豬球蟲病診斷技術(shù)

1豬球蟲病診斷技術(shù)NY/T541-2016獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范4.1.1豬等孢球蟲（又名囊等孢球蟲）病附錄C圖C.1）。病豬表現(xiàn)為衰弱，脫水，發(fā)育遲緩，時(shí)有死亡4.1.2豬艾美耳球蟲病4.2診斷25.1材料與試劑5.1.1試劑飽和鹽水和2.5％重鉻酸鉀溶液，配置方法分別見(jiàn)附錄B中B.15.1.2器材5.2樣品采集、保存和運(yùn)輸若是群體采樣，采集新鮮糞便不少于300g；若是個(gè)體采樣，采集新鮮糞便不少于10將所采集樣品在24h內(nèi)送往實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)，運(yùn)輸條件應(yīng)符合NY/T541-25.3操作5.3.1.2輕輕攪勻，依次經(jīng)孔徑為0.25mm和0.15mm銅絲網(wǎng)或尼龍網(wǎng)過(guò)濾。），5.3.1.7定性檢查的判定標(biāo)準(zhǔn)如a）發(fā)現(xiàn)球蟲卵囊，判為陽(yáng)性，說(shuō)明該豬（群）已感染球蟲。將球蟲陽(yáng)性糞樣置于2.5%重鉻酸鉀溶還需連續(xù)采集糞便14d~21d，每天檢查均未發(fā)現(xiàn)球35.3.2.1對(duì)定性檢查中呈陽(yáng)性的糞樣，需進(jìn)行定量檢查。0.15mm銅絲網(wǎng)或尼龍網(wǎng)過(guò)濾，用少攪拌均勻，移入100mL量筒，加飽和鹽水至60mL處，充分混勻。（lcm×1cm×0.15cm=0.15cm3）內(nèi)的所有卵囊數(shù)，將兩個(gè)計(jì)數(shù)室的卵囊數(shù)之值。計(jì)數(shù)過(guò)程中對(duì)于壓線的卵囊，按左、上壓線計(jì)，右、下壓線不計(jì)處理。根據(jù)每次重復(fù)的卵囊平均5.3.2.6每克糞便卵囊數(shù)（ooc5.3.2.7對(duì)卵囊數(shù)較多的糞樣，可在605.3.2.8定量檢查的判定標(biāo)準(zhǔn)如下：），6.2.1對(duì)疑似球蟲感染致死或?qū)⒁劳龅呢i進(jìn)行解剖，觀察腸道病變6.2.2尸體剖檢所觀察的特征性病變是急性腸炎，主要見(jiàn)于空腸和回腸，若發(fā)現(xiàn)腸道明顯腫大、或變形，腸漿膜面出現(xiàn)針尖大小、顏色為鮮紅色、褐色或白色的斑點(diǎn)或斑塊或結(jié)節(jié)；腸內(nèi)容4凝塊、脫落的上皮細(xì)胞、纖維索樣物、黏液等，呈暗紅色、橙黃色或乳白色，多為稀薄狀；腸黏膜增厚，有壞死的病灶等病變，可懷疑為球蟲病。進(jìn)一步做裂殖子、裂殖體6.3.1取病變明顯的腸道（特別是小腸），縱向剪開，用磷酸鹽緩沖液輕輕6.3.3在高倍鏡(×100）下觀察，如見(jiàn)有大量球形的像剝了皮的橘子似的裂殖體（直徑大多為蓋玻片，輕輕將內(nèi)容物壓散，置顯微鏡下檢查，若見(jiàn)大量球蟲卵囊（卵囊形態(tài)見(jiàn)），6.4.2或取有灰白色斑點(diǎn)或斑塊的腸道，縱向剪開，用磷酸鹽緩沖液輕輕洗去黏膜表層的雜物，5A.1豬球蟲及種類debliecki）、光滑艾美耳球蟲（Eimeriapolita）、粗糙艾美耳球蟲（Eimeriascabra）、有刺艾美耳球蟲（Eimeriaspinosa）、新蒂氏艾美耳球蟲（Eimerianeodebliecki）、豬艾美耳球蟲（Eimeriasuis）、極細(xì)艾美耳球蟲（Eimeriaperminuta）和豚艾美耳球蟲（其次為蒂氏艾美耳球蟲、光滑艾美耳球蟲、粗糙艾美耳球蟲和有刺艾美耳球蟲。A.2豬等孢球蟲斯氏體。孢子化時(shí)間最早約為63h。豬等孢球蟲的卵囊形態(tài)A.3蒂氏艾美耳球蟲6A.4光滑艾美耳球蟲A.5粗糙艾美耳球蟲卵囊呈圓形，卵壁粗糙，具有放射狀條紋，黃色或褐色，大小為（23.01μm~35.10μm）×A.6有刺艾美耳球蟲卵囊呈圓形，囊壁粗糙，上有細(xì)刺，褐色，大小為（21.75μm~28.32μm）×（16.25μm~21.24μm7A.7新蒂氏艾美耳球蟲殘?bào)w，有極粒。孢子囊為長(zhǎng)卵圓形，斯氏體明顯，內(nèi)殘A.8豬艾美耳球蟲8A.9極細(xì)艾美耳球蟲A.10豚艾美耳球蟲9稱取25g重鉻酸鉀固體，放入1L燒杯中，加入蒸餾水至1000mL刻度處，充分?jǐn)嚢枋怪劂t酸鉀完全充分?jǐn)噭颍眠m量1mol/L鹽酸調(diào)溶液的pH至7.4，再加蒸餾水250mL的玻璃瓶中，在121kPa壓力下蒸汽[3]王楠皓.我國(guó)部分地區(qū)規(guī)?；i場(chǎng)豬球蟲感染情況調(diào)查[D].河南農(nóng)業(yè)大學(xué),[4]GongQL,Zhao