糖化血紅蛋白HbA1c的應(yīng)用及影響HbA1c檢測的因素

關(guān)于糖化血紅蛋白HbA1c的應(yīng)用及影響HbA1c檢測的因素糖化血紅蛋白（HbA1c）是人類血液中葡萄糖與紅細胞中的血紅蛋白形成的非酶促的穩(wěn)定糖基化產(chǎn)物。HbA1c一旦形成，即存在于紅細胞120天的整個生命周期中，并與血糖濃度成正比。什么是糖化血紅蛋白第2頁,共36頁，2024年2月25日，星期天HbA1c的形成HbHbA1aHbA1bHbA97%HbF0.5%HbA22.5%HbA094%HbA16.0%HbA1c80%非糖基化血紅蛋白糖基化血紅蛋白第3頁,共36頁，2024年2月25日，星期天由于HbA1c是血液內(nèi)葡萄糖與Hb形成的糖基化產(chǎn)物，因此，臨床定量測定和應(yīng)用的是HbA1c或相當于HbA1c的檢測結(jié)果。為避免混淆，國際專家組建議糖化血紅蛋白的正規(guī)表達為HbA1c，也可簡寫成A1c描述糖化血紅蛋白。第4頁,共36頁，2024年2月25日，星期天

HbA1c水平反映的是在檢測前120天內(nèi)的平均血糖水平，而與抽血時間，病人是否空腹，是否使用胰島素等因素無關(guān)。是判定糖尿病長期控制的良好指標。第5頁,共36頁，2024年2月25日，星期天糖化血紅蛋白的測定結(jié)果以百分率表示，指的是和葡萄糖結(jié)合的血紅蛋白占全部血紅蛋白的比例。非糖尿病患者的糖化血紅蛋白的水平為4%-6%。8%9%第6頁,共36頁，2024年2月25日，星期天心力衰竭的幾率Hb死亡的幾率心肌梗死的幾率中風的幾率微血管病變的幾率白內(nèi)障摘除手術(shù)的幾率1%21%14%12%37%19%16%第7頁,共36頁，2024年2月25日，星期天HbA1c的臨床應(yīng)用作為糖尿病患者長期血糖控制的評價指標

HbA1c的測定目的在于消除波動的血糖對病情的控制觀察的影響。可作為糖尿病長期控制的良好指標，可反映測定前1~2月的平均血糖水平，監(jiān)測糖尿病病情控制程度，根據(jù)監(jiān)測結(jié)果，臨床醫(yī)生可以采用飲食控制或藥物等方法來制訂正確的治療方案。

1型糖尿病患者2型糖尿病患者

第8頁,共36頁，2024年2月25日，星期天用于糖尿病的診斷健康人HbA1c為4.0%-6.0%,未控制的DM病人HbA1c可高達10%-20%。目前并不主張單獨用HbA1c來診斷糖尿病，原因是精確度不高，有時造成臨床解釋困難。HbA1c的測定可協(xié)助判斷預后HbAlc處于較高水平時，說明患者存在持續(xù)性高血糖，可能出現(xiàn)糖尿病腎病、動脈硬化、白內(nèi)障等并發(fā)癥，特別增高者，應(yīng)警惕糖尿病酸中毒等急性并發(fā)癥的發(fā)生。因此，臨床醫(yī)生常通過HbAlc測定來評估患者慢性并發(fā)癥的發(fā)生風險情況。

第9頁,共36頁，2024年2月25日，星期天糖尿病的鑒別診斷中的應(yīng)用各種應(yīng)激如急性心肌梗死、腦血管意外、嚴重腹瀉、冠心病等疾病和輸注了含葡萄糖注射液后，都可以使血糖升高，但這種高血糖的HbAlc不一定升高，若為糖尿病患者HbAlc則升高，兩者簽別診斷和指導治療很有價值，同時可以輔助鑒別診斷隱性糖尿病早期或者輕型糖尿病。第10頁,共36頁，2024年2月25日，星期天糖尿患者妊娠期間方面的應(yīng)用

母親HbAlc水平對健康胎兒的孕育極為重要，對預防判斷糖尿病孕婦的巨大胎兒、畸形胎、死胎、子癇前期以及糖尿病急、慢性并發(fā)癥的監(jiān)測具有重要意義。第11頁,共36頁，2024年2月25日，星期天HbA1c的監(jiān)測時間有條件的患者治療之初至少每三個月檢測一次，一旦達到治療目標可每六個月檢查一次，以了解一段較長時間內(nèi)血糖控制的總體情況如何。

建議使用胰島素治療的患者，由于血糖波動較大，至少每2~3月檢查一次。第12頁,共36頁，2024年2月25日，星期天糖化血紅蛋白檢查的注意事項

盡管糖化血紅蛋白檢查是一個重要的評估指標，但它不能代替日常的自我血糖監(jiān)測。因為糖化血紅蛋白檢查不能反映每天的血糖控制情況；患者也不能以糖化血紅蛋白測試的結(jié)果來調(diào)整日常胰島素的用量。因此，血糖監(jiān)測和記錄結(jié)果對有效控制血糖的重要性還是不可代替的。

第13頁,共36頁，2024年2月25日，星期天影響HbA1c檢測的因素

標本處理方式的影響

①抗凝劑的種類：臨床上以EDTA-K2作為測定HbA1c的標準用管。肝素鋰抗凝的全血檢測結(jié)果略有偏高。

②標本儲存條件：若全血標本不能及時測定，需將其于４～８℃保存并最好在１５ｄ內(nèi)進行測定此時HbA1c檢測結(jié)果變異率小于3%。第14頁,共36頁，2024年2月25日，星期天患者自身因素的影響

①貧血患者，影響紅細胞壽命的疾病均可對HbA1c測定產(chǎn)生影響。如溶血性貧血、缺鐵性貧血、大量失血等。

②部分進展迅速的1型糖尿病患者，HbA1c的水平往往正常或輕度升高，并不能完全反應(yīng)急速增高的血糖水平。

第15頁,共36頁，2024年2月25日，星期天患者自身因素的影響

③飲食和藥物，如抗氧化劑（VC和VE）能抑制Hb的糖基化，可造成測定結(jié)果偏低，服用阿司匹林可使HbA1c輕微升高等。④某些血紅蛋白亞型，如HbS、HbC、HbF和HbE等血紅蛋白病的存在，會影響HbA1c的檢測結(jié)果。

第16頁,共36頁，2024年2月25日，星期天患者自身因素的影響⑤黃疸和高脂血癥患者：血中膽紅素和乳糜與血紅蛋白在相同波長處存在吸收效應(yīng)，會導致HbA1c假性升高。⑥高原地區(qū)居民，由于慢性缺氧造成Hb量的改變，繼而可導致HbA1c基礎(chǔ)水平與平原地區(qū)存在差異。

第17頁,共36頁，2024年2月25日，星期天患者自身因素的影響⑦年齡和種族：因空腹血糖水平隨年齡增長略有增高，所以HbA1c也與年齡呈正相關(guān)，有研究認為，30歲后，年齡每增長10歲，HbA1c會增長0.1%；白種人的HbA1c較其他種族都低。

第18頁,共36頁，2024年2月25日，星期天方法學的影響HbA1c的檢測方法主要有：基于電荷差異的檢測方法，包括離子交換高效液相色譜法（HPLC）和電泳方法等?；诮Y(jié)構(gòu)差異的檢測方法，包括親和層析色譜法、免疫化學方法以及酶法等。床旁檢測方法，多采用親和層析或免疫比濁等方法原理。

第19頁,共36頁，2024年2月25日，星期天離子交換HPLC法具有檢測通量高、準確度高、重復性良好的優(yōu)點，但易受血紅蛋白變異體的影響。此法已被美國國家糖化血紅蛋白標準化計劃（NGSP）推薦為參考方法。免疫比濁法適用于自動生化分析儀批量檢測，但易受高濃度葡萄糖、甘油三酯和膽紅素的干擾，以及變異血紅蛋白的影響。第20頁,共36頁，2024年2月25日，星期天親和層析法特異性強，不受異常血紅蛋白的干擾。英國DREWSCIENTIFIC公司的DS1糖化血紅蛋白分析儀日前剛剛獲得美國儀器藥品管理署(FDA)的認可獲準上市，作為目前世界唯一的快速床邊糖化血紅蛋白儀，它采用硼酸親和層析法，只需10μl全血即可在4分鐘內(nèi)快速分離檢測糖果化血紅蛋白，為臨床提供即時的化驗結(jié)果，從而使醫(yī)生在患者就診的第一時間明確診斷并制定相應(yīng)的治療方案，特別適合于臨床科室使用，尤其對小兒患者而言更有優(yōu)勢。其檢測結(jié)果也完全達到并超過臨床要求，CV值5%以內(nèi)。但親和層析柱的測定結(jié)果偏低，尤其當HbF＞20%時，可導致HbA1c值下降1%，甚至更多，可能與HbF的糖發(fā)化速率較HbA更慢有關(guān)。第21頁,共36頁，2024年2月25日，星期天酶法反應(yīng)靈敏、特異，可使用全自動生化儀檢測，不需昂貴的儀器。與常規(guī)HPLC和免疫法有很好的相關(guān)性。由于此法應(yīng)用于臨床的時間不長，還需對實際應(yīng)用中存在的問題進行總結(jié)和研究。第22頁,共36頁，2024年2月25日，星期天BIO-RADD10第23頁,共36頁，2024年2月25日，星期天NycoCardreaderII第24頁,共36頁，2024年2月25日，星期天有學者認為HbAlc用以診斷糖尿病具有較高的敏感性和特異性，可以替代空腹血糖；其缺點是測定方法尚未標準化，且生物變異度較大，HbAlc能否用于診斷糖尿病的篩查是目前國際上討論的熱點問題，用于診斷糖尿病一直存在爭議。第25頁,共36頁，2024年2月25日，星期天HbA1c的標準化工作

所謂檢測標準化：是指通過對測定方法和檢測程序規(guī)范化，使測定結(jié)果的量值可溯源至統(tǒng)一標準物質(zhì)或參考方法，從而使測定結(jié)果在不同方法、不同試劑及不同實驗室間具有可比性。其最終目標是通過標準化，評價和改善實驗室測定結(jié)果的準確度和精密度，從而提高不同實驗室之間的可比性。第26頁,共36頁，2024年2月25日，星期天HbA1c的標準化工作階段第1階段，由于較長時間內(nèi)缺乏國際標準化，致使一些國家相繼開展本國內(nèi)標準化計劃，其中以美國、瑞典和日本為代表的國家標準化最為成功。第2階段，是國際臨床化學與實驗室聯(lián)盟（IFCC）開展的全球標準化工作。第27頁,共36頁，2024年2月25日，星期天HbA1c檢測，國際標準有爭議美國、瑞典、日本3國的標準化組織所采用的參考方法均為“指定的比對方法”，并不是基于計量學概念建立的真正的參考方法。由于檢測系統(tǒng)特異性的差異，導致3種指定比對系統(tǒng)對同一份樣本測定結(jié)果不同，無法在全球范圍內(nèi)實現(xiàn)HbA1c檢測結(jié)果的溯源性和可比性。第28頁,共36頁，2024年2月25日，星期天IFCC

建立基于計量學概念的參考系統(tǒng)IFCC參考方法的特異性高于上述3個國家的指定比對方法，因此，IFCC參考方法的測定結(jié)果低于上述指定比對參考方法。IFCC單位:

mmol/molNGSP單位:

%第29頁,共36頁，2024年2月25日，星期天在過去的十多年里，NGSP和IFCC二者間一直存在爭議，主要原因就在于NGSP結(jié)果是建立在使用基礎(chǔ)上，而IFCC結(jié)果是建立在準確計量基礎(chǔ)上，目前達成共識的是：IFCC參考的系統(tǒng)是HbA1C測定標準化唯一有效的參考系統(tǒng)；HbA1C結(jié)果應(yīng)該由IFCC國際單位制單位（mmol/mol）和使用IFCC-NGSP方程推倒換算的NGSP單位（100%）共同報告。第30頁,共36頁，2024年2月25日，星期天HbA1c檢測，國內(nèi)標準化在行動2010年衛(wèi)生部臨檢中心室間質(zhì)評，不同儀器組內(nèi)HbA1c的CV值為4.5%~21%。2011年北京市臨床檢驗中心室間質(zhì)評結(jié)果顯示，相同儀器組內(nèi)CV基本在4%以下，雖顯示了很好的精密度，但不同儀器組間CV仍高達15.8%，檢測結(jié)果的可比性較差，無法達到HbA1c檢測結(jié)果互認。第31頁,共36頁，2024年2月25日，星期天2010版《中國2型糖尿病防治指南》不推薦

HbA1c作為現(xiàn)階段糖尿病的診斷方法和診斷標準！第32頁,共36頁，2024年2月25日，星期天目前，由衛(wèi)生部臨檢中心牽頭，已經(jīng)建立了國際公認的HPLC-串聯(lián)質(zhì)譜HbA1c測定參考方法，并且研制出了HbA1c國家一級校準物質(zhì)。這2項工作的完成對于實現(xiàn)HbA1c測定結(jié)果的量值溯源和保證檢測質(zhì)量具有重要作用。第33頁,共36頁，2024年2月25日