香菇多糖的提取純化_第1頁
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文檔簡介

崗位演練香菇多糖的提取純化1任務(wù)七細(xì)胞色素C的三氯乙酸沉淀查閱資料，了解香菇多糖的性質(zhì)，理解熱水浸提和乙醇沉淀香菇多糖的原理。查閱設(shè)計《香菇多糖的提取純化操作記錄》，在任務(wù)實施過程中同步填寫。按照標(biāo)準(zhǔn)操作步驟，以水提醇沉法，對香菇子實體提取純化香菇多糖。設(shè)計實操設(shè)計（一）任務(wù)描述2（二）實訓(xùn)材料1.材料、試劑香菇（取子實體）、蒸餾水、無水乙醇、Sevage試劑2.儀器設(shè)備分析天平、高速離心機(jī)、離心試管、冷凍干燥機(jī)、磁力攪拌器、恒溫水浴鍋、燒杯等3（三）實訓(xùn)操作0504030201配制溶液提取Sevage法除蛋白乙醇沉淀香菇多糖含量測定（苯酚-硫酸法）配制Sevage試劑：取三氯甲烷和正丁醇，按照5﹕1的體積比進(jìn)行混合，放置在棕色瓶中備用。將干燥的香菇子實體粉碎，用沸水提取2h，過濾，濾渣再按第相同提取工藝提取1次，將上清液合并后于80℃下濃縮。在冷卻后的濃縮液中加入一定量95%的乙醇，離心沉淀，用真空冷凍干燥機(jī)凍干稱取得到的樣品10g（含水率9.7%）充分溶解于100mL蒸餾水中。加入一定體積的Sevage試劑，用磁力攪拌器劇烈攪拌20min左右，離心，去除粗多糖溶液中蛋白質(zhì)沉淀。重復(fù)2次。

上清液中緩慢加入95%的乙醇，至乙醇濃度為75%（v/v），使多糖均勻沉淀。放在4℃冰箱中6h，離心棄去上清液，將沉淀溶解，重復(fù)以上過程3次，冷凍干燥機(jī)凍干制得香菇粗多糖。根據(jù)實訓(xùn)方案標(biāo)準(zhǔn)操作繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并測定多糖提取率4（四）任務(wù)分析與總結(jié)1.Sevage試劑的作用是什么？沉淀蛋白質(zhì)是什么原理？2.熟練計算乙醇稀釋料液時的用量。如向2L乙醇含量為20%的料液中加入95%乙醇，要將料液的乙醇濃度提高至70%，請問需添加多少95%乙醇？3.以醇沉法為例，簡述有機(jī)溶劑沉到操作的注意事

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