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多氯聯(lián)苯醌介導(dǎo)的HepG2細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激及硫辛酸拮抗自由基的研究的開(kāi)題報(bào)告題目:多氯聯(lián)苯醌介導(dǎo)的HepG2細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激及硫辛酸拮抗自由基的研究一、研究背景與意義多氯聯(lián)苯醌(PCB153)是一種環(huán)境污染物,廣泛存在于大氣、水、土壤中,且對(duì)人體健康有潛在威脅。已有研究表明,PCB153可以引起肝細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激以及產(chǎn)生自由基,對(duì)肝臟造成損傷。但其分子機(jī)制仍不完全清楚。硫辛酸(ALA)被認(rèn)為是一種具有強(qiáng)大自由基清除能力的天然抗氧化劑,具有顯著的保護(hù)肝臟功能。因此,探究ALA是否具有抗PCB153的肝臟損傷效應(yīng),將有重要的臨床和環(huán)境應(yīng)用價(jià)值。二、研究?jī)?nèi)容本研究將利用HepG2細(xì)胞模型,探究PCB153對(duì)HepG2細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激和自由基的影響,并進(jìn)一步探究ALA對(duì)其產(chǎn)生的影響。具體研究?jī)?nèi)容如下:1.建立HepG2細(xì)胞的PCB153暴露模型,探究PCB153處理后對(duì)HepG2細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激的影響。2.利用相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù),測(cè)定PCB153處理后HepG2細(xì)胞內(nèi)自由基的水平,探究PCB153處理后會(huì)否產(chǎn)生過(guò)多的自由基。3.建立ALA預(yù)處理模型,探究ALA對(duì)于PCB153處理后HepG2細(xì)胞的氧化應(yīng)激和自由基的影響。4.建立ALA和PCB153聯(lián)合處理模型,探究ALA與PCB153的聯(lián)合作用對(duì)HepG2細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激和自由基的影響。5.評(píng)估不同模型下HepG2細(xì)胞的凋亡情況,探究ALA是否具有抗PCB153損傷的效應(yīng)。三、預(yù)期成果通過(guò)本研究,我們預(yù)期得到以下幾方面的成果:1.研究PCB153的暴露對(duì)HepG2細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激和自由基的影響,深入理解PCB153誘導(dǎo)的肝臟損傷機(jī)制。2.探究ALA對(duì)HepG2細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激和自由基的影響,為ALA在肝臟保護(hù)方面的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。3.研究ALA與PCB153聯(lián)合作用的效應(yīng),尋找ALA對(duì)PCB153致?lián)p傷的拮抗作用。4.提供新的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和證據(jù),豐富關(guān)于環(huán)境污染物影響及抗氧化劑預(yù)防的研究?jī)?nèi)容,更好地保障人類健康。四、研究方法1.HepG2細(xì)胞培養(yǎng)2.細(xì)胞模型建立:分別設(shè)置對(duì)照組、PCB153暴露組、ALA預(yù)處理組、ALA和PCB153聯(lián)合處理組。3.細(xì)胞氧化應(yīng)激指標(biāo)的檢測(cè):包括SOD、MDA、GSH、GST等。4.細(xì)胞內(nèi)自由基的檢測(cè):包括DCFH-DA比色法和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)自由基水平。5.細(xì)胞凋亡指標(biāo)的檢測(cè):包括AnnexinV-FITC和PI雙染和JC-1染色法。6.數(shù)據(jù)分析:SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。五、研究進(jìn)程1.文獻(xiàn)調(diào)研9月2.HepG2細(xì)胞培養(yǎng)和暴露處理10月3.氧化應(yīng)激和自由基檢測(cè)11月4.細(xì)胞凋亡指標(biāo)的檢測(cè)12月5.數(shù)據(jù)分析和撰寫(xiě)論文2022年1月-4月六、參考文獻(xiàn)1.Faroon,O.M.,Keith,L.,Smith,D.,DeRosa,C.(2000):EnvironmentalHazardsandHumanHealthEffectsofPolychlorinatedBiphenyls,DepartmentofHealthandHumanServices,PublicHealthService,AgencyforToxicSubstancesandDiseaseRegistry.2.Yordanova,E.,R.Mitrovska-Sheremet,S.Ribarska,andN.Kamynina(2011):Oxidativestressinducedbypolychlorinatedbiphenyls(Aroclor1254)inratlivermicrosomes,Biotechnol.&Biotechnol.Eq.,25(1),Suppl.1,50–54.3.ZhuH,WangS,ShaoJ,GuoX,LiangY,LiuA.(2014):Protectiveeffectofα-lipoicacidagainstoxidativestressin-impairedhepatitisBvirustransgenicmice,JVetMedSci.,76(12):1599-604.4.Zappia,V,G.C.Galletti,A.Capasso.(1996):Alpha-lipoicacidinthetreatmentofliverdiseases,Curr.Pharm.Des.,2,381–386.5.ChenYM,LvL,JiX,WangHP,LiuYJ,JiangH,LouHX.(2017):Lentinusedodes-derivedpolysac
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