蛋白質溶解度

關于蛋白質溶解度在一定的氫氧化鉀溶液中溶解的蛋白質質量占試樣中總蛋白質量的百分數。通常采用氮溶解指數（NSI）和蛋白質分散指數（(PDI)來表示。

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原理用一定濃度的氫氧化鉀溶液提取試樣中的可溶性蛋白質，在催化劑作用下用濃硫酸將提取液中可溶性蛋白質的氮轉化為硫酸銨。加入強堿進行蒸餾使氨逸出，用硼酸吸收后，再用鹽酸滴定測出試樣中可溶性蛋白質含量；同時，測定原始試樣中粗蛋白質含量，計算出試樣的蛋白溶解度。第3頁,共12頁，2024年2月25日，星期天試劑a)

氫氧化鉀（分析純），無水硫酸鉀、五水硫酸銅、氫氧化鈉、硼酸、甲基紅、溴甲酚綠、硫酸銨；

b)

濃硫酸、鹽酸（分析純）、95%乙醇、蒸餾水。

第4頁,共12頁，2024年2月25日，星期天

儀器和設備

a)

感量為0.0001g分析天平；

b)

磁力攪拌器；

c)

離心機；

d)

樣品粉碎機；

e)

60目分析篩；

f)

電爐；

g)

100mL或250mL凱氏燒瓶；

h)

凱氏蒸餾裝置；

i)

250mL錐形瓶；

j)

1000mL容量瓶；

k)

微量滴定管。第5頁,共12頁，2024年2月25日，星期天分析步驟1

0.042M氫氧化鉀溶液

稱取2.360g氫氧化鉀，加水溶解后，轉移至1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。

2

混合催化劑

稱取6g硫酸鉀和0.4g硫酸銅，磨碎混勻。

3

氫氧化鈉溶液

稱取400g氫氧化鈉，加水溶解后，轉移至1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。

4

硼酸溶液

稱取20g硼酸，加水溶解后，轉移至1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。

5

0.1M鹽酸標準溶液

量取8.3mL濃鹽酸，注入1000mL水中混勻，按GB601-88要求進行標定即可。

6

混合指示劑

稱取1g甲基紅和5g溴甲酚綠，加入乙醇溶解后，轉移至1000mL容量瓶中，用乙醇定容至刻度。

第6頁,共12頁，2024年2月25日，星期天

試樣處理稱取試樣1.5g（準確至0.0002g）置于250mL燒杯中，準確移入0.042M氫氧化鉀溶液75mL，磁力攪拌20min，然后將試樣轉移至離心管中，以2700r/min的速度離心10min。第7頁,共12頁，2024年2月25日，星期天

測定吸取上清液15mL,放入消化管中,按照GB/T6432-1994凱氏定氮法測定試樣中可溶性蛋白質的含量。同時，按照GB/T6432-1994凱氏定氮法測定試樣中粗蛋白質的含量。第8頁,共12頁，2024年2月25日，星期天分析結果計算15/75=x/1.5g=0.3gx

ps%=0.3g原樣中粗蛋白含量/原樣中粗蛋白含量×100%

第9頁,共12頁，2024年2月25日，星期天注意事項

不同樣品的粒度應相同。

不同樣品在氫氧化鉀溶液中的攪拌時間應一致。第10頁,共12頁，2024年2月25日，星期天Over謝謝觀看第