色譜應(yīng)用與化合物提純

色譜應(yīng)用與化合物提純TLC方法建立（Rf要求）

第2頁,共33頁，2024年2月25日，星期天舉例物質(zhì)中可能含有的雜質(zhì)1、碳鏈長短帶來的雜質(zhì);2、含氟多少帶來的雜質(zhì)3、氧化雜質(zhì)（反應(yīng)方程式如下）第3頁,共33頁，2024年2月25日，星期天第4頁,共33頁，2024年2月25日，星期天TLC方法建立---

甲氟奎

常見問題解決拖尾問題:由于載體對被分離物質(zhì)吸附太強所致.解決辦法是:對鹼性化合物,在展開劑中添加比其極性強的不干擾測定的鹼性物.如氨水、三乙胺等，置換解決。對酸性化合物，在展開劑中添加比其極性強的不干擾測定的酸性物.如甲酸、冰乙酸等，置換解決,舉例見幻燈片5.邊沿效應(yīng)問題：特別是對鋁泊板，可用食指與拇指沿邊沿上下?lián)崞秸?，先空白爬行一次看是否有邊沿效?yīng)，無則熱風吹干后使用。第5頁,共33頁，2024年2月25日，星期天TLC方法建立---甲氟奎Syntheticprocess

(1):過渡物(2):產(chǎn)品

第6頁,共33頁，2024年2月25日，星期天TLC方法建立及其驗證第7頁,共33頁，2024年2月25日，星期天某藥物-中間體監(jiān)控TLC方法建立中間體1檢測TLC方法建立分離試驗:△Rf=0.10

滿足分離要求.檢測限試驗:中間體1為3.00μg,SM為

2.02μg.加樣試驗:SM取檢測限的2-3倍(最少),中間體1取SM量的50-60倍,然后混合.SM:中間體1=4.69:250第8頁,共33頁，2024年2月25日，星期天某藥物-中間體監(jiān)控TLC方法建立中間體結(jié)構(gòu)式中間體2中間體3中間體4

極性:中間體4＞3＞2第9頁,共33頁，2024年2月25日，星期天薄層原位化學反應(yīng)簡介一、創(chuàng)立時間：1953年由Miller及Kirchner提出二、原始發(fā)表文章：MillerM.KirchnerJG.Analchem，1953三、定義：根據(jù)不同的目的在點樣處點加試劑或以其他方式使被測物質(zhì)在點樣原位處進行化學反應(yīng)，當反應(yīng)完成后再進行展開，從而測定反應(yīng)進行情況。四、研究內(nèi)容：氧化還原、光解、水解、脫水、鹵化、酯化、硝化、重氮化等反應(yīng)以及制備衍生物都可以用此方法進行。第10頁,共33頁，2024年2月25日，星期天薄層原位化學反應(yīng)的應(yīng)用藥物穩(wěn)定性研究化學反應(yīng)摸索化學鑒別反應(yīng)第11頁,共33頁，2024年2月25日，星期天

應(yīng)用舉例

硝苯地平對光穩(wěn)定性研究

第12頁,共33頁，2024年2月25日，星期天硝苯地平對光的穩(wěn)定性第13頁,共33頁，2024年2月25日，星期天硝苯地平的氧化反應(yīng)第14頁,共33頁，2024年2月25日，星期天硝苯地平氧化反應(yīng)TLC檢測第15頁,共33頁，2024年2月25日，星期天脫水反應(yīng)舉例

尼群地平中間體制備第16頁,共33頁，2024年2月25日，星期天TLC方法演示第17頁,共33頁，2024年2月25日，星期天雙異丙酚的氧化純品雙異丙酚是無色液體，在TLC板上展開時如不顯色則看不出，但在點樣原點處將其用氧化劑氧化后生成了玫瑰紅色的醌類物質(zhì)，展開時可見紅色斑點在上行。第18頁,共33頁，2024年2月25日，星期天利用色譜分析圖構(gòu)思分離方法利用GC譜圖研究蒸餾、精餾過程HPLC譜圖與重結(jié)晶、吸附工藝關(guān)系舉例說明利用色譜分析圖構(gòu)思分離方法第19頁,共33頁，2024年2月25日，星期天利用GC譜圖研究蒸餾、精餾過程組分出峰順序及其依據(jù)一、對一般常用的毛細管氣相色譜柱和填充柱來說：各被測定組分主要按照由低到高的沸點順序、由小（大）到大（?。┑臉O性順序依次出峰。二、a.程序升溫情況下，各組分按照由低到高的沸點順序依次出峰。

b.沸點相近的組分，如使用極性柱分離，則按照由小到大的極性順序依次出峰；反之相反。應(yīng)用舉例第20頁,共33頁，2024年2月25日，星期天利用GC譜圖研究蒸餾、精餾過程應(yīng)用舉例(程序升溫)1、氟苯、氯苯、溴苯的分離沸點順序：氟苯＜氯苯＜溴苯GC譜圖第21頁,共33頁，2024年2月25日，星期天利用GC譜圖研究蒸餾、精餾過程2、沸點相近組分的分離a.組分A與B第22頁,共33頁，2024年2月25日，星期天利用GC譜圖研究蒸餾、精餾過程2、沸點相近組分的分離b.組分A與B分離色譜圖（A極性大于B）第23頁,共33頁，2024年2月25日，星期天GC圖譜與蒸餾、精餾的關(guān)系

未知沸點的液體組分分離（程序升溫情況下）當保留時間差（ΔRT）很大時，可直接用蒸餾的方法分離。當保留時間差較小時，只能考慮用精餾的方法分離或分子蒸餾技術(shù)。一條經(jīng)驗：當在HP6890型GC上安裝30M毛細管柱，且當載氣流速為1.6ML/min時，如ΔRT≥1min，則可以用精餾的方法提純組分，理論塔板數(shù)一般小于50；如

ΔRT＜0.5min，則較難用精餾的方法提純。分子蒸餾：高真空較低溫度下，利用液體組分間揮發(fā)時具有的分子平均自由程差進行分離的一種技術(shù)。第24頁,共33頁，2024年2月25日，星期天HPLC譜圖與重結(jié)晶、吸附工藝關(guān)系反相色譜與正相色譜概念1、反相色譜：柱子極性小于流動相2、正相色譜：柱子極性大于流動相出峰順序1、反相色譜：極性大的組分先出峰，小的后出。2、正相色譜：極性小的組分先出峰，大的后出。舉例說明1、硝苯地平（Nifedipine）2、某藥物第25頁,共33頁，2024年2月25日，星期天HPLC譜圖與重結(jié)晶、吸附工藝關(guān)系

舉例說明1（硝苯地平）反相測定HPLC圖顯示極性順序為A＞B＞Nifedipine，雜質(zhì)A、B為致癌物質(zhì)，均不得超過0.2%第26頁,共33頁，2024年2月25日，星期天HPLC譜圖與重結(jié)晶、吸附工藝關(guān)系

舉例說明1（硝苯地平）重結(jié)晶提純工藝設(shè)計1、原重結(jié)晶用溶劑-95%工業(yè)乙醇2、根據(jù)HPLC圖設(shè)計現(xiàn)用重結(jié)晶用溶劑-80%乙醇+1%HOAc（混合溶劑）3、硝苯地平粗品及其雜質(zhì)（B）在兩種溶劑中的溶解度（60℃下測定）

名稱

用量工業(yè)乙醇混合溶劑硝苯地平粗品1g5ml7ml

雜質(zhì)（B）1g6ml2ml第27頁,共33頁，2024年2月25日，星期天HPLC譜圖與重結(jié)晶、吸附工藝關(guān)系

舉例說明1（硝苯地平）

用混合溶劑重結(jié)晶后：收率有所提高，HPLC顯示幾乎全部去掉了雜質(zhì)A及B第28頁,共33頁，2024年2月25日，星期天HPLC譜圖與重結(jié)晶、吸附工藝關(guān)系

舉例說明2（抗高血壓藥）反相測定HPLC圖顯示該產(chǎn)品粗品中主要雜質(zhì)M-IP極性遠小于主物質(zhì)第29頁,共33頁，2024年2月25日，星期天該藥物與主要雜質(zhì)結(jié)構(gòu)分析1.藥物分子結(jié)構(gòu)中含有磺酰氨基，為強極性基團。2.雜質(zhì)分子結(jié)構(gòu)中不含有磺酰氨基。3.除去雜質(zhì)方法：堿溶液處理、過濾、濾液酸處理，過濾、洗滌即可。第30頁,共33頁，2024年2月25日，星期天HPLC譜圖與重結(jié)晶、吸附工藝關(guān)系

舉例說明2（抗高血壓藥）重結(jié)晶：原用變性乙醇重結(jié)晶進一步去除雜質(zhì)，后用正丁醇重結(jié)晶去除雜質(zhì)，效果更好。（因為正丁醇極性小于乙醇）第31頁,共33頁，2024年2月25日，星期天總結(jié)1-相似相溶原理應(yīng)用?。?！在反相HPLC圖中：一般先出峰的組分極性較強，可用極性溶劑重結(jié)晶將其除去。在反相HPLC圖中