.定義

介于晚幼紅和成熟紅細(xì)胞之間未完全成熟的RBC。胞質(zhì)內(nèi)含尚存留多少不等的嗜堿性物

質(zhì)RNA,經(jīng)活體染色后，嗜堿性物質(zhì)凝聚成顆粒，其顆粒又可聯(lián)綴成線而構(gòu)成網(wǎng)狀。

原紅早幼紅中幼紅晚幼紅網(wǎng)織紅RBC

2.分級：

I型絲球型：僅存于骨髓

II型網(wǎng)型

III型破網(wǎng)型：外周血少量

IV型點粒型：多見于外周血

3.Ret計數(shù)法

(1)顯微鏡計數(shù)法

【原理】

陽離子染料進行活體染色，在顯微鏡下計數(shù)。

【試劑】

①新亞甲藍N溶液：

②煌焦油藍溶液：

【參考值】成人：0.008-0.02或(25?75)X109/L新生兒：0.02-0.06

【方法(method)和質(zhì)量控制］

1混勻

1制成薄血涂片

染液新鮮2d血液2d染15~20min

數(shù)lOOORet絕對值

個RBC中計算

出分?jǐn)?shù)=Ret分?jǐn)?shù)XRBC/L

的Ret

(2)Ret計數(shù)儀法

(3)血液分析儀計數(shù)法

(4)流式細(xì)胞儀計數(shù)法

4.臨床意義

(1)Ret增高：表示BM紅系生成旺盛

①溶血性貧血：可高達0.20以上，急性失血后5—10天Ret達高峰，2周后恢復(fù)正常。

②放、化療后，造血恢復(fù)時：Ret可短暫而迅速增高。

③Ret可作為貧血治療療效觀察指標(biāo)：

※抗貧血藥物治療后1―2天開始高，1周左右達高峰，貧血愈嚴(yán)重，Ret升高超高，且

Ret先于RBC和Hb增高。

X抗貧血藥物治療后，Ret不升高，說明治療無效或骨髓造血功能有障礙。

④骨髓移植后監(jiān)測造血功能受抑或恢復(fù)：移植后21天，如＞15X109/L,表示無移植并發(fā)

癥。如V15X109/L,且Pit、WBC增高，可能移植失敗。

7

Ret減少：

表示骨髓造血機能減弱。

常見再生障礙性貧血：Ret<0.005

絕對值V15X109/L,為其診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。

派掌握內(nèi)容：靜脈采血的部位、抗凝劑的使用范圍、

HCT定義、臨床意義,ESR定義、影響因素、

臨床意義，紅細(xì)胞三個平均指數(shù)的計算及意義。

派熟悉內(nèi)容：靜脈采血，抗凝劑,ESR、HCT測定的方法，參考值。

※了解內(nèi)容：采血操作對檢驗結(jié)果的影響，血液標(biāo)本運送、保存與處理。

靜脈采血法Veinpunctureforbloodcollection

凡需血量較多的檢查>0.2ml

如：ESR、Het、凝血因子的測定等。

1.普通靜脈采血法

2.真空采血法

1.普通靜脈采血法

［準(zhǔn)備器材］

［部位］體表淺靜脈

常用：肘部靜脈幼兒可用：頸外靜脈

［采血操作和注意事項］

真空采血法(負(fù)壓采血法)

主要原理是將有膠塞頭蓋的采血管抽成不同的真空度，利用針頭、試管和針筒組合成全封閉

的真空采血系統(tǒng)，實現(xiàn)自動定量采血。

［主要器材］

①雙向采血針

②真空采血管

穿刺針刺塞針

［主要器材］雙向采血針、真空采血管

［真空采血法的優(yōu)點］①計量準(zhǔn)確②傳送方便③封閉無菌④標(biāo)識醒目⑤刻度清晰⑥容

易保存等。

［采血方法］

派硬接式雙向采血針的采血操作

派軟接式雙向采血針的采血操作穿刺針

刺塞針

四、血液標(biāo)本抗凝bloodspecimensanticoagulation

抗凝：用物理或化學(xué)的方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性，以阻止血液凝固。

抗凝劑：能夠阻止血液凝固的物質(zhì)。

1.乙二胺四乙酸(EDTA)鹽(ethylenediaminetetraceticacid)

①原理：與血鈣離子形成螯合物。

②用量：15g/LEDTA水溶液0.4ml：5ml血液

③適用于：血常規(guī)檢查、Het、Pit計數(shù)

④不適用于：凝血象檢查和血小板功能試驗

2.枸檬酸鈉(trisodiumcitrate)

①原理：與血中鈣離子形成可溶性螯合物

②用法：109mmol/L與血1：9或1：4

8

③適用于：血栓與止血檢驗、ESR、輸血保養(yǎng)液。

④不適用于：血細(xì)胞計數(shù)，Het(不能干燥)

3.肝素(heparin)：

①原理：加強AT-ni滅活絲氨酸蛋白酶，從而具有阻止凝血酶形成

②用量：lg/L水溶液，0.5ml干燥后可抗凝5ml血液。

③適用于：RBC脆性試驗、Het及細(xì)胞培養(yǎng)等。

④不適用于：WBC和Pit計數(shù)、血涂片檢查、凝血象檢驗。

4.草酸鹽(oxalate)：

①原理：草酸根與血液中鈣離子生成草酸鈣沉淀。

②用法：0.1mol/L濃度與血液之比1：9

③適用于：制備正吸漿。

④不適用于：對凝血因子V保護功能差，影響PT測定；沉淀物影響自動凝血儀的使用。

第一節(jié)紅細(xì)胞檢查Redblloodcellll(erythrocyte)examiinatiion

四、紅細(xì)胞比容測定

紅細(xì)胞比容(hematocrit,Het或packedcellvolume,PCV)是指在一定體積全血中RBC

所占容積的相對比例，與RBC數(shù)量和平均體積有關(guān)。

(-)檢測方法

1.離心沉淀法：溫氏法、微量血細(xì)胞比容法

2.血液分析儀法：

(二)溫氏法的試劑、器材和質(zhì)量控制

長毛細(xì)滴管溫氏管

血漿層

白色乳糜層

灰紅色層

暗紅色層

含還原HbHct

含氧RBC層

(三)方法學(xué)評價］

(四)參考值

男：0.380?0.508女：0.335?0.450

(五)臨床意義

1.HCT降低：①各種貧血②稀釋血癥

2.HCT增高：①血漿丟失②RBC量增加

3.臨床補液量的參考：

4.用于計算MCV和MCHC

五、紅細(xì)胞平均指數(shù)

1.平均紅細(xì)胞容積：(meancorpuscularvolume,MCV)RBC群體中各個RBC體積的平均值。

MCV=X10(fL)lfL=10"LRBC/L

2.平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量：(meancorpuscularhemoglobinMCH)RBC群體中各個RBC血

紅蛋白含量的平均值。Hb(g/L)

MCH=RBC/LX10pglpg=10g

3.平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度：(meancorpuscularhemoglobinconcentrationMCHC)

平均每升RBC中含有的Hb濃度Hb(g/L)

MCHC=Hct

9

4.參考值：

MCV(1L)MCH(pg)MCHC(g/L)

成人80-10026-34320-360

1?3歲79-10425-32280-350

新生兒86-12027-36250—370

2014-6-17335.臨床意義

貧血的形態(tài)學(xué)分類MCV(fL)MCH(pg)MCHC(g/L)病因

正常細(xì)胞性貧血80-10027-34320-360急HA、AA

單純小細(xì)胞性貧血<80<27320-360慢性炎癥

小細(xì)胞低色素性貧血<80<27<320IDA

大細(xì)胞性貧血>100>34320-360MA

八、紅細(xì)胞沉降率測定erythrocytesedimentationrateESR

(一)定義：指在一定條件下，離體抗全血中的RBC自然下沉的速率。

(-)魏氏法的試劑、器材和質(zhì)量控制

ESRlh后

1.6ml血

0.4ml抗凝劑

三、ESR影響因素

血漿或RBC本身發(fā)生改變則使血沉發(fā)生變化。

1.血漿因素：

纖維蛋白原

球蛋白增高tESR加快

膽固醇

白蛋白I

一糖蛋白ESR減慢

卵磷脂

2.紅細(xì)胞因素：

①RBC數(shù)量②RBC形態(tài)

ESR快

正常數(shù)量數(shù)量減少

ESR慢

3.抗凝劑影響實驗溫度血沉測定值校正值

4.溫度的影響溫度升高，ESR增快

5.血沉管因素：

血沉管傾斜30,

血沉加快30%

(四)參考值

<50歲男：0~15mm/h

女：0~20mm/h

(五)方法學(xué)評價

(六)臨床意義：

對疾病的鑒別和動態(tài)觀察具有一定的參考價值

1.生理性增快：

10

①女比男快

②妊娠>3月

③>50歲

④婦女月經(jīng)期

2.病理性增快：

①組織損傷、壞死和大手術(shù)：心肌梗塞和心絞痛鑒別。

②惡性腫瘤：良、惡性腫瘤的鑒別。

③各種炎癥：急性細(xì)菌感染、風(fēng)濕病活動期、結(jié)核病活動期等。

④高球蛋白血癥：MM、SLE、肝硬化、慢性腎炎等。

⑤高膽固醇血癥：動脈粥樣硬化、糖尿病等。

3.ESR減慢：

真性紅細(xì)胞增多癥、RBC形態(tài)異常、低纖維蛋白原血癥等。

★白細(xì)胞檢驗

Whitebloodcell(WBC)orLeukocyte(LEC)

外周血WBC：RBC=1：(500—750)

(-)白細(xì)胞的組成：

WBC單核細(xì)胞monocyte淋巴細(xì)胞lymphocyte粒細(xì)胞granulocyte(中性粒細(xì)胞neutrocyte,

NC嗜酸性粒細(xì)胞eosinophil,Eos嗜堿性粒細(xì)胞basophil,Bas)

(二)WBC起源及分布

粒細(xì)胞的發(fā)育過程

如何計數(shù)

WBC?

白細(xì)胞計數(shù)whitebloodcellcount

測定單位體積的外周血(循環(huán)池)中各種白細(xì)胞的總數(shù)。

【檢測原理】

血液經(jīng)一定倍數(shù)稀釋并破壞紅細(xì)胞一計數(shù)一換算

【試劑】

白細(xì)胞稀釋液：2%冰醋酸

冰醋酸：溶解紅細(xì)胞，同時固定核蛋白

10g/L美藍：數(shù)滴f可使核略為著色。

2014-6-176【器材(equipment)]

1、微量吸管：

2、血細(xì)胞計數(shù)盤：

0.1mm

【方法和質(zhì)量控制】

11

混勻

稀釋液血20ul充池

0.38ml

計數(shù)計算WBC/L=N/4X10X106X20=N/20X109

血涂片WBC密度與WBC的總數(shù)的關(guān)系

WBC血涂片WBC個數(shù)/HP

(4?7)X109/L2-4

(7?9)X109/L4?6

11

(10-12)X109/L6-10

(13~18)X109/L10-12

4.減少計數(shù)域誤差的措施

WBC措施

<3X109/L

擴大計數(shù)范圍、縮小稀釋倍數(shù)

>15X109/L

增加稀釋倍數(shù)、適當(dāng)減少加血量

參考值：

成人：(4-10)X109/L兒童：(5-12)X109/L

6個月一2歲：X109/L新生兒：(15—20)X109/L

5.方法學(xué)評價：

顯微鏡法

血液分析儀法

二、白細(xì)胞分類計數(shù)Diifferentiialllleukocytecount,DLC

(一)定義及方法：

根據(jù)白細(xì)胞的形態(tài)進行分類計數(shù)，求得各種白細(xì)胞的百分比和絕對值。

采血制備良好血涂片染色觀察

(-)外周血五種常見白細(xì)胞的形態(tài)

①中性粒細(xì)胞

②嗜酸性粒細(xì)胞

③嗜堿性粒細(xì)胞

④單核細(xì)胞

⑤淋巴細(xì)胞

細(xì)胞胞體胞漿胞核

Neud:10~15um較多細(xì)小均勻的桿狀、分2?5葉，染色淡粉紅中性顆粒質(zhì)小塊狀染成深

紫紅色Eosd:13~15um充滿粗大、緊密排列的桔紅色嗜酸性顆粒

分兩葉，呈八字形也有3?4葉者

Basd:10~12um少量粗大小不均，紫黑色嗜堿性顆粒常被顆粒遮蓋，分葉不明顯，模糊不

清感

CellLymphocyte

胞體小d：6—10um

大d：10—15um

胞漿透明藍色，有少量粗大，但大小不等的紫紅色顆粒

胞核粗糙致密，排列均勻，常隱約成塊。

CellMonocyte

胞體d：14—20um

胞漿淡藍或灰藍，毛玻璃樣半透明，含有細(xì)小、粉塵狀紫紅色顆粒

胞核大，不規(guī)則，染色質(zhì)細(xì)致、疏松如網(wǎng)狀

(三)WBC分類計數(shù)法和質(zhì)量保證：

①血涂片制備和染色：

②低倍鏡：

③油鏡：數(shù)100—200個WBC分類計數(shù)，求出各種WBC所占比值.

⑤若有幼稚或異常WBC應(yīng)分類鑒定，包括在WBC百分率中。

12

⑥若有幼稚紅細(xì)胞，應(yīng)逐個計數(shù)，但不包括在WBC總數(shù)中。

⑦有寄生蟲和細(xì)胞形態(tài)有異常改變應(yīng)報告。(

(四)WBC分類計數(shù)參考值(成人)：

WBC百分率(％)

中性桿狀核1?5

分葉核50~70

Eos0.5?5

BasO?1

LC20-40

MC3?8

(五)白細(xì)胞計數(shù)與分類的臨床意義

(1)生理變化

①年齡：Neu和Lym兩次交叉

②日間變化：安靜、休息〈活動、進食，早晨〈下午

③運動、疼痛和情緒的影響：

④妊娠與分娩：t,NC比值正常。分娩2—5天內(nèi)恢復(fù)正常，如再次升高，有產(chǎn)后感染的

可能性。

(2)中性粒細(xì)胞病理性增多

1).反應(yīng)性增多★

①急性感染：最常見原因。

a.急性化膿性膽囊炎：WBO20X109/L

b.急性胰腺炎：WBC>10X109/L

c.腸缺血、壞死：WBO10X109/L,腸壞死的指標(biāo)。

d.局限性感染：

輕度感染：WBC可正常；

中度感染：WBC(10-20)X109/L；

重度感染：WBC(20-30)X109/L

②嚴(yán)重的組織損傷：

③大量血細(xì)胞破壞和急性內(nèi)出血：

④非造血系統(tǒng)惡性腫瘤

⑤急性中毒：

2異常增生性增多：

白血病：急性：WBC(10-50)X109/L；

慢性：WBC(100-300)X109/L；

類白：WBC<100X109/L。

惡性腫瘤：肝癌、胃癌

其他：骨髓增殖性疾病、類風(fēng)關(guān)、自身免疫性疾病、缺氧等。

類白血病反應(yīng)：機體對某些刺激因素所產(chǎn)生的類似白血病表現(xiàn)的血象反映。數(shù)量增多，并可

出現(xiàn)幼稚細(xì)胞，但紅細(xì)胞和血小板一般無變化，病因去除后逐漸消失。

(3)中性粒細(xì)胞減少

①某些感染：傷寒、副傷寒等②某些血液病：③慢性理化損傷：藥物、射線等④脾功能亢

進：⑤自身免疫性疾?。篒TP

(六)異常白細(xì)胞形態(tài)

1.中性粒細(xì)胞毒性變化：

13

①大小不均②中毒顆粒③空泡形成④杜勒氏體⑤核變性

2.棒狀小體（Auerbody）

中性粒細(xì)胞毒性變化

中性粒細(xì)胞的核象變化

①核左移（shifttoleft）：再生性的、退行性的核左移

②核右移（shifttoright）

中性粒細(xì)胞胞核異常形態(tài)：多分葉核中性粒細(xì)胞雙核中性粒細(xì)胞胞環(huán)形桿狀核中性粒細(xì)胞

巨多分葉核中性粒細(xì)胞巨桿狀核中性粒細(xì)胞

淋巴細(xì)胞計數(shù)

1、淋巴細(xì)胞數(shù)量變化：

增多：⑴某些病毒或細(xì)菌所致的急性傳染?、颇承┞愿腥荆孩悄I移植術(shù)后：⑷LC性白血

?。孩稍偕系K性貧血、粒細(xì)胞缺乏癥：

減少：主要見于接觸放射線及應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素。

2、淋巴細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化：

⑴異型LC：

在傳染性單核細(xì)胞增多癥、病毒性肺炎、流行性出血熱、濕疹、過敏性疾病等病毒性感染或

過敏原刺激下，可使淋巴細(xì)胞增生，并出現(xiàn)某些形態(tài)變化。

I型漿細(xì)胞型一胞漿中含有小空泡或呈泡沫狀。

n型單核細(xì)胞型一胞核不規(guī)則似單核。

皿型未成熟細(xì)胞型f染色質(zhì)細(xì)致呈網(wǎng)狀排列，可見1—2個核仁。

異形淋巴細(xì)胞

⑵受放射線損傷后LC形態(tài)變化：衛(wèi)星核

⑶LC性白血病時形態(tài)學(xué)變化：

課程要求：

A.掌握：EOS和PLT計數(shù)的原理、方法、臨床意義

B.熟悉：質(zhì)量控制、參考值

C.了解：EOS和PLT的來源、功能、計數(shù)方法學(xué)評價※嗜酸性粒細(xì)胞（eosinophil）計數(shù)

㈢EOS的功能

A.趨化、吞噬作用

B.抑制Bas和肥大細(xì)胞活性物質(zhì)的合成與釋放

C.分泌組胺酶破壞組胺，限制超敏反應(yīng)

D.參與寄生蟲感染的病理過程

㈣EOS計數(shù)方法

【原理】

用EOS稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)，同時破壞RBC和大部分其它WBC,并將EOS著色，

然后滴入細(xì)胞計數(shù)盤中，計數(shù)一定范圍內(nèi)EOS數(shù)，即可求得每升血液中EOS數(shù)。

【計數(shù)方法】1.顯微鏡計數(shù)法

2.血液分析儀法

【試劑】

EOS稀釋液：伊紅-丙酮稀釋液、乙醇-伊紅稀釋液、濱甲酚紫稀釋液、固綠稀釋液

①EOS保護劑（如丙酮、乙醇）②破壞RBC和大部分其它WBC（如碳酸鉀、草酸鉉或低

滲狀態(tài)）③將EOS著色（如伊紅、漠甲酚紫、固綠）

【顯微鏡計數(shù)法操作方法】

1

14

混勻1

充池計數(shù)：10個大方稀釋液血20M1

0.38ml格內(nèi)的Eos

計算：Eos=NX20X106/L

【質(zhì)量控制】

盡量減少人為誤差

保護劑用量

混勻不宜太過用力；適當(dāng)延長混勻時間

計數(shù)應(yīng)在血液稀釋后lh內(nèi)完成

注意與殘留的中性粒細(xì)胞區(qū)別

【參考值】(0.05-0.5)X109/L

【臨床意義】

1.生理變化：

①勞動、饑餓、寒冷、精神刺激等

Eos減低

②日間變化

Eos白天較低，夜間較高上午波動較大，下午比較恒定

下丘腦

垂體前葉

促腎上腺皮質(zhì)激素

腎上腺皮質(zhì)

抑制骨髓釋放EOS

腎上腺皮質(zhì)激素

EOS減少

EOS減少

2.病理性變化：

(1)EOS增多:>0.5X109/L

①寄生蟲?。夯紫x、鉤蟲、絳蟲等

②過敏性疾?。捍斡诩纳x病的另一病因，Eos常(1~2)X109/L

如：支氣管哮喘、尊麻疹、藥物或食物過敏、血管神經(jīng)性水腫、過敏性肺炎等

③某些皮膚?。簼裾?、剝脫性皮炎、銀屑病等④.血液?。郝?、嗜酸性粒細(xì)胞性白血病等

⑤.某些惡性腫瘤：胃癌、肺癌、結(jié)腸癌、何杰金淋巴瘤

⑥.某些傳染病：猩紅熱(乙型溶血性鏈球菌)

⑦,某些內(nèi)分泌疾?。耗X垂體功能低下及原發(fā)性腎上腺皮質(zhì)功能不全等

(2).EOS減少：傳染病急性期：傷寒、副傷寒嚴(yán)重組織損傷：手術(shù)后

應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素或促腎上腺皮質(zhì)激素后

垂體或腎上腺皮質(zhì)功能亢進時

3.嗜酸性粒細(xì)胞計數(shù)的其他應(yīng)用

A.觀察急性傳染病的預(yù)后：急性感染時，嗜酸性粒細(xì)胞減少，恢復(fù)時增高。

B.觀察手術(shù)和燒傷病人的預(yù)后：手術(shù)后4小時，嗜酸性粒細(xì)胞減少，24?48小時后增多；

大面積燒傷的病人，數(shù)小時后嗜酸性粒細(xì)胞完全消失。

C.測定腎上腺皮質(zhì)功能：

血小板(platelet)計數(shù)

血小板出血

15

一、概述

血小板

（一）形態(tài)：

胞體：圓形、橢圓形或不規(guī)則形

胞質(zhì)：淡藍色或粉紅色，中心部位有細(xì)小的紫紅色

顆粒，無核，常3?5成群聚集成團

壽命：7~14天

造血干細(xì)胞

（二）來源：

原始巨核細(xì)胞

骨髓巨核細(xì)胞

幼稚巨核細(xì)胞

顆粒型巨核細(xì)胞

產(chǎn)血小板巨核細(xì)胞裸核巨核細(xì)胞

血小板

（三）功能

主要功能：粘附、聚集、釋放、參與凝血和血塊收縮、維護血管內(nèi)皮完整等功能。

二、計數(shù)

不明原因的出血

排除出血性疾病

化療和放療病人的檢測

懷疑骨髓造血系統(tǒng)疾病

懷疑血小板破壞增加、消耗過多或反應(yīng)性增多檢測原理

方法原理

檢測原理

方法原理

普通顯微鏡直接計數(shù)法破壞紅細(xì)胞一溶血法和不破壞紅細(xì)胞法

相差顯微鏡直接計數(shù)法相差顯微鏡下血小板立體感增強

血液分析儀法電阻抗法和光散射法

流式細(xì)胞儀法免疫法熒光素標(biāo)記血小板特異性抗體，流式

細(xì)胞儀計數(shù)

【原理】血液經(jīng)一定比例稀釋后，滴入計數(shù)池，在顯微鏡下計數(shù)一定體積內(nèi)的血小板數(shù)，經(jīng)

換算求出每升血液中血小板的數(shù)量。

【試劑】草酸鍍?nèi)苎ā?fù)方尿素溶血法、高鐵氟化鉀法、復(fù)方碘法等。

【操作方法】

混勻靜置15min稀釋液充池計數(shù)1ml血10”

PEI7L=NX10X100X106=NX109

【質(zhì)量控制】

原則：盡量避免PLT被激活、破壞，避免雜質(zhì)污染。

檢測前：采血順利

抗凝劑：肝素、EDTA-K2

儲存溫度和時間

檢測中：器材標(biāo)準(zhǔn)化，清潔干燥充池前充分搖勻，充池后靜置15min后計數(shù)lh內(nèi)計數(shù)完畢

16

計數(shù)時光線要適中；注意與雜質(zhì)鑒別

檢測后：

PLT計數(shù)V60X109/L,應(yīng)觀察血涂片中的PLT分布情況。

【參考值】(100-300)X109/L

【臨床意義】

1.生理性變化：

①正常人晨間較低，午后略高；春季低、冬季略高；平原居民低，高原居民略高。

②婦女月經(jīng)前低，月經(jīng)后上升；妊娠中晚期升高，分娩后1?2天降低。

③劇烈活動和飽餐后高、休息后恢復(fù)。

2.病理性變化：

PLT數(shù)減低：小于100X109/L(20?50)X109/L：輕度出血或手術(shù)后出血低于5X109/L：導(dǎo)

致嚴(yán)重出血

①PLT生成減少：AA、AL、惡性腫瘤放化療后等

②PLT破壞過多：ITP、脾亢

③PLT消耗過多：DIC、血栓性血小板減少性紫瘢等

④PLT分布異常：脾腫大

⑤先天性的PLT減少：PLT減少癥、巨大PLT綜合征血小板數(shù)增多：>400X109/L

原發(fā)性增多：CML；真紅

反應(yīng)性增多：急性化膿性感染；急性出血；脾切后

異常血小板形態(tài)

1、大小異常①大血小板：d4?7nm②小血小板：d<1.5Um

2、形態(tài)異常：①血小板顆粒減少②血小板衛(wèi)星現(xiàn)象③血小板“粘附”紅細(xì)胞

3、聚集性和分布異常：非抗凝血外周血涂片中?？梢??5個聚集成簇，聚集與散在血小板

之比為20：1

復(fù)習(xí)題

1.顯微鏡下計數(shù)EOS的區(qū)域是()E

A.一側(cè)計數(shù)室，四角四個大方格

B.一側(cè)計數(shù)室，對角兩個大方格

C.兩側(cè)計數(shù)室，對角共四個大方格

D.兩側(cè)計數(shù)室，四角共八個大方格

E.兩側(cè)計數(shù)室，共十個大方格

2.外周血中EOS增高見于()D

A.風(fēng)疹感染期B.傳染性單核細(xì)胞增多癥感染期

C.百日咳感染期D.猩紅熱感染期

E.流行性腮腺炎感染期

3.可引起EOS數(shù)量增高的一組疾病是()D

A.鉤蟲病，急性化膿性膽囊炎

B.急性失血，肺癌

C.尊麻疹，心肌梗死

D.支氣管哮喘，猩紅熱

E.嚴(yán)重外傷，肝吸蟲病

4.血小板減少是指血小板數(shù)量小于()B

A.80X109/LB.100X109/L

C.110X109/LD.120X109/L

17

E.150X109/L

5.血小板破壞過多見于（）D

A.急性白血病B.急性放射病

C.急性溶血后D.原發(fā)性血小板減少性紫瘢

E.血栓性血小板減少性紫搬

6.將20Hl血液加入0.38ml血小板稀釋液中，計數(shù)5個中方

格血小板數(shù)為78個，問每升血液中血小板是多少？判斷

血小板是增高還是降低了，并簡述可能的病理原因？

7.簡述嗜酸性粒細(xì)胞增高的原因有哪些？

血型和輸血（一）

重點難點：血型定義、ABO系統(tǒng)抗原、抗體、血型物質(zhì)、血型鑒定、交叉配血熟習(xí)內(nèi)容：

ABO系統(tǒng)的亞型

第一節(jié)血型

血型（bloodgroup）是指血液系統(tǒng)的一種遺傳多態(tài)性，它是以血型抗原為表現(xiàn)形式的遺傳性

狀，血型由血型基因決定，是血細(xì)胞的主要特征之一。血型系統(tǒng)有很多，常見的有ABO血

型系統(tǒng)、Rh血型系統(tǒng)，此外還有Kidd血型系統(tǒng)、MNSs血型系統(tǒng)等。

一.ABO血型系統(tǒng)

（一）抗原

1.ABO抗原的遺傳：由ABO、Hh、Sese三個分離位點的基因所控制ABO基因：

①ABO基因位于9q34,基因座上有A、B、O,A、B基因?qū)τ?基因是顯性基因。

②父母各遺傳給子代一個基因。

③有6個基因型，4種表現(xiàn)型ABO

基因型表型RBC上抗原血清中抗體血型

AO、AAAA抗BA

BO、BBBB抗AB

ABABAB—AB

000—抗A、B0

8.ABO抗原的生物合成：基因ABO及H基因控制著A、B抗原的形成。0為無效基因；H

位點有Hh兩個等位基因，h為無效基因。ABH血型抗原決定簇的前身物質(zhì)是紅細(xì)胞膜上含

4個糖的低聚糖鏈，由各自的糖基轉(zhuǎn)移酶作用決定抗原物質(zhì)的形成。

9（1）前身物質(zhì)：4個糖的低聚糖鏈（2）H物質(zhì)：基因H-巖藻糖轉(zhuǎn)移酶一H抗原

（3）A抗原：TheAAntigen基因A-*酶A：N-乙酰半乳糖氨基轉(zhuǎn)移酶一A抗原

（4）B抗原：基因B-酶B：半乳糖基轉(zhuǎn)移酶一B抗原

（5）h基因：如體內(nèi)僅有h基因，則不能合成巖藻糖轉(zhuǎn)移酶，所以無H物質(zhì)，表現(xiàn)型為O

型，稱為Oh型（孟買型）h基因RBC膜上含4個Oh型（孟買型）糖的低聚糖鏈?；騂物

質(zhì)RBC膜上含4個糖的低聚糖鏈A基因

H基因A抗原

H物質(zhì)基轉(zhuǎn)移酶

轉(zhuǎn)移酶

B基因B抗原）基轉(zhuǎn)移酶

N-乙酰半乳糖胺

N-acetylGlucosamine

D-GalactoseA

N?乙酰葡萄糖胺H

18

.ABO抗原的發(fā)生：

(1)5?6周胎兒RBC可測出ABH抗原f出生時還未發(fā)育完全。

(2)新生兒A、B抗原位點較成人少

(3)一般出生后18個月時才充分表現(xiàn)出抗原性。

(4)抗原頻率也有地區(qū)、種族差異。

4.分泌型：

血型物質(zhì)：組織細(xì)胞也能合成分泌可溶性的ABH抗原一存在于許多體液中。以唾液中含量

最豐富，CSF中無。

⑴分泌型：體液中含有這種血型物質(zhì)者為分泌型一80%人受控基因是Sese、SeSe

⑵非分泌型：無血型物質(zhì)者一約20%人受控基因是sese、se是無效基因。

⑶血型物質(zhì)的作用：①輔助鑒定血型②預(yù)測胎兒ABO血型：羊水③可中和天然抗體，有

助于鑒別抗體的性質(zhì)。

5ABO系統(tǒng)抗體：

1.抗A、抗B抗體：主要是IgM

天然抗體：機體沒有經(jīng)過可察覺的Ag刺激就在體內(nèi)存在的Ab.人血清中存在的Ab能天然

地與其自身RBC所缺乏的A、B抗原相對應(yīng)一血型定型的依據(jù)。

產(chǎn)生：人在出生前尚未產(chǎn)生Ab,生后幾個月才開始形成自己的Ab,5—6歲時達高峰，

產(chǎn)生Ab的功能一直延續(xù)到生命的晚期，但成人后，效價隨年齡增長而逐漸I。免疫抗體：

通過輸注異型抗原刺激機體產(chǎn)生的抗體，IgG

6.抗體特性：

.抗A、B抗體：O型人血清中；與A型或B型RBC都能凝集。

7.ABO系統(tǒng)的亞型：

亞型：是指屬于同一血型Ag,但Ag結(jié)構(gòu)和性能或Ag位點數(shù)有一定差異所引起的變化。

㈠A亞型：最多見，有Al、A2,A3,AX,我國人中A2和A2B型在A與AB型中所

占比例＜1%A2的抗原性弱，定型時很可能誤認(rèn)為O型

㈡B亞型：較A亞型少見，臨床意義不大。

(五).ABO血型鑒定(ABObloodtyping)

【原理(principle)]

正定型：用已知標(biāo)準(zhǔn)抗血清檢測RBC上的抗原。

反定型：用已知RBC測血清中的抗體。

【試劑(reagent)]

1.標(biāo)準(zhǔn)抗A、抗B、抗AB血清：

制備：青壯年混合血清，無菌分離，56℃30min滅活

標(biāo)準(zhǔn)：①特異性：不含意外Ab,無非特異性凝集。

②效價：抗A：1:128以上；抗B：1:64以上。

③親和力：血清0.05ml+清％RBCO.lml-15s內(nèi)出現(xiàn)凝集,3min凝塊》lmm2。

④冷凝集素：冷凝集素效價＜1:4。

2.ABO血型單克隆抗體：

①特異性：能凝集Al、A2抗原。②親和力：對Al、A2、A2B分別為15s、

30s、45s③凝效價：大于1：128o④穩(wěn)定性：較血清抗體好。

【方法(method)]1.玻片法2.試管法

1.玻片法：(正定型)

【ABO血型的臨床意義】

1.輸血2.新生兒溶血病檢查3.器官移植4.其他用途：親緣鑒定、可疑血跡、精斑、毛等的鑒

19

定及相關(guān)疾病的調(diào)查等（

六）.交叉配血交叉配血實驗是在血型鑒定的基礎(chǔ)上，進一步檢查受血者和供血者血液中是

否含有不相配的抗原和抗體成分的試驗。

交叉配血試驗

受

血

者不產(chǎn)生凝集或溶血時，方

主

側(cè)可將供血者的血液或血液

次成分給受血者輸注。

供側(cè)

血

者

目的：是在血型鑒定的基礎(chǔ)上，進一步檢測受血者和

供血者血液中是否含有不配合的成分。

33實驗方法

1.鹽水介質(zhì)配血

2.聚凝胺介質(zhì)配血

3.微柱凝膠法配血

4.酶介質(zhì)配血

菠蘿酶，無花果酶，木瓜酶

5.抗球蛋白介質(zhì)配血

1.鹽水介質(zhì)交叉配血試驗

【原理】主要檢查：

①供受者血清中中是否存在破壞對方RBC的不規(guī)則IgM抗體或補體依賴性RBC抗體。

②驗證ABO血型鑒定是否正確，防止發(fā)生急性溶血反應(yīng)。

【試劑和器材】生理鹽水

報告方式：

1.受血者XXX（X型）血清+供血者XXX（X型）紅細(xì)胞凝集溶血與否

2.供血者XXX（X型）血清+受血者XXX（X型）紅細(xì)胞凝集溶血與否

3.受血者XXX與供血者XXX配血是否相合。

4.實驗方法：鹽水介質(zhì)交叉配血法

2.低離子聚凝胺介質(zhì)交叉配血試驗

【原理】RBC表面帶有大量的負(fù)電荷，以避免其產(chǎn)生自發(fā)性聚集

凝聚胺溶解后能產(chǎn)生很多正電荷，可以中和RBC表面帶有的負(fù)電荷一縮短RBC之間距離，

使RBC產(chǎn)生非特異性凝聚。

利用低離子溶液，降低介質(zhì)的離子強度，以促進RBC和抗體結(jié)合。

加入重新懸浮液能中和凝聚胺陽離子的作用，使正常的RBC非特異性凝集散開。而RBC被

相應(yīng)的抗體致敏，則不會散開。

3.微柱凝膠介質(zhì)交叉配血試驗

【原理】

利用抗原抗體特異性反應(yīng)的作用一通過離心技術(shù)一利用凝膠的微孔過濾作用，將發(fā)生凝集反

應(yīng)的RBC阻滯于凝膠之內(nèi)，而未凝集的單個RBC則穿過微孔運動至柱底一從而

區(qū)分有無凝集。

20

【結(jié)果判斷】

陽性結(jié)果：主次側(cè)或單側(cè)管內(nèi)RBC凝集塊位于凝膠表面或凝膠中，和（或）出現(xiàn)溶血一不相

容一不可輸注

反應(yīng)強度：

①特異性RBC抗原抗體復(fù)合物位于膠表面一強陽性反應(yīng)

②復(fù)合物在膠中f弱陽性反應(yīng)

愈靠近膠底部凝集，顆粒愈小，反應(yīng)愈弱。

陰性結(jié)果：

主次側(cè)管內(nèi)RBC完全沉降于底部一相容一輸注

重點內(nèi)容：Rh血型抗原與抗體及臨床意義；

新生兒溶血??；血液保存方法；

主要的血液成分制品及適應(yīng)癥。

熟習(xí)內(nèi)容：Rh血型鑒定方法；獻血員條件和發(fā)出要求獻血后并發(fā)癥；輸血后的不良反應(yīng)及

并發(fā)癥。了解內(nèi)容：成分輸血的優(yōu)點；自身輸血。

二.Rh血型系統(tǒng)

Rh系統(tǒng)重要性僅次于ABO系統(tǒng)。

㈠.Rh抗原：①Rh抗原有40多種，②與臨床關(guān)系最密切：D、E、C、c、e5種，D的抗原

性最強。③臨床習(xí)慣地稱含D抗原的RBC為Rh+,不含D的為Rh-。④我國Rh—頻率

約占人群中的0.34%

（二）.Rh系統(tǒng)抗體：

①多是通過外來RBC免疫刺激后產(chǎn)生，即通過輸血或妊娠產(chǎn)生。這些抗體均為IgG。

②D抗原是非ABO紅細(xì)胞抗原中免疫性最強的抗原，可以引起抗D的產(chǎn)生，抗D與D紅

細(xì)胞產(chǎn)生嚴(yán)重的溶血反應(yīng)。

㈢.Rh血型鑒定及方法學(xué)評價：

Rh抗體屬IgG不能在鹽水介質(zhì)中與RBC發(fā)生凝集。

1.低離子強度鹽水試驗

原理：降低介質(zhì)的離子強度一可減少RBC外圍的離子云

①促進IgG分子在兩個RBC之間搭橋一使之結(jié)合，

②能縮短抗原與抗體的反應(yīng)時間，并提高其靈敏度。

2.抗人球蛋白法：又稱Coombs試驗P81

直接法：用于檢查受檢者的RBC是否已被不完全抗體致敏；

間接法：可用于鑒定Rh血型及血清中是否存在不完全抗體。P813.酶介質(zhì)法：

原理：

①木瓜酶或菠蘿酶可以破壞RBC表面的唾液酸，使RBC膜失去電荷，縮小RBC間的距離；

②酶可以部分地改變RBC結(jié)構(gòu)，使某些隱蔽的抗原得以暴露，增強凝集性

4.聚凝胺法：帶有高價陽離子，溶解后能產(chǎn)生很多正電荷，可以中和RBC表面的負(fù)電荷。

本法已在實踐中逐漸推廣。

5.人源鹽水介質(zhì)抗D試驗：

采用免疫蛋白變性劑（如二硫蘇糖）處理人源IgG類抗D血清，使小分子的IgG抗體分子

增大為具有大分子的“IgM”的性質(zhì)，能在鹽水介質(zhì)中與相應(yīng)紅細(xì)胞發(fā)生凝集，可用于Rh

血型的快速鑒定。

㈣.RH血型的臨床意義：

1.與輸血關(guān)系：

Rh-第一次接受Rh+血液f不溶血，產(chǎn)生抗體一十Rh第二次接受Rh血液一產(chǎn)生大量的抗

21

體，溶血

2.與新生兒溶血病的關(guān)系：

第二節(jié)新生兒溶血?。╤emolyticdiseaseofnewborn）

一.定義

母嬰血型不合，孕母體內(nèi)IgG類血型抗體通過胎盤進入體內(nèi)，胎兒RBC被母親的同種抗體

包被（這種抗體是針對胎兒RBC上父源性的抗原的），被包被的RBC在分娩前后加速破壞，

發(fā)生溶血，造成胎兒發(fā)生以溶血為主要損害的一種被動免疫性疾病。二.臨床表現(xiàn)：

①貧血：HbV180g/L②高膽紅素血癥：342umol/L或更高：③肝脾腫大：④組織水腫：⑤肌

張力降低：

三.發(fā)病機制：

種類母親胎兒溶血嚴(yán)溶血發(fā)生發(fā)病率血型血型重程度胎次

AB0

溶血癥O型A或B型較嚴(yán)重第一胎即可發(fā)病最常見Rh溶一般第一胎不發(fā)

一+病，而從第二胎血病RhRh嚴(yán)重起發(fā)病較低三.實驗室檢查：

1.患嬰確診的依據(jù)：

①RBC直接抗人球蛋白試驗陽性：

②釋放試驗：

③血清中存在與患嬰RBC上抗原相對應(yīng)的游離抗體2.輔助檢查：

①高膽紅素血癥：

②孕母血清內(nèi)檢查到與胎兒RBC不相合的抗體

3.產(chǎn)前試驗：

①血清學(xué)檢查：ABO血型系統(tǒng)Rh血型系統(tǒng)②羊水分析：

四、預(yù)防與治療

（一）產(chǎn)前治療對象

1.AB0血型不合：一般無必要預(yù)防，但抗A或抗B效價超過64時，可給予預(yù)防。

2.Rh血型不合：一般也無需特殊預(yù)防，當(dāng)Rh抗體較高時，有必要降到8以下。（二）產(chǎn)前

治療方法

1.藥物治療：大量丙球治療。2.血漿置換3.宮內(nèi)輸血4.剖宮產(chǎn)

（三）新生兒治療

1.換血2.丙球、白蛋白、激素等藥物治療。3.光照療法

第二節(jié)輸血（tansfusion）

一.輸血

1.輸入自然的血液成份，以達到治療的目的。2.輸入現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn)的與血液相關(guān)的制

品。3.血液成份可以根據(jù)需要先在體外對血液進行處理后再輸入。4.利用某些手段將患者血

中病理成份加以去除。

二.血液的采集：

1.獻血員的要求：

①18-55周歲，身體健康，無傳染病，無貧血者，均可獻血。

②采血前要做體格檢查、測Hb、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、HBsAg等，合格后方可獻血。

③采血前要做好血型鑒定。

④獻血員在獻血前4h不得吃富含脂肪及蛋白質(zhì)的食物。

2.采集：

3.獻血并發(fā)癥

①貧血：健康成人