消毒滅菌與首要微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全

關(guān)于消毒滅菌與首要微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全第一節(jié)微生物控制的相關(guān)術(shù)語（一）促進(jìn)微生物生長的名詞術(shù)語1、富集培養(yǎng)（enrichedculture):

又稱增殖培養(yǎng)，是指在培養(yǎng)基中加入欲分離菌所需的某些營養(yǎng)物和抑制其他微生物生長的抗菌物質(zhì)，創(chuàng)造利于分離菌而不利于其他菌生長繁殖的條件，從而使分離菌快速增殖的培養(yǎng)方法。第2頁,共36頁，2024年2月25日，星期天第一節(jié)微生物控制的相關(guān)術(shù)語（一）促進(jìn)微生物生長的名詞術(shù)語1、復(fù)壯（rejuvenation):

是指采用適合原種生長的良好培養(yǎng)條件使發(fā)生衰退的菌種恢復(fù)原來性壯的一種培養(yǎng)方法。如將毒力下降的病原菌接種敏感的動(dòng)植物第3頁,共36頁，2024年2月25日，星期天第一節(jié)微生物控制的相關(guān)術(shù)語（二）抑制或殺死微的名詞術(shù)語1、消毒(disinfection)

是指用化學(xué)或物理方法殺死物體上病原微生物的方法而對(duì)非病原微生物并不嚴(yán)格要求全部殺死。2、滅菌(sterilization)

是指殺死物體上所有病原性或非病原性微生物包括細(xì)菌的芽孢和霉菌的孢子的方法。

滅菌后的物體內(nèi)外均無活的微生物存在。

第4頁,共36頁，2024年2月25日，星期天第一節(jié)微生物控制的相關(guān)術(shù)語（二）抑制或殺死微的名詞術(shù)語3、防腐(antisepsis)

是指利用某種理化因素防止或抑制微生物生長繁殖的方法。防腐也稱抑菌。

為防止任何微生物進(jìn)入人和動(dòng)物機(jī)體以及其他物品而采取方法均叫無菌法，其操作方法叫無菌操作。第5頁,共36頁，2024年2月25日，星期天

溫度

干燥

輻射

物理方法超聲波與微波滲透壓過濾除菌

酸、堿與pH

重金屬及其化合物表面消毒劑有機(jī)化合物（酚類、醇類、醛類）鹵族元素及其化合物表面活性劑（新潔爾滅、杜滅芬）化學(xué)因素染料抗代謝藥物：磺胺類等化學(xué)治療劑抗生素細(xì)菌素

植物殺菌素第二節(jié)控制微生物生長的方法第6頁,共36頁，2024年2月25日，星期天第二節(jié)控制微生物的物理方法一、溫度微生物分為低溫、中溫、高溫3大溫度類型低溫型微生物（環(huán)境溫度不超過20℃）中溫型微生物（適于在25-40℃）

多數(shù)病原微生物最適生長溫度為37℃高溫型微生物第7頁,共36頁，2024年2月25日，星期天第二節(jié)控制微生物的物理方法一、溫度

當(dāng)環(huán)境溫度低于微生物生長的下限時(shí)，其酶活性降低，新陳代謝緩慢，甚至生命活動(dòng)停止，呈休眠狀態(tài)，因而低溫有抑菌作用，被廣泛用于保存食品、菌種和毒種。

第8頁,共36頁，2024年2月25日，星期天第二節(jié)控制微生物的物理方法一、溫度低溫的用途：菌種保藏

液氮的溫度（-195℃）、干冰溫度（-70℃）、-20℃和4℃（常加大分子保護(hù)劑如糊精、血清白蛋白等）食品冷藏

冷藏（0-4℃）與凍藏（-18℃）第9頁,共36頁，2024年2月25日，星期天第二節(jié)控制微生物的物理方法一、溫度

當(dāng)環(huán)境溫度超過微生物生長的最高溫度時(shí)可引起其酶變性失活，代謝停滯，DNA斷裂，核糖體解體和蛋白質(zhì)變性或凝固，導(dǎo)致微生物死亡。

微生物在干熱環(huán)境中比濕熱環(huán)境中的抗熱力大。第10頁,共36頁，2024年2月25日，星期天第二節(jié)控制微生物的物理方法常用的高熱消毒滅菌法1、干熱滅菌⑴焚燒滅菌法：（接種環(huán)、試管口、鑷子等）⑵、熱空氣滅菌法超過180℃，棉花、紙張會(huì)燒焦甚至燃燒滅菌前玻璃器皿未干或滅菌后未降溫至60℃以下就打開箱門，可導(dǎo)致玻璃器皿炸裂2、濕熱滅菌⑴煮沸法⑵巴氏消毒法（63℃30min；高溫快速法）⑶常壓蒸汽滅菌法⑷高壓蒸汽滅菌法第11頁,共36頁，2024年2月25日，星期天二、干燥（濕度）水分約占微生物細(xì)胞組成的70-85%，環(huán)境中缺水時(shí)（干燥的環(huán)境）引起微生物細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的變性和鹽類濃度的增高，抑制微生物的生長，甚至造成微生物的死亡。干燥用于食品保藏的方法可分為兩類，即自然干燥（熏干、曬干、冷凍干燥）和人工干燥（常壓干燥如熱風(fēng)、噴霧、凍結(jié)、微波等；真空干燥如真空和冷凍真空干燥）第12頁,共36頁，2024年2月25日，星期天三、輻射輻射滅菌(RadiationSterilization)是利用電磁輻射產(chǎn)生的電磁波殺死大多數(shù)物質(zhì)上的微生物的一種有效方法。用于滅菌的電磁波有微波，紫外線(UV)、X-射線和γ-射線等第13頁,共36頁，2024年2月25日，星期天三、輻射（一）紫外線

紫外輻射能作用于核酸，引起致死突變。紫外線穿透能力很差，不能穿過玻璃、衣物、紙張等，但能夠在空氣中傳播，可用作物體表面或室內(nèi)空氣的滅菌。經(jīng)紫外輻射處理后，受損傷的微生物細(xì)胞若再暴露于可見光中，一部分可恢復(fù)正常，這稱為光復(fù)活現(xiàn)象。第14頁,共36頁，2024年2月25日，星期天三、輻射紫外輻射對(duì)核酸的影響紫外線常作用于核酸形成胸腺嘧啶二聚體。第15頁,共36頁，2024年2月25日，星期天三、輻射（二）電離輻射

X射線、α射線、β射線和γ射線均為電離輻射。電離輻射的殺菌作用主要是間接地通過射線本身引起環(huán)境中水分子和細(xì)胞中水分子在吸收能量后導(dǎo)致電離所產(chǎn)生的自由基起作用，如H20-、OH.、OH-等，上述離子常與液體內(nèi)存在的氧分子作用，產(chǎn)生一些具強(qiáng)氧化性的過氧化物，如H2O2與HO2等使細(xì)胞內(nèi)某些重要的蛋白質(zhì)和酶發(fā)生變化，如使酶蛋白的-SH基氧化，從而使細(xì)胞受到損傷或死亡。第16頁,共36頁，2024年2月25日，星期天四、超聲波

超聲波殺菌的主要機(jī)制是，超聲波探頭的高頻率振動(dòng)，引起探頭周圍水溶液的高頻率振動(dòng)，當(dāng)探頭和水溶液的振動(dòng)不同步時(shí)能在溶液內(nèi)產(chǎn)生空穴，空穴內(nèi)處于真空狀態(tài)，只要懸液內(nèi)的細(xì)菌接近或進(jìn)入空穴區(qū)，由于細(xì)胞內(nèi)外壓力差，可導(dǎo)致細(xì)菌裂解，另外，超聲波的作用，可使機(jī)械能變成熱能，使細(xì)胞產(chǎn)生熱變性，也是微生物死亡的一個(gè)原因。第17頁,共36頁，2024年2月25日，星期天五、過濾除菌空氣和不耐熱的液體培養(yǎng)基的滅菌棉花、玻璃纖維或石棉濾膜核孔第18頁,共36頁，2024年2月25日，星期天六、滲透壓

應(yīng)用滲透壓調(diào)控微生物的方法主要用于保存肉類、水產(chǎn)品、蔬菜、水果等，常用10%-15%食鹽或50%-70%的糖來腌漬食品。第19頁,共36頁，2024年2月25日，星期天第三節(jié)控制微生物的化學(xué)方法抗微生物劑非選擇性（對(duì)所有細(xì)胞均有毒性）有選擇性（對(duì)病原微生物毒性更強(qiáng)）消毒劑(Disinfectant)防腐劑(Antisepsis)抗代謝藥物抗生素細(xì)菌素（化學(xué)治療劑）（化學(xué)藥劑）殺菌劑(disinfection)植物殺菌素第20頁,共36頁，2024年2月25日，星期天（一）殺菌劑、消毒劑和防腐劑特點(diǎn)：

對(duì)一切活細(xì)胞都有毒性，不能用于人或動(dòng)物體內(nèi)的化學(xué)治療。消毒劑：是指殺死病原微生物的藥物，通常用于非生物材料的滅菌或消毒。防腐劑：能殺死微生物或抑制其生長，但對(duì)人及動(dòng)物的體表組織無毒性或毒性低，可作為外用抗微生物藥物。殺菌劑：是指能殺死一切微生物及其孢子的藥物?；瘜W(xué)藥劑第21頁,共36頁，2024年2月25日，星期天（一）殺菌劑、消毒劑和防腐劑廣泛用于一些熱敏感的或無法進(jìn)行高溫滅菌的物品或場(chǎng)所的滅菌：溫度計(jì)、帶有透鏡的儀器設(shè)備、聚乙烯管或?qū)Ч艿?；墻壁、樓板與儀器設(shè)備等表面和自來水；空氣；第22頁,共36頁，2024年2月25日，星期天幾種常用表面消毒劑及其應(yīng)用類型名稱及使用濃度作用機(jī)制應(yīng)用范圍重金屬鹽0.05-0.1%升汞0.1-1%AgNO3使蛋白質(zhì)變性非金屬物品，器皿皮膚，滴新生兒眼睛酚類3-5%石炭酸2%煤酚皂（來蘇兒）蛋白質(zhì)變性，損傷細(xì)胞膜地面、家具、器皿皮膚醇類70-75%乙醇蛋白變性、脫水溶脂皮膚、器械醛類0.5-10%甲醛蛋白質(zhì)變性物品消毒、接種室熏蒸氧化劑0.1%KMnO4蛋白質(zhì)變性皮膚、尿道、水果蔬菜鹵素及其化合物0.2-0.5mg/L氯氣10-20%漂白粉0.5-1%漂白粉2.5%碘酒破壞細(xì)胞膜、酶、蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)變性飲水、游泳池水地面、廁所飲水、空氣、體表皮膚表面活性劑0.05-0.1%新潔爾滅破壞膜及蛋白質(zhì)皮膚、黏膜、手術(shù)器械染料2-4%龍膽紫蛋白質(zhì)變性皮膚、傷口第23頁,共36頁，2024年2月25日，星期天（一）抗代謝物

有些化合物在結(jié)構(gòu)上與生物體所必需的代謝物很相似，以至可以和特定的酶結(jié)合，從而阻礙了酶的功能，干擾了代謝的正常進(jìn)行，這些物質(zhì)稱為抗代謝物(Antimetabolite)。葉酸對(duì)抗物（磺胺）磺胺類藥物

是最常用的化學(xué)治療劑，它可抑制大多數(shù)革蘭氏陽性細(xì)菌和某些革蘭氏陰性細(xì)菌的生長繁殖，能治療多種疾病。

化學(xué)治療劑第24頁,共36頁，2024年2月25日，星期天磺胺類藥物的作用機(jī)制第25頁,共36頁，2024年2月25日，星期天（二）抗生素是由某些生物合成或半合成的一類次級(jí)代謝產(chǎn)物或衍生物，它們?cè)诤艿蜐舛葧r(shí)就能抑制或影響它種生物的生命活動(dòng)，如殺死微生物或抑制其生長?？股?Antibiotic)：1、概念

自本世紀(jì)40年代以來，已找到上萬種新抗生素，合成了近10萬種半合成抗生素，但其中在臨床上常用的僅幾十種?；瘜W(xué)治療劑第26頁,共36頁，2024年2月25日，星期天抗生素的作用機(jī)制1.抑制細(xì)胞壁的合成：如青霉素含有β-內(nèi)酰胺環(huán)，可特異地結(jié)合在細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖上，抑制細(xì)胞壁的合成，因而只作用于細(xì)菌特別是肽聚糖成分豐富的G+菌。2.破壞細(xì)胞膜的功能：如多黏菌素可作用于膜磷脂使膜溶解，而G-菌細(xì)胞膜磷脂特別豐富，所以可特異性地抑制G-細(xì)菌的生長。3.抑制蛋白質(zhì)的合成：由于原核微生物蛋白質(zhì)合成所需的核糖體為30S以及50S亞基，與真核細(xì)胞明顯不同，氯霉素是50S亞基的抑制劑。鏈霉素，四環(huán)素，卡那霉素等是30S亞基的抑制劑，因而它們都可特異地抑制原核微生物的生長。4.抑制核酸的合成:利福霉素可特異地結(jié)合到與真核細(xì)胞明顯不