臨床微生物學(xué)檢驗（理論）細(xì)菌部分 重點（上篇）

球菌

主要是化膿性細(xì)菌一一能感染人體并引起化膿性炎癥的細(xì)菌

第一節(jié)葡萄球菌屬

分布非常廣泛。病原性葡萄球菌是最常見的化膿性細(xì)菌，醫(yī)務(wù)人員的帶菌率70%vs正常

30%。主要包括三個菌種：金黃色葡萄球菌（s.aureus）、表皮葡萄球菌（s.epidermidis）及腐生

葡萄球菌（s.saprophyticus）。

一、金黃色葡萄球菌

（-）生物學(xué)特性

1、形態(tài)染色：單個菌體呈球形，呈葡萄串狀排列，直徑平均1Um,G+菌，無鞭毛，無芽

酒

2、培養(yǎng)特性：營養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基即可生長，中等大小S型菌落，并因種不同出現(xiàn)

金黃色、白色、檸檬色脂溶性色素，金萄菌溶血毒素在血平板上形成B溶血。

3、生化反應(yīng)：觸酶（+）,致病菌株分解甘露糖。

4、抗原結(jié)構(gòu)

葡萄球菌A蛋白（SPA）、多糖抗原（磷壁酸中的成分）、莢膜抗原

葡萄球菌A蛋白（SPA）：存在于90%以上的金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁表面的一種蛋白質(zhì)，能與

人及多種哺乳動物的IgG分子的Fc段非特異性結(jié)合。功能：具有抗吞噬作用可進(jìn)行協(xié)同凝

集反應(yīng)（coagglutination）,以及免疫熒光、放射免疫和酶聯(lián)免疫技術(shù)中用來替代第二抗體，

促進(jìn)細(xì)胞分裂，與噬菌體吸附呈負(fù)相關(guān)，激活補(bǔ)體途徑。

莢膜：有利于黏附和抗吞噬。

多糖抗原（磷壁酸抗原）：黏附。

5、分類

①依生化反應(yīng)不同分為：金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生性葡萄球菌

②依色素不同分為：金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、檸檬色葡萄球菌

③依是否產(chǎn)生凝固酶分為：+/-

④依噬菌體裂解作用不同分為：4~5群26型

6、抵抗力：是無芽胞菌中抵抗力最強(qiáng)的：干燥膿汁、痰液中存活2~3月；耐熱（60℃lh或

80℃30min才可殺滅）；耐鹽（10%~15%Nacl）；對堿性染料敏感（2%~4%龍膽紫）；對磺

胺和青霉素耐藥（90%金葡）

致病性與免疫性

致病物質(zhì)

1、凝固酶（coagulase）：是指于體外能使含有抗凝劑（枸椽酸鈉或肝素）的人或兔血漿發(fā)生

凝固的酶類。是鑒別葡萄球菌有無致病性的指標(biāo)。（但也有例外）

結(jié)合凝固酶：結(jié)合于菌體表面，其作用是在菌體表面形成纖維蛋臼原受體，當(dāng)細(xì)菌混懸于人

或兔血漿中時，纖維蛋白原與其受體兩者交聯(lián)而使細(xì)菌凝聚。

凝固酶耐熱，100℃,30min,或高壓滅菌仍保持部分活性。易被蛋白酶分解破壞。

功能：阻礙吞噬細(xì)胞對細(xì)菌的吞噬及殺滅作用；纖維蛋白還可沉積在病灶周圍，阻止藥物及

機(jī)體內(nèi)殺菌物質(zhì)與細(xì)菌接觸，利于其繁殖。纖維蛋白的大量形成能限制細(xì)菌擴(kuò)散，并易使局

部毛細(xì)血管栓塞，導(dǎo)致組織壞死，故葡萄球菌引起的化膿感染多為局限性.

決定了金黃色葡萄球菌引起化膿性感染時的感染特點：病灶局限、不易擴(kuò)散、而且膿汁粘稠。

2、葡萄球菌溶血素（staphylolysin）：

性質(zhì)：屬外毒素，血平板菌落周圍產(chǎn)生B溶血環(huán)

分型：分a、6、丫、8、e五型，對人致病的主要有a溶血素，對白細(xì)胞、血小板和多種

組織細(xì)胞有破壞作用，并能引起局部小血管收縮，導(dǎo)致局部組織缺血和壞死。

抗原性：強(qiáng)，經(jīng)甲醛處理可制成類毒素，用與葡萄球菌感染的防治和治療。

溶血機(jī)制：a溶血素對紅細(xì)胞的作用機(jī)制是毒素分子插入細(xì)胞膜疏水區(qū)，破壞膜完整性，造

成細(xì)胞溶解，血紅蛋白外逸。雖非葡萄球菌感染中唯一的毒力因子，但是當(dāng)感染灶形成后是

造成組織病變的重要致病物質(zhì)。

3、殺白細(xì)胞素(panton-valentine,PV)：選擇性地作用于中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，使細(xì)胞破

壞并在抵抗宿主細(xì)胞的吞噬作用、增強(qiáng)本菌侵襲力方面有一定意義。

4、腸毒素(enterotoxin)：部分金葡菌產(chǎn)生，可引起急性胃腸炎。屬外毒素，有多種血清型，

但以A、D型引起的食物中毒多見。是熱穩(wěn)定的單純蛋白，100℃30min仍有活性，且不受

胰蛋白酶的影響，食入后引起急性胃腸炎。作用機(jī)制不明，有超抗原特性，作用部位在中樞

神經(jīng)。

5、表皮剝脫毒素(exfoliativetoxin,exfoliatin)：又稱表皮溶解毒素(epidemolytictoxin)

性質(zhì)：蛋白質(zhì)，有抗原性，可被脫毒稱為類毒素。類別：A型噬菌體編碼耐熱，B型質(zhì)粒編

碼不耐熱。作用：引起葡萄球菌燙傷樣皮膚綜合征(staphylococcalscaldedskin

syndrome,SSSS)

6、毒性休克綜合征-1(toxicshocksyndrometoxin1,TSST-1)：

引起毒性休克綜合征。誘發(fā)休克的機(jī)制：抑制內(nèi)毒素的脫毒或直接損傷肝枯否氏細(xì)胞，使內(nèi)

毒素在體內(nèi)蓄積；刺激枯否氏細(xì)胞等單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)，釋放血管活性物質(zhì)，干擾心血管系

統(tǒng)及血液動力學(xué)；增加毛細(xì)血管通透性，繼而引起心血管功能損傷而導(dǎo)致休克-毒性休克綜

合征(TSS)

7、其它

①耐熱核酸酶(heat-stablenuclease)：致病性葡萄球菌產(chǎn)生，其特點是耐熱，經(jīng)100℃15

分鐘或60℃2小時不被破壞；能較強(qiáng)的降解DNA或RNA。臨床上已將耐熱核酸酶作為測

定葡萄球菌有無致病性的重要指標(biāo)。

②透明質(zhì)酸酶(hyaluronidase)：又稱為擴(kuò)散因子(spreadingfactor),溶解細(xì)胞間質(zhì)中的透明

質(zhì)酸，利于細(xì)菌的擴(kuò)散。90%以上的金黃色葡萄球菌產(chǎn)生此酶。

③脂酶(lipase)：作用為分解血漿和機(jī)體各部位表面的脂肪和油類，細(xì)菌藉以獲得必需營養(yǎng)

從而可定居于分泌脂質(zhì)的部位，故脂酶的產(chǎn)生對細(xì)菌入侵皮膚和皮下組織是很重要的。

所致疾病

1、化膿性感染：

局部性感染：傷口感染、拜、癰、毛囊炎

全身性感染：敗血癥、膿毒血癥

內(nèi)臟器官感染：呼吸道感染、膿胸、心內(nèi)膜炎

假膜性腸炎：菌群失調(diào)后引起的局部炎癥

尿路感染

2、毒素性疾?。菏澄镏卸?、燙傷樣皮膚綜合征、中毒性休克綜合征

免疫性：人體對葡萄球菌感染具有天然免疫力，病后機(jī)體可產(chǎn)生抗體，但維持時間短，可再

次感染

(三)微生物學(xué)檢查

取材：膿汁、血液、可疑食物、嘔吐物、糞便等

直接鏡檢：革蘭染色(Gramstain)

分離培養(yǎng)和鑒定：形態(tài)學(xué)鑒定、抗原性測定、藥敏試驗

血平板上有透明溶血環(huán)，多為金黃色菌落；血漿凝固酶試驗；耐熱核酸酶試驗；厭氧甘露醇

發(fā)酵

腸毒素檢驗：動物實驗、ELISA

致病性葡萄球菌的鑒定依據(jù)：產(chǎn)生血漿凝固酶、耐熱核酸酶、金黃色色素、溶血素、發(fā)酵甘

露醇。

（四）防治

預(yù)防很重要，醫(yī)務(wù)人員的帶菌率高達(dá)70%,是院內(nèi)交叉感染的重要傳染源；注意個人衛(wèi)生;

加強(qiáng)食品衛(wèi)生管理；防止醫(yī)院內(nèi)感染；嚴(yán)防亂用抗生素；藥敏試驗指導(dǎo)下用藥。

二、凝固酶陰性葡萄球菌（coagulasenegativestaphylococcus,CNS）

過去認(rèn)為不致病，但目前已成為醫(yī)源性感染的常見菌，而且耐藥菌株為金葡更為多見。特性:

正常微生物叢；菌群失調(diào)癥、醫(yī)源性感染

CNS十余種與致病有關(guān)，最多是表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌。常引起泌尿系統(tǒng)感染、細(xì)

菌性心內(nèi)膜炎、敗血癥及術(shù)后感染。

第二節(jié)鏈球菌屬（streptococcus）

營養(yǎng)要求高（血液、血清、葡萄糖）；在血清肉湯中易形成長鏈，管底呈絮狀沉淀；在血瓊

脂平板上，形成灰白色，表面光滑，邊緣整齊，直徑0.5~0.7mm的細(xì)小菌落；不同菌株溶血

性不一

一、鏈球菌屬分類

（-）根據(jù)血平板上溶血現(xiàn)象分類

1、甲型溶血性鏈球菌：菌落外卜2mm寬草綠色不完全溶血環(huán)（a溶血），為條件致病菌（肺

炎鏈球菌也是本種溶血）。

2、乙型溶血性鏈球菌：菌落外2~3mm寬透明的完全溶血環(huán)（6溶血），致病力最強(qiáng)。

3、丙型鏈球菌：不溶血，不致病。

（-）根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的分類

細(xì)胞壁多糖抗原一C抗原分群：A、B、C等20群，對人致病的90%屬A群。同一群又分若

干型，如：A群根據(jù)M型抗原分成約100型。

（三）根據(jù)氧的需要分類

需氧鏈球菌及兼性厭氧鏈球菌：致病

厭氧鏈球菌：條件致病菌

傳統(tǒng)分類：A、C、G群B溶血型鏈球菌/B群B溶血型鏈球菌：無乳鏈球菌/a溶血溶血

性鏈球菌：肺炎鏈球菌和草綠色鏈球菌/不溶血D群鏈球菌

二、抗原構(gòu)造

蛋白質(zhì)抗原：又稱表面抗原，為細(xì)胞壁中的蛋白質(zhì)成分，位于多糖抗原的外側(cè)，可分為M、

R、T、S四種，與致病有關(guān)的是M蛋白，它為特異性蛋白，可用于分型。

多糖抗原：又稱C抗原，可用于分群或分族，除甲型鏈球菌外，所有鏈球菌細(xì)胞壁中均有

此抗原，依C抗原的差異，可將鏈球菌分為A、B、C等20個族，對人致病的溶血性鏈球

菌90%屬A族

核蛋白抗原：P抗原，無特異性，與葡萄球菌交叉

三、抵抗力：不強(qiáng)，60℃30分鐘可被殺死，對一般消毒劑及抗菌藥敏感，其中只有糞鏈球

菌的抵抗力較強(qiáng)。

四、致病性與免疫性

（―）致病物質(zhì)

A群鏈球菌（即乙型溶血性鏈球菌）也稱化膿性鏈球菌，或溶血性鏈球菌，是人類鏈球菌中

致病力最強(qiáng)的細(xì)菌，有較強(qiáng)侵襲力。

1、菌體成分

脂磷壁酸(lipoteichoicacid,LTA)：粘附于多種細(xì)胞表面

F蛋白(proteinF):粘附于上皮細(xì)胞表面，

與纖維蛋白原結(jié)合，增強(qiáng)抗吞噬能力

M蛋白(proteinM)：具有抗吞噬細(xì)胞的吞噬和殺菌作用，幫助鏈球菌黏附于上皮細(xì)胞進(jìn)行

繁殖。其產(chǎn)生的抗體對機(jī)體有一定的保護(hù)力。可引起超敏反應(yīng)性疾病。

2、侵襲性酶類

透明質(zhì)酸(hyaluronidase)：可分解細(xì)胞間質(zhì)的透明質(zhì)酸，使細(xì)菌易于組織間擴(kuò)散

璉激酶(streptokinase)：能使血液中的溶纖維蛋白酶原轉(zhuǎn)化成溶纖維蛋白酶，故可溶解血塊

或阻止血漿凝固，有利于細(xì)菌擴(kuò)散

鏈道酶(streptodornase)：又稱鏈球菌DNA酶，能分解膿汁中粘稠的DNA,使膿汁稀薄，

促進(jìn)細(xì)菌擴(kuò)散

膠原酶(collagenase)

3、毒素

鏈球菌溶血素：

①鏈球菌溶血素0(SLO)：A族產(chǎn)生，含-SH的蛋白質(zhì)毒素，對氧敏感，(-SH易被氧化

成-S-S-,失去溶血作用)；抗原性強(qiáng)，刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體持續(xù)時間較長。

②鏈球菌溶血素S(SLS)：是小分子的糖肽，含-S-S-,對氧不敏感(血平板上菌落周圍的

溶血環(huán)由其溶血形成)；無抗原性。

致熱外毒素：由A族產(chǎn)生，不耐熱，抗原性強(qiáng)，又稱紅斑毒素或猩紅熱毒素，有致熱、致

死作用，是引起猩紅熱癥狀的主要毒素。

(-)所致疾病

A群鏈球菌

1、化膿性疾病：丹毒、膿皮病、淋巴組織炎、蜂窩組織炎、癰等；病灶有擴(kuò)散傾向，界限

不清，膿汁稀薄，帶血色，也可引起其它部位的感染。

2、中毒性疾病：猩紅熱

3、超敏反應(yīng)性疾病：急性腎小球腎炎、風(fēng)濕熱

其它鏈球菌感染：甲型鏈球菌一細(xì)菌性心內(nèi)膜炎;變異鏈球菌一踽齒;B族鏈球菌一新

生兒敗血癥、腦膜炎，免疫力低下成人繼發(fā)感染；D族鏈球菌一泌尿系統(tǒng)感染

(三)免疫性：可刺激機(jī)體產(chǎn)生多種抗體，抗M蛋白、致熱外毒素抗體；人體被感染后，

可獲得一定的免疫力，但鏈球菌型別多，可反復(fù)感染。

五、肺炎球菌

屬鏈球菌屬，學(xué)名為肺炎鏈球菌，寄生于上呼吸道，多數(shù)不致病，是大葉性肺炎的病原體

(-)生物學(xué)性狀

G+,有毒株在機(jī)體內(nèi)形成較厚的莢膜，人工培養(yǎng)后消失，具有英膜多糖抗原，營養(yǎng)要求高,

血平板上的菌落與甲鏈的相似

生化反應(yīng)：菊糖發(fā)酵/膽汁溶菌/Optochin敏感試驗

抵抗力：弱，56℃20mins,對一般消毒劑均敏感，有莢膜的菌株抗干燥能力強(qiáng)，無陽光直

射的干痰中可存活1至2年

(-)臨床特征

致病物質(zhì)：脂磷壁酸、莢膜，另外，本菌產(chǎn)生的溶血素、神經(jīng)氨酸酶也有一定的致病作用。

所致疾?。寒?dāng)機(jī)體抵抗力減弱時，寄生在上呼吸道的肺炎球菌可引起大葉性肺炎，肺炎后可

繼發(fā)胸膜炎、膿胸，也可引起中耳炎、腦膜炎和敗血病等。

同型免疫力牢固，因菌型多，故可因再感染其它型菌而患病

(三)防治原則

預(yù)防：多價莢膜多糖菌苗，免疫效果較好

治療：大劑量青霉素或林可霉素治療；肺炎球菌對磺胺易產(chǎn)生耐藥性。

六、微生物學(xué)檢驗

膿汁：直接涂片一局部化膿性疾病/分離培養(yǎng)一全身感染

血清：抗鏈。試驗一超敏反應(yīng)性疾病/血清總補(bǔ)體和C3含量測定

痰標(biāo)本（肺炎鏈球菌）：直接涂片/血平板一菊糖發(fā)酵十、膽汁溶菌+、Optochin敏感試驗

+,動物致病性試驗

（-一）病原學(xué)檢驗

取材：膿汁、穿刺液、咽拭子、血液、等

直接鏡檢：Gramstain/抗原檢測

分離培養(yǎng)和鑒定：

6溶血：觸酶試驗（與金葡相區(qū)別）、桿菌肽敏感試驗（A群）、CAMP試驗（B群）、其它

a溶血：菊糖發(fā)酵/膽汁溶菌/Optochin敏感試驗（肺炎鏈球菌）、VP/胭酶精氨酸等（草

綠色鏈球菌）

Y溶血：膽汁七葉昔試驗（牛鏈球菌）

藥敏試驗

（-）血清學(xué)檢驗

抗“0”試驗（ASOtest）：鏈球菌侵入體內(nèi)產(chǎn)生SLO,刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)抗體ASO,當(dāng)兩

者中和后，在加入SLO乳膠試劑，因病人血清中ASO量很多，未被中和掉的抗體與乳膠

試劑反應(yīng)，產(chǎn)生清晰凝集，為陽性；無凝集，為陰性。

原理：中和試驗/方法：間接凝集/結(jié)果：效價大于400單位

意義：風(fēng)濕熱及其活動性的輔助診斷

七、防治原則

預(yù)防：減少傳染源

治療：積極治療，首選青霉素

第三節(jié)腸球菌屬

原屬D群鏈球菌，為G+球菌，成雙或短鏈狀排列，最適生長溫度35℃,不溶血或a溶血。

如今耐藥菌株增多。

一、菌種與分型

組1：鳥腸球菌、假鳥腸球菌、棉子糖腸球菌、惡臭腸球菌

組2：糞腸球菌、屎腸球菌、卡氏黃色腸球菌、孟氏腸球菌、微黃腸球菌、雞腸球菌

組3：堅韌腸球菌、海瑞腸球菌、不稱腸球菌、糞腸球菌（變異株）

組4：硫黃色腸球菌

致病物質(zhì)：黏附素，細(xì)胞溶素等。

二、病原學(xué)檢查

取材：尿液、膿汁、穿刺液等

直接鏡檢：Gramstain

分離培養(yǎng)和鑒定：丫溶血（不溶血）/6.5%Nacl生長試驗（+）/膽汁七葉昔試驗（+）/PYR（lft

咯烷酮B-蔡基酰胺）水解試驗（+）

藥敏試驗

腸球菌屬是醫(yī)院感染的重要病原菌，引起尿路感染、腹腔盆腔感染、敗血癥等。

三、臨床意義

為消化道、膽道、陰道和下尿道的正常菌群，是醫(yī)院感染的主要病原菌。

對大多數(shù)常用的抗菌藥物如頭硝菌素、青霉素、氨基糖虱類抗生素呈固有耐藥，所致重癥感

染較為難治。常見的感染有尿路感染，腹腔、盆腔的創(chuàng)傷和外科手術(shù)后的感染等。

治療：因其耐藥嚴(yán)重，應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果選擇抗生素。

第四節(jié)奈瑟菌屬（Neisseria）

一、腦膜炎奈瑟菌

（-）生物學(xué)性狀

G-雙球菌，腎形或豆形，似一堆咖啡豆，無鞭毛、芽胞，有菌毛，少數(shù)可見莢膜，常存

在于中性粒細(xì)胞內(nèi)

營養(yǎng)要求極高，需要X、V因子，因而常用巧克力色培養(yǎng)基培養(yǎng)；專性需氧，初次分離時須

供給5%~10%的C02才能良好生長；培養(yǎng)后形成較大的無色透明露滴狀的菌落

抵抗力弱，對干燥、冷熱及紫外線敏感，對常用消毒劑及抗菌素均敏感，可產(chǎn)生自溶酶

（二）臨床特征及其免疫

是流行性腦脊髓膜炎（流腦）的病原菌，正常人帶菌率為5%~10%,發(fā)病率為50%,但由于

血腦屏障的存在，出現(xiàn)癥狀的為少數(shù)。

致病物質(zhì)：菌毛、莢膜、內(nèi)毒素

經(jīng)飛沫傳播，引起流腦。

臨床類型：普通型、爆發(fā)型、敗血癥型。兒童發(fā)病率比成人要高，因血腦屏障發(fā)育不成熟。

免疫力不持久

（三）病原學(xué)檢查

取材：腦脊液、血液等

直接鏡檢：Gramstain/抗原檢測/PCR

分離培養(yǎng)和鑒定（巧克力色平板）：形態(tài)學(xué)鑒定、觸酶試驗（+）、氧化酶試驗（+）、氧化

分解糖類（+）、其它

藥敏試驗

（四）防治原則

兒童要接種流腦莢膜多糖疫苗

發(fā)現(xiàn)患者及時隔離、治療，對患者用青霉素治療或磺胺（能達(dá)到腦脊液，療效更好）

二、淋病奈瑟菌（gonococcus）----淋球菌

（-）生物學(xué)特性

形態(tài)與腦膜炎球菌很相似，有菌毛，無芽胞，無鞭毛，新分離的菌株有莢膜。

培養(yǎng)時營養(yǎng)要求高，也需要巧克力色血平板，抵抗力弱，初次分離也需要5%~10%CO2。

菌毛蛋白抗原、脂寡糖抗原、外膜蛋白抗原

抵抗力極弱

（-）臨床特征

致病物質(zhì)：菌毛、IgA1蛋白酶、外膜蛋白、內(nèi)毒素等。所致疾?。撼扇肆懿　⑿律鷥耗撀?/p>

眼

淋病是世界上發(fā)病率最高的性傳染病，人對淋球菌無自然抵抗力，普遍易感，是唯一宿主。

淋球菌主要經(jīng)性接觸傳播，男性引起尿道炎，女性則引起陰道炎、外陰炎、宮頸糜爛、子宮

內(nèi)膜炎、輸卵管炎及盆腔腹膜炎。

免疫力不持久

（三）病原學(xué)檢查

取材：濃汁、分泌物等

直接鏡檢：Gramstain/抗原檢測/PCR

分離培養(yǎng)和鑒定（巧克力色平板）：

形態(tài)學(xué)鑒定、觸酶試驗（+）、氧化酶試驗（+）、葡萄糖發(fā)酵（+）、其它

藥敏試驗

（四）防治原則

預(yù)防為主，潔身自愛，加強(qiáng)衛(wèi)生宣傳?；颊咭獜氐字委?，首選青霉素，但耐藥菌株日益增多

患淋病的孕婦，分娩后對新生兒要立即用1%硝酸銀滴眼，防止新生兒淋病性結(jié)膜炎（即膿

漏眼）的發(fā)生

腸桿菌科

是一大群寄居于人和動物腸道中的革蘭氏陰性無芽胞桿菌，常隨人與動物糞便排出，廣泛分

布于水、土壤或腐物中。

包括致病性較強(qiáng)、能引起人類傳染病的菌屬：鼠疫耶爾森菌、傷寒沙門菌

引起人類腹瀉和腸道感染的菌屬（四個）：埃希菌屬、志賀菌屬、沙門菌屬、耶爾森菌屬

菌屬埃希氏志賀氏沙門氏

鞭毛+-+

菌毛++-

包膜+(K)++(Vi)

五管糖1?5④1.4+傷1.3.4+

gij1.3.4?

IMViC++-++--+-+

H2S——乙副+

抗原O:H:KO:KO:H:Vi

腸桿菌科的共同特點：

1、形態(tài)與結(jié)構(gòu)：革蘭氏陰性桿菌，多數(shù)有鞭毛，大多有菌毛，少數(shù)有莢膜或包膜，無芽胞。

2、培養(yǎng)特性：需氧或兼性厭氧菌，在普通培養(yǎng)基上生長良好，常用腸道選擇培養(yǎng)基分離培

養(yǎng)。

3、生化反應(yīng)：生化反應(yīng)活潑，乳糖發(fā)酵試驗在初步鑒別腸道致病和非致病菌時有重要意義,

生化反應(yīng)與致病性成反比。

4、Ag構(gòu)造：菌體（O）Ag、鞭毛（H）Ag、表面（K、Vi）Ag、粘附因子（F）Ag

菌體抗原（O）Ag：為細(xì)胞壁的LPS最外側(cè)的重復(fù)寡糖單位，決定0抗原的特異性。

鞭毛抗原（H）Ag：蛋白質(zhì)成分，不耐熱，特異性強(qiáng)；可發(fā)生H-0變異。

莢膜（K/Vi）抗原：如大腸桿菌的K抗原；多糖抗原Vi是K抗原的特殊形式，如傷寒桿

菌，能阻抑。凝集

腸道桿菌共同抗原：抗原決定簇位于LPS的核心多糖上，在細(xì)菌鑒定和分類中有一定的意

義

菌毛（F）抗原：是細(xì)菌表面的黏附結(jié)構(gòu)，能阻斷0凝集

5、變異現(xiàn)象：S-R、H-0、Ag、耐藥性、毒素產(chǎn)生、生化反應(yīng)等

6、傳播方式：污染的飲水及食物、經(jīng)消化道傳播。

7、致病性：菌毛、表面Ag、內(nèi)毒素、腸毒素等，以腸道癥狀為主

8、抵抗力：不強(qiáng)，加熱60℃經(jīng)30分鐘即死亡。

第一節(jié)大腸桿菌(埃希菌屬)

大腸桿菌(E.coli)為埃希氏菌屬(Escherichia)代表菌。一般多不致病，為人和動物腸道中的

常居菌，在一定條件下可引起腸道外感染。某些血清型菌株的致病性強(qiáng)，引起腹瀉，統(tǒng)稱病

致病大腸桿菌。

非致病性大腸桿菌

生理學(xué)意義：刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)；為機(jī)體提供營養(yǎng)成分；構(gòu)成機(jī)體腸道的生物屏障；

可作為水源是否被污染的依據(jù)：

我國飲水；細(xì)菌總數(shù)W100個/ml,大腸菌群數(shù)W3個/L;

飲料?：細(xì)菌總數(shù)W100個/ml,大腸菌群數(shù)W5個/100ml。

一、生物學(xué)性狀

1、形態(tài)與染色：革蘭氏陰性桿菌，大小(0.4?0.7)X(1?3)utn,大多數(shù)菌株有動力，有普

通菌毛與性菌毛，有些菌株有多糖類包膜，無芽胞。

2、培養(yǎng)特性：在血瓊脂平板上，有些菌株B溶血。在SS或CB選擇性培養(yǎng)基上形成有顏色、

直徑2?3mm的光滑型菌落。

3、生化反應(yīng)：大部分菌株發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，IMViC試驗為，即為大腸菌群。

4、抗原

構(gòu)造較復(fù)雜，有0、K、H、F四種抗原。表示大腸桿菌血清型的方式是按O：K：H排列，

例如Olll:K58:H2o

O抗原為脂多糖，H鞭毛抗原

K抗原為莢膜脂多糖抗原。從病人新分離的大腸桿菌多有K抗原，有抗吞噬和補(bǔ)體殺菌作

用。

F抗原至少有5種，與大腸桿菌的粘附作用有關(guān)。

5、抵抗力：該菌對熱的抵抗力較其他腸道桿菌強(qiáng)，

55℃經(jīng)60分鐘或60℃加熱15分鐘仍有部分細(xì)菌存活。在自然界的水中可存活數(shù)周至數(shù)月，

在溫度較低的糞便中存活更久。膽鹽、煌綠等對大腸桿菌有抑制作用。對磺胺類、鏈霉素、

氯霉素等敏感，但易耐藥，是由帶有R因子的質(zhì)粒轉(zhuǎn)移而獲得的。

二、致病性

(一)致病物質(zhì)

1.定居因子(Colonizationfactor,CF)：也稱粘附素(Adhesin),即大腸桿菌的菌毛。致病大

腸桿菌須先粘附于宿主腸壁，以免被腸蠕動和腸分泌液清除。定居因子具有較強(qiáng)的免疫原性,

能刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體。

2、腸毒素：外毒素只有腸產(chǎn)毒性大腸桿菌產(chǎn)生：

(1)不耐熱腸毒素(Heatlabileenterotoxin,LT)：對熱不穩(wěn)定，65℃經(jīng)30分鐘即失活。為

蛋白質(zhì)，有免疫原性。由A、B兩個亞單位組成。LT的免疫原性與霍亂弧菌腸毒素相似，

兩者的抗血清交叉中和作用。

B亞單位：與小腸粘膜上皮細(xì)胞膜表面的GM1神經(jīng)節(jié)背脂受體結(jié)合

A亞單位為毒性亞單位，A1毒性成分進(jìn)入細(xì)胞與結(jié)合cAMP,細(xì)胞主動分泌Na+、K+、碳

酸和水，導(dǎo)致嚴(yán)重嘔吐和腹瀉。

(2)耐熱腸毒素(Heatstableenterotoxin,ST)：對熱穩(wěn)定，100C經(jīng)20分鐘仍不被破壞，免

疫原性弱。ST可激活小腸上皮細(xì)胞的鳥甘酸環(huán)化酶，使胞內(nèi)cGMP增加，在空腸部分改變

液體的運(yùn)轉(zhuǎn)，使腸腔積液而引起腹瀉。

ST與霍亂毒素?zé)o共同的抗原關(guān)系。

3、其他：胞壁脂多糖的類脂A具有毒性。O特異多糖有抵抗宿主防御屏障的作用。大腸桿

菌的K抗原有吞噬作用。

(二)所致疾?。?/p>

1、腸道外感染：多為內(nèi)源性感染，泌尿系感染為主，如尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎、上行

性尿道感染多見于已婚婦女。也可引起腹膜炎、膽囊炎、闌尾炎等。

嬰兒、年老體弱、慢性消耗性疾病、大面積燒傷患者，大腸桿菌可侵入血流，引起敗血癥。

早產(chǎn)兒，尤其是生后30天內(nèi)的新生兒，易患大腸桿菌性腦膜炎。

2、腸道感染：ETECsEPEC、EIEC、EHEC、EAEC

①腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(EnterotoxigenicE.coli,ETEC)

引起嬰幼兒和旅游者腹瀉，出現(xiàn)輕度腹瀉，也可呈嚴(yán)重的霍亂樣癥狀即大量的米汨水樣便。

腹瀉常為自限性，一般2?3天即愈。營養(yǎng)不良者可達(dá)數(shù)周，也可反復(fù)發(fā)作。

致病因素是LT或ST,或兩者同時致病。有些菌株具有定居因子，常見者為06：K15：H16、

025：K7：H42。鑒定ETEC主要測定大腸桿菌腸毒素，血清型有一定參考意義。

②腸致病性大腸桿菌(EnteropathogenicE.coli,EPEC):

是嬰兒腹瀉的主要病原菌，有高度傳染性，嚴(yán)重者可致死；成人少見。細(xì)菌侵入腸道后，主

要在小腸大量繁殖。發(fā)熱、惡心、嘔吐、非血性便。

切片標(biāo)本中可見細(xì)菌粘附于絨毛，導(dǎo)致刷狀緣破壞、絨毛萎縮、上皮細(xì)胞排列紊亂和功能受

損，造成嚴(yán)重腹瀉，作用與志賀氏毒素相似，具有神經(jīng)毒素、細(xì)胞毒素和腸毒素性。鑒定EPEC

可根據(jù)臨床表現(xiàn)與血清型。

③腸侵襲性大腸桿菌(EnteroinvasiveE.coli,EIEC)：為糞一口途徑感染，與菌痢的發(fā)病機(jī)理

相似，臨床癥狀也類于菌痢即里急后重，且無動力故易誤診為細(xì)菌性痢疾?？績?nèi)毒素與定

居因子致病。

④腸出血性大腸桿菌(EnterohemorrhagicE.coli,EHEC)：引起散發(fā)性或暴發(fā)性出血性結(jié)腸炎，

可產(chǎn)生志賀氏毒素樣細(xì)胞毒素。EHC0的主要菌型是0157：H7,還可有026、0IH等。

⑤腸集聚性大腸桿菌(EnteroaggregativeE.coli,EAEC)：引起嬰兒持續(xù)性腹瀉，脫水，偶有

血便，不侵襲細(xì)胞。毒素為腸集聚耐熱毒素(enteroaggregativeheal-stabletoxin,EAST)；另

一類毒素似大腸埃希菌的a溶血素。

三、微生物學(xué)檢查法

(-)細(xì)菌的分離與鑒定

1.標(biāo)本：血液、膿液、腦脊液等，腹瀉者取糞便。

2.分離培養(yǎng)與鑒定：糞便標(biāo)本直接接種腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基(SS瓊脂)。血液需先經(jīng)肉湯

增菌，再轉(zhuǎn)種血瓊脂平板。采用一系列生化反應(yīng)進(jìn)行鑒定。腸致病性大腸桿菌須先作血清學(xué)

定型試驗。必要時檢定腸霉毒素。

(二)衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查

大腸桿菌不斷隨糞便排出體外，污染周圍環(huán)境和水源、食品等。取樣檢查時，樣品中大腸桿

菌越多，表示樣品被糞便污染越嚴(yán)重，也表明樣品中存在腸道致病菌的可能性越大。故應(yīng)對

飲水、食品、飲料進(jìn)行衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查。

1.細(xì)菌總數(shù)：檢測每毫升或每克樣品中所含細(xì)菌數(shù)，采用傾注培養(yǎng)計算。我國規(guī)定的衛(wèi)生

標(biāo)準(zhǔn)是每毫升飲水中細(xì)菌總數(shù)不得超過100個。

2.大腸菌數(shù)指數(shù)：指每立升中大腸菌群數(shù)，采用乳糖發(fā)酵法檢測。我國的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)是每

1000ml飲水中不得超過3個大腸菌群；瓶裝汽水、果汁等每100ml大腸菌群不得超過5個。

四、防治原則

在腸產(chǎn)毒性大腸桿菌的免疫預(yù)防研究中，發(fā)現(xiàn)其菌毛抗原在自然感染和人工自動免疫中是一

種關(guān)鍵性抗原。

治療可選用慶大霉素、丁胺卡那霉素等。

第二節(jié)志賀菌屬(痢疾桿菌)

志賀氏菌屬(Shigella)是一類革蘭氏陰性桿菌，是人類細(xì)菌性痢疾最為常見的病原菌，通

稱痢疾桿菌。

一、生物學(xué)性狀

1、形態(tài)與染色：大小為(0.5~0.7)X(2~3)um,無芽胞，無莢膜,無鞭毛。多數(shù)有菌

毛。革蘭氏陰性桿菌。

2、培養(yǎng)特性：為兼性厭氧菌，能在普通培養(yǎng)基上生長，形成中等大小，半透明的光滑型菌

落。在腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基上形成無色菌落。

3、生化反應(yīng)：分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。VP試驗陰性，不分解尿素，不形成硫化氫，不能

利用枸椽酸鹽作為碳源。宋內(nèi)氏志賀氏菌能遲緩發(fā)酵乳糖(37℃3?4天)。

4、抗原構(gòu)造與分類：有K和0抗原。

K抗原在血清學(xué)分型上無意義，但可阻止0抗原與相應(yīng)抗血清的凝集反應(yīng)。

0抗原分為群特異性抗原和型特異性抗原，根據(jù)志賀氏菌抗原構(gòu)造的不同，可分為四群48

個血清型(包括亞型)

5、分類

A群：又稱痢疾志賀氏菌(Sh.dysenteriae),通稱志賀氏痢疾桿菌。

B群：又稱福氏志賀氏菌(Sh.flexneri),通稱福氏痢疾桿菌。

C群：又稱鮑氏志賀氏菌(Sh.boydii),通稱鮑氏痢疾桿菌。

D群：又稱宋內(nèi)氏志賀氏菌(Sh.sonnei),通稱宋內(nèi)氏痢疾桿菌。

根據(jù)志賀氏菌的菌型分布調(diào)查，我國一些主要城市在過去二、三十年中均以福氏菌為主。其

次為宋內(nèi)氏菌；志賀氏菌與鮑氏菌則較少見。但近年來，志賀氏菌I型的細(xì)菌性痢疾已發(fā)

展為世界性流行趨勢。

了解菌群分布與菌型變遷情況，對制備菌苗，預(yù)防菌痢具有重大意義。

6、抵抗力：本菌對理化因素的抵抗力較其他腸道桿菌為弱。

不耐熱，一般56?60°C經(jīng)10分鐘即被殺死。較耐寒，在冰塊中存活96天。對化學(xué)消毒劑

敏感，1%石碳酸15?30分鐘死亡。

7、變異：

①S-R型變異：當(dāng)菌落變異時，常伴有生化反應(yīng)、抗原構(gòu)造和致病性(毒到無毒)的改變。

②耐藥性變異：由于廣泛使抗生素，志賀氏菌的耐藥菌株不斷增加，給防治工作帶來多困難。

③營養(yǎng)缺陷型變異：南斯拉夫Mel(1963年)首創(chuàng)的依賴鏈霉素的志賀氏菌株(依鏈株，

Sd),作為口服菌苗可預(yù)防志賀氏菌痢疾。

二、致病性與免疫性

(―)致病物質(zhì)

1、侵襲力：志賀氏菌的菌毛能粘附于回腸末端和結(jié)腸粘膜的上皮細(xì)胞表面，繼而在侵襲蛋

白作用下穿入上皮細(xì)胞內(nèi)，一般在粘膜固有層繁殖形成感染灶。

2、內(nèi)毒素：各型痢疾桿菌都具有強(qiáng)烈的內(nèi)毒素。

內(nèi)毒素作用于腸壁，使其通透性增高，促進(jìn)內(nèi)毒素吸收，引起發(fā)熱，神志障礙，甚至中毒性

休克等。內(nèi)毒素能破壞粘膜，形成炎癥、潰湯，出現(xiàn)典型的膿血粘液便。

內(nèi)毒素還作用于腸壁植物神經(jīng)系統(tǒng)，至腸功能紊亂、腸蠕動失調(diào)和氫攣，尤其直腸括約肌痙

攣最為明顯，出現(xiàn)腹痛、里急后重(頻繁便意)等癥狀。

4、外毒素：志賀氏菌還可產(chǎn)生外毒素，稱志賀氏毒素。為蛋白質(zhì)，不耐熱，75?80℃1小

時被破壞。該毒素具有三種生物活性：①神經(jīng)毒性，作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，引起四肢麻痹、

死亡；②細(xì)胞毒性，對人肝細(xì)胞、猴腎細(xì)胞和HeLa細(xì)胞均有毒性；③腸毒性，具有類似大

腸桿菌、霍亂弧菌腸毒素的活性，可以解釋疾病早期出現(xiàn)的水樣腹瀉。

（二）所致疾病

細(xì)菌性痢疾是最常見的腸道傳染病，夏秋兩季患者最多。人類對志賀氏菌易感，10?200個

細(xì)菌可使10?50%志愿者致病。傳染源為病人和帶菌者，糞口途徑傳播，潛伏期1?3天。

1、急性細(xì)菌性痢疾：發(fā)病急，常在腹痛、腹瀉未出現(xiàn)，呈現(xiàn)嚴(yán)重的全身中毒癥狀。

2、慢性細(xì)菌性痢疾：急性菌痢治療不徹底，或機(jī)體抵抗力低、營養(yǎng)不良或伴有其他慢性病

時，易轉(zhuǎn)為慢性，病程多在二個月以上。部分患者可成為帶菌者，帶菌者不能從事飲食業(yè)、

炊事及保育工作。

3、急性中毒型菌?。阂孕憾嘁?，在消化道癥狀未出現(xiàn)前，內(nèi)毒素從腸道吸收入血，引起

全身嚴(yán)重的中毒癥狀，高熱、休克、昏迷、呼吸衰竭。死亡率高。

（三）免疫性

病后免疫力不牢固，機(jī)體對菌痢的免疫主要依靠腸道的局部免疫，即腸道粘膜細(xì)胞吞噬能力

的增強(qiáng)和SlgA的作用。SIgA可阻止痢疾桿菌粘附到腸粘膜上皮細(xì)胞表面，病后三天左右即

出現(xiàn)，但維持時間短，由于痢疾桿菌不侵入血液，故血清型抗體（IgM、IgG）不能發(fā)揮作

用。

三、微生物學(xué)檢查與防治

1、標(biāo)本：糞便

2、分離培養(yǎng)與鑒定

3、快速診斷法：熒光菌球法/協(xié)同凝集試驗

四、防治原則

特異性預(yù)防主要采用口服減毒活菌苗，近年試用者有Sd株、神氏2a變異株等。但免疫力

弱，維持時間短，故大規(guī)模應(yīng)用還受一定限制。

治療可用磺胺類藥、氨茉青霉素、氯霉素、黃連素等。中藥黃連、黃柏、白頭翁、馬齒寬等

均有療效。

第三節(jié)沙門菌屬

是腸桿菌科中最復(fù)雜的菌屬，有2000種以上血清型。根據(jù)其對宿主的致病性，可分為三類:

①對人致??；②對人和動物均致??；③對動物致病。

對人類有致病性的：

腸熱癥一一傷寒沙門菌，甲型副傷寒沙門菌、肖氏沙門菌、希氏沙門菌

食物中毒一一鼠傷寒沙門菌、豬霍亂沙門菌、腸炎沙門菌

敗血癥一一豬霍亂沙門菌最常見

一、生物學(xué)性狀

1、形態(tài)與染色：大?。?.6~1.0）X（2?3）um,無芽胞，一般有鞭毛，無莢膜，多數(shù)有

菌毛，革蘭氏陰性桿菌。

2、培養(yǎng)特性：兼性厭氧菌，在普通瓊脂平板上形成中等大小、半透明的S型菌落。在腸道

桿菌選擇性培養(yǎng)基上形成無色菌落。

3、生化反應(yīng)：

大多產(chǎn)生硫化氫。五管糖試驗：不發(fā)酵2、5,發(fā)酵1、3、4,

除傷寒桿菌產(chǎn)酸不產(chǎn)氣外，其他沙門氏菌均產(chǎn)酸產(chǎn)氣。

4、抗原構(gòu)造與分類

主要有O和H兩種抗原。少數(shù)菌具有表面抗原，功能與大腸桿菌的K抗原相似，一般認(rèn)為

與毒力有關(guān)，故稱Vi抗原。

①O抗原：特異性多糖抗原，分組的依據(jù)，42組人~2,刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生IgM抗體，

將菌液用乙醇或加熱處理來制備O抗原。

②H抗原：蛋白質(zhì)性質(zhì)；同一組的沙門氏菌按照H抗原的不同分為不同的種和型;刺激機(jī)體

免疫系統(tǒng)產(chǎn)生IgG抗體;將菌液用甲醛處理來制備H抗原；

③Vi抗原：新分離的沙門氏菌有此抗原，不穩(wěn)定加熱或石炭酸或在人工培養(yǎng)基上消失；阻

抑。凝集現(xiàn)象；刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體，為帶菌免疫利于帶菌者的檢出。

5、噬菌體分型：有些沙門氏菌在血清學(xué)分型的基礎(chǔ)上，可借噬菌體進(jìn)一步分型。分為96

個噬菌體型。我國常見者有12個型。傷寒桿菌的噬菌體分型在追蹤傳染源及發(fā)現(xiàn)新型菌株

上有實際意義。

6、抵抗力：不強(qiáng)。對熱抵抗力不強(qiáng)，60℃1小時或65℃經(jīng)15?20分鐘可被殺死。在水中

能存活2?3周，類便中可活1?2個月，可在冰凍土壤中過冬。膽鹽、煌綠等對本屬細(xì)菌的

抑制作用較對其他腸道桿菌為小，故可用其制備腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基，利于分離糞便中的

沙門氏菌。

7、變異

①H-0變異：有鞭毛的沙門氏菌失去鞭毛的變異

②S-R變異：失去O抗原變?yōu)镽型菌落，細(xì)菌的毒力也隨之消失。是第1相、部分是第2

相的不同菌落。

③V-W變異：指有Vi抗原的菌株（V型）失去Vi抗原（W型），即細(xì)菌與抗O血清凝集

而不再與抗Vi血清凝集，稱為V-W變異。

④位相變異：將具有第1相和第2相H抗原的沙門氏桿菌接種于瓊脂平板上，所得單個菌

落，有些是第1相，有些是第2相。如任意挑選一個菌落（第1相或第2相），在培養(yǎng)基上

多次移種后，其后代又出現(xiàn)部分是第1相，有些是第2相。

二、致病性與免疫性

（―）致病物質(zhì)

1.侵襲力：沙門氏桿菌侵入小腸粘膜上皮細(xì)胞，穿過上皮細(xì)胞層到達(dá)上皮下組織。細(xì)菌雖

被細(xì)胞吞噬，但不被殺滅，并在其中繼續(xù)生長繁殖。菌毛的粘附作用也是細(xì)菌侵襲力的一個

因素。

2.內(nèi)毒素：引起發(fā)熱、白細(xì)胞減少。大劑量時可發(fā)生中毒性休克

3.腸毒素：有些沙門氏桿菌，如鼠傷寒桿菌可產(chǎn)生腸毒素，性質(zhì)類似腸產(chǎn)毒性大腸桿菌的

腸毒素。

（-）人類的沙門氏菌病

1、腸熱癥：是傷寒病和副傷寒病的總稱，主要由傷寒桿菌和甲、乙、丙型副傷寒桿菌引起。

細(xì)菌在腸系膜淋巴結(jié)及其他淋巴組織中繁殖，經(jīng)胸導(dǎo)管進(jìn)入血流，引起第一次菌血癥。第1

周，稱前驅(qū)期。

細(xì)菌隨血流至骨髓、肝、脾、腎、膽囊、皮膚等并在其中繁殖，再次進(jìn)入血流，引起第二次

菌血癥。第2?3周，部分病例皮膚出現(xiàn)玫瑰疹。

部分菌可再次侵入腸壁淋巴組織，出現(xiàn)超敏反應(yīng)，第4周進(jìn)入恢復(fù)期，患者逐漸康復(fù)。

典型傷寒的病程約3?4周。病愈后部分患者可自糞便或尿液繼續(xù)排菌3周至3個月，稱恢

復(fù)期帶菌者。約有3%的傷寒患者成為慢性帶菌者。

副傷寒病與傷寒病癥狀相似，但一般較輕，病程較短，約1?3周即愈。

2、急性胃腸炎（食物中毒）：是最常見的沙門氏桿菌感染。多由鼠傷寒桿菌、豬霍亂桿菌、

腸炎桿菌等引起。系因食入未煮熟的病畜病禽的肉類、蛋類而發(fā)病。潛伏期短，病程較短，

一般2?4天內(nèi)可完全恢復(fù)。

3、敗血癥：常由豬霍亂桿菌、丙型副傷寒桿菌、鼠傷寒桿菌、腸炎桿菌等引起。病菌進(jìn)入

腸道后，迅速侵入血流，導(dǎo)致組織器官感染，如腦膜炎、骨髓炎、膽囊炎、腎盂腎炎、心內(nèi)

膜炎等。出現(xiàn)高熱、寒戰(zhàn)、厭食、貧血等。

(三)免疫性

傷寒或副傷寒病后有牢固的免疫性，很少再感染。主要依靠細(xì)胞免疫。

體液免疫方面，局部抗體較重要，尤其是SlgA具有特異性防止傷寒桿菌粘附于腸粘膜表面

的能力。有菌免疫。

三、微生物學(xué)檢查與防治

(-)分離培養(yǎng)與鑒定

標(biāo)本的采?。?周，靜脈血/全程可采骨髓液/2周起，糞便尿液

腸炎型：糞便嘔吐物可疑食物

敗血癥：血液

(二)血清學(xué)試驗

肥達(dá)反應(yīng)(Widaltest)：用傷寒桿菌O抗原和傷寒桿菌、甲/乙型副傷寒桿菌的H抗原與待

檢血作定量凝集試驗。根據(jù)抗體含量多少及其增長情況，輔助臨床診斷腸熱癥。

判定結(jié)果時必須考慮下述情況：021:80感染急性期/H2L160確定感染細(xì)菌；

1、正?？贵w水平：正常人因隱性感染或預(yù)防接種，血清中可含有一定量抗體，其效價隨各

地區(qū)情況而不同.一般說來，0凝集價21:80、H凝集價21:160時才有診斷價值。

2、動態(tài)觀察：判斷肥達(dá)氏反應(yīng)結(jié)果須結(jié)合臨床癥狀、病期等。單次凝集效價增高，有時不

能定論。如間隔數(shù)天重復(fù)采用，若效價隨病程延長而逐漸上升4倍以上，有診斷意義。

3、O/H抗體在診斷上的意義

①若H、O凝集效價均超過正常值，則感染傷寒、副傷寒的可能性大；

②H與O效價均低，則患腸熱癥的可能性甚小；

③若H效價高而O不高，可能系預(yù)防接種或非特異性回憶反應(yīng)；

④如O效價高而H不高，可能是感染早期或其他沙門氏菌感染。

4、其他：少數(shù)病例在整個病程中，肥達(dá)氏試驗始終呈陰性?？赡苁牵孩侔l(fā)病早期曾用大量

或多種抗生素治療；②患者免疫功能低下。故本試驗陰性時，不宜匆忙地否定診斷。

四、防治

采用皮下多次接種死菌苗，雖有一定的保護(hù)作用，但常引起局部和全身反應(yīng)。

可采用氯霉素、氨茉青霉素、羥氨革青霉素等，中藥白花蛇舌草，穿心蓮等有效。

第四節(jié)其他菌屬

(-)克雷伯菌屬：克雷伯菌屬屬腸桿菌科，其代表是肺炎桿菌，即肺炎克雷伯菌(K.

peneumoniae)

灰白色粘液菌落，以接種環(huán)挑之，易拉成絲，有助鑒別。本菌存在于人體腸道、呼吸道。

可引起支氣管炎、肺炎，泌尿系和創(chuàng)傷感染，甚至敗血癥、腦膜炎、腹膜炎等。

1、形態(tài)結(jié)構(gòu)：肺炎克雷伯菌為革蘭陰性桿菌，無鞭毛，無芽泡，患者標(biāo)本直接涂片或在營

養(yǎng)豐富培養(yǎng)基上的培養(yǎng)物可見菌體外有明顯的莢膜。

2、培養(yǎng)特性：兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高，在初次分離培養(yǎng)基可形成較大、凸起灰白色黏液

型的菌落。菌落大而厚實、光亮，相鄰菌落容易發(fā)生融合。在MAC培養(yǎng)基上發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸,

形成較大的黏液型、紅色的菌落，紅色可擴(kuò)散至菌落周圍的培養(yǎng)基中。用接種針沾取時可挑

出長絲狀細(xì)絲。

3、臨床意義：克雷伯菌屬的細(xì)菌多感染免疫力低下的人群，是醫(yī)院感染中最重要的條件致

病菌。所致疾?。悍窝?、腦膜炎、腹膜炎、泌尿系統(tǒng)感染、敗血癥

肺炎克雷伯菌是臨床標(biāo)本中常見的細(xì)菌，可引起典型的原發(fā)性肺炎。該菌在正常人口咽部的

帶菌率為1%?6%,在住院患者中可高達(dá)20%,是酒精中毒者、糖尿病和慢性阻塞性肺部疾

病患者并發(fā)肺部感染的潛在的危險因素。

肺炎克雷伯菌肺炎亞種還能引起各種肺外感染，包括腸炎和腦膜炎（嬰兒），泌尿道感染（兒

童和成人）及菌血癥。

近年在一些亞洲地區(qū)（特別是臺灣和韓國）由肺炎克雷伯菌引起的肝膿腫等嚴(yán)重社區(qū)獲得性

侵襲性感染有上升的趨勢。

4、鑒定：

（1）屬的鑒定：動力陰性，鳥氨酸脫竣酶陰性（解鳥氨酸勞特菌陽性），

（2）種的鑒定：肺炎克雷伯菌"引躲陰性，而產(chǎn)酸克雷伯菌口引跺陽性

（二）變形桿菌（Proteusspecies）

廣泛存在于水、土壤腐敗的有機(jī)物以及人和動物的腸道中，為條件致病菌，多為繼發(fā)感染，

如慢性中耳炎、創(chuàng)傷感染等，也可引起膀胱炎、嬰兒腹瀉、食物中毒等。

1、生物學(xué)性狀：

革蘭氏陰性菌，呈多形性，周鞭毛菌，運(yùn)動活潑。在固體培養(yǎng)基上呈擴(kuò)散生長，形成遷徙生

長現(xiàn)象（見不到單個菌落）。若在培養(yǎng)基中加入0.1%石碳酸或0.4%硼酸可以抑制其擴(kuò)散生

長，形成單個菌落，即發(fā)生H-0變異。

生化反應(yīng)：葡萄糖+,乳糖一，快速分解尿素

2、外斐試驗：此屬細(xì)菌X19、XK、X2菌株的0抗原與某些立克次體的部分抗原有交叉，

可替代立克次體抗原與患者血清作凝集反應(yīng)，此反應(yīng)稱為外斐試驗（Weil-Felixtest）,用于

某些立克次體病的輔助診斷。

KIAMIU苯

甲基紅枸檬酸丙

菌種

斜面底層產(chǎn)氣硫化氫動力口僻腺酶（Mr）鹽（C）氨

酸

大腸埃希菌AA+-++-+--

福氏志賀菌KA?/+--+/?-+/---

宋內(nèi)氏志賀菌KA-/+----+/---

傷寒沙門氏菌KA-+/-+--4-+/?-

甲型副傷寒菌KA+-/++--+--

乙型副傷寒菌KA+++--++-

肺炎克雷伯菌AA+---+-+-

變形桿菌KA+++++++/-+

弧菌屬

弧菌屬（Vibrio）為一大群菌體短小，彎曲成弧，G-單毛菌，運(yùn)動極活潑，分布廣泛，多存

在于水中，對人有致病性主要為霍亂弧菌和副溶血弧菌.

共同特征

為革蘭陰性菌，彎曲成弧形或直桿狀，具有一端單一鞭毛，運(yùn)動迅速

兼性厭氧，發(fā)酵利用葡萄糖，氧化酶+（除麥?zhǔn)匣【猓?/p>

對弧菌抑制劑0/129敏感，鈉離子能刺激其生長，除霍亂弧菌和擬態(tài)弧菌外其他菌種為嗜鹽

菌

第一節(jié)霍亂弧菌

一、生物學(xué)特性

1、形態(tài)染色：革蘭染色陰性，弧形或逗點狀。菌體一端有單鞭毛，懸滴鏡檢呈穿梭或流星

樣運(yùn)動；在病人“米淚水”樣便中，可呈頭尾相接的“魚群”樣排列。0139群有莢膜。

2、培養(yǎng)特性：營養(yǎng)要求不高，兼性厭氧。最適生長溫度3TC,具耐堿性，初次分離選用pH8.5

的堿性陳水增菌培養(yǎng)，經(jīng)35℃4h-6h在液體表面形成菌膜。

在硫代硫酸鹽-枸椽酸鹽-膽鹽-蔗糖瓊脂平板（TCBS）上菌落呈黃色；在含亞礎(chǔ)酸鉀的平板上

（糖雙洗瓊脂平板、慶大霉素瓊脂平板）菌落中心灰褐色（儒離子還原為金屬蹄）；可在無

鹽培養(yǎng)基上生長（NaCl濃度0-6%）,El-Tor生物型在BAP可形成B溶血環(huán)。

3、生化反應(yīng)：氧化酶（+）、葡萄糖發(fā)酵（+）、蔗糖發(fā)酵（+）、口引跺（+）

4、抗原和分型：霍亂弧菌有不耐熱的H抗原和耐熱的?？乖?根據(jù)。抗原的不同分為01

群霍亂弧菌和非01群霍亂弧菌，其中01群、0139群引起霍亂。01群霍亂弧菌分為古典

生物型和El-Tor生物型。

01群霍亂弧菌根據(jù)O抗原的A、B、C三種抗原成分組成不同分成三個血清型，小川型：

含A、B抗原/稻葉型：含A、C抗原/彥島型：含A、B、C抗原。

5、抵抗力：較弱，干燥時易死亡，水環(huán)境中可存活兩周（水源性傳播，水性爆發(fā)）；怕酸一

一正常胃酸4min；不耐熱一一100℃,l-2min；對消毒劑敏感，可用漂白粉處理病人的排泄

物或嘔吐物。

二、致病性與免疫性

1、致病物質(zhì)：鞭毛、菌毛

霍亂弧菌腸毒素（choleraToxin,CT）：CT由一個A亞單位和5個相同B亞單位組成多聚體

蛋白。

A亞單位包含A1和A2兩部分，以二硫鍵相連。A1為毒素活性單位，激活腺甘酸環(huán)化酶

（cAMP酶），使細(xì)胞內(nèi)cAMP大量增加。A2連接A1和B亞單位。

B亞單位與腸粘膜上皮細(xì)胞膜上的神經(jīng)節(jié)普脂GM1受體結(jié)合

致病機(jī)理：霍亂弧菌進(jìn)入腸道粘附于腸粘膜上皮細(xì)胞，分泌CT,其B亞單位結(jié)合細(xì)胞膜上

GM1受體形成通道，A1進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)激活cAMP酶，細(xì)胞內(nèi)cAMP大量增加，分泌亢進(jìn)導(dǎo)

致嚴(yán)重嘔吐和腹瀉

臨床表現(xiàn)：前驅(qū)期、吐瀉期、脫水期、恢復(fù)期

2、所致疾?。夯魜y，在我國屬甲類傳染病

傳染源：病人和無癥狀感染者的糞便污染的水源和食物。

傳播途徑：經(jīng)口傳播

潛伏期：2-3d

臨床表現(xiàn)：劇烈吐瀉、米泊樣，每日數(shù)十次，持續(xù)2-3天，大量失水，嚴(yán)重吐瀉引起水電解

質(zhì)紊亂，脫水酸中毒，腎衰、循環(huán)衰竭、休克、死亡；及時補(bǔ)充液體和電解質(zhì)非常重要，可

大大降低死亡率。

免疫力：病人愈后可獲得牢固免疫

三、微生物學(xué)檢查法

1、標(biāo)本直接檢查

直接鏡檢：革蘭染色，觀察有無“魚群”樣排列的革蘭陰性弧菌。

動力和制動試驗：“米淚水”樣便制成懸滴標(biāo)本，直接觀察有無呈穿梭樣運(yùn)動的細(xì)菌。在懸

液中加入1滴霍亂多價診斷血清，若細(xì)菌停止運(yùn)動并發(fā)生凝集，則為制動試驗+。

直接熒光抗體染色和抗01群抗原的單克隆抗體凝集試驗，

霍亂毒素的測定：ELISA法或乳膠凝集測定CT

2、分離培養(yǎng)與鑒定

將標(biāo)本接種于堿性陳水,35℃6~8h接種至TCBS平板或雙洗瓊脂平板或慶大霉素瓊脂平板，

霍亂弧菌在TCBS上形成黃色，雙洗瓊脂或慶大霉素瓊脂平板上呈灰褐色中心的菌落

用O1群和0139群霍亂弧菌的多價和單價抗血清進(jìn)行凝集，結(jié)合菌落特征和菌體形態(tài)，作

出初步報告。

依據(jù)全面生化反應(yīng)，血清學(xué)分群及分型進(jìn)行最后鑒定。符合霍亂弧菌的菌株需區(qū)分古典生物

型和El-Tor生物型。

特征古典生物型日-Tor生物型

雞紅細(xì)胞凝集—+一

V-PT^—+

多粘菌素B敏感試驗+—

IV組噬菌體裂解+—

V組噬菌體裂解—+一

3、初篩試驗:

霍亂紅試驗：

霍亂弧菌

/\

色氨酸硝酸鹽

11

1

呼1味亞硝酸鹽

\/

亞硝酸吧啜

1濃硫酸

薔薇色

粘絲試驗：霍亂弧菌濃懸液+0.5%去氧膽酸鈉，1'內(nèi)由混變清，再變粘稠，弧菌屬細(xì)菌除

副溶血性弧菌部分菌株外，均有此反應(yīng);

0/129敏感試驗

四、防治原則

加強(qiáng)國境檢疫，加強(qiáng)水源及糞便管理

及時檢出病人，隔離封鎖疫區(qū)

疫苗接種

對癥治療，及時補(bǔ)充液體和電解質(zhì)，預(yù)防大量失水引起的低血容量性休克和酸中毒，及時抗

菌治療。

第二節(jié)副溶血弧菌

又稱嗜鹽性弧菌，沿海地區(qū)常見，存在于近海海水、海泥、海產(chǎn)品中，1950年首發(fā)于日本

大阪，主要引起食物中毒。是我國沿海地區(qū)及海島食物中毒和急性腹瀉最常見病原菌。臨床

表現(xiàn)有：惡心、嘔吐、腹痛、低熱、寒戰(zhàn)等。呈水樣便，偶爾血性，恢復(fù)較快，病程2天~3

天，通常為自限性。

一、生物學(xué)性狀

1、形態(tài)和染色：為革蘭陰性桿菌，極單鞭毛，無莢膜

2、培養(yǎng)特性：營養(yǎng)要求不高，具有嗜鹽性（NaCl濃度1%~8%）,在無鹽培養(yǎng)基上不能

生長，最適pH為7.7~8.0,在堿性陳水中經(jīng)6h~9h增菌可形成菌膜。

在TCBS平板上形成藍(lán)綠色的菌落。從腹瀉病人中分離到的副溶血弧菌95%以上在我妻

(wagatsuma)培養(yǎng)基上可產(chǎn)生溶血現(xiàn)象，稱為神奈川現(xiàn)象(KP)。在SS平板上形成扁

平，無色半透明，蠟滴狀的菌落，不易刮下。

3、生化反應(yīng)：氧化酶(+)、蔗糖發(fā)酵(-)、葡萄糖發(fā)酵(+)

NaCl生長試驗：0%NaCl(-),3%NaCl(+),7%NaCl(+),10%NaCl(-)

二、致病因素

副溶血性弧菌通過菌毛的粘附，

KP+菌株產(chǎn)生耐熱直接溶血素(TDH)：①溶血作用，②細(xì)胞致死活性，③腸毒性作用，④

心臟毒性

KP一菌株產(chǎn)生TDH相關(guān)溶血素(TRH)

三、微生物學(xué)檢查

生化反應(yīng)：氧化酶十,掘酶一。葡萄糖+、麥芽糖+、甘露醇+,蔗糖一、乳糖一。R引噪十、

V-P一。賴氨酸脫較酶+、鳥氨酸脫竣酶+,精氨酸雙水解酶一

0/129(150ug)敏感

NaCl生長試驗：在不含NaCl和含10%NaCl的蛋白陳水中不生長，在3%和7%NaCl蛋白

陳水中生長

神奈川現(xiàn)象+

毒素測定：用免疫學(xué)方法測定TDH和TRH。用基因探針和PCR方法直接測定毒素基因tdh

或trh

非發(fā)酵菌

是一大群不發(fā)酵葡萄糖或僅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厭氧、無芽胞的革蘭陰性桿

菌。通常所講的非發(fā)酵菌指在KIA中24小時內(nèi)表面能夠生長，在底部不生長的需氧革蘭

陰性桿菌。

【基本鑒定要求】

1、缺少糖發(fā)酵的證據(jù)，通常是在KIA或TSI培養(yǎng)基中無酸產(chǎn)生，斜面和底部均呈紅色。

2、氧化酶陽性(不動桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌、唐菖蒲伯克菌、淺黃華麗單胞菌、棲稻黃

素單胞菌陰性)，但并非所有氧化酶陽性的革蘭陰性桿菌都是非發(fā)酵菌。

3、麥康凱平板MAC上生長很差或不生長

4、動力陽性

【重要鑒定試驗】

假單胞無色桿黃桿菌不動桿產(chǎn)堿桿叢毛菌莫拉菌

菌屬菌屬屬菌屬菌屬屬屬

氧化酶+++/--+++/-

OZF試

O/-OOO/----