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鳥巴氏桿菌病診斷技術(shù)實(shí)訓(xùn)目標(biāo)學(xué)會(huì)巴氏桿菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷方法主要儀器設(shè)備與場(chǎng)地設(shè)備材料:巴氏桿菌病被檢材料(肝、脾、心血等)、剪刀、組織鑷、酒精燈、接種環(huán)、載玻片、無菌平皿、記號(hào)筆、顯微鏡、吸水紙、擦鏡紙、香柏油、二甲苯、普通肉湯培養(yǎng)基、鮮血(血清)瓊脂平板、75%酒精、3%來蘇爾、染色液(美藍(lán)、革蘭氏、瑞氏)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(鴿、雞或小白鼠)。場(chǎng)地:傳染病實(shí)驗(yàn)室。鳥巴氏桿菌病的臨床診斷(1)流行特點(diǎn):以春初秋末、產(chǎn)卵期間、性成熟期最常見(2)臨診癥狀:病鳥精神萎頓,廢食,閉目縮頸,呼吸急促,口鼻分泌物增加,有時(shí)呈泡沫狀。冠髯變紫,后期常有劇烈腹瀉,排出黃色、灰白色或綠色稀糞。(3)剖檢變化:肝腫大、質(zhì)脆,呈棕色或黃棕色,表面散布有許多灰白色、針尖大小的壞死點(diǎn)。腸道尤其是十二指腸呈卡他性和出血性腸炎鳥巴氏桿菌涂片染色鏡檢無菌采取病料制作涂片或觸片數(shù)張,分別進(jìn)行美蘭和瑞氏染色,鏡檢。多殺性巴氏桿菌呈卵圓形(或球桿狀),兩極濃染,并可清晰地看出兩極之間兩側(cè)的連線。血液涂片用瑞氏染色時(shí),細(xì)菌被染成藍(lán)色或淡青色,紅細(xì)胞染成淡紅色,紅細(xì)胞內(nèi)有紫色的核。鳥巴氏桿菌分離培養(yǎng)將病料分別接種于鮮血瓊脂、血清瓊脂、普通肉湯于37℃培養(yǎng)24hr。多殺性巴氏桿菌在鮮血瓊脂上長出較平坦、半透明的露滴樣菌落,不溶血,在血清瓊脂中生長旺盛。在普通肉湯中呈均勻混濁,以后便有沉淀,振搖時(shí)沉淀物呈瓣?duì)钌?。鳥巴氏桿菌生化試驗(yàn)培養(yǎng)物做涂片檢查(在由培養(yǎng)基上的培養(yǎng)物所做的涂片中,大部分多殺性巴氏扦菌不表現(xiàn)兩極染色特性,而常呈珠桿狀或雙球狀),觀察其形態(tài)、染色特性、培養(yǎng)特性,同時(shí)做生理生化鑒定。本菌48hr內(nèi)能分解葡萄糖、甘露糖和蔗糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。靛基質(zhì)、接觸酶和氧化酶均為陰性,M?R試驗(yàn)和V?P試驗(yàn)均為陰性。石蕊牛乳無變化,不液化明膠。鳥巴氏桿菌動(dòng)物接種試驗(yàn)無菌采取病料,剪碎、研磨、用滅菌生理鹽水稀釋成1:5~1:10乳劑,接種于鴿、雞或小鼠的皮下、肌肉或腹腔,劑量為0.2~0.5ML。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物如于接種后18~24hr死亡,則采取心血及實(shí)質(zhì)臟器做涂片檢查,分離培養(yǎng),然后再對(duì)病死動(dòng)物尸體進(jìn)行剖檢并觀察病理變化。接種局部可見肌肉及皮下組織發(fā)生水腫和發(fā)炎灶;胸腔和心包有漿液性纖維
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