實(shí)驗(yàn)七染色體核型分析

【實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目】染色體核型分析實(shí)驗(yàn)室名稱顯微分析實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)室地點(diǎn)學(xué)時(shí)2實(shí)驗(yàn)類型驗(yàn)證每組人數(shù)2-4選做或必做必做實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^(guò)幾種生物染色體標(biāo)本的觀察，掌握染色體核型分析的方法內(nèi)容提要生物染色體標(biāo)本的觀察；染色體核型的分析重點(diǎn)難點(diǎn)染色體核型的分析方法主要儀器及耗材顯微鏡、尺子、剪刀實(shí)驗(yàn)七：染色體核型分析〖實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵蟆接^察分析細(xì)胞有絲分裂中期染色體的長(zhǎng)短、臂比和隨體等形態(tài)特征；學(xué)習(xí)染色體組型分析的基本方法和技能?！紝?shí)驗(yàn)原理〗染色體組型分析是細(xì)胞遺傳學(xué)研究的基本方法，是研究物種演化、分類以及染色體結(jié)構(gòu)、型態(tài)與功能之間的關(guān)系所不可缺少的重要手段。染色體組是指二倍體生物配子中所含的染色體總稱，常以“Ｘ”表示。同一物種的同一染色體組內(nèi)各染色體的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和連鎖群是彼此不同的，但它們卻相互協(xié)調(diào)，共同決定生物性狀的發(fā)育。

研究染色體組型的方法，一是靠有絲分裂時(shí)染色體的形態(tài)特征，另一是靠減數(shù)分裂時(shí)染色體的形態(tài)和特征。本實(shí)驗(yàn)著重介紹有絲分裂的染色體組型分析。

細(xì)胞有絲分裂中期是識(shí)別染色體個(gè)性特征的最佳時(shí)期，而染色體組型分析就是進(jìn)行染色體特征的鑒別和描述，其形態(tài)的鑒別主要依據(jù)染色體的長(zhǎng)度、著絲粒位置、付縊痕的有無(wú)和位置、隨體的有無(wú)、形狀和大小等資料進(jìn)行分析。現(xiàn)分別介紹如下：

1.染色體長(zhǎng)度，同一染色體組內(nèi)各染色體的長(zhǎng)度是不一致的，其絕對(duì)長(zhǎng)度可在顯微鏡上測(cè)量，或用放大照片測(cè)量后換算。由于染色體制片過(guò)程中使用的藥劑及方法不同，另外供觀察的細(xì)胞分裂不可能保證同一時(shí)期，故染色體的收縮有差異而導(dǎo)致絕對(duì)長(zhǎng)度在同一物種或個(gè)體不同細(xì)胞間發(fā)生差異，針對(duì)這種情況，在分析中常用染色體的相對(duì)長(zhǎng)度來(lái)表示。

在染色體長(zhǎng)度測(cè)量中，對(duì)染色體的兩條臂要分別測(cè)量，一般隨體不計(jì)入染色體長(zhǎng)度內(nèi)。

2.著絲粒的位置：每條染色體都有一著絲粒，其位置可因不同染色體而異。由于著絲粒把染色體分為兩個(gè)染色體臂：長(zhǎng)臂和短臂，它們的比率（即臂比）便可確定著絲粒的位置。

3.付縊痕的有無(wú)和位置：有些染色體上除著絲粒，還另有一不著色或縊縮變細(xì)的區(qū)域稱符縊痕。

4.隨體的有無(wú)、形狀和大?。河行┤旧w在短臂的末端有一棒狀小體稱為隨體，隨體和染色體臂之間常以付縊痕相隔，具隨體的染色體稱SAT染色體。〖材料和方法〗細(xì)胞有絲分裂永久制片或其中期染色體圖象的放大照片?！加镁吆退幤贰郊舻?、直尺、膠水。〖實(shí)驗(yàn)步驟〗（一）染色體標(biāo)本的制備1.制片2.觀察制片，選擇理想的中期分裂相細(xì)胞進(jìn)行顯微攝影，沖洗放大照片（二）染色體組型分析1.染色體計(jì)數(shù)2.染色體測(cè)量和計(jì)算根據(jù)放大圖片并安下表測(cè)量和計(jì)算：編號(hào)長(zhǎng)臂短臂1

2

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3.染色體排隊(duì)①根據(jù)染色體的相對(duì)長(zhǎng)度、臂長(zhǎng)和形態(tài)特征，將同源染色體歸類成對(duì)。②按由長(zhǎng)至短的順序?qū)⒏鲗?duì)染色體依次排隊(duì)。長(zhǎng)度相同的染色體則將短臂長(zhǎng)的染色體排在前面，隨體染色體排在最后。4.根據(jù)臂率將染色體分類。臂率為1.0－1.7，稱中部著絲粒染色體(m)，臂率為1.71－3.0，稱近中部著絲粒染色體(sm)，臂率為3.01－7.0，稱近端部著絲粒染色體（st），臂率超過(guò)7.0稱端部著絲粒染色體(t)。5.染色體核型標(biāo)準(zhǔn)圖像的制備?！甲鳂I(yè)〗完成染色體形態(tài)測(cè)量數(shù)據(jù)表及染色體核型圖。相比而言，下面一個(gè)實(shí)驗(yàn)更容易操作，我們08級(jí)生科也是用的下面這個(gè)：實(shí)驗(yàn)七人類染色體的識(shí)別與核型分析實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)染色體核型的分析方法；了解人類染色體的特征。二、實(shí)驗(yàn)原理1．染色體組型(核型)是指生物體細(xì)胞所有可測(cè)定的染色體表型特征的總稱。包括：染色體的總數(shù)，染色體組的數(shù)目，組內(nèi)染色體基數(shù)，每條染色體的形態(tài)、長(zhǎng)度、著絲粒的位置，隨體或次縊痕等。染色體組型是物種特有的染色體信息之一，具有很高的穩(wěn)定性和再現(xiàn)性。組型分析能進(jìn)行染色體分組外，還能對(duì)染色體的各種特征做出定量和定性的描述，是研究染色體的基本手段之一。利用這一方法可以鑒別染色體結(jié)構(gòu)變異、染色體數(shù)目變異，同時(shí)也是研究物種的起源、遺傳與進(jìn)化，細(xì)胞遺傳學(xué)，現(xiàn)代分類學(xué)的重要手段。2．人類的單倍體染色體組(n=23)上約有30000-40000個(gè)結(jié)構(gòu)基因。平均每條染色體上有上千個(gè)基因。各染色體上的基因都有嚴(yán)格的排列順序，各基因間的毗鄰關(guān)系也是較為恒定的。人類的24種染色體形成了24個(gè)基因連鎖群，所以，染色體上發(fā)生任何數(shù)目異常、甚至是微小的結(jié)構(gòu)變異，都必將導(dǎo)致許多獲某些基因的增加或減少，從而產(chǎn)生臨床效應(yīng)。染色體異常常表現(xiàn)為具有多種畸形的綜合征，稱為染色體綜合征，其癥狀表現(xiàn)為多發(fā)畸形、智力低下和生長(zhǎng)發(fā)育異常，此外還可看到一些特征性皮膚紋理改