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核酸的理化性質(zhì)
核酸的相對(duì)分子質(zhì)量核酸是生物體內(nèi)的大分子化合物。相對(duì)質(zhì)量比較大,一般為106-1010
之間。不同生物體內(nèi)的DNA的相對(duì)分子質(zhì)量差異很大。RNA的相對(duì)分子質(zhì)量也在數(shù)百到數(shù)百萬之間。
核酸的溶解性和黏度生物體內(nèi)的核酸屬于極性化合物,一般溶于水不溶于乙醇、乙醚、三氯甲烷等有機(jī)溶劑。
生物體內(nèi)DNA的結(jié)構(gòu)比較細(xì)長(zhǎng),即使很稀的濃度也有極大的黏度。當(dāng)DNA變性時(shí),黏度下降。RNA分子的黏度比DNA小。
核酸的酸堿性
核酸分子結(jié)構(gòu)中既包括含有酸性的磷酸基團(tuán),又含有堿性的堿基,所以核酸是兩性電解質(zhì),一般條件下,由于堿基是弱堿性,所以核酸常表現(xiàn)出酸性。核酸的紫外線吸收
核酸分子中的堿基都含有共軛雙鍵,對(duì)260nm的紫外光具有強(qiáng)烈的吸收作用。因此,可用紫外分光光度法對(duì)核酸進(jìn)行測(cè)定。
實(shí)驗(yàn)室中最常用這一特性定量測(cè)定小量純的DNA和RNA。也可用紫外法檢測(cè)樣品是純品,檢測(cè)時(shí)用紫外分光光度計(jì)讀出260nm和280nm處的OD值,從OD260/OD280的比值即可判斷樣品的純度。
檢驗(yàn)待測(cè)樣品是否純品可用紫外分光光度計(jì)讀出260nm與280nm的OD值,從OD260/OD280的值即可判斷樣品的比純度。純DNA的OD260/OD280應(yīng)為1.8
純RNA的OD260/OD280應(yīng)為2.0
樣品中如含有雜蛋白及苯酚,OD260/OD280的值即明顯降低。
對(duì)于純的樣品,只要讀出260nm的OD值即可算出含量。通常按1OD值相當(dāng)于50μg/ml雙螺旋DNA,
40μg/ml單螺旋DNA(或RNA)2μg/ml寡核苷酸計(jì)算。這個(gè)方法既快速又準(zhǔn)確,而且不會(huì)浪費(fèi)樣品。對(duì)于不純的核酸可以用瓊
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