(高清版)GBT 41683-2022 化妝品中禁用物質(zhì)秋水仙堿及其衍生物秋水仙胺的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

化妝品中禁用物質(zhì)秋水仙堿及其衍生物秋水仙胺的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法2022-10-12發(fā)布I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由中國輕工業(yè)聯(lián)合會提出。本文件由全國香料香精化妝品標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(SAC/TC257)歸口。本文件起草單位：深圳海關(guān)食品檢驗檢疫技術(shù)中心、深圳市檢驗檢疫科學(xué)研究院。本文件主要起草人：康海寧、沈金燦、趙鳳娟、林偉堅、徐婷婷、華紅慧、羅耀、陳沛金、謝志榕、Ⅱ本文件的被測物質(zhì)是我國《化妝品安全技術(shù)規(guī)范(2015年版)》規(guī)定的禁用原料。禁用原料是指不得作為化妝品原料使用的物質(zhì)。《化妝品安全技術(shù)規(guī)范(2015年版)》規(guī)定：若技術(shù)上無法避免禁用物質(zhì)作為雜質(zhì)帶入化妝品時，國家有限量規(guī)定的應(yīng)符合其規(guī)定；未規(guī)定限量的，應(yīng)進(jìn)行安全性風(fēng)險評估，確保在正常、合理及可預(yù)見的使用條件下不得對人體健康產(chǎn)生危害。目前我國尚未規(guī)定這些物質(zhì)的限量值，本文件的制定，僅對化妝品中測定這些物質(zhì)提供檢測方法。1化妝品中禁用物質(zhì)秋水仙堿及其衍生物秋水仙胺的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法警示——使用本文件的人員應(yīng)有正規(guī)實(shí)驗室工作的實(shí)踐經(jīng)驗。本文件并未指出所有可能的安全問題。使用者有責(zé)任采取適當(dāng)?shù)陌踩徒】荡胧?，并保證符合國家有關(guān)規(guī)定的條件。本文件描述了化妝品中禁用物質(zhì)秋水仙堿及其衍生物秋水仙胺的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定方法的本文件適用于水基、乳液、膏霜、凝膠、蠟基、粉基類等化妝品中秋水仙堿及其衍生物秋水仙胺的測定。本文件的方法檢出限和定量限：秋水仙堿和秋水仙胺的檢出限均為5.0μg/kg,定量限均為2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗室用水規(guī)格和試驗方法3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4試驗方法樣品經(jīng)提取液超聲提取、離心后，用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定和定性，外標(biāo)法定量。4.2試劑和材料24.2.9甲醇乙腈溶液：移取500mL甲醇(4.2.2)至1000mL容量瓶中，用乙腈(4.2.3)定容至刻度，混勻備用。4.2.10正己烷飽和甲醇乙腈溶液：用量筒分別量取100mL正己烷(4.2.5)和400mL甲醇乙腈溶液(4.2.9)置于試劑瓶中振搖，靜置分層，除去上層正己烷，下層即為正己烷飽和甲醇乙腈溶液。4.2.115mmol/L乙酸銨溶液(含0.1%甲酸):準(zhǔn)確稱取0.3854g乙酸銨(4.2.6),加入800mL水溶解，加入1mL甲酸(4.2.8),轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。表A.1,純度不小于95%。4.2.13標(biāo)準(zhǔn)儲備液：準(zhǔn)確稱取適量各標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(4.2.12)分別置于50mL容量瓶中，用無水乙醇(4.2.4)溶解并定容至刻度，分別配制成質(zhì)量濃度為100mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲備液，于一18℃下保存，有效期6個月。4.3儀器設(shè)備4.3.1液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀(LC-MS/MS):配有電噴霧離子源(ESI)。4.3.2離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于9500r/min。4.3.3電子天平：精度為0.0001g和0.001g。4.3.4渦旋混合器。4.3.5超聲波清洗器。4.3.6有機(jī)系微孔濾膜：0.22μm。4.4試驗步驟4.4.1樣品溶液制備稱取1g(精確至0.001g)樣品于10mL容量瓶中，用正己烷飽和甲醇乙腈溶液(4.2.10)定容至刻度，渦旋混勻，超聲提取15min;轉(zhuǎn)移至15mL具塞離心管中，以9500r/min離心5min,取上清液5.0mL于10mL容量瓶中，用水定容至刻度，混勻；取5.0mL至15mL離心管中，加入5.0mL正己烷(4.2.5),渦旋，以9500r/min離心5min,棄去上層正己烷后，移取1.0mL下層清液，過微孔濾膜稱取1g(精確至0.001g)樣品于10mL容量瓶中，加入0.2g乙酸銨(4.2.7),用正己烷飽和甲醇乙腈溶液(4.2.10)定容至刻度，渦旋混勻，超聲提取15min;轉(zhuǎn)移至15mL具塞離心管中，以9500r/min離心5min,取上清液5.0mL于10mL容量瓶中，用水定容至刻度，混勻；取5.0mL至15mL離心管中，加入5.0mL正己烷(4.2.5),渦旋，以9500r/min離心5min,棄去上層正己烷后，移取1.0mL下層稱取1g(精確至0.001g)樣品于50mL具塞離心管中，準(zhǔn)確加入5mL正己烷(4.2.5),渦旋均勻后準(zhǔn)確加入10mL正己烷飽和甲醇乙腈溶液(4.2.10),渦旋混勻，超聲提取15min;以9500r/min離心5min,取下層清液5.0mL于10mL容量瓶中，用水定容至刻度，混勻；轉(zhuǎn)移至15mL具塞離心管中，以39500r/min離心5min,移取1.0mL清液，過微孔濾膜(4.3.6),上機(jī)測定。平行做兩份試驗。液相色譜參考條件如下：b)流動相：A:5mmol/L乙酸銨溶液(含0.1%甲酸)(4.2.11),B:甲醇(4.2.2);f)梯度洗脫條件見表1。表1液相色譜流動相及參考分離條件時間/minA/%B/%065串聯(lián)質(zhì)譜參考條件如下：b)數(shù)據(jù)采集：多反應(yīng)監(jiān)測(MRM),質(zhì)譜參數(shù)見表2;4GB/T41683—2022表2化合物的母離子及定量定性離子、碰撞電壓和射頻電壓化合物名稱母離子m/z子離子m/z碰撞電壓V射頻電壓V秋水仙胺372.21310.04"341.11秋水仙堿400.21358.11?310.04“定量離子。4.4.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：分別準(zhǔn)確移取1mL標(biāo)準(zhǔn)儲備液(4.2.13)至100mL的容量瓶中，用甲醇溶液(4.2.2)定容至刻度，配制成質(zhì)量濃度為1mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，于一18℃下保存，有效期1個月。取相近的空白樣品，按照4.4.1步驟進(jìn)行處理，用得到的空白樣品提取液將混合標(biāo)準(zhǔn)溶液逐級稀釋得到質(zhì)量濃度為0.500pg/L、1.00pg/L、3.00pg/L、5.00μg/L、10.0μg/L的秋水仙堿、秋水仙胺系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，質(zhì)量濃度由低到高進(jìn)行檢測，以定量離子峰面積對質(zhì)量濃度作圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。秋水仙堿及其衍生物秋水仙胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)選擇離子質(zhì)量色譜圖見附錄B中圖B.1和圖B.2。4.4.5試樣測定按照液相色譜和串聯(lián)質(zhì)譜參考條件(4.4.2和4.4.3)測定試樣溶液(4.4.1)。如果試樣中待測物質(zhì)的色譜峰保留時間與標(biāo)準(zhǔn)溶液的一致(變化范圍在±2.5%),在扣除背景后的試樣質(zhì)譜圖中所選擇的離子均出現(xiàn)，而且選擇離子的相對豐度與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的進(jìn)行比較，最大允許偏差不超過表3規(guī)定的范圍，可判定為試樣中含有對應(yīng)的待測物。記錄目標(biāo)化合物定量離子色譜峰的峰面積，以外標(biāo)法定量。試樣溶液中被測物的響應(yīng)值均應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍之內(nèi)，超過線性范圍則應(yīng)稀釋后再進(jìn)樣測定。表3定性確證時相對離子豐度的最大允許偏差K≤104.5空白試驗除不稱取樣品外，均按4.4.1～4.4.5步驟進(jìn)行測定。5試驗數(shù)據(jù)處理樣品中待測組分含量按式(1)計算。 (1)式中：X;——樣品中待測組分含量，單位為微克每千克(μg/kg);5c;——由標(biāo)準(zhǔn)曲線得出的樣品溶液中待測組分的質(zhì)量濃度，單位為微克每升(μg/L)V——定容體積，單位為毫升(mL);f——前處理過程中的稀釋倍數(shù)，取值為2;1000——單位換算系數(shù)；m——樣品質(zhì)量，單位為克(g);k——超出線性范圍時的稀釋倍數(shù)。計算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。在添加濃度10.0μg/kg～100μg/kg的范圍內(nèi)，回收率在71.6%～106%之間。7精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不應(yīng)超過算術(shù)平均值的10%。6(資料性)秋水仙堿及其衍生物秋水仙胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的信息秋水仙堿及其衍生物秋水仙胺的英文名稱、CAS號、分子式、結(jié)構(gòu)式及相對分子質(zhì)量見表A.1。表A.1秋水仙堿及其衍生物秋水仙胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的信息序號中文名稱英文名稱CAS號分子式結(jié)構(gòu)式相對分子質(zhì)量1秋水仙堿ColchicineC??H??NO?2秋水仙胺Demecolcine477-30-5C??H