lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告

轉(zhuǎn)基因生物和基因打靶轉(zhuǎn)基因生物和基因打靶l(wèi)A無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告基本原理目的基因顯微注射受精卵或胚胎細(xì)胞整合植入輸卵管外源基因：順式作用元件結(jié)構(gòu)基因報告基因(reportgene)融合基因基本原理目的基因顯微注射受精卵或胚胎細(xì)胞整合基本方法顯微注射法胚胎干細(xì)胞法(embryonicstemcells,ES細(xì)胞)逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法精子載體法轉(zhuǎn)基因動物中外源基因的檢測染色體及基因水平：斑點雜交、Southern雜交、PCR轉(zhuǎn)錄水平：Northern雜交蛋白質(zhì)水平：Western印跡基本方法顯微注射法lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告轉(zhuǎn)基因動物的應(yīng)用基因特異表達(dá)的研究發(fā)現(xiàn)基因的新功能發(fā)現(xiàn)新基因建立基因表達(dá)、調(diào)控的動物模型建立人類疾病的動物模型等轉(zhuǎn)基因動物的應(yīng)用基因特異表達(dá)的研究lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告轉(zhuǎn)基因植物(transgenicplant)基本方法獲得目的基因受體細(xì)胞培養(yǎng)：如植物愈傷組織等目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞培養(yǎng)轉(zhuǎn)化細(xì)胞篩選、培植、鑒定農(nóng)桿菌介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移：冠癭瘤Ti質(zhì)粒(tumor-in-ducingplasmid)轉(zhuǎn)移DNA(transferDNA,T-DNA)轉(zhuǎn)基因植物(transgenicplant)基本方法轉(zhuǎn)基因植物在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用生產(chǎn)藥用蛋白生產(chǎn)新的疫苗等轉(zhuǎn)基因植物的安全性探討轉(zhuǎn)基因植物在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用基因打靶(genetargeting)通過DNA定點同源重組，改變基因組中的某一特定基因，在生物活體內(nèi)研究該基因的功能?；蚯贸?geneknockout)：定向敲除基因敲入(geneknockin)：定向替代基因打靶(genetargeting)通過DNA定點同源重基因打靶的必備條件胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)能在體外培養(yǎng)，保留發(fā)育的全能性打靶載體Neo（新霉素）陽性篩選標(biāo)志HSV-tk陰性篩選標(biāo)志：單純皰疹病毒(herpessimplexvirus)胸腺嘧啶激酶(thymidinekinase)基因打靶的必備條件胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)基因敲除的基本程序打靶載體的構(gòu)建打靶載體導(dǎo)入ES細(xì)胞：重組置換基因敲除ES細(xì)胞注射入胚泡胚泡植入假孕小鼠的子宮中嵌合體的雜交育種基因敲除的基本程序打靶載體的構(gòu)建lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告基因打靶在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用基因打靶與遺傳病基因打靶與腫瘤的研究基因打靶與生物制藥基因打靶在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用基因打靶與遺傳病第十四章基因與疾病基因結(jié)構(gòu)異常的分子機(jī)制基因結(jié)構(gòu)變異與異常血紅蛋白病基因結(jié)構(gòu)變異與地中海貧血基因結(jié)構(gòu)變異與血友病甲基因結(jié)構(gòu)變異與血友病乙第十四章基因與疾病基因結(jié)構(gòu)異常的分子機(jī)制基因結(jié)構(gòu)異常的分子機(jī)制DNA一級結(jié)構(gòu)變異的分子機(jī)制自發(fā)突變；誘發(fā)突變誘變因素：誘變劑堿基和核苷類似物：5-氟尿嘧啶；6-巰基嘌呤烷化劑：氮芥、環(huán)磷酰胺；活性烷基抗生素類：放線菌素D染色劑：吖啶黃亞硝酸鹽電離輻射和紫外線照射基因結(jié)構(gòu)異常的分子機(jī)制DNA一級結(jié)構(gòu)變異的分子機(jī)制誘變劑的作用機(jī)制堿基類似物誘發(fā)突變?nèi)〈烊换衔?，引起配對錯誤，如5-嗅尿嘧啶使A-T變G-C改變DNA的化學(xué)結(jié)構(gòu)亞硝酸鹽（HNO2），氧化脫氨結(jié)合到DNA上誘發(fā)移碼突變：如吖啶類紫外線及其它射線引起的DNA分子的變化誘變劑的作用機(jī)制堿基類似物誘發(fā)突變突變類型及其遺傳效應(yīng)突變類型點突變：轉(zhuǎn)換，顛換；缺失；插入；倒位突變的遺傳效應(yīng)：改變了DNA的堿基排列順序遺傳密碼的改變：錯義突變；無義突變；同義突變；移碼突變對mRNA剪接的影響蛋白質(zhì)肽鏈中的片段缺失突變類型及其遺傳效應(yīng)突變類型lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告基因結(jié)構(gòu)變異與異常血紅蛋白病血紅蛋白(Hb)變異的分子基礎(chǔ)單個堿基替代密碼子的缺失與嵌入移碼突變終止密碼突變?nèi)诤匣蚧蚪Y(jié)構(gòu)變異與異常血紅蛋白病血紅蛋白(Hb)變異的分子基礎(chǔ)不穩(wěn)定血紅蛋白病成因與血紅素接觸的氨基酸發(fā)生了置換：疏水的“血紅素口袋”在α-螺旋上的氨基酸發(fā)生了替代α1β1接觸面上的氨基酸發(fā)生置換氨基酸缺失結(jié)果：血紅素脫下，排出；珠蛋白，亨氏小體，溶血性貧血不穩(wěn)定血紅蛋白病成因血紅蛋白M病高鐵血紅蛋白（HbM）：珠蛋白點突變，His被Tyr取代，氧親和力下降，紫紺伴有紅細(xì)胞增多癥的異常血紅蛋白病位于α1β2接觸面上的氨基酸發(fā)生取代位于珠蛋白肽鏈羧基端的氨基酸間不能形成鹽橋氨基酸取代影響β鏈與2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)的結(jié)合“血紅素口袋”四周的氨基酸被取代血紅蛋白M病lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告基因結(jié)構(gòu)變異與地中海貧血地中海貧血：珠蛋白肽鏈合成受到抑制所引起的溶血性貧血α-地中海貧血：α鏈的合成受到抑制α-珠蛋白基因家族：α類：α和ζ；β類：β、γ、δ和εα-地中海貧血的分子基礎(chǔ)基因結(jié)構(gòu)變異與地中海貧血地中海貧血：珠蛋白肽鏈合成受到抑制所β-地中海貧血原因：β鏈的合成明顯減少或完全不能合成突變對基因表達(dá)的影響：轉(zhuǎn)錄水平降低RNA剪接異常翻譯缺陷RNA修飾缺陷生成不穩(wěn)定的β珠蛋白基因缺失引起的β0-地中海貧血β-地中海貧血原因：β鏈的合成明顯減少或完全不能合成lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告lA無錫路橋工程總公司內(nèi)部管理診斷報告基因結(jié)構(gòu)變異與血友病甲“經(jīng)典”血友病：X染色體連鎖，自發(fā)性出血病因：因子Ⅷ活性缺乏，因子Ⅷ基因的缺陷基因缺失插入突變點突變基因重排基因結(jié)構(gòu)變異與血友病甲“經(jīng)典”血友?。篨染色體連鎖，自發(fā)性出基因結(jié)構(gòu)變異與血友病乙性連鎖遺