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文檔簡介
關(guān)于動物實驗的設(shè)計和實施一.動物實驗設(shè)計的基本原則
1.相似性2.可靠性3.重復(fù)性
4.可控性5.經(jīng)濟性6.倫理性
二.動物實驗課題的設(shè)計
1.實驗動物選擇
2.動物分組原則
三、動物實驗的實施
1、實驗動物的訂購
2、動物實驗基本方法
3、實驗動物安死術(shù)
四.實驗結(jié)果分析與外推第2頁,共63頁,2024年2月25日,星期天生命科學(xué)研究的設(shè)計中遵循的原則
1.相似性(比較醫(yī)學(xué))
為了避免直接在人身上進行實驗,必須在人為設(shè)計的條件下,選擇動物作為人類的替代者。第3頁,共63頁,2024年2月25日,星期天結(jié)論.無論何種動物均與人類不屬同種生物。2.被判為對動物無效的藥物,不等于臨床無效。
設(shè)計的一個重要原則是:所獲結(jié)果應(yīng)盡可能類似于人類的情況。1第4頁,共63頁,2024年2月25日,星期天2.可靠性
課題研究結(jié)果要可靠,就要求使用的動物模型能夠準(zhǔn)確模擬人類的疾病,即可特異地,真實地反映某種疾病或機能、代謝、結(jié)構(gòu)變化,應(yīng)具備該種疾病的主要癥狀和體征,經(jīng)化驗或X光照片,心電圖,病理切片等證實。第5頁,共63頁,2024年2月25日,星期天
要使實驗結(jié)果可靠,就必須使用質(zhì)量符合實驗要求的實驗動物。
如不合格的實驗動物易自發(fā)地出現(xiàn)某些相應(yīng)病變的癥狀,就不應(yīng)選用。
為了確保實驗動物在進行實驗處理后的反應(yīng)可靠性,還要求實驗環(huán)境保持穩(wěn)定,動物實驗設(shè)施符合動物實驗的需要,以及保障實驗人員和環(huán)境免受實驗危害。第6頁,共63頁,2024年2月25日,星期天3.重復(fù)性
科學(xué)與實用、經(jīng)典與創(chuàng)新
科學(xué)研究成果必須能夠重復(fù),所用動物模型應(yīng)能重復(fù)培育,且能實現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化。如用一次定量放血法可導(dǎo)致動物百分之百呈出血性休克,百分之百死亡,這就符合可重復(fù)和達到標(biāo)準(zhǔn)化的要求。第7頁,共63頁,2024年2月25日,星期天但結(jié)扎犬冠狀動脈的后果差異太大,不同犬同一動脈相同部位的結(jié)扎后果無法預(yù)測,不能標(biāo)準(zhǔn)化;
改用實驗小鼠、大鼠、地鼠或豚鼠結(jié)扎冠狀動脈,其結(jié)果就比較一致,可標(biāo)準(zhǔn)化。
用犬做心肌梗死模型應(yīng)較合適,犬的冠狀動脈循環(huán)與人相似,且適宜做暴露心臟的剖胸手術(shù);第8頁,共63頁,2024年2月25日,星期天4.可控性
對動物及其實驗操作過程控制
在課題研究中使用的動物模型應(yīng)考慮到今后臨床應(yīng)用和便于控制其疾病的發(fā)展,以利課題的順利進展。
如雌激素能終止實驗大鼠和小鼠的早期妊娠,但不能終止人的妊娠。
以實驗大鼠或小鼠篩選帶有雌激素活性的藥物時,常發(fā)現(xiàn)這類藥物能終止妊娠,似乎是有效的避孕藥,但用于人類卻不成功。如果已知待測藥物含有雌激素,就不能使用實驗大鼠或小鼠觀察其終止妊娠的作用。第9頁,共63頁,2024年2月25日,星期天
實驗大鼠和小鼠對革蘭氏陰性菌有較強的抵抗力,不宜選用實驗大鼠或小鼠作實驗性腹膜炎動物模型,不容易導(dǎo)致腹膜炎。
有的動物對某些致病因子特別敏感,很難控制,極易死亡,不適宜研究
...
,.如犬腹腔注射糞便濾液引起腹膜炎,有80%在24h內(nèi)死亡;等不及實驗治療觀察;且糞便濾液中細(xì)菌菌株難于控制,不能準(zhǔn)確重復(fù)實驗結(jié)果。第10頁,共63頁,2024年2月25日,星期天5.經(jīng)濟性
經(jīng)費預(yù)算和其他考慮
在設(shè)計和執(zhí)行課題計劃時,對選用的動物和采用的方法應(yīng)符合課題經(jīng)費預(yù)算。
靈長類實驗動物與人類最相似,但其數(shù)量少,價格貴,不宜多用。目前已有為數(shù)眾多的實驗小鼠、大鼠、豚鼠和地鼠能復(fù)制成十分近似人類疾病的動物模型。其年齡、性別、體重等可根據(jù)課題需要而選擇,價格比靈長類動物低,便于飼養(yǎng)管理和實驗操作,可按需使用。第11頁,共63頁,2024年2月25日,星期天6.動物實驗的福利與倫理
使用合格的實驗動物,以減少使用數(shù)量。
根據(jù)動物的習(xí)性,給予適當(dāng)?shù)木幼】臻g,進行科學(xué)的飼養(yǎng)管理。
使用適當(dāng)?shù)穆樗?,減輕動物緊張,最后對動物采用安死術(shù)。
盡可能采用“替代”,包括生命系統(tǒng)和非生命系統(tǒng)的替代。第12頁,共63頁,2024年2月25日,星期天
實驗動物的福利與倫理隨著世界上動物保護主義的興起,而醫(yī)學(xué)生命科學(xué)研究又不得不使用實驗動物的前提下產(chǎn)生的。因此,1959年Russell和Burch發(fā)表的《仁慈的試驗技術(shù)原理》一書中提出的動物實驗應(yīng)采取替代、減少和優(yōu)化原則(即“3R”)被廣大生命科學(xué)工作者所接受。第13頁,共63頁,2024年2月25日,星期天1.替代(replacement)原則:是指在試驗系統(tǒng)中盡可能用低等實驗動物替代高等實驗動物,用離體培養(yǎng)的細(xì)胞、組織、器官替代動物個體,用微生物替代動物,用物理、化學(xué)等非生命系統(tǒng)替代生命系統(tǒng)的實驗,并能獲得相同試驗結(jié)果的科學(xué)方法。2.減少(reduction)原則:是指如果某一研究方案中必須使用實驗動物,同時又沒有可行的替代方法,則應(yīng)通過合理的實驗設(shè)計,把使用動物的數(shù)量降低到實現(xiàn)科研目的最小量,或用較少的動物獲得更多的實驗數(shù)據(jù),或者綜合利用動物。3優(yōu)化(refinement)原則:是指通過改善動物設(shè)施、飼養(yǎng)管理和實驗條件,精選實驗動物、技術(shù)路線和實驗手段,優(yōu)化實驗設(shè)計和實驗操作技術(shù),熟練掌握動物實驗方法,盡量減少實驗過程中對動物機體的損傷,減輕動物遭受的痛苦和應(yīng)激反應(yīng),使動物實驗得出科學(xué)的結(jié)果。第14頁,共63頁,2024年2月25日,星期天違背倫理
把小狗小貓放入微波加熱裝置中,以研究微波加熱引起的傷害與一般發(fā)熱引起傷害的差別,結(jié)果使這些動物在數(shù)十分鐘內(nèi)極其痛苦地死亡。
其他一些實驗手段,如“砸碎”、“冷凍”、“出血”、“壓力或應(yīng)激”、“脊髓損傷”、“剝奪蛋白質(zhì)”等都屬于違背倫理的操作。
在飼養(yǎng)管理和使用實驗動物過程中,要采取有效措施,使實驗動物免遭不必要的傷害、饑渴、不適、驚恐、折磨、疾病和疼痛,保證動物能夠?qū)崿F(xiàn)自然行為,受到良好的管理和照料,為其提供清潔、舒適的生活環(huán)境,提供充足的保證健康的食物、飲水,避免或減輕疼痛和痛苦等。
化妝品公司為了觀察洗發(fā)香波的毒性,把它滴入兔眼,持續(xù)三周觀察兔眼的潰爛情況。兔會發(fā)出慘痛的嘶叫,拼命抓眼,最后雙目失明。第15頁,共63頁,2024年2月25日,星期天二.動物實驗課題的設(shè)計(一)實驗動物選擇
在生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)的研究中,通常以動物作為實驗對象,但由于不同種動物具有不同生物學(xué)特性,即使同品種不同亞系間也存在一定的差異,必須根據(jù)動物實驗課題的要求和目的選擇合適的動物。1.選擇的基本原則1)根據(jù)實驗?zāi)康倪x擇動物2)選擇在結(jié)構(gòu)、機能、代謝以及發(fā)病機理與人相似的實驗動物3)選用解剖、生理上有特點的動物4)選用特殊生理反應(yīng)的動物以符合不同的實驗要求
第16頁,共63頁,2024年2月25日,星期天(1)根據(jù)實驗?zāi)康倪x擇動物
按照實驗?zāi)康暮鸵筮x用合適的實驗動物,是保證實驗研究成功的關(guān)鍵。
各種實驗動物均具有各自生物學(xué)特點,只要選擇恰當(dāng),妥善使用,將能簡化實驗操作,使實驗易于成功。如:犬的甲狀旁腺位于兩個甲狀腺端部的表面,位置比較固定.作甲狀旁腺摘除實驗,應(yīng)選犬而不用兔。兔的甲狀旁腺分布的比較散,位置不固定。甲狀腺摘除實驗要保留甲狀旁腺的功能,就要選兔不選犬。第17頁,共63頁,2024年2月25日,星期天
豬是二十世紀(jì)才開發(fā)的實驗動物。
豬的皮膚在結(jié)構(gòu)上與人皮膚有很多相似點,經(jīng)處理后的豬皮片,常被用作嚴(yán)重?zé)齻∪说倪^度性皮膚。豬的心血管系統(tǒng)與人類也較為接近,尤其是小型豬的開發(fā)成功,為豬的大規(guī)模實驗提供了有利條件兩棲類動物,如蛙類,其大腦很不發(fā)達,但脊髓的發(fā)展已符合實驗要求,達到簡單、直觀、明確、容易分析結(jié)果。第18頁,共63頁,2024年2月25日,星期天(2)選擇在結(jié)構(gòu)、機能、代謝以及發(fā)病機理與人相似的實驗動物
生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究,絕大多數(shù)是利用實驗動物的某些與人類相近似的特性,通過動物實驗,了解人類疾病的發(fā)生、發(fā)展過程,以利解決疾病的預(yù)防和治療。
通常實驗動物愈高等,進化愈完善,其機能、代謝、結(jié)構(gòu)愈復(fù)雜,反應(yīng)就愈近似于人類。
靈長類動物與人在分類學(xué)上地位最相近,是研究人類多種疾病的理想動物;是牙科學(xué),胚胎學(xué),病理學(xué),解剖學(xué),生理學(xué),免疫學(xué)等多種學(xué)科的常用動物;也是研究人類生殖課題的首選動物。第19頁,共63頁,2024年2月25日,星期天如獼猴,其生殖生理與人類非常接近,月經(jīng)周期為28d,是研究人類生殖生理的理想動物。
很多傳染性疾病,有較強感染種屬特異性,如人類乙型肝炎病毒(HBV),在自然情況下只感染人和黑猩猩。靈長類實驗動物價格昂貴,飼育要求高,目前至少有66種靈長類動物被列入瀕危保護動物。若要廣泛地,大量地使用尚有困難。尤其是黑猩猩等,不但數(shù)量有限、實驗操作麻煩;還是瀕危保護動物。第20頁,共63頁,2024年2月25日,星期天動物進化程度越高并不是所有器官和功能都越接近人類
如犬有發(fā)達的血液循環(huán)和神經(jīng)系統(tǒng),以及與人基本相似的消化過程,在毒理學(xué)方面的反應(yīng)與人類比較接近。貓可以耐受麻醉與腦的部分破壞術(shù),其反應(yīng)機能與人相似。豬的皮膚組織學(xué)結(jié)構(gòu)與人相似;豬的心臟瓣膜可以直接植入人體,以修補人的心臟瓣膜之缺陷
近年來,國內(nèi)實驗室研究血脂代謝常用大鼠和小鼠;然而,已有許多證據(jù)表明,大鼠和小鼠血清脂蛋白的構(gòu)成和體內(nèi)脂質(zhì)代謝過程與人類相距甚遠(yuǎn),不能真實反映人類脂代謝狀態(tài)。國際上高脂血癥動物模型趨向于豚鼠和金黃地鼠。第21頁,共63頁,2024年2月25日,星期天脂蛋白在循環(huán)血液中存在形式(%)第22頁,共63頁,2024年2月25日,星期天(3)選用解剖生理上有特點的動物
外科實驗,通常選用體形稍大的、耐受力較強的動物,如大鼠、犬等動物。這將對實驗的成功起著重要的作用。
如:兔頸部的交感神經(jīng)、迷走神經(jīng)和減壓神經(jīng)是單獨平行分布人、犬、貓、豬等減壓神經(jīng)是分布在交感神經(jīng)和迷走神經(jīng)之間,且不易分開;
選用兔觀察減壓神經(jīng)對心臟影響較為合適。第23頁,共63頁,2024年2月25日,星期天
大鼠沒有膽囊,不適合作膽囊功能的研究,適合作膽道插管和收集膽汁實驗。
大鼠、小鼠的性成熟期早,性周期和妊娠期短,產(chǎn)仔數(shù)多,生命周期短,適用于避孕藥物、營養(yǎng)學(xué)、毒理、胚胎學(xué)和致畸等方面的研究。兔耳的動脈和靜脈都較明顯,如需反復(fù)藥物注射和耳靜脈采血,實驗兔是較為理想的選擇。兔和貓是典型的刺激性排卵動物,成年母兔常被作為誘發(fā)排卵觀察和避孕藥物的研究。青紫藍兔的后肢腘部和腹溝股處的淋巴結(jié)較明顯,通常在體表即可觸及到,適合于作淋巴結(jié)內(nèi)注射的免疫性研究。
約有80%的沙鼠左右兩側(cè)大腦血管不相交通;
且排尿量和飲水量極少;適合于作腦血管疾病和腎功能的研究。第24頁,共63頁,2024年2月25日,星期天(4)選用特殊生理反應(yīng)的動物以符合不同的實驗要求
鴿、犬、猴和貓的嘔吐反射十分靈敏,適合于作嘔吐反射試驗;
而嚙齒類動物,尤其是大鼠、小鼠則基本沒有嘔吐反射,故需灌胃的實驗選擇大鼠、小鼠為合適。
兔的體溫變化十分靈敏,適合作熱源試驗。鼠、小鼠體溫調(diào)節(jié)差,不適合作致熱源試驗。豚鼠體內(nèi)缺乏合成維生素C酶,只能從飼料中得以補充。維生素C缺乏1個月后,會出現(xiàn)壞血病當(dāng)?shù)呐R床癥狀,一旦給予補充則癥狀消失。第25頁,共63頁,2024年2月25日,星期天2.動物選擇的一般規(guī)律(1)選擇標(biāo)準(zhǔn)化的實驗動物
(2)年齡和體重
(3)性別
(4)生理狀況
(5)健康狀況
(6)品種、品系
(7)多種動物聯(lián)合使用
第26頁,共63頁,2024年2月25日,星期天(1)選擇標(biāo)準(zhǔn)化的實驗動物
標(biāo)準(zhǔn)化的實驗動物是指遺傳背景清楚,微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)質(zhì)量得到控制,飼養(yǎng)環(huán)境及其飼料營養(yǎng)均符合國家標(biāo)準(zhǔn)的動物。
切忌隨意使用來源不清的實驗動物,進行動物實驗。第27頁,共63頁,2024年2月25日,星期天
應(yīng)根據(jù)研究的目的要求,選用符合實驗動物國家標(biāo)準(zhǔn)的實驗動物。
在微生物學(xué)方面,應(yīng)選用清潔級、無特定病原體動物,或無菌動物等如在遺傳學(xué)方面可選用近交系、封閉群、突變系或雜交F1動物。大、中型實驗動物,如兔、犬、猴等,也應(yīng)選擇無人獸共患疾病和遺傳背景清楚的普通級動物。第28頁,共63頁,2024年2月25日,星期天不同微生物學(xué)等級的
實驗動物比較第29頁,共63頁,2024年2月25日,星期天(2)年齡和體重
在毒理或感染等實驗中,幼齡動物較成年動物敏感;因此,通常選用成年鼠。
在飼育環(huán)境和飼料營養(yǎng)均達標(biāo)的條件下,實驗動物的年齡與體重,基本上成正比。若發(fā)現(xiàn)動物個體間體重超過10%,則該群(組)動物自身存在差異,不宜用作實驗第30頁,共63頁,2024年2月25日,星期天(3)性別
同品種或同品系的不同性別動物,對同一實驗的反應(yīng)有差異。
雌性動物易受性周期、懷孕、哺乳等影響。
通常采用雌雄各半的原則;
。(4)生理狀況雌性動物在妊娠期和哺乳期,以及動物換毛季節(jié)等不適宜作實驗。
(5)健康狀況實驗動物患病時,不可進行實驗,若是大動物,待其康復(fù)后再考慮是否使用;若是小動物予以淘汰。第31頁,共63頁,2024年2月25日,星期天(6)品種、品系
不同品種和品系的實驗動物,具有不同的生物學(xué)特性,對相同試驗會出現(xiàn)不同的反應(yīng)結(jié)果。
如果實驗需要的是近交系動物,而誤用了非近交系動物,實驗將不可能成功。第32頁,共63頁,2024年2月25日,星期天
常用的BALB/c小鼠,已有不少亞系,在不同實驗室制備的鼠原性單克隆抗體的效價差異就很大。
C3H、AKR、NZB、NZW、SHR等均是良好的模型動物,具相應(yīng)的適用范圍,若有選錯,實驗結(jié)果將會令人費解。第33頁,共63頁,2024年2月25日,星期天(7)多種動物聯(lián)合使用
實驗中使用一種動物所獲得的結(jié)果總是有限的,同時使用2種,或2種以上的動物所得的實驗結(jié)果更有利于作出正確的判斷。
在新藥的臨床前研究中,就規(guī)定必須使用一種嚙齒類動物(大鼠),另一種大型動物(犬或猴或小型豬)。第34頁,共63頁,2024年2月25日,星期天(二)動物實驗分組原則
在研究中,對實驗動物的分組應(yīng)按照機遇均等的原則進行,即隨機性原則。
目的是盡量減少干擾因素造成的實驗誤差,不受實驗人員主觀因素,或其它偏性誤差的影響。
隨機化的手段可采用編號卡片抽簽法,隨機數(shù)字表或采用計算機的隨機數(shù)字鍵進行。設(shè)對照組的問題在動物實驗中準(zhǔn)確設(shè)立對照組非常重要,常有忽視或錯誤設(shè)立對照組的情況,導(dǎo)致了實驗失敗。第35頁,共63頁,2024年2月25日,星期天對照方法1.空白對照是在不給任何措施的情況下觀察動物自發(fā)變化的規(guī)律。2.實驗對照是采用與實驗組相同操作條件的對照。3.有效對照在藥物研究中,用已知有效藥物作對照,考核方法可靠性和新藥的有效性。4.配對對照自身對照。(實驗前后或身體兩側(cè)5.交叉對照對照組作為實驗組的重復(fù)。6.實驗重復(fù)和肯定即多種動物的聯(lián)合使用7歷史對照與正常值對照必須非常慎重,否則將會得出不恰當(dāng)甚至錯誤結(jié)論。第36頁,共63頁,2024年2月25日,星期天1、實驗動物的訂購2、動物實驗基本方法3、實驗動物安死術(shù)
三、動物實驗的實施第37頁,共63頁,2024年2月25日,星期天1.實驗動物訂購必須向具有實驗動物生產(chǎn)許可證的單位訂購符合實驗要求的實驗動物實驗動物在運輸過程中,必須符合相應(yīng)的微生物學(xué)等級要求。普通級實驗動物購入后,必須進行健康檢查和隔離檢疫,才能用于實驗。
第38頁,共63頁,2024年2月25日,星期天不同運輸時間對大鼠體重的影響第39頁,共63頁,2024年2月25日,星期天大鼠運輸后血糖和白細(xì)胞的測定結(jié)果第40頁,共63頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24華東師范大學(xué)41(1)實驗動物的保定(2)動物標(biāo)記和除毛法(3)給藥途徑和方法
(4)麻醉和采血技術(shù)2、動物實驗基本方法第41頁,共63頁,2024年2月25日,星期天(1)實驗動物保定
應(yīng)以不使動物產(chǎn)生痛苦、符合生理特性、減少應(yīng)激、便于實驗操作為原則。動作輕緩忌動作突然用力過猛避免抓耳朵呼得應(yīng),抱著走避免驚嚇動物第42頁,共63頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24華東師范大學(xué)43籠號項圈針刺耳記耳環(huán)(牌)芯片
生物染色劑(如:苦味酸的80-90%酒精飽和溶液、堿性品紅、甲基蘭等)
(2)實驗動物標(biāo)記實驗動物除毛法(剪毛,拔毛,脫毛。剃毛)
標(biāo)記號碼清楚、持實驗動物除毛法久、簡便、易認(rèn)和耐久適用。掛牌剪趾剪毛第43頁,共63頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24華東師范大學(xué)44(3)實驗動物給藥方法動物自動攝入(加樣飼料勻質(zhì)化摻入待測物質(zhì)對飼料營養(yǎng)平衡的干擾飼料中待測物質(zhì)與其他成分間可能產(chǎn)生的相互作用)2.灌胃3.注射給藥第44頁,共63頁,2024年2月25日,星期天注射給藥的方法
A.皮內(nèi)注射B.皮下注射C.肌肉注射D.腹腔注射
E.靜脈注射F.腦內(nèi)接種
G.其他接種法第45頁,共63頁,2024年2月25日,星期天A.皮內(nèi)注射對實驗兔和豚鼠,常以其背部或腹部為皮內(nèi)注射部位。如欲觀察動物的皮膚反應(yīng),宜選擇白化的動物或局部為白色處接種。B.皮下注射的部位小鼠的背部;大鼠的背部或側(cè)下腹部;貓,犬的大腿外側(cè)皮下兔在背部或耳根部;豚鼠的大腿內(nèi)側(cè),或小腹部等脂肪少的部位;C.肌肉注射對實驗動物肌肉注射,通常選用的部位為:后肢的股二頭肌和臀部肌肉。注射時應(yīng)避開骨質(zhì)結(jié)構(gòu)、神經(jīng)和血管D.腹腔注射
注射時沿腹白線右側(cè)向左側(cè)約呈450角度進針,應(yīng)避開肝臟、脾臟、腎臟、胃、大小腸、腹膜等臟器,預(yù)防藥液返流第46頁,共63頁,2024年2月25日,星期天E.靜脈注射對家兔靜脈注射,通常在其耳緣靜脈。因一次注射后,注射部位的血管常常形成拴塞,妨礙血液通流,如欲多次注射,應(yīng)先自耳尖部之血管開始注射,逐次下移。F腦內(nèi)接種多在微生物學(xué)動物實驗時應(yīng)用。常用動物為實驗小鼠;實驗兔和豚鼠由于顱骨較硬,需用穿顱鋼錐穿透顱骨,再用注射器針頭刺入腦內(nèi)。
注射速度一定要慢,避免引起顱內(nèi)壓急速升高。.G其他接種法某些科研工作中,也需將接種物劃痕接種于實驗動物的皮膚上;吸入鼻腔;接種于氣管;接種于眼內(nèi)或睪丸內(nèi).做角膜劃痕接種或鼻腔接種常需對動物進行局部麻醉(5%可卡因)或乙醚輕度麻醉。第47頁,共63頁,2024年2月25日,星期天不同種類實驗動物不同給藥方法一次給藥能耐受的最大容量mL第48頁,共63頁,2024年2月25日,星期天(四).采血和麻醉技術(shù)
采血方法的選擇,取決于實驗?zāi)康暮退枰恳约皠游锓N類。
如欲獲取全血,血漿或血球,采血后可注入含抗凝劑的容器內(nèi),或盛有玻璃珠的試管或玻瓶內(nèi);
如欲得清晰的血清,可于早晨未飼喂前采血。第49頁,共63頁,2024年2月25日,星期天采集實驗動物血液的方法第50頁,共63頁,2024年2月25日,星期天實驗動物采血量(ml)第51頁,共63頁,2024年2月25日,星期天(四)、動物麻醉的方法
包括全身麻醉、局部麻醉、針刺麻醉、復(fù)合麻醉、低溫麻醉等,一般實驗常選擇全身麻醉。
第52頁,共63頁,2024年2月25日,星期天.全身麻醉前的準(zhǔn)備麻醉藥物與器械的準(zhǔn)備。準(zhǔn)確計算麻醉藥物的劑量。麻醉中毒解救藥物的準(zhǔn)備。麻醉前禁食:
對大多數(shù)哺乳類實驗動物和鳥類動物,10~12h。反芻類動物中,大體型的成年動物,麻醉前空腹時間達36~48h。第53頁,共63頁,2024年2月25日,星期天.全身麻醉的方法A、吸入麻醉
吸入麻醉的方法是用揮發(fā)性麻醉劑或氣體麻醉劑使動物吸入體內(nèi),達到麻醉的效果。揮發(fā)性麻醉劑常用的有:乙醚、氯仿、氟脘、異氟脘等。氣體麻醉劑常用有環(huán)丙烷、氧化亞氮等;是嚙齒類實驗動物常用的麻醉方法B、非吸入麻醉
通常采用的是注射方法,可經(jīng)靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、腹腔注射等達到麻醉的效果。常用的麻醉藥有戊巴比妥鈉、硫噴妥鈉、水合氯醛、鹽酸氯胺酮等,注射方法和劑量可查表。第54頁,共63頁,2024年2月25日,星期天實驗動物常用麻醉藥的劑量和注射途徑注:I.V.為靜脈內(nèi)注射;I.P.為腹膜內(nèi)注射;I.M.為肌肉注射;S.C.為皮下注射第55頁,共63頁,2024年2月25日,星期天C.局部麻醉
0.5~1%鹽酸普魯卡因,是無刺激性的快速局部麻醉劑;對皮膚和黏膜的穿透力較弱,需注射給藥才能產(chǎn)生局麻作用。注射后1~3min內(nèi)產(chǎn)生麻醉,可維持30~45min。
丁卡因的局麻作用比普魯卡因強10倍,動物吸收后的毒性作用也相應(yīng)加強,能穿透黏膜,作用迅速,1~3
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