動物細胞融合和單克隆抗體終極版

關于動物細胞融合和單克隆抗體終極版動物細胞融合和單克隆抗體第2頁,共27頁，2024年2月25日，星期天一、動物細胞融合（別名：細胞雜交）1.概念：

是指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程。

融合后形成的具有兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞，稱為雜交細胞。第3頁,共27頁，2024年2月25日，星期天2.過程：、動物細胞融合的基本原理是什么？、動物細胞融合的誘導方式是什么？與植物細胞融合的誘導方式有什么不同？第4頁,共27頁，2024年2月25日，星期天不同DNA的兩個細胞融合有絲分裂兩個完整的雜交細胞滅活的病毒？這是什么？？用滅活的病毒誘導動物細胞融合的過程2.過程：第5頁,共27頁，2024年2月25日，星期天⑴.原理：與植物原生質體融合的基本原理相同，即細胞膜的流動性。⑵.誘導方式：物理法：電激、振動、離心化學法：聚乙二醇（PEG）生物法：滅活的病毒例如：仙臺病毒第6頁,共27頁，2024年2月25日，星期天打破生殖隔離，使遠緣雜交成為可能；重要用途：制備單克隆抗體。3.意義和應用：第7頁,共27頁，2024年2月25日，星期天三、單克隆抗體1、抗體是由何種細胞產生的？漿細胞（效應B細胞）2、抗體是如何產生的？B淋巴細胞抗原增殖分化成漿細胞3、一種漿細胞能產生幾種抗體？一種知識回顧第8頁,共27頁，2024年2月25日，星期天思考：1、傳統(tǒng)的方法得到的抗體具有什么特點？特異性差、產量和純度都很低。第9頁,共27頁，2024年2月25日，星期天二、單克隆抗體1.概念：

由單個B淋巴細胞經過無性繁殖（克?。纬苫蛐拖嗤募毎?，這一細胞群所產生的化學性質單一、特異性強的抗體稱為單克隆抗體。

特點：

特異性強、靈敏度高

第10頁,共27頁，2024年2月25日，星期天思考：1、在體外培養(yǎng)的條件下，一個B淋巴細胞有沒有可能無限增殖？不可能2、我們學過的什么細胞具有這樣的能力？癌細胞3、你認為有什么辦法讓B淋巴細胞也具有這樣的能力？細胞融合第11頁,共27頁，2024年2月25日，星期天一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體骨髓瘤細胞（癌細胞）能無限增殖雜種細胞動物細胞培養(yǎng)技術２、實驗原理：動物細胞融合創(chuàng)始人：米爾斯坦單克隆抗體既能產生特異性抗體，又能大量繁殖柯勒第12頁,共27頁，2024年2月25日，星期天2.制備過程：誘導其融合的方法有哪些？融合后培養(yǎng)液中有幾種細胞怎樣篩選出雜交瘤細胞，雜交瘤細胞有何優(yōu)點注射抗原的目的是什么為何要進行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測，多次篩選大量增殖雜交瘤細胞獲得單抗的方法第13頁,共27頁，2024年2月25日，星期天第14頁,共27頁，2024年2月25日，星期天考考你！1.在制備單克隆抗體的過程中，選用哪兩種細胞進行融合？為什么選擇這兩種細胞？漿細胞和骨髓瘤細胞漿細胞能產生單一抗體，但不能無限增殖；骨髓瘤細胞能無限增殖，但不能產生單一抗體。第15頁,共27頁，2024年2月25日，星期天考考你！2、在這過程中進行了幾次篩選？分別在哪個步驟進行篩選？兩次篩選。第一次在B細胞和骨髓瘤細胞融合以后篩選出雜交瘤細胞；第二次在雜交瘤細胞中篩選出能產生所需抗體的雜交瘤細胞。第16頁,共27頁，2024年2月25日，星期天三、單克隆抗體的應用請同學們根據(jù)自己所收集的資料，談談單克隆抗體的應用。１、可用于作為診斷試劑２、可用于疾病治療３、可用于運載藥物（作為運載對應疾病的藥物的“生物導彈“。）“生物導彈”＝單克隆抗體＋藥物第17頁,共27頁，2024年2月25日，星期天小結第18頁,共27頁，2024年2月25日，星期天

細胞骨髓瘤細胞細胞融合

漿篩選

瘤細胞

雜交細胞培養(yǎng)選出能產生特定抗體的細胞群繼續(xù)培養(yǎng)體外培養(yǎng)

體內培養(yǎng)從培養(yǎng)液或小鼠腹水中取出

單克隆抗體第19頁,共27頁，2024年2月25日，星期天練習：1、動物細胞融合和植物原生質體融合比較，在動物細胞融合中有特殊性的是（）A、融合的原理B、融合的優(yōu)點C、融合的誘導手段D、融合的過程第20頁,共27頁，2024年2月25日，星期天練習：2、動物細胞融合的目的中最重要的是（）A、克服遠緣雜交不親和B、制備單克隆抗體C、培育新物種D、生產雜種細胞第21頁,共27頁，2024年2月25日，星期天練習：3、科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交細胞，經培養(yǎng)可產生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細胞融合的是（）A、經過免疫的B淋巴細胞B、不經過免疫的T淋巴細胞C、經過免疫的T淋巴細胞D、不經過免疫的B淋巴細胞第22頁,共27頁，2024年2月25日，星期天練習：4.單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細胞是（）①淋巴細胞②小鼠骨髓瘤細胞③B淋巴細胞自身融

合細胞④小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞

⑤雜交瘤細胞

A．②④B．①③⑤C．①②③④D．②③第23頁,共27頁，2024年2月25日，星期天練習：5、(2006，廣雅中學考題)研究單克隆抗體治療癌癥的思路是（）A．利用單克隆抗體特異性地對抗癌細胞B．以單克隆抗體作抗癌藥物殺死癌細胞C．抗癌物質在克隆細胞中大量合成D．單克隆抗體攜帶抗癌藥物特異性地與癌細胞結合第24頁,共27頁，2024年2月25日，星期天練習：6．只能使動物細胞融合的常用誘導方法（）A．PEG

B．滅活的病毒C．電刺激D．離心7、“生物導彈”是指（）A.單克隆抗體B.雜交瘤細胞C.產生特定抗體的B淋巴細胞D.在單抗上連接抗癌藥物第25頁,共27頁，2024年2月25日，星期天練習：8、（多選）下列關于單克隆抗體的制備和應用的敘述中，正確的是（）A．B淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合，一般不

需要滅活的仙臺病毒或聚乙二醇誘導B．融合后形成的雜交瘤細胞既能無限增殖，又

能產生單克隆抗