糖化血紅蛋白分析儀校準(zhǔn)規(guī)范

JJF1841—20201糖化血紅蛋白分析儀校準(zhǔn)規(guī)范1范圍本規(guī)范適用于高效液相色譜法和免疫法的糖化血紅蛋白分析儀的校準(zhǔn),其他類方法儀器參照本規(guī)范執(zhí)行。2引用文件本規(guī)范引用了下列文件:JJF1001—2011通用計(jì)量術(shù)語及定義JJF1071—2010國家計(jì)量校準(zhǔn)規(guī)范編寫規(guī)則JJF1265—2010生物計(jì)量術(shù)語及定義GB/T14666—2003分析化學(xué)術(shù)語YY/T1246—2014糖化血紅蛋白分析儀CLSIEP06-A定量測量程序的線性評(píng)估:統(tǒng)計(jì)學(xué)方法;批準(zhǔn)指南(EvaluationoftheLinearityofQuantitativeMeasurementProcedures:AStatisticalApproach;ApprovedGuideline)凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本規(guī)范;凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本規(guī)范。3術(shù)語和計(jì)量單位3.1術(shù)語JJF1001—2011、JJF1265—2010和GB/T14666—2003中界定的及以下術(shù)語和定義適用于本規(guī)范。3.1.1糖化血紅蛋白HemoglobinA1c;HbA1c人體血液中葡萄糖與血紅蛋白β-鏈-N末端纈氨酸殘基以共價(jià)鍵結(jié)合的穩(wěn)定化合物。3.2計(jì)量單位3.2.1糖化血紅蛋白計(jì)量單位糖化血紅蛋白(HbA1c)以IFCC單位(mmol/mol)以及衍生的NGSP單位(%)報(bào)告。IFCC單位(mmol/mol)與NGSP單位(%)之間換算可使用IFCC-NGSP換算公式:.4概述糖化血紅蛋白分析儀(以下簡稱分析儀)是測定人體中糖化血紅蛋白占總血紅蛋白比例的儀器。分析儀目前常用的技術(shù)原理主要分為高效液相色譜法和免疫法兩種,前者JJF1841—20202是利用離子交換HPLC法測定血液中糖化血紅蛋白的百分含量,后者是利用抗原抗體直接測定總血紅蛋白中糖化血紅蛋白的百分含量。分析儀通常主要由進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、顯示系統(tǒng)及附帶的試劑盒等組成。5計(jì)量特性分析儀各項(xiàng)計(jì)量性能指標(biāo)見表1。表1分析儀主要計(jì)量性能指標(biāo)計(jì)量性能計(jì)量性能指標(biāo)相對示值誤差±8%測量重復(fù)性<3%攜帶污染率*<3%線性相關(guān)性r≥0.99注:1表中技術(shù)指標(biāo)不用于合格性判別,僅供參考。2相對示值誤差的計(jì)量特性也可參照儀器制造廠商給出的技術(shù)要求。3*為如適用,可進(jìn)行該項(xiàng)目的校準(zhǔn)。6校準(zhǔn)條件6.1環(huán)境條件分析儀允許的使用環(huán)境條件,校準(zhǔn)過程中應(yīng)記錄環(huán)境溫度、相對濕度數(shù)據(jù)。6.2標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和試劑6.2.1糖化血紅蛋白有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),包括低值、中值、高值3個(gè)濃度,其中低值濃度范圍應(yīng)在4.5%~5.5%(25.7mmol/mol~36.6mmol/mol),高值濃度范圍應(yīng)在9.5%~10.5%(80.3mmol/mol~91.2mmol/mol)。相對擴(kuò)展不確定度一般應(yīng)不大于4%(k=2),或根據(jù)用戶及分析儀的技術(shù)要求選擇。6.2.2校準(zhǔn)過程中需要的分析儀配套診斷試劑。試劑應(yīng)按照說明書要求的條件儲(chǔ)存并在有效期內(nèi)。6.2.3校準(zhǔn)設(shè)備:校準(zhǔn)過程中使用經(jīng)過計(jì)量溯源的可調(diào)移液器。7校準(zhǔn)項(xiàng)目和校準(zhǔn)方法7.1相對示值誤差用分析儀分別測定低值和高值的糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),每個(gè)濃度水平分別重復(fù)測量3次,計(jì)算3次測量結(jié)果的平均值。根據(jù)公式(1)計(jì)算相對示值誤差:×100%(1)式中:JJF1841—20203 x—標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)3次測量結(jié)果的平均值,%或mmol/mol;x———標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)值,%或mmol/mol。7.2測量重復(fù)性用分析儀對低值糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)重復(fù)測量6次,并根據(jù)公式(2)計(jì)算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD作為重復(fù)性的表征。RSD=(2)式中:xi—第i次標(biāo)準(zhǔn)偏差的測量值,%或mmol/mol; x———測量平均值,%或mmol/mol;n—測量次數(shù),n=6。7.3攜帶污染率(如適用)按照從高值到低值的測量順序,分別連續(xù)測量高值和低值糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)各3次,測量值分別記為i1、i2、i3和j1、j2、j3。以CO來表征分析儀的攜帶污染率,見公式(3)?！?00%(3)式中:i3———高值標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)第3次測量值,%或mmol/mol;j1———低值標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)第1次測量值,%或mmol/mol;j3———低值標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)第3次測量值,%或mmol/mol。7.4線性相關(guān)性對至少5個(gè)濃度(在低值至高值范圍內(nèi),涵蓋測試范圍的上、下限和中間值)的糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(或配制的校準(zhǔn)溶液)進(jìn)行測量,重復(fù)測量3次,取其平均值。線性相關(guān)性校準(zhǔn)溶液的配制方法見附錄C。將測量結(jié)果的平均值與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)值(或校準(zhǔn)溶液的配制值)進(jìn)行線性回歸,用軟件進(jìn)行線性擬合或按公式(4)計(jì)算線性相關(guān)系數(shù)r作為線性相關(guān)性的表征。(4)式中:xi———各個(gè)濃度水平標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)值,%或mmol/mol; x———各個(gè)濃度水平標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的平均值,%或mmol/mol;JJF1841—20204yi———各個(gè)濃度水平標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的測量值,%或mmol/mol;y———各個(gè)濃度水平標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的測量值平均值,%或mmol/mol。8校準(zhǔn)結(jié)果表達(dá)8.1校準(zhǔn)結(jié)果處理經(jīng)校準(zhǔn)后的分析儀應(yīng)填發(fā)校準(zhǔn)證書,校準(zhǔn)證書應(yīng)符合JJF1071—2010中5.12的要求,并給出各校準(zhǔn)項(xiàng)目名稱和測量結(jié)果以及擴(kuò)展不確定度。校準(zhǔn)記錄和校準(zhǔn)證書的內(nèi)頁格式見附錄A。8.2校準(zhǔn)結(jié)果的測量不確定度分析儀校準(zhǔn)結(jié)果的不確定度按JJF1059.1—2012的要求評(píng)定,相對示值誤差校準(zhǔn)的不確定度評(píng)定示例見附錄B。9復(fù)校時(shí)間間隔由于復(fù)校時(shí)間間隔的長短是由分析儀的使用情況、使用者、分析儀本身質(zhì)量等諸因素所決定的,因此,送校單位可根據(jù)實(shí)際使用情況自主決定復(fù)校時(shí)間間隔,建議不超過1年。5附錄A校準(zhǔn)記錄和校準(zhǔn)證書的內(nèi)容及格式A.1校準(zhǔn)證書的內(nèi)容校準(zhǔn)證書至少應(yīng)包括下列的信息:a)標(biāo)題“標(biāo)準(zhǔn)證書”;b)實(shí)驗(yàn)室和地址;c)進(jìn)行校準(zhǔn)的地點(diǎn)(如果與實(shí)驗(yàn)室的地點(diǎn)不同);d)證書的唯一性標(biāo)識(shí)(如編號(hào)),每頁及總頁數(shù)的標(biāo)識(shí);e)客戶的名稱和地址;f)被校對象的描述和明確標(biāo)識(shí);g)進(jìn)行校準(zhǔn)的日期,如果與校準(zhǔn)結(jié)果的有效性和應(yīng)用相關(guān)時(shí),應(yīng)說明被校對象的接收日期;h)如果與校準(zhǔn)結(jié)果的有效性應(yīng)用相關(guān)時(shí),應(yīng)對被校樣品的抽樣程序進(jìn)行說明;i)校準(zhǔn)所依據(jù)的技術(shù)規(guī)范的標(biāo)識(shí),應(yīng)包括名稱和代號(hào);j)本次校準(zhǔn)所用測量標(biāo)準(zhǔn)的溯源性及有效性說明;k)校準(zhǔn)環(huán)境的描述;l)校準(zhǔn)結(jié)果及測量不確定度的說明;m)對校準(zhǔn)規(guī)范的偏離的說明;n)校準(zhǔn)證書或校準(zhǔn)報(bào)告簽發(fā)人的簽名、職務(wù)或等效標(biāo)識(shí);o)校準(zhǔn)結(jié)果只對校準(zhǔn)對象的有效聲明;p)未經(jīng)實(shí)驗(yàn)室書面批準(zhǔn),不得部分復(fù)制證書的聲明。A.2校準(zhǔn)記錄的內(nèi)頁格式JJF1841—20206校準(zhǔn)記錄共2頁,第1頁儀器名稱型號(hào)制造廠商出廠編號(hào)委托單位名稱聯(lián)系人地址電話溫度濕度大氣壓試劑和校準(zhǔn)品批號(hào)記錄編號(hào)證書編號(hào)校準(zhǔn)員核驗(yàn)員一、相對示值誤差標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測量值平均值標(biāo)準(zhǔn)值相對示值誤差高值低值二、測量重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測量值低值平均值相對標(biāo)準(zhǔn)偏差/%三、攜帶污染率標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測量值攜帶污染率/%高值低值7四、線性相關(guān)性共2頁,第2頁標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測量值平均值標(biāo)準(zhǔn)值線性相關(guān)系數(shù)1234568A.3校準(zhǔn)證書的內(nèi)頁格式共頁,第頁序號(hào)校準(zhǔn)項(xiàng)目校準(zhǔn)結(jié)果不確定度1相對示值誤差2測量重復(fù)性3攜帶污染率4線性相關(guān)性校準(zhǔn)員:核驗(yàn)員:JJF1841—2020附錄B相對示值誤差校準(zhǔn)不確定度評(píng)定示例B.1測量方法采用糖化血紅蛋白分析儀測定有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),并與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)值進(jìn)行比較。B.2測量模型相對示值誤差可由公式(B.1)給出:—((B.1)式中:—x—標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)3次測量結(jié)果的平均值,%或mmol/mol;x———標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)值,%或mmol/mol。B.3不確定度來源不確定度來源包括:a)糖化血紅蛋白分析儀測量重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度u1;b)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度u2。B.4合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度計(jì)算公式—由于糖化血紅蛋白分析儀測定結(jié)果x與糖化血紅蛋白分析儀校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)值x之間不相關(guān),依據(jù)公式(B.1),輸出量估計(jì)方差的完整表達(dá)式應(yīng)為:u=u+u(B.2)由公式(B.2)得:(B.3)B.5標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量評(píng)定B.5.1測量重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量u1選定一臺(tái)糖化血紅蛋白分析儀,對低值糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)連續(xù)測量10次,得到一組測量值:5.0%,5.1%,5.0%,5.1%,5.0%,5.1%,5.0%,5.1%,5.0%,5.1%。則單次測量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差s(xi)為:實(shí)際校準(zhǔn)時(shí)在重復(fù)性條件下連續(xù)測量3次,以3次測量的算術(shù)平均值作為結(jié)果,則由測量重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量u1為:在這種測量條件下,分析儀的最小分辨力為0.1%,區(qū)間半寬a=0.05%,按均勻9分布,取包含因子由此引起的標(biāo)準(zhǔn)不確定度u3為:9JJF1841—202010從以上計(jì)算可以看出,由于測量重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量u1大于分辨力引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量u3,由JJF1033—2016《計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)考核規(guī)范》可知,當(dāng)重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量大于分辨力引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量時(shí),可不考慮分辨力引入的不確定度分量,故分辨力引入的不確定度分量u3在標(biāo)準(zhǔn)不確定度合成時(shí)不列入。B.5.2標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量u2由標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)引入的不確定度分量u2可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書提供的擴(kuò)展不確定度Ux和包含因子kx按公式(B.4)計(jì)算:(B.4)式中:u2———標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度,%;Ux———標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書提供的擴(kuò)展不確定度,%;kx———標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書提供的包含因子,通常為2。下面以一次糖化血紅蛋白分析儀校準(zhǔn)為例具體評(píng)定其測量不確定度。在校準(zhǔn)中糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)3次測定結(jié)果分別為5.0%、5.0%和5.0%;使用的糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW09181標(biāo)準(zhǔn)值為5.02%,U=0.15%(k=2),則由標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量為:B.6標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量一覽表標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量一覽表見表B.1。表B.1糖化血紅蛋白分析儀測定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)不確定度一覽表不確定度來源符號(hào)數(shù)值靈敏系數(shù)輸出量不確定度分量測量重復(fù)性u(píng)10.031%19.90.6169%標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)u20.075%-19.91.4925%B.7合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度由公式(B.3)可得合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度uc為:B.8擴(kuò)展不確定度取包含因子k=2,則擴(kuò)展不確定度U為:U=k×uc=2×1.62%=3.3%JJF1841—202011附錄C線性相關(guān)性校準(zhǔn)溶液的配制方法依據(jù)美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(ClinicalandLaboratoryStan