土壤、沉積物 二噁英類的測定 同位素稀釋-高分辨氣相色譜－低分辨質譜法(HJ 650-2013)

目次

前言...........................................................................................................................................I

1適用范圍...................................................................................................................................1

2規(guī)范性引用文件.......................................................................................................................1

3術語和定義、符號和縮略語...................................................................................................1

4方法原理...................................................................................................................................3

5試劑和材料...............................................................................................................................4

6儀器和設備...............................................................................................................................5

7樣品...........................................................................................................................................6

8分析步驟...................................................................................................................................8

9結果計算與表示.....................................................................................................................10

10精密度和準確度.....................................................................................................................12

11質量保證和質量控制.............................................................................................................12

12檢測報告.................................................................................................................................13

13廢物處理.................................................................................................................................13

附錄A（規(guī)范性附錄）二噁英類分析流程圖.......................................................................155

附錄B（資料性附錄）二噁英類校準物質使用舉例..............................................................16

附錄C（資料性附錄）樣品前處理及分析流程圖.................................................................17

附錄D（資料性附錄）方法精密度和準確度.........................................................................18

附錄E（資料性附錄）測定結果記錄......................................................................................19

I

前言

為貫徹《中華人民共和國環(huán)境保護法》和《中華人民共和國水污染防治法》，保護環(huán)境，保障人體

健康，規(guī)范土壤及沉積物中二噁英類污染物高分辨氣相色譜-低分辨質譜監(jiān)測方法，制定本標準。

本標準規(guī)定了土壤及沉積物中二噁英類物質的高分辨氣相色譜-低分辨質譜法。

本標準為首次發(fā)布。

本標準的附錄A為規(guī)范性附錄，附錄B～附錄E為資料性附錄。

本標準由環(huán)境保護部科技標準司組織制訂。

本標準主要起草單位：浙江省環(huán)境監(jiān)測中心、環(huán)境保護部環(huán)境保護標準研究所。

本標準驗證單位：國家環(huán)境分析測試中心、遼寧省環(huán)境監(jiān)測中心、湖北省環(huán)境監(jiān)測中心、寧波市環(huán)

境監(jiān)測中心

本標準環(huán)境保護部2013年6月3日批準。

本標準自2013年9月1日起實施。

本標準由環(huán)境保護部解釋。

I

土壤、沉積物二噁英類的測定同位素稀釋/

高分辨氣相色譜-低分辨質譜法

警告：實驗中所使用的標準品、有機試劑等均為有毒化合物，其溶液配制、前處理等均

應在通風柜中進行，操作時應按規(guī)定要求佩帶防護器具，避免接觸皮膚和衣物。

1適用范圍

本標準規(guī)定了測定土壤及沉積物中的多氯二苯并二噁英和多氯二苯并呋喃同位素稀釋/高

分辨氣相色譜-低分辨質譜方法。

本標準適用于土壤和沉積物中二噁英類物質的初步篩查，主要包括從四氯到八氯的多氯

二苯并二噁英、二苯并呋喃的高分辨氣相色譜/低分辨質譜聯用的測定方法。事故仲裁、建設

項目評價及驗收等建議采用HJ77.4等高分辨質譜方法。

本標準方法的檢出限隨儀器的靈敏度、樣品中二噁英濃度及干擾水平等因素變化。當土

壤取樣量為20g時，對2,3,7,8-T4CDD的檢出限應低于1.0ng/kg，見表1。

2規(guī)范性引用文件

本標準內容引用了下列文件或其中的條款。凡是不注明日期的引用文件，其有效版本適

用于本標準。

GB/T8170數值修約規(guī)則與極限數值的表示和判定

GB17378.3海洋監(jiān)測規(guī)范第3部分：樣品采集、儲存與運輸

HJ77.4土壤和沉積物二噁英類的測定同位素稀釋高分辨氣相色譜-高分辨質譜法

HJ/T166土壤環(huán)境監(jiān)測技術規(guī)范

HJ613土壤干物質和水分的測定重量法

3術語和定義、符號和縮略語

下列術語和定義適用于本標準。

3.1術語和定義

3.1.1二噁英類Polychlorinateddibenzodioxins(PCDDs)andPolychlorinateddibenzofurans

(PCDFs)

多氯二苯并-對-二噁英（PCDDs）和多氯二苯并呋喃（PCDFs）的統(tǒng)稱。

3.1.2同類物Congener

二噁英類所有化合物互為同類物。二噁英類共有210種同類物。

3.1.32,3,7,8-氯代二噁英類PCDDs/PCDFsisomersubstitutedat2,3,7,8-positions

指在2,3,7,8-位有氯原子取代的二噁英類同類物。其中多氯二苯并-對-二噁英有7種，多

氯二苯并呋喃有10種，共有17種，參見表1。

3.1.4二噁英類內標InternalstandardforPCDDs/PCDFsanalysis

1

濃度已知的同位素(13C或37Cl)標記的二噁英類標準物質，見表2。包括樣品前處理流程中

添加的凈化內標和進樣內標。

3.1.5毒性當量因子Toxicityequivalencyfactor，簡稱TEF

指各二噁英類同類物與2,3,7,8-四氯二苯并-對-二噁英對芳香烴（Ah）受體親和性能之比。

3.1.6毒性當量Toxicequivalentquantity，簡稱TEQ

各二噁英類同類物質量分數折算為相當于2,3,7,8-四氯二苯并-對-二噁英毒性的等價質量

分數，毒性當量質量分數為實測質量分數與該異構體的毒性當量因子的乘積。

表12,3,7,8-氯代二噁英類及方法檢出限

序號異構體名稱簡稱檢出限(ng/kg)

12,3,7,8-四氯二苯并-對-二噁英類2,3,7,8-T4CDD0.3

21,2,3,7,8-五氯二苯并-對-二噁英類1,2,3,7,8-P5CDD0.5

31,2,3,4,7,8-六氯二苯并-對-二噁英類1,2,3,4,7,8-H6CDD0.6

41,2,3,6,7,8-六氯二苯并-對-二噁英類1,2,3,6,7,8-H6CDD0.6

51,2,3,7,8,9-六氯二苯并-對-二噁英類1,2,3,7,8,9-H6CDD0.6

61,2,3,4,6,7,8-七氯二苯并-對-二噁英類1,2,3,4,6,7,8-H7CDD1.2

7八氯二苯并-對-二噁英類OCDD1.7

82,3,7,8-四氯二苯并呋喃2,3,7,8-T4CDF0.2

91,2,3,7,8-五氯二苯并呋喃1,2,3,7,8-P5CDF0.3

102,3,4,7,8-五氯二苯并呋喃2,3,4,7,8-P5CDF0.3

111,2,3,4,7,8-六氯二苯并呋喃1,2,3,4,7,8-H6CDF0.4

121,2,3,6,7,8-六氯二苯并呋喃1,2,3,6,7,8-H6CDF0.4

131,2,3,7,8,9-六氯二苯并呋喃1,2,3,7,8,9-H6CDF0.4

142,3,4,6,7,8-六氯二苯并呋喃2,3,4,6,7,8-H6CDF0.4

151,2,3,4,6,7,8-七氯二苯并呋喃1,2,3,4,6,7,8-H7CDF1.4

161,2,3,4,7,8,9-七氯二苯并呋喃1,2,3,4,7,8,9-H7CDF1.4

17八氯二苯并呋喃OCDF1.4

表2可供選用的二噁英類內標

取代氯原子數PCDDsPCDFs

37

Cl4-2,3,7,8-T4CDD13

13C12-1,2,7,8-T4CDF

四氯C12-2,3,7,8-T4CDD13

13C12-2,3,7,8-T4CDF

C12-1,2,3,4-T4CDD

13

13C12-2,3,4,7,8-P5CDF

五氯C12-1,2,3,7,8-P5CDD13

C12-1,2,3,7,8-P5CDF

13

13C12-2,3,4,6,7,8-H6CDF

C12-1,2,3,7,8,9-H6CDD13

13C12-1,2,3,6,7,8-H6CDF

六氯C12-1,2,3,4,7,8-H6CDD13

13C12-1,2,3,4,7,8-H6CDF

C12-1,2,3,6,7,8-H6CDD13

C12-1,2,3,7,8,9-H6CDF

1313

七氯C12-1,2,3,4,6,7,8-H7CDDC12-1,2,3,4,7,8,9-H7CDF

1313

八氯C12-OCDDC12-OCDF

3.2符號和縮略語

3.2.1PCDDsPolychlorinateddibenzo-p-dioxins

多氯二苯并-對-二噁英。有75種同類物。

2

3.2.2PCDFsPolychlorinateddibenzofurans

多氯二苯并呋喃。有135種同類物。

3.2.3T4CDDsTetrachlorodibenzo-p-dioxins

四氯二苯并-對-二噁英。有22種異構體。

3.2.4P5CDDsPentachlorodibenzo-p-dioxins

五氯二苯并-對-二噁英。有14種異構體。

3.2.5H6CDDsHexachlorodibenzo-p-dioxins

六氯二苯并-對-二噁英。有10種異構體。

3.2.6H7CDDsHeptachlorodibenzo-p-dioxins

七氯二苯并-對-二噁英。有2種異構體。

3.2.7OCDDOctachlorodibenzo-p-dioxin

八氯二苯并-對-二噁英。有1種異構體。

3.2.8T4CDFsTetrachlorodibenzofurans

四氯二苯并呋喃。有38種異構體。

3.2.9P5CDFsPentachlorodibenzofurans

五氯二苯并呋喃。有28種異構體。

3.2.10H6CDFsHexachlorodibenzofurans

六氯二苯并呋喃。有16種異構體。

3.2.11H7CDFsHeptachlorodibenzofurans

七氯二苯并呋喃。有4種異構體。

3.2.12OCDFOctachlorodibenzofuran

八氯二苯并呋喃。有1種異構體。

3.2.13RRFRelativeresponsefactor

相對響應因子。

3.2.14HRGCHigh-resolutiongaschromatography

高分辨氣相色譜。

3.2.15LRMSLow-resolutionmassspectrometry

低分辨質譜儀。

3.2.16SIMselectiveionmonitoring

選擇離子檢測。

3.2.17EIelectronimpactionization

電子轟擊離子化

3.2.18S/Nsignal/noiseratio

信噪比

3.2.19PCBspolychlorinatedbiphenyls

多氯聯苯

4方法原理

按相應采樣規(guī)范采集樣品并干燥，采用索氏提取、加速溶劑萃取或其它等效并經驗證的

方法進行提取，提取液用硫酸/硅膠柱或多層硅膠柱凈化及氧化鋁柱或活性炭分散硅膠柱等分

3

離，濃縮后加入進樣內標，使用高分辨氣相色譜-低分辨質譜法（HRGC-LRMS）進行定性和

定量分析。參見附錄A，二噁英類分析流程圖。

5試劑和材料

除非另有說明，分析時均使用符合相關標準的農殘級試劑，并進行空白試驗。有機溶劑

濃縮10000倍不得檢出二噁英類物質。

5.1丙酮（（CH3）2CO）

5.2甲苯（C7H8）

5.3正己烷（n-C6H14）

5.4甲醇（CH3OH）

5.5二氯甲烷（CH2Cl2）

5.6無水硫酸鈉（NaSO4）：優(yōu)級純，使用前在馬弗爐中660℃焙燒6h，待冷卻至150℃后，轉

移至干燥器中，冷卻后裝入試劑瓶中，干燥保存。

5.7鹽酸溶液：優(yōu)級純，1+1。

5.8硫酸：優(yōu)級純，ρ(H2SO4)=1.84g/ml。

5.9氫氧化鈉溶液：c（NaOH）＝1mol/L。

5.1010％硝酸銀硅膠：市售，保存在干燥器中。

5.11還原銅

使用前用鹽酸（5.7）、蒸餾水、丙酮（5.1）、甲苯（5.2）分別淋洗，放入干燥器中保存。

5.12硅膠

將色譜用硅膠（100～200目）放入燒杯中，用二氯甲烷（5.5）洗凈，待二氯甲烷全部揮

發(fā)后，攤放在蒸發(fā)皿或燒杯中，厚度小于10mm，在130℃的條件下加熱18h，放在干燥器中

冷卻30min。裝入密閉容器后放入干燥器中保存。

5.13氫氧化鈉堿性硅膠：ω=33%

取硅膠（5.12）67g，加入濃度為1mol/l的氫氧化鈉溶液（5.9）33g，充分攪拌，使之呈

流體粉末狀。制備完成后裝入試劑瓶中密封，保存在干燥器內。

5.14硫酸硅膠：ω=44%

取硅膠（5.12）100g，加入78.6g的硫酸（5.8），充分振蕩后變成粉末狀。制備完成后裝

入試劑瓶中密封，保存在干燥器內。

5.15氧化鋁

色譜用氧化鋁（堿性活性度Ⅰ）。分析過程中可以直接使用活性氧化鋁。必要時可進行

活化，活化方法為：將氧化鋁攤放在燒杯中，厚度小于10mm，在130℃的條件下加熱18h，

或者在培養(yǎng)皿中鋪成5mm厚度，在500℃的條件下加熱8h，放在干燥器內冷卻30min。裝入

密閉容器后放在干燥器內保存?；罨髴M快使用。

5.16活性碳分散硅膠：市售，保存在干燥器中。

5.17氮氣：高純氮氣，99.999%。

5.18水：用正己烷（5.3）充分洗滌過的蒸餾水。除非另有說明，本標準中涉及的水均指上述

處理過的蒸餾水。

4

5.19二氯甲烷-正己烷溶液：3%（v/v）

二氯甲烷和正己烷以3:97的體積比混合。

5.20二氯甲烷-正己烷溶液：50%（v/v）

二氯甲烷和正己烷以1:1的體積比混合。

5.21二氯甲烷-正己烷溶液：25%（v/v）

二氯甲烷和正己烷以1:3的體積比混合。

5.22氯化鈉溶液：ρ(NaCl)＝0.15g/ml。取150g氯化鈉溶于水中，稀釋至1L。

5.23堿性洗滌劑：市售。

5.24校準標準：市售二噁英類校準標準物質，需要涵蓋17種不同氯取代二噁英及呋喃，見附

錄B。

5.25凈化內標：市售二噁英類凈化內標物質，一般選擇8-17種13C標記化合物作為凈化內標，

見附錄B。

5.26進樣內標：市售二噁英類進樣內標物質，一般選擇1～2種13C標記化合物作為進樣內標，

見附錄B。

5.27全氟三丁胺（PFTBA）校準調諧標準溶液，市售。

6儀器和設備

6.1采樣裝置

6.1.1采樣工具：應符合HJ/T166和GB17378.3的要求，并使用對二噁英類無吸附作用的不銹

鋼或鋁合金材質器具。

6.1.2樣品容器：應符合HJ/T166和GB17378.3的要求，并使用對二噁英類無吸附作用的不銹

鋼或玻璃材質可密封器具。

6.2前處理裝置

樣品前處理裝置要用堿性洗滌劑（5.23）和水充分洗凈，使用前依次用丙酮（5.1）、正己

烷（5.3）或甲苯（5.2）等溶劑沖洗，定期進行空白試驗。所有接口處嚴禁使用油脂。

6.2.1索氏提取器或具有相當功能的設備

6.2.2濃縮裝置：旋轉蒸發(fā)濃縮器、氮吹儀以及相當濃縮裝置等。

6.2.2快速萃取裝置：帶34ml和66ml的萃取池，萃取壓力不低于1500psi，萃取溫度需要大

于120℃。

6.2.3層析柱：內徑8～15mm，長200～300mm玻璃層析柱。

6.3分析儀器

使用高分辨氣相色譜-低分辨質譜（HRGC-LRMS）對二噁英類進行分析。

6.3.1高分辨氣相色譜：進樣部分采用柱上進樣或者不分流進樣方式，進樣口最高使用溫度

250～280℃。

6.3.1.1石英毛細管色譜柱：長度為25～60m，內徑為0.1～0.32mm，膜厚為0.1～0.25μm石英毛

細管色譜柱，可對2,3,7,8—位氯取代異構體進行良好分離，并能判明這些化合物的色譜峰流

出順序。為保證對所有的2,3,7,8—位氯取代異構體都能很好的分離，宜選擇2種不同極性的

毛細管柱分別測定。

5

6.3.1.2柱箱溫度：溫度控制范圍在50～350℃，能進行程序升溫。

6.3.2低分辨質譜

離子源溫度，250℃；電子轟擊（EI）模式；電子轟擊能，70eV；選擇離子檢出方法（SIM

法）。

6.3.3載氣：高純氦氣（純度為99.999%以上）。

7樣品

7.1采集與保存

7.1.1按照HJ/T166和GB17378.3要求進行采樣。樣品采集后，避光保存，盡快送至實驗室進

行樣品制備和樣品分析。用于樣品采集的器械、材料等應保持清潔，采樣前應使用水和有機

溶劑清洗。

7.1.2按照HJ/T166和GB17378.3要求，將采集后的樣品在實驗室中風干、破碎、過篩。保存

在棕色玻璃瓶中。

7.1.3含水率的測定

參照HJ613測定土壤含水率。

7.2試樣的制備

試樣的制備主要包括凈化內標的加入、樣品的提取、提取液的多種凈化、凈化液的濃縮、

進樣內標的加入，前處理過程的流程圖見附錄C。

7.2.1樣品的提取

7.2.1.1索氏提取法

13

稱取約20g風干過篩樣品放入索氏提取器的提取杯中，在每個樣品中加入1ng的C12-標

記的凈化內標。用200～300ml左右的甲苯（5.2）提取16h以上。將提取液濃縮至1～2ml，定

容到5ml，待凈化。

7.2.1.2快速萃取方法

在小燒杯中稱取約20g的風干過篩樣品，加入一定量的無水硫酸鈉（5.6），將樣品轉移至

13

快速萃取裝置的萃取池中，同時加入一定量的C12-標記的凈化內標。設定的萃取條件為：壓

力1500psi，溫度120℃，提取溶劑甲苯（5.2），100%充滿萃取池模式，高溫高壓靜置5min，

循環(huán)三次。提取后的樣品按7.2.1.1方法濃縮定容，待凈化。

7.2.1.3如沉積物樣品含大量的硫化物，需要進行脫硫凈化。脫硫方法如下：將樣品提取液濃

縮至50ml左右，加入處理后的還原銅，充分振蕩，過濾，收集濾液，按照7.2.1.1方法濃縮定

容。

7.2.2樣品的凈化

7.2.2.1硫酸-硅膠柱凈化：

當樣品顏色較深，干擾較大時，采用硫酸-硅膠柱凈化方法。

7.2.2.1.1將7.2.1濃縮后的樣品放入250ml的分液漏斗中，加入75ml正己烷（5.3），用30ml

硫酸（5.8）振搖約10min，靜置后棄去水相，重復操作直至硫酸層為無色。正己烷層用50mll5%

氯化鈉溶液（5.22）反復洗至中性，經無水硫酸鈉（5.6）脫水后，濃縮到2mL以下，按照7.2.2.1.2

或7.2.2.2方法繼續(xù)凈化處理。

6

7.2.2.1.2在玻璃層析柱的底部添入玻璃棉，填入3g硅膠（5.12），再在其上部加入約10mm厚

的無水硫酸鈉（5.6）。

7.2.2.1.3用50ml的正己烷（5.3）沖洗硅膠柱，液面保持在無水硫酸鈉層以上。將樣品濃縮液

緩慢轉入硅膠柱，再用1ml正己烷反復洗滌濃縮瓶，同樣轉移至硅膠柱上，待液面降至無水

硫酸鈉層以下，用120ml正己烷以2.5ml/min（每秒1滴）的流速進行淋洗。淋洗液用濃縮器

濃縮到1ml左右，用于下一步處理。

注1：玻璃柱層析時，分步收集餾分的條件隨著填充劑的種類、活性或者溶劑的種類、溶劑量的變化而

變化，在操作之前，用煤灰提取液等包含全部二噁英的樣品進行分步實驗，以確定條件。

7.2.2.2多層硅膠柱凈化

7.2.2.2.1在玻璃層析柱（內徑15mm）底部添加一些玻璃棉，依次稱取3g硅膠（5.12）、5g33%

氫氧化鈉堿性硅膠（5.13）、2g硅膠（5.12）、10g44%硫酸硅膠（5.14）、2g硅膠（5.12）、5g10%

硝酸銀硅膠（5.10）和5g無水硫酸鈉（5.6）。

7.2.2.2.2用50ml正己烷淋洗，保持液面在無水硫酸鈉層上面。

7.2.2.2.3取7.2.1的提取液，用氮氣除去甲苯，剩余液體量約為0.5ml。將該濃縮液緩慢注入玻

璃柱中，液面保持在柱子填充部分的上端。用1ml的正己烷反復洗滌濃縮瓶，同樣轉移到玻

璃柱上。

7.2.2.2.4將120ml正己烷裝入分液漏斗置于硅膠柱上方，以2.5ml/min（每秒1滴）的流速緩

慢滴入硅膠柱中進行淋洗。

7.2.2.2.5淋洗液用濃縮器濃縮到1ml，用于下一步處理。如果充填部分的顏色變深或出現穿透

現象，則應重復7.2.2.2的操作。

7.2.2.3活性氧化鋁凈化

7.2.2.3.1在玻璃層析柱的底部添入玻璃棉，填入20g活化后氧化鋁（5.15），并在其上部加入

10mm厚的無水硫酸鈉，用50ml正己烷淋洗后。液面保持在硫酸鈉的上部。

7.2.2.3.2將7.2.2.1或7.2.2.2凈化后的樣品溶液適量緩慢移入氧化鋁柱，用1ml正己烷反復清

洗容器，洗脫液也轉移入氧化鋁柱上。待樣品溶液液面在硫酸鈉層的下部時，加入70ml甲苯

溶液淋洗，甲苯流出后，棄去所有的淋洗液。再加入30ml正己烷，收集該部分淋洗液為A部

分，主要含多氯聯苯等物質。然后用220ml50%（v/v）二氯甲烷—正己烷溶液（5.20）以2.5ml/min

（每秒1滴）的速度進行淋洗，得到淋洗液B部分，此部分溶液含有二噁英類物質。然后用

50ml的二氯甲烷淋洗層析柱直至不再流出，得到淋洗液C部分。保留A部分和C部分直至測

定結束（A部分和C部分溶液可以合并在一起）。

7.2.2.3.3將B部分淋洗液用濃縮器濃縮到1ml以下，轉移至5ml濃縮管中（或者直接進行7.2.2.4

步操作），用氮氣吹至近干，添加進樣內標，并用壬烷或甲苯定容至20μl，轉移入100μl小樣

品管中，封裝待儀器分析。

注2：氧化鋁的活性隨著生產批號和開封后的保存時間不同而有很大的變化?；钚越档蜁r1,3,6,8-T4CDD

和1,3,6,8-T4CDF可能會在第一部分淋洗液中溶出，而八氯代物用50%的二氯甲烷—正己烷溶液用規(guī)定的量

在第二部分淋洗液中不能洗脫出來。所以在操作之前，用煤灰提取液等包含全部二噁英的樣品進行分步實驗，

以確定條件。

7

7.2.2.4小活性氧化鋁柱凈化

當用7.2.2.3方法不能較好地凈化時，可以操作本步驟。在一次性滴管的頭部添加少量的

玻璃棉，再稱取1g的活性氧化鋁（5.15）于滴管上，加入5ml的正己烷淋洗層析管。待正己

烷溶液在氧化鋁上部時，將7.2.2.3中的濃縮樣品轉移入柱上，用0.5ml的正己烷清洗樣品瓶

三次，清洗液同時轉移到層析柱上。待樣品溶液液面在氧化鋁層上部時，棄去淋洗液，依次

加入12ml3%（v/v）二氯甲烷-正己烷溶液（5.19）、17ml50%（v/v）二氯甲烷-正己烷溶液（5.20）

和5ml二氯甲烷（5.5）進行淋洗，收集的淋洗液分別標注為B（a）部分、B（b）部分和B（c）

部分，其中B（b）部分含有二噁英，將B（a）和B（c）部分合并存放直至分析結束。按7.2.2.3.3

濃縮B（b）部分溶液，待儀器分析。

7.2.2.5活性碳分散硅膠柱凈化

取一根內徑8mm的玻璃管，由下至上分別加入玻璃棉、10mm無水硫酸鈉、1g的活性

碳分散硅膠（5.16）、10mm無水硫酸鈉、玻璃棉。固定架安裝好層析柱，用甲苯充分洗凈后，

再用正己烷置換柱內的甲苯。將7.2.2.1或7.2.2.2處理后的樣品進一步濃縮至0.5ml，轉移該

濃縮樣品至層析柱上，清洗樣品瓶一次，清洗液同時轉移到層析柱上，停留15min，再清洗樣

品瓶兩次，同樣轉移到層析柱上。待樣品溶液在玻璃棉層以下時，加入25ml正己烷，棄去該

淋洗液，然后加入40ml25%(v/v)二氯甲烷-正己烷（5.21）混合溶液，收集該片段溶液保存。

將活性碳柱反轉，用50ml甲苯淋洗該柱，收集甲苯溶液，二噁英主要在此步驟中淋洗下來，

按7.2.2.3.3濃縮待分析。

7.2.2.6其它凈化方法

可以使用凝膠滲透色譜（GPC）、高效液相色譜（HPLC）、自動樣品處理裝置（FMS）等

自動凈化技術代替手工凈化方式進行樣品的凈化處理。使用前必須用焚燒設施布袋除塵器底

灰樣品提取液進行分離和凈化效果試驗，并經驗證確認滿足本方法質量控制/質量保證要求后

方可使用。

8分析步驟

8.1測定條件

8.1.1.氣相色譜參考條件的設定

毛細管色譜柱，60m×0.32mm，膜厚0.1μm（二苯基-95%二甲基硅氧烷固定液），或其

它相當毛細管色譜柱；色譜柱溫度，100℃（2min）→（25℃/min）→200℃→（3℃/min）

→280℃（5min）；載氣，氦氣；流速，1.4ml/min；進樣口溫度，280℃；接口溫度，280℃；

進樣量，1μl，不分流進樣。

8.1.2質譜儀（MS）校正及測定

在儀器開機狀態(tài)下，設定必要的條件后，注入PFTBA或其它校正調諧標準溶液依照儀器

內部質量校正程序進行操作，質量數調諧范圍m/z35～550amu，關鍵離子豐度應滿足相應的

規(guī)范要求。保留質量校正結果。

使用選擇離子測定方法（SIM法），選定的質量數及離子豐度比見表3。記錄各氯代物色

譜圖，確認2,3,7,8-氯取代物能夠得到有效分離。

8.2標準曲線的建立

8.2.1校準溶液的測定

8

按照資料性附錄B配置的校準標準溶液或其它校準標準系列按照SIM測定操作進行。

8.2.2峰面積強度比確認

從得到的色譜圖上，確認各個標準物質對應的兩個監(jiān)測離子的峰面積強度比與通過氯原

子同位素豐度比推算的離子強度比幾乎一致。見表3和表4。

表3二噁英類測定的質量數（檢測離子）及離子豐度比

氯代物M+（M+2）+（M+4）+離子豐度比（%）

T4CDDs320322*0.77±0.12

P5CDDs354356*1.55±0.13

H6CDDs390*3921.24±0.19

H7CDDs424*4261.04±0.16

OCDD458460*0.89±0.13

待測物質

T4CDFs304306*0.77±0.12

P5CDFs338340*1.55±0.13

H6CDFs374*3761.24±0.19

H7CDFs408*4101.04±0.16

OCDF442444*0.89±0.13

13

C12—T4CDDs332334*

13

C12—P5CDDs366368*

13

C12—H6CDDs402*404

13

C12—H7CDDs436*438

13

C12—OCDD470472*

內標物質

13

C12—T4CDFs316318*

13

C12—P5CDFs350352*

13

C12—H6CDFs386*388

13

C12—H7CDFs420*422

13

C12—OCDF454456*

“*”標注為定量離子。

8.2.3相對響應因子的計算

8.2.3.1按照公式（1）計算凈化內標相對響應因子RRFcs

OACSS

RRFCS=×（1）

QASCS

式中：

RRFcs——凈化內標的相對響應因子；

Qcs——校準標準溶液中凈化內標質量，ng；

Qs——校準標準溶液中待測物質質量，ng；

As——校準標準溶液中待測物質峰面積；

Acs——校準標準溶液中凈化內標峰面積。

8.2.3.2按照公式（2）計算進樣內標的相對響應因子RRFrs。

9

QArscs

RRFrs=×（2）

QAcsrs

式中：

RRFrs——進樣內標相對響應因子；

Qrs——校準標準溶液中進樣內標質量，ng；

Qcs——校準標準溶液中凈化內標質量，ng；

Acs——校準標準溶液中凈化內標峰面積；

Ars——校準標準溶液中進樣內標峰面積。

8.3樣品測定

將預處理后的樣品，按照與標準曲線相同的條件進行測定。根據峰面積進行定量。

9結果計算與表示

9.1色譜峰的檢出

確認8.3樣品測定中分析樣品進樣內標的峰面積是標準溶液中同等濃度進樣內標的峰面

積的70%～130%，超出該范圍，要查明原因后重新測定。

9.2定性

9.2.1二噁英類同類物

二噁英類同類物的兩個監(jiān)測離子在指定的保留時間窗口內同時存在，并且其離子豐度比

與表4所列理論離子豐度比相對偏差小于15%（濃度在3倍檢出限時在±25%以內）。同時滿

足上述條件的色譜峰定性為二噁英類物質。

9.2.22,3,7,8-氯取代二噁英類的定性

除滿足9.2.1條件要求之外，色譜峰的保留時間應與標準溶液一致（±3s以內），同時內標

的相對保留時間亦與標準溶液一致（±0.5%以內）。同時滿足上述條件的色譜峰定性為2,3,7,8-

氯代二噁英類。

表4氯原子同位素存在的豐度比推斷離子強度比

MM+2M+4M+6M+8M+10M+12M+14

T4CDDs77.43100.0048.7410.720.940.01

P5CDDs62.06100.0064.6921.083.500.25

H6CDDs51.79100.0080.6634.858.541.140.07

H7CDDs44.43100.0096.6452.0316.893.320.370.02

OCDD34.5488.80100.0064.4826.076.781.110.11

T4CDFs77.55100.0048.6110.640.92

P5CDFs62.14100.0064.5720.983.460.24

H6CDFs51.84100.0080.5434.728.481.120.07

10

H7CDFs44.47100.0096.5251.8816.803.290.370.02

OCDF34.6188.89100.0064.3925.986.741.100.11

9.3二噁英類物質定量

9.3.12,3,7,8-氯取代異構體的量（Qi）。

按公式（3）以對應的凈化內標的添加量為基準，采用內標法求出。非2,3,7,8-氯代二噁英

類，采用具有相同氯原子取代數的2,3,7,8-氯代二噁英類RRFcs均值計算。

AQicsi

Qi=×（3）

AcsiRRFcs

式中：

Qi——提取液中i異構體的量，ng；

Ai——色譜圖上i異構體的峰面積；

Acsi——對應凈化內標物質的峰面積；

Qcsi——對應凈化內標物質的添加量，ng；

RRFcs——對應凈化內標物質的相對響應因子。

9.3.2濃度計算

按公式（4）計算樣品中的各異構體的濃度。

1

CQQi=?×()it（4）

M

式中：

Ci——樣品中i異構體的濃度，ng/kg；

Qi——提取液總量中i異構體的質量，ng；

Qt——空白實驗中i異構體的的質量，ng；

M——干基樣品量，kg。

9.4結果的表示

9.4.1結果的表示方法

二噁英類化合物濃度測定結果，要有2,3,7,8-氯取代異構體的濃度，四氯～八氯代物

（T4CDDs-OCDD和T4CDFs-OCDF）同族體的濃度、并記錄它們的總和。

當各異構體的濃度大于檢出限時，原值記錄；低于檢出限的，按照低于檢出限記錄。

各同族體的濃度和它們的總和按照被檢出的異構體濃度計算。樣品的檢出限也要明確記

錄。

9.4.2濃度單位二噁英類實測值用ng/kg表示。

9.4.3毒性當量的換算

當二噁英類化合物的濃度換算成毒性當量時，用測定濃度乘以毒性當量因子（TEF)，以

11

TEQng/kg表示。

9.4.3.1毒性當量因子（TEF）

沒有特殊指定的時候，二噁英類化合物的毒性當量因子見附錄D。

9.4.3.2毒性當量的計算

計算各個異構體的濃度，計算總毒性當量。當高于檢出限時按照原值進行計算，低于檢

出限時按照0值計算毒性當量，最后加和計算總的毒性當量。

10精密度和準確度

10.1精密度

五家實驗室分別對含二噁英類污染物毒性當量濃度為64.8ng/kg的土壤樣品進行了測定：

實驗室間17種不同二噁英類同類物相對標準偏差變化范圍在3.1％～24.4％之間，毒性當量相

對標準偏差為5.4％。

10.2準確度

五家實驗室分別在土壤樣品中加入1.0ng不同同位素內標，8種同位素內標平均加標回收

率范圍在48.6％～92.4％之間。

精密度和準確度結果詳見附錄D。

11質量保證和質量控制

11.1校準曲線相對校正因子

制作校準曲線的凈化內標相對響應因子RRFcs相對標準偏差需控制在±20%以內，超出范

圍需要重新調整儀器或者重新配置標準系列。

11.2連續(xù)校準

選擇標準曲線的中間濃度點，每天至少一次進行SIM測定，計算各個異構體對應的凈化

內標相對響應因子RRFcs和進樣內標相對響應因子RRFrs，將此結果與8.2.3的計算結果進行

對比，確認變化值在±20%以內。如果超過這個范圍，應查找原因，重新測定。如果保留時間

在一天內變化超過±5%，或者與內標物的相對保留時間在±2%以上，應查找原因，重新測定。

11.3確認內標物質的回收率

按照公式（5）確認凈化內標的回收率。

13

作為定量的C12－標記的同類物的信噪比＞20:1

AQ100

Rc=×csirsi×（5）

ArsiRRFrsQcsi

式中：

Rc——凈化內標的回收率，%；

Acsi——凈化內標的峰面積；

Arsi——對應的進樣內標的峰面積；

Qrsi——對應的進樣內標的添加量，ng；

RRFrs——對應的進樣內標的相對響應因子；

Qcsi——凈化內標的添加量，ng。

12

每個樣品中單個2,3,7,8－氯代PCDDs/PCDFs的凈化內標回收率需滿足：四氯代至六氯代

同類物回收率為50～130％；七氯代至八氯代同類物回收率為40～130％。若某種同類物的回

收率超過此要求，但對總的I-TEQ的毒性貢獻不超過10％，其回收率的范圍可放寬到：四氯

代至六氯代同類物回收率為30～150％；七氯代至八氯代同類物回收率為20～150％。若凈化

內標的回收率不在上述范圍之內，需重新進行前處理，再測定。

11.4儀器的檢出限

制作標準曲線的標準溶液的最低濃度（四氯代及五氯代二噁英類同類物10～50pg，六氯代

及七氯代二噁英類同類物20～100pg，八氯代二噁英類同類物50～250pg）。對2,3,7,8—氯代異

構體進行定量，這樣的操作反復進行5次以上，計算測定結果的標準偏差，標準偏差的3倍

為儀器檢出限。

如果儀器的檢出限超過下列值：四氯代及五氯代二噁英類同類物10pg，六氯代及七氯代

二噁英類同類物25pg，八氯代二噁英類同類物50pg，重新檢查器具、儀器，要調整儀器的檢

出限低于以上值。

儀器的檢出限隨著使用GC/MS的狀態(tài)而變化，一定周期內要進行確認。在使用儀器和測

定條件變化的時候必須進行確認。

11.5樣品

11.5.1每批樣品至少應采集一個運輸空白和全程序空白樣品?？瞻字心繕嘶衔餄舛葢∮?/p>

下列條件的最大值：

(1)方法檢出限；

(2)相關環(huán)保標準限值的5%；

(3)樣品分析結果的5%。

若空白試驗未滿足以上要求，則應采取措施排除污染并重新分析同批樣品。

每批樣品應至少進行一次試劑空白分析，樣品數量多于20個時，每20個樣品應分析一

個試劑空白。

11.5.2每批樣品應進行一次平行樣分析，樣品數量多于20個時，每20個樣品應進行一個平

行樣分析。平行樣分析時目標化合物的相對偏差應小于30%，同位素內標物質的回收率應滿

足11.3要求。

12檢測報告

結果報告宜采用表格的形式，表中應包括測定對象、實測質量分數、采用的毒性當量因

子、以及毒性當量質量分數等內容（見附錄E）。

13廢物處理

13.1實驗室應遵守各級管理部門的廢物管理法律規(guī)定，避免廢物排放對周邊環(huán)境的污染。

13.2氣相色譜分流及質譜機械泵廢氣應通過活性碳柱、含油或高沸點醇的吸收管后排出。

13.3實驗過程中產生的含酸廢液應集中收集處理。

13.4液體及可溶性廢物可溶解于甲醇或乙醇中并以紫外燈（波長低于290nm）照射處理，若

無二噁英類檢出可按普通廢物處置。

13.5二噁英類在800℃以上可以有效分解?？谡帧⑾鹉z手套和濾紙等低質量濃度水平的廢物可

13

委托具有資質的設施進行焚化處置。

13.6實驗室產生的廢物屬于危險廢物時，按有關法律規(guī)定進行處置。