玻璃海鞘多肽的分離純化及抗腫瘤機(jī)制研究的開題報(bào)告

玻璃海鞘多肽的分離純化及抗腫瘤機(jī)制研究的開題報(bào)告一、課題背景與研究意義：玻璃海鞘（Halocynthiaroretzi）是一種常見的海洋無脊椎動(dòng)物，其主要產(chǎn)地為中國(guó)、日本、韓國(guó)等亞洲國(guó)家。近年來，研究人員發(fā)現(xiàn)玻璃海鞘具有多種生物活性物質(zhì)，包括多肽類化合物，具有抗菌、抗腫瘤等功效。其中，玻璃海鞘多肽是一種具有生物活性的降解產(chǎn)物，其結(jié)構(gòu)復(fù)雜，但對(duì)人體毒性較低，因此具有極高的發(fā)展和應(yīng)用價(jià)值。目前，玻璃海鞘多肽的分離純化及其對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用等相關(guān)研究還比較少，需要進(jìn)一步深入探究。二、研究?jī)?nèi)容：本研究擬以玻璃海鞘為材料，采用酸解、薄層層析、逆相高效液相層析（RP-HPLC）等分離純化方法，分離得到玻璃海鞘多肽。通過質(zhì)譜分析、氨基酸分析等手段，對(duì)玻璃海鞘多肽的結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定。同時(shí)，使用細(xì)胞實(shí)驗(yàn)等方法，研究玻璃海鞘多肽對(duì)乳腺癌細(xì)胞MCF-7的影響，探究其抗腫瘤作用機(jī)制。三、研究方法：1.玻璃海鞘的收集和提取。收集玻璃海鞘，去除外殼，利用酸解方法提取多肽類生物活性物質(zhì)。2.薄層層析法初步分離。將提取物進(jìn)行薄層層析，初步分離得到多肽類化合物。3.逆相高效液相層析法進(jìn)一步分離。將初步分離得到的多肽類化合物進(jìn)行逆相高效液相層析，進(jìn)一步分離得到玻璃海鞘多肽。4.對(duì)得到的玻璃海鞘多肽進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。采用質(zhì)譜分析、氨基酸分析等手段，對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定。5.研究玻璃海鞘多肽的抗腫瘤作用。將其應(yīng)用于乳腺癌細(xì)胞MCF-7的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，觀察其對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，并研究其抗腫瘤作用機(jī)制。四、預(yù)期成果：1.成功分離純化玻璃海鞘多肽。2.首次對(duì)玻璃海鞘多肽的結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定。3.研究發(fā)現(xiàn)玻璃海鞘多肽具有一定的抗腫瘤作用，并發(fā)現(xiàn)其可能的作用機(jī)制。4.為玻璃海鞘多肽的開發(fā)和應(yīng)用提供了重要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。五、研究難點(diǎn)：1.玻璃海鞘多肽結(jié)構(gòu)復(fù)雜。需要采用多種手段進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。2.細(xì)胞實(shí)驗(yàn)存在很多干擾因素，需要進(jìn)行多次重復(fù)實(shí)驗(yàn)確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。六、研究進(jìn)度安排：1.第1-2個(gè)月：收集玻璃海鞘，進(jìn)行提取及初步分離。2.第3-4個(gè)月：進(jìn)行逆相高效液相層析法進(jìn)一步分離。3.第5-6個(gè)月：對(duì)得到的玻璃海鞘多肽進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。4.第7-10個(gè)月：進(jìn)行乳腺癌細(xì)胞MCF-7的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究。5.第11-12個(gè)月：論文撰寫及答辯準(zhǔn)備。七、參考文獻(xiàn)：1.Jin,H.Z.,Park,J.I.,Lee,J.S.,Seo,S.B.,Choi,I.W.,Kim,Y.S.etal.(2008).AnovelcytotoxicpeptidefromthemarinespongeHalichondriapaniceathatinducesapoptosisinMCF-7humanbreastcarcinomacells.Peptides,29(10),1705-1711.2.Park,K.H.,Je,J.Y.,Ham,J.S.,Lee,H.H.,Kim,S.B.,Kim,D.S.etal.(2012).IsolationofbioactivepeptidefromthehydrolysateofSolengrandisanditseffectontheinhibitionofadipogenesisin3T3-L1adipocytes.FoodScienceandBiotechnology,21(5),1491-1496.3.Ren,J.,Zhao,M.,Yuan,J.,Hao,Y.,Zhang,Q.,Wang,J.etal.(2013).Thecytotoxicactivityofamarine-derivedpeptide,Te